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파랑에너지 활용을 위한 연직각판형 회전 부이 Heave-Pitch 상관관계 분석
천재연 강원대학교 대학원(삼척캠퍼스) 2025 국내석사
파랑에너지는 해양에서 발생하는 파도의 운동 에너지를 활용하는 재생에너지원으로, 다양한 구조물 형태를 통해 에너지를 변환할 수 있다. 구조물에 작용하는 파랑하중은 형상과 파 주기에 따라 Heave, Pitch 등 여러 형태의 운동이 발생하며, 이러한 응답을 정량적으로 분석하는 것은 파랑에너지 변환 시스템의 응답 특성을 파악하는 데 중요하다. 특히 회전형 부이의 구조는 두가지 운동이 복합적으로 발생하는 경향을 보이며, 주기별 운동 특성을 실험적으로 분석할 필요가 있다. 본 연구에서는 부유식 방파제 전면에 연직각판형 회전 부이를 설치한 모형을 제작하고, 규칙파 조건에서의 운동 응답 특성을 분석하기 위한 수리모형실험을 수행하였다. 실험은 Froude 상사법칙을 적용하여 1/30 축척으로 축소 제작된 모형을 기반으로 하였으며, 실험 수조 내에서 다양한 규칙파 조건을 설정하여 부이의 운동 변화를 분석하였다. 부이의 움직임은 수조 외부에 설치된 고해상도 카메라로 촬영된 영상을 기반으로 측정되었으며, 영상 분석에는 Tracker 프로그램을 사용하여 마커 위치의 좌표를 프레임 단위로 추출하였다. Heave 응답은 부이에 설치된 풀리(Pulley) 기준점의 y축 평균 진폭을 기준으로 산정하였고, Pitch 응답은 부이의 하단 마커와 풀리 상단 기준점 간 상대적 위치 변화를 바탕으로 회전각(rad)을 계산하였다. 좌표 변화는 시계열 데이터로 변환되어 각 주기 조건에 따라 운동 진폭을 산정하였고, 해당 진폭을 입사파 진폭과 정규화하여 RAO(Response Amplitude Operator)를 계산하였다. 산정된 RAO는 주기별 운동 응답 특성을 비교 분석하는 데 활용되었으며, 각 운동 성분의 상대적인 응답 기여도와 주기변화에 따른 특성 차이를 정리하였다.
천재연 숙명여자대학교 대학원 2003 국내박사
그람양성세균인 Corynrbacterium glutamicum은 아미노산의 대량생산에 유용한 균주이다. C. glutamicum로부터 Histidine 생합성 유전자들을 암호화하는 his 유전자들을 pMT1에 삽입된 C. glutamicum genomic library를 이용 여러 가지Escherichia coli 돌연변이균주에 형질전환하는complementation 방법을 이용하여 선별하였다. 이 방법을 통해 3개의 plasmid를 선별하였다: pCH1은 E. coli의 hisD,C,B 돌연변이 균주에complementation; pCH2은 E. coli의 hisH,A,F,I 돌연변이 균주에 complementation; pCH3은 E. coli의 hisE,G 돌연변이 균주에 complementation 하였다. 이미 알려진 E. coli and Salmonella typhimurium 균주에서 보고에 따르면 Histidine 생합성 단계에는 ATP 와phosphoribosyl-pyrophosphate (PRPP) 합성을 시작으로 10개의 효소반응이 요구되어진다. 이들 균주에서 단지 8개의 유전자에 의해 효소가 암호화되었는데 그중 hisD, hisB, hisIE 유전자는 bifunction 하다. C. glutamicum에서는 7개의 유전자 (hisDCBHAFI)가 하나의 operon에 포함되어 있으며 attenuation에 의해 조절된다. 9,672-bp 부위의 전체 염기서열을 결정한 결과 9개의 open reading frames (ORFs)이 존재함이 확인되었다. 9개 ORF들은 E. coli hisDCBHAFI에 homology가 있으며, orf1 와 impA 유전자가 함께 포함되어있다. 아미노산서열중에 하나는 M. tuberculosis의 hisD과 높은 유사성 (61%)을 보이며, 432개의 아미노산으로 구성된 단백질로 분자량이 46 kDa으로 확인되었다. 이 유전자는 histidinol dehydrogenase를 암호화하며, bifunctional enzyme으로 Histidine 생합성 단계의 마직막 2단계에 관여한다. hisD 유전자의 downstream으로 5 bp 떨어져 366개의 아미노산으로 구성된 분자량이 40 kDa인 ORF를 발견하고 이를 M. tuberculosis과 56 % 유사성을 보이므로 hisC로 명명하였다. hisB 유전자는 hisC 유전자 다음에 위치하며 205 아미노산을 암호화하며, E. coli HisB 단백질의 carboxy-terminal 부위인 HisBd와 다른균주에서 57 % 유사성을 보인다. orf1에 해당하는 유전자는 hisB 유전자의 256 bp downstream에 위치하고 421개의 아미노산을 암호화하며, multidrug resistance 단백질과 transmembrane transport 단백질에 유사성을 보인다. hisH 유전자는 636개의 염기서열로 구성되어있으며 다른균주들과 62 % 이상의 유사성을 보이며, 211개의 아미노산으로 이루어져있고 분자량은 24 kDa이다. hisF의 마직막과 4개의 여기서열이 overlap 되어서 118개의 아미노산으로 구성된 작은 단백질을 확인하였다. 이 단백질은 E. coli hisI와 유사성이 높은 것으로 확인되었다. 최근에 Mycobacterium tuberculosis his opron이 보고되었고 9개의 다른 ORFs으로 이루어져있다. C. glutamicum에서 his 유전자들은 연관되지 않은 두개의 loci로 나눠져있다. 그중 하나는 hisEG 유전자를 포함하며 다른 위치는 나머지 ORFs (hisDCBHAFI)가 cluster를 이루고 있다. RT-PCR 반응 결과 hisG 와 hisD 유전자가 chromosome상의 다른 위치에 떨어져 존재함이 확인되었다. Primer extension 실험으로 전사개시부위는 hisD 유전자의 개시코돈으로부터 196 bp위에 위치함을 확인할 수 있었다. 이 부위는 promoter인 Phis를 포함한 his leader region이로 명명되어졌다. C. glutamicum의 his operon은 attenuation 조절기작중 tRNA-dependent mechanism에 의해 control 된다. 두가지 types의 transcriptional fusion construct를 제조하였는 데 이들은 promoter probe와 terminator probe vector를 이용하였으며, 각각 pProm과 pTer로 명명하였다. pProm series는 Phis promoter 다음의 변화된 his leader region의 조절하의 cat 유전자를 포함한다. pTer series는 his promoter가 tac promoter로 치환된 his leader region를 포함한다. 이들은 termination과antitermination에 의해 조절되는 Histidine operon을 연구하기 위해 사용되어진다. Mutational analysis를 통해 tRNA의 acceptor stem과 anticodon의 interaction에 leader region이 필수적임이 확인되었다. The gram-positive bacterium Corynebacterium glutamicum is used for the large-scale production of amino acids. The his genes encoding histidine biosynthetic enzymes from C. glutamicum were screened by complementation of several Escherichia coli mutants by transforming a C. glutamicum genomic library cloned in the vector pMT1. In this way, three plasmids that complemented of the E. coli histidine auxotrophs were obtained: pCH1 complemented hisD, C, and B in E. coli mutants; pCH2 complemented hisH, A, F, and I in E. coli mutants; pCH3 complemented hisE, and G in E. coli mutants. The histidine biosynthetic pathway, which requires 10 enzymatic reactions from ATP and phosphoribosyl-pyrophosphate (PRPP), has been extensively analyzed in E. coli and Salmonella typhimurium. The enzymes are encoded by only eight genes in these bacteria, since the products of the hisD, hisB, and hisIE genes are bifunctional. In C. glutamicum, the seven genes (hisDCBHAFI) are organized in an operon, which is regulated by attenuation. The complete nucleotide sequence of a 9,672-bp region was determined. Analysis of this sequence revealed the presence of 9 open reading frames (ORFs). Nine ORFs are homologous to E. coli hisDCBHAFI, with the insertion of orf1 and impA gene. One of the deduced amino acid sequences showed a high degree of similarity (61 %) to the hisD from M. tuberculosis. The hisD gene encoded a protein of 432 amino acids with a calculated molecular weight of 46. This gene codes for a histidinol dehydrogenase, a bifunctional enzyme, which catalyzes the two final step in histidine biosynthesis. Downstream of the hisD gene, separated by 5 bp, I identified an ORF encoding a protein of 366 amino acids with a calculated molecular weight of 40. It was named hisC because of its significant similarity to the corresponding gene from M. tuberculosis (56 % identity). The hisB gene, positioned downstream from the hisC gene, encoded a 205 amino acid polypeptide. hisB gene has 57 % identity with the other bacteria HisBd protein which is carboxy-terminal region of the E. coli HisB protein. The orf1 gene is positioned 256 bp downstream of hisB and is transcribed in the same direction as the his genes are. The orf1 gene encodes a polypeptide of 421 amino acids, showing similarity to multidrug resistance proteins and transmembrane transport proteins. The multidrug resistance proteins are all membrane proteins with a pump function. The hisH gene was composed of 636 nucleotides, which exhibited homology by up to 62 % with the corresponding sequences of the other bacteria. The hisH gene encoded a polypeptide of 24 kDa containing 211 amino acid residues. Downstream of hisF, and overlapped by 4 nucleotide, I identified a coding sequence for a putative small protein of 118 amino acids. The deduced amino acid sequence showed similarity to the E. coli hisI. Mycobacterium tuberculosis his opron was recently reported. In this operon 9 different ORFs have been identified. In C. glutamicum, the his genes were mapped in two nulinked loci. One loci containing hisEG genes, the other locus contains the main his gene cluster with eight ORFs (hisDCBHAFI). RT-PCR reactions resulted that hisG and hisD genes were separated in the different region of chromosome. The primer extension showed that the first nucleotide of the mRNA was a C residue corresponding to position 246 in the DNA sequence. The 196-bp region upstream of the start codon of hisD contains the promoter Phis and a 196-bp noncoding sequence that was named the his leader region. The his operon of C. glutamicum is effectively controlled by a tRNA-dependent mechanisms of attenuation. Two types of transcriptional fusions were constructed, one each in a promoter probe and a terminator probe vector, named pProm and pTer, respectively. The pProm series contains the cat genes under the control of the Phis promoter followed by a modified his leader region. The pTer series contains derivatives of the his leader region without the promoter cloned in pET-tac as the parental vector. It was used to study the regulation of the histidine operon by termination and antitermination. Mutational analysis show that the interactions of the anticodon and the acceptor stem of the tRNA with the leader are necessary.
Molecular cloning of the arginine biosynthetic genes from Corynebacterium glutamicum
Corynebacterium glutamicum의 DNA library를 Escherichia coli arginine auxotrophs에 transformation하여 argC, E, D, F, A 유전자를 complementation cloning하였다. E. coli argB mutant에 complementation하는 6.7kb 와 4.8kb fragment를 포함하는 recombinant DNA가 E. coli argC, E, A, D 와 F에 역시 complementation 하였고, gene들이 cluster를 이루고 있음을 알 수 있었다. pRBl 와 pRB2로 명명된 recombinant DNA를 여러 가지 restriction enzyme들로 제한효소지도를 작성 하였다. 각 유전자들의 위치를 결정하는 데 있어서 DNA fargment를 subcloning하고 transformation하여 각 유전자의 순서는 ArgCEBDF로 결정하였다. 여기서 argB의 염기서열을 결정하였고, enzyme assay 방법을 통해 argB 유전자가 N-acetylglutamate kinase를 암호화함을 알 수 있었다. 이미 보고된 ArgB protein의 아미노산 서열과 homology를 조사한 결과 B. stearothermophilus와 B.substilus의 ArgB protein과 각각 45%, 38%의 높은 homology를 보여 주었고, E. coli 와는 25%의 homology를 보였다. 본 연구의 최종목표는 C. glutamicum의 유전자 조작을 통해 arginine을 더 많이 생산하는데 있다. Complementation cloning of the argC, E, B, D, F, and A genes in Corynebacterium glutamicum was done by transforming DNA library into the corresponding arginine auxotrophs of Escherichia coli. The recombinant plasmid containing 6.7 kb and 4.8 kb fragment complementing the E. coli argB mutant was also able to complement the E. coli argC, E, A, D, and F mutants, indicating the clustered organization of the genes within the DNA fragment. The insert DNA fragments in the recombinant plasmids, named pRB1 and pRB2, were physically mapped with several restriction enzymes. By further subcloning the entire DNA fagment containing the functions and by complementation analysis, we located the arg genes in the order of ACEBDF on the restriction map. I also determined the DNA nucleotide sequence of the fragment and report here the sequence of the argB gene. When compared to that with the mutant strain, higher enzyme activity of N-acetylglutamate kinase was detected in the extract of the mutant carrying the plasmid containing the putative argB gene, indicating that the plasmid contains a functional argB gene. Deduced amimo acid sequence of the argB gene shows 45%, 38%, and 25% identity to that from Bacillus stearothermophilus, Bacillus substilus, and E. coli respectively. Our long-term goal is to genetically engineer C. glutamicum which produces more arginine than a typical strain.
미술치료의 탈중심화 과정을 통한 중증 우울증을 경험한 중년 여성의 삶에 대한 내러티브 탐구
본 연구는 중증 우울증을 경험한 중년여성이 미술치료의 탈중심화 과정을 통해 자신의 삶의 이야기를 어떻게 풀어나가는지 알아보고, 미술치료를 통해 얻은 경험이 연구 참여자에게 어떠한 의미를 가지는지에 대해 탐구하는 데 그 목적이 있다. 본 연구의 참여자는 50대 중년 여성으로 과거의 힘든 삶 속에서 중증 우울증을 경험하였고, 그 증상이 현재까지 지속되고 있다. 연구 참여자에게 2016년 3월부터 5월까지 주 2회, 총 12회기의 미술치료를 실시하였고, 매 회기는 평균 3시간 이상 소요되었다. 본 연구는 중증우울증을 경험한 중년 여성이 미술치료의 탈중심화 과정을 통해 풀어나가는 경험 이야기를 보다 잘 전달할 수 있고, 그 과정에서 얻는 경험의 의미를 구체적으로 탐구하기 위해, 질적 연구의 한 방법인 내러티브 탐구방법론(Connelly & Clandinin, 2000)을 적용하여 서술하였다. 본 연구는 연구자가 미술치료의 탈중심화 과정을 통해 풀어낸 연구 참여자의 과거 삶의 이야기를 함께 이해하고 재구성하는 과정에서, 과거와 연결된 현재 삶의 의미와 가치를 이해하고자 하였다. 그 결과 연구 참여자는 미술치료의 탈중심화 과정을 통해 자신의 과거를 되돌아보는 경험을 함으로써, 억압된 과거 삶 속의 자신을 스스로 위로하는 경험을 하였고, 상실의 아픔을 극복할 수 있었다. 또한 이를 통해 현재 ‘자신’의 소중함을 깨달음과 동시에 자신의 미래에 대한 방향성을 찾는 긍정적 변화를 경험하였다. 이는 미술치료에 내제된 탈중심화 과정이 우울증을 경험한 중년 여성에게 긍정적인 영향을 미쳤음을 의미한다. 따라서 본 연구는 향후 미술치료사들이 우울증 환자를 다루는 미술치료 현장에서, 미술치료의 탈중심화 과정을 유용하게 활용할 수 있는 임상적 기초자료가 될 것으로 기대된다. This study aims to explore meanings offered by experiences learnt through art therapy to a middle-aged woman who suffered severe depression after finding how her life story was unfolded through a decentralized process of art therapy. The participant in this study was a woman in her fifties and experienced severe depression in her hard life in the past; such symptoms are still going on. Twelve times of art therapy were offered to the participant, twice a week from March to May, 2016. It took three hours or more for a session. The study adapted the narrative Inquiry(Connelly & Clandinin, 2000) which is one of qualitative methods in order to substantially explore meanings rendered by experiences in the process and to deliver better stories on the life of a middle-aged woman who suffered severe suppression unsolved through a decentralized process. The study attempted to understand the meanings of the current life connected with the past through a process of reconstruction while the researcher understood the stories in the past of the participant together through the process of a decentralized process of art therapy. As a result, the participant went through positive changes through which she could find a direction to the future for herself while she got aware again of her preciousness through experiences enabling her to find and to appease herself in the suppressed past through a decentralized process of art therapy. It means that positive effects of a decentralized process innate in art therapy were exerted to the middle-aged woman who suffered depression. Thus, this case is expected to serve as basic clinical data through which a decentralized process can be beneficially used at the art therapy sites where art therapists treat patients with depression.