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        OVCAR-3와 SKOV-3 난소암 세포주에서 Flow Cytometry를 이용한 Apoptosis와 p53 단백의 측정

        윤주희 ( Yoon Joo Hee ),최운만 ( Choi Woon Min ),조윤성 ( Jo Yun Seong ),나종구 ( Rha Jong Gu ),한구택 ( Han Gu Taeg ) 대한산부인과학회 2003 Obstetrics & Gynecology Science Vol.46 No.7

        OVCAR-3와 SKOV-3 난소암 세포주에서 taxol 투여에 의해 유발된 고사 (apoptosis)의 연구를 통하여 두가지 세포주들 사이의 p53의 발현과 세포사의 생물학적 기전을 알아보고자 본 연구를 수행하였다. RPMI 1640 배양액으로 배양한 OVCAR-3와 SKOV-3 난소암 세포주를 taxol (paclitaxel)을 투여하지 않은 대조군과 taxol을 24시간 및 48시간 동안 투여한 투여군으로 나누어 실험을 진행하였다. 수확한 세포들을 먼저 annexin V-FITC (fluorescein isothiocyanate)와 anti-cytokeratin 항체인 clone CAM5.2와 clone MNF116과 반응시킨 다음 세포들을 세척하고 p53 항체를 가하여 반응시켰다. 세포들을 세척한 후 FITC와 공유 결합된 goat anti-mouse (GAM) immunoglobulin G (IgG)-FITC (이하 GAM IgG-FITC) 및 GAM IgG-phycoerythrin (PE) 이차 항체와 반응시켜 염색하였으며, 이어서 propidium iodide (이하 PI)를 이용하여 DNA를 염색하였다. 세포들의 분석에는 488 ㎚의 레이저가 장착된 표준 FACScan flow cytometer로 측정하였다. Taxol을 투여한 후 SKOV-3와 OVCAR-3 세포주 모두에서 G_2M에 세포들이 정지된 것으로 보아 정지된 세포들이 궁극적으로는 세포사 과정으로 진입할 것으로 생각되었다. Cytokeratin과 annexin V 및 G_0G_1 전분기 분획으로 표현된 고사 분획의 출현이 OVCAR-3 세포주에 비해 SKOV-3 세포주에서 낮은 것은 SKOV-3 세포주의 taxol에 대한 낮은 감수성을 나타내는 결과로 생각되었다. SKOV-3 세포주에서 p53 발현은 관찰되지 않았고, G_0G_1 전분기 분획의 미미한 증가 및 cytokeratin과 annexin V으로 측정된 고사 분획의 변화가 관찰되지 않았다. OVCAR-3 세포주에서 p53이 taxol의 투여 여부와 관계없이 발현되었지만 투여 시간에 따른 증가는 관찰되지 않았던 점과 G_0G_1 전분기 분획과 cytokeratin과 annexin V으로 측정된 고사 분획의 완만한 증가로 미루어 볼 때 p53의 발현이 세포주기 변화와 G_2M 분기의 정지와 무관하였으나 고사의 출혈과 관련되어 있을 것으로 생각되었다. 이러한 관찰은 향후 종양으로부터 채취한 종양 세포 부유액에 항암 화학요법제를 투여한 후 유발되는 고사의 정도를 신속하고 정확한 flow cytometry로 측정함으로써 항암 화학요법제의 투여 전 감수성을 알아보는 검사법의 개발 가능성을 암시하는 것으로 생각되었다. Objective : Taxol (paclitaxel)-induced apoptosis was studied to understand their biological mechanism correlated with the expression of p53 in the SKOV-3 and OVCAR-3 ovarian cancer cell lines. Materials and Methods : The SKOV-3 and OVCAR-3 cell lines were cultured in RPMI 1640 medium without taxol (control group) and with taxol for 24 h and 48 h (experimental group). After harvest, the cells were stained with annexin V-FITC (fluorescein isothiocyanate) and anti-cytokeratin antibodies (clone CAM5.2 and clone MNF116). They were washed and stained with p53 antibody. After then the secondary antibodies, i.e., FITC- or phycoerythrin (PE)-conjugated goal anti-mouse (GAM) immunoglobulin G (GAM IgG-FITC or GAM IgG-PE) were added in the cells and they were incubated in the dark. DNA of these cells were stained sequentially with propidium iodide (PI). Standard FASCcan equipped with a 499 ㎚ single laser was used for the analysis of these cells. Results : Both of SKOV-3 and OVCAR-3 cell lines were arrested in the G_2M phase after treatment of taxol, suggesting that these cells would eventually enter into the stage of cell death. Fractions of negative cytokeratin and positive annexin V and amount of sub-G_0G_1 fraction indicative of apototic fractions were lower in the SKOV-3 cell line compared with that in OVCAR-3 cell line, probably as a result of lower sensitivity of SKOV-3 cell line to the taxol. p53 expression were not detected in SKOV-3 cell line. On the basis of observed findings in SKOV-3 cell line and findings of high expressions of p53 regardless of taxol treatment, no increase in their expressions according to culturing time, and gradual increases in sub-G_0G_1 fractions and in fractions of negative cytokeratin and positive annexin V indicative of apoptosis in OVCAR-3 cell line, we concluded that the expression of p53 would not be associated with cell cycle changes and the arrest in the G_2M pahse but associated with the appearance of apotosis. Conclusion : Our results suggest that flow cytometric detection of the apoptotic fractions would be an effective, fast, and accurate method for the chemosensitivity test in tumor cells before the administration of anti-cancer drugs in gynecologic cancer patients.

      • KCI등재

        난소 질환에서 혈청 VEGF의 임상적 유용성

        윤주희 ( Joo Hee Yoon ),김대훈 ( Dae Hoon Kim ),유영옥 ( Young Oak Lew ) 대한산부인과학회 2007 Obstetrics & Gynecology Science Vol.50 No.1

        목적: 본 연구의 목적은 난소 질환에서 혈청내 VEGF농도를 측정하여 다른 임상 요소와 종양 표지 인자들과의 상관 관계를 평가하는 것이다. 연구방법: 사전 동의를 한 76명의 양성 난소 질환자, 9명의 정상인, 4명의 경계성 암환자, 53명의 난소암 환자들의 혈청 VEGF를 ELISA 법으로 측정하였다. 결과: 혈청 VEGF값이 난소 양성 질환자군 (157.7±197.8 pg/ml)과 난소 악성 질환자군 (344.7±372.2 pg/ml)에서 통계적으로 유의한 차이를 보였다 (p<0.005). 결론: 혈청 VEGF값은 난소 양성 질환과 악성 질환에서 감별 진단에 도움을 줄 수 있을 것으로 기대된다. 그래서 우리는 혈청 VEGF 값이 난소질환에서 하나의 진단요소로서 유용하리라 기대하는 바이다. Objective: The aim of this study was to evaluate the concentration of serum VEGF and its relationship with the clinical parameters and the tumor markers in ovarian diseases. Methods: We measured the serum VEGF concentrations by ELISA in 76 patients with benign ovarian disease, as well as 9 normal volunteers, 4 patients with ovarian borderline malignancy and 53 patients with ovarian cancer. Results: There is a significant statistical difference between the serum VEGF levels in patients with benign ovarian disease (157.7±197.8 pg/ml) and ovarian cancer (344.7±372.2 pg/ml) (p<0.005). Conclusion: Serum VEGF may help in the differential diagnosis between benign and malignant ovarian disease. We suggest that serum VEGF may be useful as a diagnostic tool in ovarian disease.

      • KCI등재

        장 폐쇄를 동반한 골반 방선균증 2 예

        윤주희(Joo Hee Yoon),이상희(Sang Hee Lee),손화정(Hwa Jeong Son),정미영(Mi Young Jeong),김석원(Sok Won Kim),김진우(Jin Woo Kim),한구택(Ku Teak Han),유기성(Ki Sung Ryu) 대한산부인과학회 2002 Obstetrics & Gynecology Science Vol.45 No.8

        Pelvic actinomycosis is a chronic, progressive, granulomatous and suppurative disease caused by an anaerobic or microaerobic Gram-positive organism, not fungi. Actinomyces species exhibit branching, filamentous growth and appear in the human skin, oral cavity, gastrointestinal tract. Actinomyces infection in human is relatively rare, however, prolonged use of an intrauterine contraceptive device (IUD) is a well known risk factor of pelvic actinomycosis. Pelvic actinomycosis can mimick pelvic malignancy leading to mutilating surgical excision, and diagnostic problems necessitated a laparotomy in many patients. The pathohistological diagnosis is based on the characteristic microscopic image and specific staining of sulfur granule. Adequate surgical excision and administration of antibiotics show good prognosis. We experienced 2 cases of pelvic actinomycosis with the intestinal obstruction, confirmed pathohistologically after laparotomy.

      • KCI등재

        자궁경관무력증에 대한 맥도날드식 자궁봉축술의 임상고찰

        이윤진(Yoon Jin Lee),윤주희(Joo Hee Yoon),김현영(Hyun Young Kim),권지영(Ji Young Kwon),정인철(In Cheol Jung),류순원(Soon Won Ryu),조현희(Hyun Hee Jo),김진홍(Jin Hong Kim) 대한산부인과학회 2001 Obstetrics & Gynecology Science Vol.44 No.11

        N/A Objective : The aim of this study is to improve the pregnancy outcome and evaluate the prognostic factor after McDonald operation of IIOC patients. Methods : From January 1, 1995 to December 31, 1999, 230 cases of IIOC were admitted and treated with McDonald operation at department of Obstetrics and Gynecology, Medical college of Catholic university. Among these patients, 187 cases were analyzed. We classified the above patients into 4 groups by gestational weeks of the operation (1st group before 14weeks, 2nd group 14+1-16weeks, 3rd group 16+1-18weeks, 4th group after 18weeks), and we analyzed the mean age of the patients, parity, indications, operation time, delivery methods and fetal survival rate on each groups. Results : The fetal survival rate was 76.08%, and duration of pregnancy was 21.65 weeks±6.39 in the 1st group, 78.5%, 19.24 weeks±6.367 in the 2nd group, 88.2%, 18.25 weeks±5.15 in the 3rd group, 75.67%, 12.12 weeks±7.19 in the 4th group. The 3rd group shows higher fetal survival rate with significantly. Conclusion : We can have higher fetal survival rate and prolongation of duration of pregnancy in the IIOC patients when we do the McDonald operation in the 16+1-18th gestation weeks.

      • KCI등재

        부인과 복강경 수술이 환자 면역체계에 미치는 영향

        유시현 ( Sie Hyun You ),윤주희 ( Joo Hee Yoon ),신은영 ( Eun Young Shin ),유영옥 ( Young Oak Lew ),김대훈 ( Dae Hoon Kim ) 대한산부인과학회 2007 Obstetrics & Gynecology Science Vol.50 No.5

        목적: 수술과 창상은 다양한 사이토카인 생산에 변화를 야기한다. 본 연구의 목적은 부인과 질환자에게 시행된 복강경 수술이 면역 체계에 미치는 영향을 평가하는 것이다. 연구방법: 부인과 질환으로 개복 수술을 받은 환자 20명과 복강경 수술을 받은 환자 33명을 대상으로 연구하였다. 환자들의 혈청 C-reactive protein (CRP)값, Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6), Interleukin-8 (IL-8), Interleukin-10 (IL-10) 그리고 TNF-α 농도를 ELISA법으로 측정하였다. 부가적으로 fibrinogen, transferrin, albumin, hemoglobin 그리고 hematocrit을 측정하였다. 그 측정값은 Mann-Whitney U test와 Kruskal-Wallis test를 통해 분석하였다. 결과: CRP, IL-6 그리고 IL-8 값이 개복 수술 환자군과 복강경 수술 환자군에서 통계적으로 유의한 차이를 보였다. CRP와 IL-8값이 개복 수술 환자군에서 수술 후 24시간 뒤에 현저한 상승을 보였고 그 차이는 통계적으로 유의하였다 (p<0.05). 결론: 수술은 면역체계의 변화를 유발하며 이것은 사이토카인 반응을 통해 평가될 수 있다. 복강경 수술은 개복 수술에 비해 CRP와 IL-8의 활성을 적게 유발한다. Objective: Elective surgical approaches and trauma cause changes in the production of different cytokines. The aim of this study was to evaluate the effects of laparoscopic surgery on the immune system of patients with gynecologic diseases. Methods: We recruited the open surgery group (n=20) and laparoscopic surgery group (n=33). In a prospective study we examined the C-reactive protein (CRP) level, the production of the cytokines Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6), Interleukin-8 (IL-8), Interleukin-10 (IL-10) and TNF-α concentrations by ELISA. In addition the fibrinogen, transferrin, albumin, hemoglobin and hematocrit were measured. Statistical analysis was made by Mann-Whitney U test and Kruskal-Wallis test. Results: There were significant statistical differences in the CRP, IL-6 and IL-8 between the open surgery group and laparoscopic surgery group after surgery. The CRP and IL-8 showed a more distinct increase in open surgery group 24 hours after surgery, the differences between the two surgical approaches were significant (p<0.05). Conclusion: Elective surgical approaches cause changes in the immune system, which can be evaluated by the reaction of cytokines. Laparoscopic surgery cause less activation of the CRP and IL-8 than open surgery.

      • KCI등재

        질에 발생한 악성 흑색종의

        박병준 ( Byung Joon Park ),윤주희 ( Joo Hee Yoon ),이혜영 ( Hye Yong Lee ),이성환 ( Sung Hwan Lee ),한구택 ( Ku Teak Han ),유기성 ( Ki Sung Ryu ),이아원 ( Ah Won Lee ),심상인 ( Sang In Shim ) 대한산부인과학회 2003 Obstetrics & Gynecology Science Vol.46 No.3

        Primary melanoma of the vagina is rare, accounting for 2.6-2.8% of all primary malignant tumor of the vagina and 0.4-0.8% of all malignant melanomas in the female. Melanocytes are the presumed precursors of malignant melanoma of the vagina; they are embr

      • KCI등재

        고려와 조선왕조의 관리등용제도

        김판석(Kim Pan Suk),윤주희(Yoon Joo Hee) 서울행정학회 2000 한국사회와 행정연구 Vol.11 No.2

        역사는 현재의 거울일 수 있기에 과거 역사 속의 국가인재선발제도를 경시할 수 없다. 비록 과거 왕조시대의 제도가 현재의 관점에서 보았을 때 합리성과 타당성 등이 결핍되었다 하더라도 이를 살피고 연구하여 보면 현재의 제도를 개선할 수 있는 교훈과 지혜를 발견할 수 있을 것이다. 그 동안 외국의 제도와 문물을 소개하고 이를 한국의 현실에 맞게 적용하려는 노력은 상당히 많았으나 고려와 조선왕조시대의 인사제도에 대한 응용연구는 많지 않은 편이었다. 다시 말해서 역사적인 사실을 규명하고 정리하거나 선조들의 사상을 연구하는 작업이 주종을 이루었고 과거의 제도를 오늘날의 제도와 접목하거나 응용하려는 시도는 상대적으로 활성화되지 못했다. 따라서 본고에서는 고려와 조선왕조의 관리등용제도에 관해 과거제를 중심으로 살펴보고 이를 오늘의 현실에 맞게 재해석하여 정부인력관리상의 정책적 함의를 도출해 보고자 한다. 본 연구의 목적은 왕조시대의 여러 가지 관리등용제도 중에서 과거제가 현대적 임용시험과 제일 유사하므로 과거제의 연구를 통해 현대적 의미와 맥락을 재발견해보자는 것이다.

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