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      • KCI등재

        발생중인 흰쥐에 전신적으로 투여된 불소가 골형성에 미치는 영향

        임도선,안용순,김은숙,배형준,장병수,Lim, Do-Seon,Ahn, Yong-Soon,Kim, Eun-Sook,Bae, Hyung-Joon,Chang, Byung-Soo 한국현미경학회 2002 Applied microscopy Vol.32 No.3

        본 연구는 전자현미경을 이용하여 음용 불소가 발생중인 경골의 성장변화와 골모세포의 조직학적 특성에 미치는 영향을 관찰하고 에너지분광분석기를 사용하여 불소의 투여 농도에 따른 골기질 성분변화를 알아보고자 하였다. 전자현미경 관찰 결과, 대조군에서는 입방형의 전형적인 골모세포가 관찰되었다. 100 ppm 불소투여군의 경우, 활성이 강한 골모세포에 의해 생성된 여러층의 반전선과 새로 형성된 골성조직이 관찰되었다. 또한 골모세포의 세포질은 잘 발달된 조면세포체와 미토콘드리아가 관찰되었고 세포막 주위에는 많은 분비소포들이 관찰되었으며, 일부는 세포막과 융합되어 분비물질이 세포 밖으로 방출되었다. 200 ppm 불소투여군에서는 활성이 저하된 골모세포가 관찰되었는데, 세포질내에는 미토콘드리아가 팽창되어 있었고 수조의 형태가 파괴되어 나타났다. 또한, 조면소포체의 표면에는 리보솜이 탈락되어 관찰되었다. 300 ppm의 고농도 불소투여군에서는 골내막과 인접한 골모세포는 불규칙하게 배열되어 있었고, 세포막은 파괴되어 세포성분이 세포 밖으로 용출되어 관찰되었다. 한편, 에너지분산분광분석 결과는 대조군에 비해 100 ppm 불소투여군에서 골기질 성분인 인과 칼슘이 증가하였으나 200 ppm 및 300 ppm 불소투여군에서는 더 이상 증가하지 않았다. 따라서 본 연구결과, 투여된 불소에 의해 골모세포의 활동이 활발해지고 왕성한 골기질 합성이 관찰되었으나, 고농도의 불소 투여는 골모세포를 파괴하고 활동을 억제한다는 것을 확인하였다. The purpose of this study was to observe the influences of the water fluoride concentration on the growth changes, the histologic characteristics of osteoblast in the tibia of growing newborn rats by using electron microscopy and on the composition changes of bone matrix in those by using energy dispersive x-ray system (EDX). The water fluoride concentration was respectively 0 ppm (contrast group), 100 ppm (100 ppm group), 200 ppm (200 ppm group) and 300 ppm (300 ppm group). The results of the investigation by using electron microscopy were as followed. In contrast group, the traditional cuboidal osteoblasts were observed. In 100 ppm group, several reversal line, the newly formed osteoid by the strongly activated osteoblast and the well developed rough endoplasmic reticulum, mitochondria in cytoplasm of osteoblast were observed. Also, many secretory vesicle around cell membrane were observed and some fused with cell membrane released secretory granule out of cell. In 200 ppm group, the depressed osteoblasts were observed, mitochondria in cytoplasm were expanded and cristae shape in mitochondria were destroyed. Also, the ribosome at the surface of rough endoplasmic reticulum were not observed. In 300 ppm group, the adjacent osteoblasts with endosteum were irregularly arranged, the cell membrane were destroyed and organelles were flowed out of cell. On the other hand, the results of the investigation by using energy dispersive x-ray system were as followed. P and Ca concentrations in 100 ppm group were increased more than those in contrast group. But, in 200 and 300 ppm group were not increased more than those in 100 ppm group. Therefore, the activities of the osteoblasts were increased, the bone matrix were actively synthesized by the supplied water fluoride. But, the osteoblasts were destroyed, inhibited by the higher water fluoride concentration.

      • KCI등재

        양서류 피부 상처회복과정 중 각질화세포 cytokeratin의 분포

        임도선,정순정,문명진,정문진,Lim, Do-Seun,Jeong, Soon-Jeong,Moon, Myung-Jin,Jeong, Moon-Jin Korean Society of Electron Microscopy 2007 Applied microscopy Vol.37 No.4

        The system of wound healing is very complex biological processing that includes inflammatory, reepithelialization, and matrix construction. For identification of the transitional pathway of the keratinocytes, we have employed immunohistochemical analysis using cytokeratin antibody after wounding. Epithelium in skin of the frog(Bombina orientalis) was examined with transmission electron microscopy. Cytokeratin was expressed in normal basal and gland cavity cells. At 3-hour basal layer cells were strong positive, however cells of the upper layer were negative reaction. Day1 and 2 after post-wounding, regenerating epithelial cell layer was positive reaction, especially basal layer cells were strong positive. At day 10 after wounding, the degree of positive reaction to basal cells of regenerating epithelial tissue was equal to day 7 wound tissue. At day of 19th, basal and spinous layer cells were strong positive reaction. Regenerating epithelial cells were positive but some basal cells were strong positive at day 27. From this result, we identified that the migration of the keratinocytes in amphibian skin wounds is initiated from basal layer fells and the keratinocytes migrate into basal and middle of the wound area. 상처회복은 염증, 재상피화 그리고 기질의 재형성등이 관여하는 복잡한 과정이다. 이중 재상피화에 관여하는 각질화세포의 이동경로를 분석하기 위하여 무당개구리 피부 상처유도 후 투과전자현미경과 cytokeratin에 대한 조직면역화학법을 이용하였다. 정상조직의 cytokeratin발현은 기저층의 세포들과 선상피에서 확인되었다. 상처 유도후 3시간 조직에서, 기저세포층에서 강한 반응이 관찰되었고, 1일과 2일 사이에서는 재생되는 각질화세포에서 강한 면역반응이 확인되었다. 상처반응 중기인 7일부터 10일 사이에서도 재생된 세포의 기저층세포에서 강한 반응이 일어났다. 19일경과의 조직에서는 기저층과 유극층의 세포들에서 cytokeratin의 발현이 증가하였다. 따라서, 재상피화에 관여하는 각질화세포는 기저층의 세포로부터 시작하여 상처부위로 이동하여 과립층과 유극층으로 분화됨으로서 재상피가 진행되었다.

      • KCI등재

        흰쥐 절치의 법랑질 형성에 미치는 불소의 효과에 관한 현미경적 연구

        임도선,장병수,정제오,정순정,정문진,Lim, Do-Seon,Chang, Byung-Soo,Jeong, Je-O,Jeong, Soon-Jeong,Jeong, Moon-Jin 한국현미경학회 2004 Applied microscopy Vol.34 No.2

        불소 투여가 백서태아 발육에 따른 법랑질형성 과정에 미치는 영향을 알아보고자 임신한 어미흰쥐에 대조군은 증류수만을 음용시켰고, 실험군은 100, 200 및 300 ppm의 불소가 함유된 음용수를 투여하였다. 이후, 생후 11일 된 어린 흰쥐를 희생하였고, 하악절치를 발치하여 법랑질형성 동안에 일어나는 법랑모세포의 형태 및 구조적 변화를 광학현미경과 투과전자현미경으로 관찰하였다. 흰쥐태아 치아기의 조직학적 구성은 전분비대, 분비대 및 성숙대로 관찰되었으며, 특히 성숙대의 법랑질에서 물과 유기물을 선택적으로 제거하는 평탄끝법랑모세포(smooth-ended ameloblast)와 무기이온을 추가로 공급하는 주름끝법랑모세포(ruffle-ended ameloblast)가 관찰되었다. 또한 치아기는 가장 외측으로부터 외법랑상피, 성상세망, 중간층, 법랑모세포층, 법랑기질층, 상아기질층, 치수로 이루어져 있었다. 이러한 조직학적 구성은 백서태아에서도 성체에서 관찰되는 구조들과 동일한 것으로 확인되었다. 한편, 불소투여군에서 각 대(zone)의 법랑모세포들은 구조적 및 형태적인 변화가 확인되었는데, 조면소포체가 공포화되고 막성계의 유실로 붕괴되었으며, 라멜라 형태인 동심원상의 팽윤된 구조가 미토콘드리아의 기질에서 관찰되었다. 특히 고농도 실험군인 300 ppm투여군에서 법랑모세포사이에 세포막이 유실된 세포들이 관찰되었다. 그러므로 임신중인 흰쥐에 투여된 불소는 흰쥐태아의 치아발육과정 중 법랑질형성에 관여하는 법랑모세포에 영향을 미쳐 전환주기에 변화를 주고 법랑모세포의 미세구조적 변화와 형태적인 변화를 초래하였다. The aim of the present study was to examine in detail, both at light and electron microscopical levels, the morphological variations in ameloblast of the fetal rat incisor enamel organ. Rats were started on distilled water at the beginning of pregnancy. The pups were sacrificed 11 days after delivery and animals were perfused intravascularly with glutaraldehyde and the incisors were removed. To examine on the ultrastructure of the ameloblast, the study employed primary light microscopy but electron microscopy was used to clarify some of the light microscopic finding. Longitudinal sections through the incisors of the rat show a continuous layer of ameloblasts on the labial surface of the tooth. This layer contains the entire sequence of developmental stages in enamel production. The ameloblast layer was divided into three main zones: 1) Presecretory zone, region of ameloblasts facing pulp. 2) Secretory zone, region of inner and outer enamel secretion. 3) Maturation zone, region of reduced ameloblasts. In particularly, the present study has shown that two distinctively different types of ameloblasts appear in the enamel organ during enamel maturation in the rat incisor. These two types have been designated ruffle-ended ameloblasts (rAB) and smooth-ended ameloblasts (sAB). The fluoride produces marked alteration in the fine structure of ameloblast from teeth of young rats, such as large confluent distensions of the endoplasmic reticulum and swelling of isolated mitochondria. This experimental data suggested that exposure prolonged of animal to high level of fluoride appears to induce a few dramatic changes in the normal appositional growth and initial mineralization of enamel created during amelogenesis.

      • KCI등재

        Histochemical Analysis of the Cutaneous Wound Healing in the Amphibian

        임도선,정순정,정제오,박주철,김흥중,문명진,정문진,Lim, Do-Sun,Jeong, Soon-Jeong,Jeong, Je-O,Park, Joo-Cheol,Kim, Heung-Joong,Moon, Myung-Jin,Jeong, Moon-Jin Korean Society of Electron Microscopy 2004 Applied microscopy Vol.34 No.1

        상처회복과정은 염증, 재상피화, 그리고 기질의 재형성등을 포함한 포괄적인 생물학적 반응이다. 생물학적 분류체계에서, 회복능력은 매우 다양한데, 일반적으로 하등동물이 고등동물에 비교해 단순하며 뛰어난 것으로 알려져 있다. 따라서, 하등동물들을 이용한 실험모델은 상처회복과 치유의 기작을 연구하는데 자주 이용되고 있다. 양서류를 이용한 피부 상처회복과정 동안의 조직화학적 특성들을 규명하기 위하여 한국산 무당개구리(Bombina orientalis)를 이용하였다. 1일, 10일 그리고 16일의 조직에서 점액물질이 활발하게 분비되는 것을 확인하였으며, PAS (periodic acid shiff)와 Alcian blue (pH 2.5) 반응에 강하게 염색되었다. PTAH(phosphotungstic acid hematoxylin) 염색을 통하여 상처 후 10일 조직에서 상처주변의 진피층에서 콜라겐의 합성이 증가하는 것을 확인하였다. 또한, 세포의 유사분열의 시점을 확인하기 위한 MG-P (methyl green pyronin)염색에서 초기에는 3시간과 6시간에 강한 염색반응을 관찰하였고, 이는 23일과 27일 조직에서도 동일한 패턴으로 이어졌다. The wound healing is very complex biological processing including inflammatory, reepithelialization and matrix construction. According to the biological systematic category, the ability of the healing is very different. Generally healing ability of the lower animal group has been known more excellent compared to its higher group. Therefore, lower animals have been used as the experimental model to explore the mechanism of the wound healing or repair. To verify histochemical characteristics of the wound healing, we have used skin of the frog (Bombina orientalis) as known common amphibian. At day 1, 10, and 16, the mucous substance was very actively synthesized and strong positive by PAS and Alcian blue (pH 2.5). Day 10 after wounding, margin of the wound was gradually strong positive by PTAH staining for detection of collagen synthesis. At 3 to 6 hour and day 23 to 27, we have found the cell division was active through the MG-P staining, in which the concentration and division of DNA in nucleus was green to deep blue color.

      • KCI등재

        불소투여에 따른 태내백서 치아의 생화학적 및 주사전자현미경적 연구

        임도선 韓國電子顯微鏡學會 2000 Applied microscopy Vol.30 No.3

        임신중에 투여된 불소가 흰쥐태아의 법량질형성에 미치는 영향을 알아보고자 어미흰쥐에게 불소를 음용 시킨 후, 생후 11일이 경과된 어린 흰쥐를 희생하였다. 이후, 하악절치를 발치한 후, 법랑단백질의 종류 및 양적 변화와 법랑질 표면의 형태학적 변화를 관찰하였다. 분비법랑질과 성숙법량질에서 추출한 법랑단백질을 전기 영동한 결과, 분비법랑질에서는 분자량 22-24kDa의 amelogenin이 확인되었는데, 대조군에서보다 불소투여 농도가 높아질수록 양이 감소하였다. 성숙법량질에서는 분자량이 68kDa의 enamelin이 확인되었으며, 대조군에 비해 불소투여 농도가 높을수록 양적인 증가가 확인되었다. 그리고 주사전자현미경을 사용하여 법량질 표면을 관찰한 결과, 대조군에서는 평탄하고 매끄러운 표면인 반면에 불소투여군은 거친 표면과 균열이 심하게 나타났고, 불규칙한 소공이 관찰되었다. 그리고 일부에서는 균열과 함께 주머니 같은 결절과 법랑질 형성부전을 확인하였다. 따라서 본 연구결과, 태아발생과정 중 투여된 불소가 법랑질형성에 관여하는 법랑모세포에 영향을 줌으로써 단백질의 형성과 분비가 지연 또는 억제되며, 수분과 단백질 제거에 관여하는 법랑모세포의 기능을 저하시키는 것으로 사료된다. 이러한 단백질의 비정상적인 형성과 분비는 법랑질 형성부전 등의 법량질형성에 전반적으로 영향을 마치는 것으로 확인되었다. The present study has been carried out to investigate the effect of fluoride toxicity on the morphology as well as inorganic chemical constituents of rat teeth. Rats were administered sodium fluoride at dose of 0ppm, 100ppm, 200ppm and 300ppm at the beginning of pregnancy. Animals were perfused intravascularly with glutaraldehyde and the incisors were removed. Changes in the protein composition of the secretory and maturation enamel were investigated using polyacrylamide gel electrophoresis (SDS PAGE). And the enamel surface of incisors was examined under scanning electron microscope (SEM). Changes of protein quantities were found significantly in high levels fluoride administration for experimental groups compared with control. The SDS PAGE analysis demonstrated as follows. In control group, secretory phase enamel protein, amelogenins, was detected more quantities than experimental group. The enamelin, presence in maturation phase enamel, showed more quantities than control enamel with an increasing fluoride concentration in the drinking water. Also, the scanning electron micrographic data showed hypoplastic, tough, uneven, pitted and cracked enamel surfaces covered with granular deposits as a result of excessive intake of fluoride. From these results we conclude that high dose of fluoride administration leads to severe structural alterations on the enamel surface and these structural changes could be through defective mineralization.

      • SCOPUSKCI등재

        배추흰나비(Pieris rapae L.)의 중장내 esterase

        임도선,문명진,여성문 한국곤충학회 1991 Entomological Research Vol.21 No.2

        배추흰나비 (Pieris rapae L.)의 종령기 동안의 중장내 esterase위치와 활성을 투과전자현미경을 이용한 세포화학적 방법과 전기영동적 방법으로 확인하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Esterase 기질인 a-naphthyl acetate와 fast blue B salt의 혼합액($25^{\circ}C$, 0.067M phosphate buffer, pH 5.8)으로 처리한 조직표본을 전자현미경으로 관찰한 결과, esterase의 반응생성물은 주로 배상세포(gobletcell)의 원형질 돌기와 상피세포의 미세융모(microbilli) 주위에서 전자밀도가 높은 과립의 형태로 관찰되었다. 전기영동적 방법에 의해 총 12개의 esterase band가 분리되었으며, 중장에서 분비되는 esterase의 대부분은 carboxylesterase인 것으로 극인되었다. The localization of the midgut esterase in the cabbage worm, Pieris rapae, during the last larval period was observed with cytochemical treatment using transmission electron microscope and esterase activity was also identified by electrophoresis. The reaction product of esterase to the substrate solution (mixture of a-naphthyl acetate and fast blue B salt) was observed both in the protoplasmic processes of the goblet cells and in the microvilli of the columnar epithelial cells as electron dense granules. Twelve esterase bands were separated in the midgut during this period and the major midgut esterase was identified to be the carboxylesterases.

      • KCI등재

        음용수 불소가 흰쥐태아 법랑모세포의 미세구조에 미치는 영향

        임도선,정문진,여성문,Lim, Do-Seon,Jeong, Moon-Jin,Yoe, Sung-Moon 한국현미경학회 1999 Applied microscopy Vol.29 No.2

        The response of ameloblast to long term (3 weeks) exposure to fluoride was examined in continuously erupting mandibular incisors of pregnancy rats as compared to control rats receiving a similar diet (Teklad L-356) but no sodium fluoride in there drinking water. Rats were started on water containing 0 ppm, 100 ppm, 200 ppm, and 300 ppm NaF at the beginning of pregnancy. To examine on the ultrastructural changes of the ameloblast, electron microscopy was used. The results indicated that rat incisors expressed two major changes in normal amelogenesis that could be attributed to chronic fluoride treatment. The fluoride produces marked alteration in the fine structure of ameloblast from teeth of young rats, such as large confluent distensions of the endoplasmic reticulum and swelling of isolated mitochondria, in particular on the morphology of the rough-surfaced endoplasmic reticulum. A graded series of alterations to these organelles were produced, and the severity of the changes would seem to be dependent on dose and time. This experimental data suggested that exposure prolonged of animal to high level of fluoride appears to induce morphological changes in the normal appositional growth and initial mineralization of enamel created during amelogenesis. 장기간 투여된 불소가 흰쥐태아의 법랑모세포(ameloblast)에 미치는 영향을 알아보고자 임신한 흰쥐에 100ppm, 200ppm 및 300ppm의 불소가 함유된 음용수를 3주간 투여하였으며, 대조군에는 불소가 함유되지 않은 증류수를 섭취시켰다. 생후 11일이 경과된 어린 흰쥐를 희생하여 하악절치를 발치한 후, 법랑모세포의 미세구조적 변화를 관찰하였다. 법랑모세포의 생활주기인 전분비대, 분비대, 성숙대에서 법랑모세포를 광학 및 투과전자현미경으로 관찰한 결과, 실험군에서는 각 대의 법랑모세포에서 형태 및 구조적인 변형을 나타내었다. 즉, 미토콘드리아 기질 내에서 라멜라 형태의 동심원상의 구조가 평륜됨과 함께 조면소포체가 공포화되고 막성계의 유실로 붕괴가 관찰되었다. 특히 고농도 불소투여군에서는 법랑모세포사이에 세포막이 유실된 세포들이 관찰되었다. 따라서, 임신중인 흰쥐에 투여된 불소는 흰쥐태아의 치아발육과정에서 특히, 법랑질 형성에 관여하는 법랑모세포에 영향을 미쳐 전환주기에 변화를 주었고, 법랑모 세포의 미세구조적 및 형태적 변화를 야기하였다.

      • KCI등재

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