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        Genetic Analysis of the Life Cycle in Interspecific Hybrids of Pleurotus ostreatus and Pleurotus florida Following Protoplast Fusion

        유영복,유창현,박용환,죤 페버디,Yoo, Young-Bok,You, Chang-Hyun,Park, Yong-Hwan,Peberdy, John F. The Korean Society of Mycology 1986 韓國菌學會誌 Vol.14 No.1

        느타리버섯과 사철느타리버섯의 영양요구성 균주를 원형질체융합에 의하여 이종간융합균주를 선발하였다. 이 체세포잡종을 재배하여 자실체에서 담자포자를 분리하여 life cycle에 대한 유전분석을 한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. $Arg{\times}Ribo-1,\;Arg{\times}Ribo-2,\;Gly\;Ser{\times}Ribo-1$ 그리고 $Gly\;Ser{\times}Ribo-2$ 4개의 융합조합에서 7개의 융합균주를 분석한 결과 모두 유전형질이 분리되었으며 또한 유전자 조환이 일어났다. $Arg{\times}Ribo-1$과 $Arg{\times}Ribo-2$에서는 4종류로 분리되었으며 $Gly\;Ser{\times}Ribo-1$, $Gly\;Ser{\times}Ribo-2$와 같이 대립유전자가 3인자 일때는 8종류로 기대되나 단지 2내지 6종류로만 분리 되었다. 2. 대림유전자의 비에 었어서 $Arg{\times}Ribo-1$과 $Arg{\times}Ribo-2$에서 1:1로 기대되나 Ribo의 분리수가 많은 3:1 으로 분리되었으며, $Gly\;Ser{\times}Ribo-1$과 $Gly\;Ser{\times}Ribo-2$에서는 1:1:1과는 아주 상이한 분리비를 나타내었다. 3. 4개의 융합조합 모두 연관에 속하지 않았으며 조환가는 $38.7{\sim}67.6%$였다. 4. 분리되는 prototrophic recombinants의 균사체에서 clamp connection이 형성되었는데 4개의 융합조합에서 모두 나타났으며 융합균주에 따라 차이가 났는데 $Arg{\times}Ribo-1$의 p5균주는 곁정된 수의 78.5%가 clamp connection을 형성하였다. 또한 이들 균주의 자실체는 정상이었으며 자실체의 색은 느타리버섯과 사철느타리버섯의 중간이었다. Interspecific hybrids of Pleurotus ostreatus and Pleurotus florida were formed by using protoplasts of complementing auxotrophs. The genetic markers were shown to segregate and recombine in the first generation of monosporus isolates from basidiocarp of seven fusion products. The analysis provides proof of heterokaryosis and strong evidence for haploidy of vegetative nuclei, a sexual cycle consisting of nuclear fusion and meiosis. In all the crosses there was no evidence of linkage between the genetic markers. Clamp connections were formed in monosporus mycelia from basidiocarp of fusion products.

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        계절별 온도에 따른 느타리 품종의 재배적 특성

        유영복,서경인,공원식,장갑열,신평균,박윤정,Yoo, Young Bok,Seo, Kyoung In,Kong, Won Sik,Jang, Kab Yeul,Shin, Pyung Gyun,Park, Yunjung 한국버섯학회 2009 한국버섯학회지 Vol.7 No.3

        최근까지 보급된 느타리버섯류 81개 품종을 URP를 이용하여 PCR에 의한 DNA 패턴으로 유연관계 분석과 자실체 특성조사로 품종간의 유사성을 결정하였고, 계절별로 상자재배 하여 온도 적응성에 대한 그 특성을 분석하였다. 재배품종의 DNA 패턴과 자실체 특성분석으로 품종의 유연관계를 조사한 결과 원형느타리는 1, 수한은 15, 왕흑평은 4, 춘추2호는 6, 신농11호는 1, 삼구01호는 2품종과 유사하거나 구별성이 뚜렷하지 않았다. 또한 수한 근연종으로는 5품종으로 나타났다. 느타리는 버섯 생육 시 산소공급을 위하여 환기가 필수적이므로 재배사내에서 외부기온의 영향을 크게 받는다. 따라서 계절에 따라 알맞은 품종을 선택하여야 에너지 절감과 생산량을 높일 수 있다. 봄~여름 재배 시 높은 온도($16^{\circ}C$ 이상)에 적응성이 강한 품종(내서성이 강함) 으로는 사철느타리종, 여름느타리종, 분홍느타리종의 8개 품종들이 속하였다. 봄~여름 재배 시 높은 온도에 적응성이 다소 강한 품종(내서성이 다소 강함)으로는 느타리종 51개 품종으로 나타났다. 가을~겨울 재배 시 낮은 온도($11^{\circ}C$ 이하)에 적응성이 다소 강한 품종으로는 느타리종 64품종으로 나타났다. 사계절 재배 시 적응성이 다소 강한 품종으로는 49개 품종으로 나타났다. 큰느타리, 아위느타리, 전복느타리종은 균사생장이 느려 오염이 심하여 상자 재배에서는 적합하지 않았다. 이러한 품종 특성 구명은 품종의 계절별 올바른 선택으로 에너지 절감과 생산성 향상에 의한 농가소득에 기여할 것이며, 나아가 농가와 종균배양소간의 분쟁해소, 품종육성자의 본인 개발 품종에 대한 상대적 위치, 육종모본 선택, 농가지도 사업에 유용하게 활용될 수 있을 것이다. We determined the genetic relatedness among 81 commercial varieties of oyster mushrooms by either comparison of fruiting body characteristics or using PCR amplification with URP primers. Also, we assessed their temperature adaptation by using box cultivation. Based on our data, some varieties such as Wonhyung and variety 1, Suhan and variety 20, Wang-hukpyung and variety 4, Chunchu #2 and variety 6, Shinong #11 and variety 1, Samgu #1 and variety 2, showed the close genetic relatedness between each other. It is known that mushroom culture room is affected by outer temperature because mushroom need the adequate aeration for their growth. Therefore, in aspect of saving energy, the cultivation of season favorable mushroom species has been recommended. Eight different commercial varieties including Sa-chul, Yeoreum and Bunhong(Pink) grew well at high temperature ($16^{\circ}C$). Also, about 51 different oyster mushroom strains were good at relatively high temperature. However, other 64 different oyster mushroom varieties were grew well at low temperature ($11^{\circ}C$). Fourty-nine varieties were adapted well in most temperatures. The slow growth rate were observed in some varieties including Kun(P. eryngii ), Awi(P. nebrodensis ), and Cheunbok(P. abalonus ), which are not suitable for box cultivation. We believe that the culture characterization of each mushroom varieties should help many farmers in many aspects such as saving energy, quantity improvement and new variety development etc.

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        Fruiting body development and genetic analysis of somatic hybrids by protoplast fusion in edible fungi

        유영복,공원식,오세종,전창성,신평균,김범기,김규현,박민선,민병례,Yoo, Young Bok,Kong, Won Sik,Oh, Se Jong,Jhune, Chang Sung,Shin, Pyung Gyun,Kim, Beom Gi,Kim, Gyu Hyun,Park, Minsun,Min, Byung Re The Korean Society of Mushroom Science 2004 한국버섯학회지 Vol.2 No.3

        원형질체 융합에 의한 화합성 및 불화합성 종간 체세포 잡종을 얻었다. 화합성 종간인 Pleurotus ostreatus와 P. florida의 융합체는 이질핵체(heterokaryon)를 형성하였고, 불화합성 종간인 P. cornucopiae + P. florida, P. ostreatus + Ganoderma applanatum, P. florida + Ganoderma lucidum, 그리고 P. ostreatus + Flammulina velutipes는 합핵체(synkaryon)를 형성하였다. 이질이핵체는 동일한 양상의 자실체를 형성하는데 비해 합핵체는 유사분열상의 꺽쇠연결체 형성, 한쪽 친과 유사한 자실체 형성, 비정상적 유전형질 분리 및 유전자재조합 현상을 나타내었다. 화합성 및 불화합성 계통간 융합체의 RAPD 분석결과 화합성 종간 융합체는 동일한 DNA 패턴을 나타내었고, 불화합성 종간 융합체는 한쪽 친과 유사한 DNA 양상이면서 비양친 DNA 밴드도 형성하였다. 합핵체의 패턴은 microgenome insertion type과 macrogenome insertion type으로 구분되었다. 합핵체의 자실체 발생은 융합 모균주 양친의 자가임성에 의존하는데 이는 느타리의 동형핵체 자가임성과 유사한 양상이었고, 교배형 전환과 관련이 있는 것으로 사료된다. 여기서는 이러한 관점에서 논할 것이다. Somatic hybrids of inter-compatible and inter-incompatible strains were obtained by protoplast fusion. The fusion products between compatible strains, Pleurotus ostreatus and P. florida, formed heterokaryons, while fusants between incompatible strains such as P. cornucopiae + P. florida, P. ostreatus + Ganoderma applanatum, P. florida + Ganoderma lucidum, and P. ostreatus + Flammulina velutipes formed synkaryons that retained genes from both parents. The heterokaryons showed the same level of basidioma development. In contrast, the synkaryons showed unique characteristics including clamp connection formation at mitosis, either partner basidioma development, and abnormal segregation and recombination compared with inter-compatible strains. Synkaryons can be classified into homokaryoyic and heterokaryotic type. A comparison of somatic hybrids with compatible and incompatible strains was made using random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis. The heterokaryons between compatible species showed the same level of variability and contained both parental RAPD bands. In contrast, most of the synkaryons between incompatible species showed similarity to those of either parental bands and non-parental RAPD bands. Synkaryons can be classified into microgenome insertion type and macrogenome insertion type. A tetrapolar mating system was found among monospore isolates in somatic hybrids and wild type P. ostreatus. Homokaryons from each somatic hybrid combination were paired with tester homokaryons of the initial wild type of P. ostreatus. The changed mating types were identified in progenies. The pattern of mating type switching in somatic hybrids depends on compatibility of fusion partner. There are several factors related to the mechanism of clamp connection formation and fruiting body development of synkaryons. Of these,the major factor may be associated with self-fertility and mating type switching such as homokaryotic fruiting of wild type P. ostreatus. This review will discuss these aspects.

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        한국인 태아의 식도 발생과정에서 bcl-2 발현에 관한 연구

        유영복(Young Bok Yoo) 대한해부학회 2005 Anatomy & Cell Biology Vol.38 No.1

        고집적(high-throughput) 연구방법인 tissue-array 기법을 사용하여 사람의 발생 14~30주까지의 식도조직을 대상으로 아포프토시스를 억제하는 대표적 유전자인 bcl-2가 식도 발생에 미치는 영향을 면역조직화학 염색을 이용하여 관찰하였다. 발생 14주에서 30주까지 식도 점막상피의 바닥층의 모든 세포에서 bcl-2가 발현되었고 이 기간 동안 발현의 강도와 발현되는 세포의 수는 변함이 없었고 발생 20주부터 bcl-2가 발현된 샘 조직이 점막상피에서 고유판으로 내려가기 시작했으며 28주 이후에는 bcl-2에 발현된 샘 조직이 점막밑조직에서 관찰되었다. 발생 실험 전 기간 동안 점막밑신경얼기와 근육층신경얼기의 신경절세포에서 bcl-2가 발현되었고 발생 14주에서 28주까지 점막근육판과 근육층의 민무늬근육세포는 bcl-2를 강하게 발현하였고 발생 28주 이후에는 bcl-2의 발현이 감소하는 경향이 있었다. 이는 분화가 진행되지 않은 발생전반기에는 미성숙한 세포가 세포사망의 취약점을 극복하기 위해 생존인자를 발현하여 세포사망이 억제되나 분화가 진행되면서 세포사망이 전반적으로 증가하여 불필요한 부분을 제거하여 장기의 형태형성 및 기능완성에 기여하는 것으로 사료된다. This study was intended to obtain the basic data in order to understand the role of the apoptosissuppressing gene, bcl-2, in the esophageal development. Immunohistochemistry for bcl-2 was performed using a tissue-array technique, on Korean fetal esophagus tissues in the 14-30 weeks of the human development. The results showed that all basal cells of mucosal epithelium were immunostained for bcl-2. After 20 week, the developing glandular tissues were descended from the mucosal epithelium, and exhibited bcl-2 immunostaining. After 28 week, the developing glandular tissues were immunostained in the submucosa. Ganglion cells of submucosal and myenteric plexus were stained intensely in all stages of the esophageal development. Until 28 week, the smooth muscle cells of the lamina musclularis mucosa and the musclularis externa were stained strongly. After 28 week, the smooth muscle cells expressing bcl-2 decreased. This results may suggest that the immature cells expressed survival factors to overcome the susceptibility to cell death. In the early stage when no differentiation occurs the death of cells is suppressed, in the late stage when differentiation is achieving the death of cells increases to remove the innecessary portions of the organs in order to protect the specific cells of the organs having functions.

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