담배나방 저장단백질 HASP-1 과 HASP-2 의 비교연구

유종명,정성은 고려대학교 한국곤충연구소 1995 昆蟲硏究誌 Vol.21 No.1

담배나방 저장단백질 HASP-1과 HASP-2의 비교 연구 유종명, 정성은 (한남대학교 이과대학 생물학과) 담배나방의 용-성충 발생동안 혈림프에서 저장단백질 HASP-1과 2를 분리하고 발생학적 및 생화학적 특성을 비교하였다. 두 단백질의 titer는 모두 종령유충기에 peak를 나타내었고 용말기에 감소한 후 성충기에 이르러 소실되었다. 그러나 이들 단백질은 정제 과정에서 서로 다른 특성을 보여 HASP-1은 DEAE-Cellulose와 Ultrogel A6상에서 그리고 HASP DEAE- Sepharose CL-6B와 Ultrogel AcA-22상에서 정제되었다. 전기영동분석 결과 HAS분자량 460 kDa 그리고 HASP-2는 분자량 332 kDa인 glycolipoprotein인 것으로 확인되었으며, HASP-1은 69 kDa와 83 kDa의 tetramer인 것으로 나타났다. 아미노산 조성에 있어서 공통적으로 높은 methione과 낮은 tyrosine 및 phenylalanine함량을 보였으나, histidine의 함량은 HASP-2에서만 높게 나타났다. Two storage proteins (HASP-1 and 2) were confirmed in haemolymph during larval-pupal development of Helicoverpa assulta, and their developmental and some biochemical chracteristics were compared. In common to the two proteins, the titer showed a peak at mature larva, decreased somewhat through the late pupal period, and then disappeared at adult stage. However, they showed quite different characteristics in the process of purification; HASP-1 was purified on DEAE-Cellulose and Ultrogel A6, while DEAE -Sepharose CL-6B and Ultrogel AcA-22 were selected for HASP-2. As the results of electrophoretic analysis, HASP-1 (MW 460 kDa) and HASP-2 (MW 332 kDa) were all glycolipoproteins, but the subunit constitution was different between them (HASP-1, hexamer of 69 kDa and 83 kDa; HASP-2, tetramer of a single subunit, 83kDa). In amino acid composition, high methionine and low tyrosine and phenylalanine were common to the two proteins, but considerably high histidine was characterized only in HASP-2.

Bacillus thuringiensis의 주입에 따른 담배나방의 혈림프 단백질, 가수분해효소 및 무기이온의 변화

유종명,조시형,황석연,이형철 한국연초학회 1994 한국연초학회지 Vol.16 No.1

Changes in haemolymph proteins, hydrolases such as esterase(EST), acid phosphatase(ACP) and alkaline phosphatase(ALP) , and inorganic ion(Na+, K+ and Cl- ) contents were induced by the injection of Bacillus thuringiengis into haemocoel of the last instar larva of Heliothis assulta. Protein concentration of haemolymph was increased until 24 hrs after injection, and decreased thereafter. Among the 8 basic protein bands identified through acid - polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE), 2 bands(bands a and b) became stronger by the bacterial infection. Activities of EST and ALP increased until 12 hrs after injection and then fell down, whereas ACP activity was decreased continuously with time after injection. Contents of inorganic ions were all increased by the bacterial injection, showing slow rate of increase in the chloride ion, but rapid in the sodium and potassium ions.

방아깨비 (Acrida cinerea) Biliverdin 결합단백질 (BP-1, BP-2)의 특성 I. Biliverdin 결합단백질 (BP-1, BP-2)의 생화학적 특성

유종명,이형철,박희윤,김선희,이옥경 한국곤충학회 1998 Entomological Research Vol.28 No.3

방아깨비(Acrida cinerea)의 혈림프에 존재하는 색소결합단백질인 biliverdin-binding protein들 (BP-1, BP-2)을 확인하였으며, 발생에 따른 변화상, 물리화학적 특성을 조사하였다. Biliverdin-binding protein들의 전기영동 상에서 함량은 BP-2에 비해 BP-1이 높았으며, 모두 발생과정 중 암컷에서는 큰 함량변화가 없었고 수컷에서는 점차감소되었다. ion exchange chromatography, gel filtration 및 electroelution을 통해 정제한 BP들의 전기영동 및 조직화 학적 분석 결과, 이들은 모두 분자량 약 51kDa와 58kDa의 두 subunit로 구성되었으며, BP-1은 약 580kDa, BP-2는 470 kDa의 단백질인 것으로 확인되었다. 두 biliverdin-binding protein (BP-1, BP-2)의 pI값은 모두 약 6.0으로서 구성아미노산의 조성에서 aspartic acid와 proline이 특징적으로 높았으며 다른 곤충류의 색소단백질들과 마찬가지로 aromatic amino acid들(tyrosine, phenylalanine)도 비교적 높게 검출되었다. BP-1은 6$0^{\circ}C$, BP-2는 $65^{\circ}C$의 온도에 이르기까지 열에 대해 비교적 안정한 단백질인 것으로 확인되었으며, biliverdin의 absorption spectrum상에서 약 375 nm와 650 nm에서 peak가 기록되어 전형적인 biliverdin 결합단백질로서의 특성을 나타내었다. Biliverdin-binding proteins (BP-1, BP-2) were confirmed, and their physicochemical characteristics were investigated in Acrida cinerea. In the content on electropherogram, BP-1 was higher than BP-2, and their levels were all constant during nymphal and adult development in female, but gradually decreased in male. As the results from electrophoretic and histochemical analysis of purified BPs through electroelution, gel filtration and ion exchange chromatography, they were all confirmed to be protein of M.W. 580 kDa (BP-1) and 470 kDa (BP-2) composed of two common subunits of 51 kDa and 58 kDa. Isoelectric point of the two BPs were about 6.0, respectively. The high contents of proline and aspartic acid were characteristic commonly to these proteins, and also somewhat high aromatic amino acid (tyrosine, phenylalanine) composition was shown similarity to the biliverdin-binding proteins from other insects. These biliverdin-binding proteins were stable to relatively high temperature (BP-1; 6$0^{\circ}C$, BP-2; $65^{\circ}C$) and all exhibited the peaks at ≒ 375 nm and ≒ 650 nm in the absorption spectra, showing the typical characteristics as biliverdin-binding protein.

솔나방의 변태에 따른 혈단백질의 변화

柳鍾鳴,李秀敏 崇實大學校 1974 論文集 Vol.5 No.2

솔잎혹파리의 변태에 따른 단백질 및 하이드로라아제의 pattern에 관한 연구

유종명 한국곤충학회 1983 Korean journal of entomology Vol.13 No.2

솔잎혹파리 (Thecodiplosis japonensis)의 발생과 변태에 따라 whole body에서 단백질 및 하이드로라아제의 pattern을 acrylamide gel 전기 영동법을 이용하여 분리한 결과는 다음과 같다. 1. 전 발생과 변태단계를 통하여 25개의 단백질 band가 분리, 확인되었다. 2. 각 발생단계 는 그들의 단백질 pattern상에 있어서 질적인 또는 양적인 변이를 보였으며 각 band의 농도가 있어서도 큰 변화를 보였다. 3. 조직화학적인 염색법에 의하여 복합단백질인 몇개의 glycoprotein과 lipoprotein band가 발생과정에 따라 확신되었다. 4. 그리고 leucinaminopeptidare, esterase, acid 및 alkaline phosphatase 등의 band들이 관찰되었는데 그들의 pattern상 역시 각 발생단계에 따라 특이하였다. Whole body protein and hydrolase patterns of the pine needle gall midge, Thecodiplosis japonensis at various developmental stages from the adult were examined by means of acrylamide gel electrophoresis. The results obtained are as fellows; 1. A total of 25 protein bands have been identified throughout the stages. 2. Each developmental stage exhibited both qualitative and quantitative differences in their proteins, and great changes in concentration of each band were observed, too. 3. By means of histochemical staining methods, several glycoprotein and lipoprotein were detected during the development. 4. In addition, leucinaminopeptidase, esterase, acid and alkaline phosphatase bands also were found, and their patterns were spcific for each developmental stage.

Nucleic Acid of the Fall Webworm, Hyphantria cunea Drury during its Development

유종명,Yoo, Chong Myung The Korean Society for Integrative Biology 1969 동물학회지 Vol.12 No.2

1. 미국흰불나방의 核酸을 發生 stage 에 따라 卵에서 成蟲까지 測定하였다. 2. 卵의 發生과 더불어 核酸量은 增加하였다. 3. RNA 와 DNA 는 成熟 5齡 幼蟲期에서 그의 最高値를 나타내었다. 4. 發生의 全 stage를 通하여 RNA 量은 DNA 量보다 一般的으로 높았다. 5. 용 이 發生되어 감에 따라 RNA 量은 增加하고 反對로 DNA 量은 減少하였다. 1. The amounts of RNA and DNA were determined in the fall webworm, Hyphantria cunea Drury during the course of development from the egg to early adult stage. 2. The amounts of both nucleic acids were increased with the development of egg. 3. Both acids reached a maximum druing the stage of the 5th instar larva. 4. The amount of RNA was generally greater than that of DNA throughout the stages of development. 5. As the pupa developed, there was an increase in the amount of RNA and on the contrary, the amount of DNA decreased.

곤충의 변태에 따른 지방체의 Hydrolase Zymogram에 관한 연구

유종명 한국곤충학회 1984 Korean journal of entomology Vol.14 No.1

곤충(배추흰나비, 연두금파리, 방아개비)의 변태에 따른 지방체의 hydrolase zymogram을 acrylamide gel 전기영동법을 이용하여 연구한 결과는 다음과 같다. 1. Esterase와 acid 및 alkaline phosphatase는 발생단계에 따라 각각 특이한 zymogram 상의 변이를 보였다. 그리고 각 band에 있어서의 효소황성의 변화가 관찰되었다. 2. Esterase는 배추흰나비에서 총 12개, 연두금파리에서 는 11개, 방아개비에서는 14개의 band로 분리되었고, acid phosphatase는 배추흰나비에서 6개, 연두금파리에서 4개, 방아개비에서 2개의 band로, 그리고 alksaline phosphatase의 경우에 는 배추흰나비 에서 8개 연두금파리에서 6개, 방아개비에서 2개의 band로 각각 분리되었다. 3. 특히, 방아개비에서 hydrolase zymogram은 배추흰나비와 연두금파리의 그것에 비하여 매우 달랐으며, 각 발생단계에 따라 특이하였고, 한편 band의 염색강도가 수컷에서 보다는 암컷에서 높았다. 4. 그리고 방아개비에서 acid phosphatase는 2개의 tand로 분리되었고 음극(-) 편에서만 전 발생단계를 통하여 관찰되었다. 5. Alkaline phosphatase band 중 가장 염색강도가 높은 band는 배추흰나비 용 1일에서 나타난 band 4이었다. Hydrolase zymograms of fat body in insects (Artogeia rapae, Lucillia illustris, Acrida cinerea) at various developmental stages were studied by means of electrophoresis in acrylamide gels. The results obtained are as follows; 1. Each developmental stage exhibited specific changes in zymograms of hydrolytic enzymes (esterase, acid and alkaline phosphatases) , and changes in enzyme activity of each band were observed, too. 2. A total of 12 esterase bands in Artegeia rapae, 11 in Lucillia illustris, 14 in Acrida cinerea, 6 acid phosphatase bands in Artogeia rapae, 4 inLucillia illustris, 2 in Acrida cinerea, and 8 alkaline phosphatase bands in Artogeia, rapae, 6 in Lucillia illustris, 2 in Acrida cinerea were identified, respectively. 3. In particular, hydrolase zymograms in Acrida cinerea were quite different from those of Artogeia rapae and Lucillia illustris, and were specific for each developmental stage, while the staining intensity in bands was higher in female than in male. 4. And in Acrida cinerea, acid phosphatase was separated into two bands and observed only in the direction of cathode throughout all the stages. 5. Among alkaline phosphatase bands, the most deep-dyed band was band 4 in Artogeia rapae and appeared at the 1-day old pupa of development.

환원당에의한 콜라겐 ( Type Ⅲ ) 의 가교결합 에 관한 연구

유종명,최쾌 생화학분자생물학회 1992 생화학분자생물학회 춘계학술발표논문집 Vol.- No.-

미국 흰불나방의 Acid 및 Alkaline Phosphatase Pattern에 관한전기 영동적 연구

유종명 崇實大學校 大學院 1983 崇實大學校 大學院 論文集 Vol.1 No.-

솔나방의 에스테라아제 아이소자임에 관한 연구

유종명,이경노 한국곤충학회 1974 Korean journal of entomology Vol.4 No.1

솔나방(Dendrolimus spectabilis Butler)의 발생과 변태 단계에 따른 haemolymph, 지방체, 장등의 esterase isozyme을 acrylamide gel 전기영동법을 이용하여 조사한 결과는 다음과 같다. 1) 발생과 변태의 전단계를 통하여 15개의 esterase isogyme band를 분리확인 하였다. 2) Esterase isozyme은 변태기와 조직에 따라 특이한 Pattern의 변이를 나타냈다. 3) Esterase의 활성은 종령유충에서 가장 높았고, 전용기, 용기로 진행되면서 그 활성은 점점 감소하였다. 4) 암수의 성별에 따른 esterase isoayme pattern은 차이를 보였다. The esterase isozymes of haemolymph of pine moth, Dendrolimus spectabilis Butler. at various developmental stages have been studied by means of acrylamide gel electrophoresis. A maximum of fifteen isozymes were identified throughout the stages. There was a stage and tissue specificity in the patterns observed, as in other organisms. The high activity in esterase was occurred at the 8th instar larval stage, decreased gradually with the development, and at the pupal stage, it reduced significantly. The difference in isozyme pattern between the male and female was observed in the adult.