Role of obioactin on toxoplasmacidal activity within mouse peritoneal macrophages

양만표,Yang, Mhan-pyo The Korean Society of Veterinary Science 1994 大韓獸醫學會誌 Vol.34 No.4

톡소플라즈마 과면역(過免疫) 우혈청(牛血淸)에서 유래된 면역증강제인 obioactin으로 처리한 마우스 복강 macrophages내(內)에서의 톡소플라즈마 증식억제 활성을 검토하였다. obioactin 및 lonomycin A로 처리한 macropohages에서는 첨가농도의 증가에 따라 세포내의 톡소플라즈마 증식이 현저하게 억제되었다. 그러나 macrophages 활성물질인 muramyl dipeptide(MDP)는 톡소플라즈마의 증식억제 효과가 없었다. 이와같이 obioactin 및 lonomycin A의 첨가에 의해 macrophages내(內)에서 톡소플라즈마의 증식이 억제되는 기전의 일부를 해명하기 위한 일환으로 활성산소 중간체 및 lysozyme 분비량을 검토하였다. obioactin과 MDP로 처리한 macrophages에서는 활성산소 중간체인 superoxide anion($O_2{^-}$)과 hydropen peroxide($H_2O_2$)의 생산은 첨가농도에 의존해서 증가하였으나 lonomycin A 첨가군에서는 대조군과 차이가 없었다. 한편 세포내에서 분비되는 lysozyme의 양은 obioactin, lonomycin A 및 MDP를 첨가한 각각의 macrophages에서 첨가농도의 증가에 따라 무처지 대조군에 비해 감소되었다. 이러한 결과로 부터 obioactin은 macrophages를 활성화시켜 세포내에서 활성산소 중간체($O_2{^-}$ 및 $H_2O_2$)를 발생시켜 이것들에 의해 톡소플라마즈의 증식이 억제되는 것으로 사료되었다. 그러나 macrophages내에서 분비되는 lysozyme은 톡소플라즈마의 증식억제와는 무관하였다. The present study was undertaken to examine the effects of obioactin, lonomycin A, and MDP on toxoplasmacidal activities in glycogen-induced mouse peritoneal macrophages. The killing effect of obioactin on Toxoplasma multiplication was increased significantly in proportion to its concentrations. $O_2{^-}$ generation in obioactin-treated macrophages was also increased from twofold to threefold when compared with that of untreated control. Similarly, $H_2O_2$ continued to rise in parallel with increase of the concentration of obioactin. Lonomycin A-treated macrophages also exhibited a good effect of dose-response on toxoplasmacidal activities. However, $O_2{^-}$ and $H_2O_2$ were not generated significantly in lonomycin A-treated macrophages. Macrophages treated with muramyl dipeptide (MDP) were not found to inhibit the prolifi:ration of Toxoplasma but showed the enhancement of $O_2{^-}$ and $H_2O_2$, generation. The released lysozyme levels from macrophages into cultured media were decreased tn dose-dependent fashion by in vitro treatment of obioactin, lonomycin A, and MDP. The intracellular lysozyme levels appeared to be a constant value regardless of increasing the concentrations of obioactin, lonomycin A, and MDP. Therefore, these results suggest that Toxoplasma multiplication within macrophages treated with obioactin was inhibited by the generation of $O_2{^-}$ and $H_2O_2$ and that lysozyme per se within or released from macrophages had no effect on toxoplasmacidal activity.

細胞內에 있어서 톡소플라즈마 ( Toxoplasma ) 增殖抑制 基調 및 톡소플라즈마 溶解 抗原의 細胞傷害性

양만표 忠北大學校 農業科學硏究所 1993 農業科學硏究 Vol.11 No.2

고양이 말초혈액 탐식세포의 탐식능에 있어서 계난백유래물질의 효과

양만표,김기홍 한국임상수의학회 1999 한국임상수의학회지 Vol.16 No.1

The immunostimulating effects of egg white derivatives (EWD) on the phagocytic response of feline peripheral blood polymorphonuclear cells (PMN) as well as mono- nuclear cells (MNC) were examined. The phagocytic activity was analyzed by a flow cytometry system. The EWD showed directly an enhanced effect on the phagocytic response of MNC but not PMN. The phagocytic activity of MNC was enhanced by culture supernatant from MNC and PMN treated with EWD, respectively. Similarly, the phagocytic activity of PMN was enhanced by culture supernatant from MNC but not PMN treated with EWD. It was, therefore, indicated that the enhanced phagocytic activity of feline PMN could be mainly mediated by humoral factor(s) released from MNC treated with EWD. These results suggested that EWD could enhance the phagocytosis of feline peripheral blood phagocytes.

랫드의 호중구 탐식능에 있어서 계난백유래물질의 효과

양만표,김기흥,나기정 한국임상수의학회 1998 한국임상수의학회지 Vol.15 No.2

Effects of chicken egg white derivatives (EWD and EF-203) on the changes of blood cells and the neutrophil phagocytic activity were examined in the rats. Rats were administered orally with either EWD (200 mg/kg) or EF-203 (200 mg/kg) for 3 days. Thereafter, the changes of blood cell values (RBC, WBC, platelets, PCV, differential count of neutrophils) and the phagocytic activity of neutrophils were evaluated for 7 days. The numbers of WBC and the differential count of neutrophils of rats administered with either EWD or EF-203 were significantly increased (p<O.05 to 0.01) when compared to those of control rats receiving saline alone. In additional the phagocytic activity of neutrophils was remarkably augmented (p<0.01) by administration of either EWD or EF-203, suggesting that these egg white derivatives have an immunostimulating potent. And the numbers of platelets were also remarkably enhanced (p<0.01) by administration of either EWD or EF- 203, indicating that these substances also have a stimulating effect of platelets. However, there was no change in the values of RBC and PCV regardless of administration of either EWD or EF-203. These results suggested that chicken egg white derivatives including EWD and EF-2(13 induce the increase of platelets and the enhancement of nonspecific immunity on neutrophils.

계난백유래물질로 배양한 고양이 말초혈액 단핵구세포 배양상층액중의 탐식촉진인자 검출

양만표,김기홍 한국임상수의학회 1999 한국임상수의학회지 Vol.16 No.1

The aim of this study is to determine the phagocytosis-promoting factor(s) for feline peripheral blood polymorphonuclear cells (PMN) by culture supernatant from mono-nuclear cells (MNC) treated with egg white derivatives (EWD). The phagocytic activity of PMN was analyzed by a flow cytometry system. The EWD did not show direct effect on the phagocytic response of PMN. The phagocytic activity of PMN was enhanced by culture supernatant from MNC but not PMN treated with EWD. Therefore, it was suggested that the enhanced phagocytic activity of feline PMN could be mediated by humoral factor(s) released from MNC treated with EWD. Thus, the phagocytosis-promoting factor(s) in supernatant fraction from MNC culture treated with EWD were isolated by reverse phase high pressure liquid chromatography. The resulting supernatant fraction on 29.02 minutes of retention time showed high phagocytic activity of PMN. The molecular weight of this supernatant fraction was 16 to 18 kDa when analyzed by capillary electrophoresis. The isoelectric point was pH 5.76 when assessed by ion-exchange chromatography. These results suggest that EWD stimulates feline MNC to elaborate a phagocytosis-promoting factor, 16 to 18 kDa of molecular weight, which could be an important mediator for the enhancement of phagocytic activity of feline peripheral blood phagocytes. Further study will be needed to elucidate this phagocytic factor.

고양이 말초혈액 다형핵백혈구의 유주성에 있어서 인삼 사포닌의 효과

양만표,박세형,윤영원 한국임상수의학회 1998 한국임상수의학회지 Vol.15 No.1

고양이 말초혈액 다형핵백혈구(PMNC)의 유주성에 있어서 인삼 saponins(ginseng total ssponin(GTS), ginseng PT saponin(GfT) 및 ginseng PD saponin(GPD))의 면역증강 효과를 검토하였다. PMNC에 대한 유주성을 hoyden chamber 변법으로 측정한 결과, GTS, GPT, GPD는 PMNC에 대해 직접적인 유주활성을 나타내지 않았다. 또한 인삼 saponins을 첨가하여 배양한 PMNC 배양상충액의 경우게는 미약한 유주활성을 나타내었다. 그러나 GPf및 GPD를 첨가하여 배양한 말초혈액 단핵구세포(MNC)배양상충액에서는 PMNC의 유주활성이 현저하게 증가하였다. PMNC에 대해 유주활성이 인정된 GPI)로 배양한 MNC 배양상충액을 이용하여 checkerboard assay를 실시한 결과 배양상충액의 농도차에 의존하는 진의 유주활성임을 알 수 있었다. 이상의 결과로부터 인삼 saponine 중 GPT 및 GPD가 고양 이 말초혈액 다형핵백혈구의 유주성을 중강시키는 효과가 있으며, 이것은 이들 saponins에 의해 활성화된 단핵구세포에서 분비되는 유주성인자에 의해 다형핵백혈구의 유주활성이 증 강되는 것으로 사료되었다.

Cyclophosphamide투여 랫드의 혈구세포 변화 밀 호중구 탐식능에 있어서 계난백유래물질의 효과

양만표,김기흥 한국임상수의학회 1998 한국임상수의학회지 Vol.15 No.2

As an antitumor agents cyclophosphamide (CPA) is frequently used in animal clinic. Important adverse effects of its administration are leukopenia, thrombocytopenia and anemia. We investigated the effects of chicken egg white derivatives (EWD and EF-203) on the changes of blood cells and the neutrophil phagocytosis of rats administered with CPA. Rats were administered CPA peritoneally at dose of 50 mgag once a day far 3 days plus either EWD or EF-203 orally at dose of 200 mg/kg once a day far 3 days. Thereafterl the changes of blood cells by automatic blood cell counter and the phagocytosis of neutrophils by flow cytometry were examined far 7 days. There was no change in RBC values regardless of administration of either EWD or EF-203 throughout experimental period. But rats receiving CPA plus either EWD or EF-203 showed a significant higher PCV values than those of CPA alone (p<0.01). The numbers of peripheral blood platelets and WBC and the differential count of neutrophils in the ra% receiving CPA plus either EWD or EF-203 were significantly higher (p<0.05 to 0.01) than those of CPA alone. Moreover, these rats showed significanly enhanced phagocytoses of neutrophils when compared to rats with CPA alone (p<0.01). These result suggested that chicken egg white derivatives including EWD and EF-2% have immunomodulatory effects in regard to the increase of platelets, WBC, differential count of neutrophils, PCV, and the enhancement of phagocytic activity of neutrophils in immunosuppressed rats by CPA. Thus, co-adminstration of chicken egg white derivatives will be able to reduce the side effects in the animals treated with antitumor agents.

우백혈병 바이러스감염 림프아구양 B 세포주(BL2M3)의 autocrine 증식

양만표,Yang Mhan-pyo The Korean Society of Veterinary Clinics 1995 한국임상수의학회지 Vol.12 No.1

우백혈병 바이러스감염 B 세포주(BL2M3 및 BL312)의 배양상층액에 대한 자기세포들의 증식반응을 검토하였다. 그 결과 BL2M3 및 BL312세포의 배양상층액을 자기세포인 BL2M3세포에 첨가했을 때 농도에 비례하여 현저한 증식을 유도하였다. 이것은 배양 4-5일차, 배양상층액의 첨가농도는 50-60%,세포수는 5x$10^4$-5x$10^{5}$ /ml에서 최적의 증식반응을 보였다. 우태아혈청(FBS) 무첨가 BL2M3 및 BL312세포의 배양상층액에 대해서도 BL2M3세포는 동일한 증식반응을 보였다. 한편 BL2M3 및 BL312세포의 배양상층액을 BL312세포에 첨가했을 때는 BL2M3세포의 경우에 비해 현저하지 않았다. 또한 BL2M3 및 BL312세포의 배양상층액은 말초혈액 림프구에 대해서도 pokeweed mitogen(PWM)첨가 유무에 관계없이 증식을 유도하였다. 그러나 PWM자극 말초혈액 단핵세포의 배양상층액은 BL2M3 및 BL312세포에 대해서 전혀 증식을 유도하지 못했다. 이상의 결과로부터 우백혈병 바이러스감염 B세포주 특히 BL2M3세포는 세포자신이 증식인자를 분비하고 그것과 반응하여 증식하는 소위 autocrine growth 양상을 보이는 것으로 판명되었다.

Changes of Plasma Progesterone and Estradiol-17${\beta}$ Level During Early Pregnancy in Immature Female Rats Superovulated by Transplantation of a Pituitary Gland

양만표,김영훈,이장락,권종국,Yang, Mhan-Pyo,Kim, Young-Hoon,Lee, Jang-Nag,Kwun, Jong-Kuk The Korean Society for Reproductive Medicine 1986 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.13 No.1

본 연구는 한개의 뇌하수체를 이식시켜 과배란된 미성숙 흰쥐에서 혈중 progesterone과 estradiol-17${\beta}$ 의 수준 변화를 관찰하기 위하여 시도되었다. 30일령 숫컷 휜쥐에서 뇌하수체를 제거하기 15일 전에 고환을 제거시켰으며 고환이 제거된 쥐에서 얻은 한개의 뇌하수체를 실험 시작일(임신 3일전 : D-2) 오전 7시에서 10시사이에 28일령의 암컷 흰쥐의 우측 신장 피막 아래 이식시켰다. 대조군은 같은날 오전 10시에 4 IU PMSG 를 투여하였다. 실험에 사용된 쥐들은 혈중 호르몬 수준을 측정하기 위하여 임신 3일전, 2일전, 1일전, 임신 1일, 2일, 3일 및 5일에 희생시켜 채혈하였다. 임신 1일에는 교배후 estrogen의 과량분비를 차단하기 위하여 난소를 제거한 후 난소 호르몬을 투여하고 임신 8일에는 착상 상태를 조사하였다. 혈중 progesteron과 estradiol-17${\beta}$ 수준은 gamma counter(Packard)로 계측하였다. 본 실험에서 얻은 결과는 다음과 같다. 1. 난소를 제거하고 progesterone과 estradiol-17${\beta}$를 투여한 과배란된 흰쥐는 난소를 제거하지 않고 과배란된 흰쥐나 대조군에 비하여 효과적인 착상율을 보이지 않았다(P<0.001). 2. 과배란된 흰쥐에서 혈중 progesterone 수준은 대조군에 비해 교배후 계속적으로 높은 상승을 보였으나 교배전 수준은 대조군에 비해 낮았다(P<0.001). 3. 과배란된 흰쥐에서 혈중 estradiol-17${\beta}$ 수준은 과배란 2일전부터 임신 1일까지 아주 높은 상태를 유지하였으며 임신 1일전(발정전기)에는 638${\pm}$134 pg/ml 으로 절정을 나타내었으나 임신 1일 이후 부터는 급격히 감소하여 임신 5일에는 10pg/ml이하로 떨어졌다.

고양이 말초혈액 다형핵백혈구의 유주활성에 있어서 계난백유래물질의 면역증강 효과

양만표,이재권 한국임상수의학회 2000 한국임상수의학회지 Vol.17 No.1

고양이 말초혈액 다형핵백혈구 (PMN)의 유주활성에 있어서 계난백유래물질 (EWD)의 면역증강 효과를 검토하였다. PMN의 유주활성은 EWD 그 자체 및 EWD로 배양한 PMN의 배양상층액에서는 활성이 존재하지 않았다. 그러나 EWD로 배양한 MNC 배양상층액에서는 PMN에 대한 유주활성이 증가되었다. 본 활성은 checkerboard assay를 통해 진성 유주활성으로 밝혀졌다. 이러한 고양이 PMN 유주활성은 human recombinant interleukin-8(hr IL-8)에 의해서도 증가되었다. IL-8의 또 다른 특성인 세포 형태변형 실험에서도 EWD로 배양한 MNC의 배양상층액과 hr IL-8 모두에서 높은 수준의 세포 형태변형효과를 나타내었다. 이와 같이 EWD로 배양한 MNC의 배양상층액과 hr IL-8 모두에서 증가된 PMN의 유주활성 및 세포변형효과는 anti-human IL-8mAb에 의해 농도의존적으로 억제되었다. 이상의 결과로부터 EWD는 고양이 PMN의 유주활성에 있어서 면역증강 효과가 있으며, 이것은 EWD에의해 활성화된 MNC에서 분비되는 IL-8양 유주성 인자에 의해 PMN의 유주활성 증가 및 세포 형태 변형이 일어나는 것으로 사료되었다.