Anti-tumor Activity of Ethanol Extract of Androsace umbellata L. In Vitro and In Vivo

Eun-Kyung Ahn(안은경),Hye-Jin Ko,Jaeyeon Lee,Joa Sub Oh,Ok Pyo Zee 한국실험동물학회 2009 한국실험동물학회 학술발표대회 논문집 Vol.2009 No.-

배암차즈기 차 제조와 항산화 활성 및 품질특성

정지숙,김용주,안은경,신주영,고근배,손병길,Jeong, Ji-Suk,Kim, Yong-Joo,Ahn, Eun-Kyung,Shin, Ju-Young,Go, Geun-Bae,Son, Byeong-Gil 한국식품조리과학회 2015 한국식품조리과학회지 Vol.31 No.1

항염 및 항산화 활성이 우수한 배암차즈기(SPR) 잎을 활용하여 배암차즈기 차(SPRT)를 제조하였다. SPR의 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량은 각각 $71.8{\pm}4.74GAE\;mg/g$ 및 $38.7{\pm}2.95QUE\;mg/g$으로 측정되었다. DPPH에 따른 수소공여능은 $16.9{\mu}g/mL$의 $RC_{50}$을 나타내었으며, 이때, 양성대조구인 ascorbic acid는 $6.1{\mu}g/mL$의 $RC_{50}$을 나타내었다. 배암차즈기는 세포 독성을 나타내지 않는 법 위에서 물 추출물의 $IC_{50}$은 $100{\mu}g/mL$ 이상이었으며, $25{\sim}100{\mu}g/mL$의 범위에서 NO 생성이 LPS 처리구에 비해 약 30% 정도 저해되었다. SPRT는 중잎과 대잎을 사용하여 자체수분을 활용하여 단시간 덖음하여 총 120분 가향한 차가 가장 좋은 평가를 받았다. 향은 맛과 전반적인 기호도에 양의관계로 영향을 주었다. SPRT는 덖음 및 가향 작업에 따른 열처리에도 항산화 수치가 통계적으로 유의적인 차이가 없어 항산화능이 유지되었다. 티백량은 1.0 g이 적당한 것으로 평가되었다. 따라서 본 실험의 결과를 바탕으로 배암차즈기가 항산화 등 기능성을 강조한 음료 또는 식품 소재로 활용될 수 있을 것이다. The substitute tea was manufactured from the leaves of Salvia plebeia R. Br. (SPR) that have anti-inflammatory and antioxidative activities. Total polyphenols and flavonoids in SPR were $71.8{\pm}4.74GAE\;mg/g$ and $38.7{\pm}2.95QUE\;mg/g$, respectively. DPPH radical scavenging activity of SPR water extract had an $RC_{50}$ of $16.9{\mu}g/mL$. SPR inhibited lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) production with an $IC_{50}$ of > $100{\mu}g/mL$. Medium and large leaves were used in the SPR substitute tea (SPRT). The water content was dissipated on roasting within approximately 10 minutes, and the tea obtained from fan-firing for a total 120 minutes was evaluated as most superior. Flavor was positively correlated with the taste and general preference. SPRT maintained its anti-oxidative activity without significant changes on roasting or fan-firing even after the heat treatment. The appropriate weight of a tea bag for one serving was 1.0 g. The study results indicated that SPR is a potential resource for the development of food or ingredients with anti-inflammatory properties.

3T3-L1 지방전구세포에서 용아초 에틸아세테이트 추출물의 항비만 효과

이정아(Jung A Lee),안은경(Eun-Kyung Ahn),홍성수(Seong Su Hong),오좌섭(Joa Sub Oh) 한국식품영양과학회 2012 한국식품영양과학회지 Vol.41 No.2

본 연구에서는 3T3-L1 지방전구세포를 이용하여 용아초 에틸아세테이트 추출물의 항비만 활성을 확인하고자 하였다. 용아초 에틸아세테이트 추출물에 의한 지방세포 분화 및 adipogenesis 저해 활성을 확인하기 위해 추출물을 3T3-L1 지방전구세포에 분화를 유도하면서 농도별(50, 100 μg/mL)로 처리하였고, 그 결과 용아초 에틸아세테이트 추출물은 지방세포의 분화를 억제시켰다. 이 같은 활성에 대한 기전을 확인하기 위해 PPARγ 전사활성과 지방세포 분화에 관여하는 유전자들의 활성을 확인해 보았다. 실험 결과 용아초 에틸아세테이트 추출물은 PPARγ 전사 활성을 억제시켰고 PPARγ 및 C/EBPα의 mRNA 발현을 농도 의존적으로 감소시켰으며 지방세포 분화에 관여하는 adipokine들의 발현을 조절하는 것으로 나타났다. 따라서 용아초 에틸아세테이트 추출물의 항비만 효과는 지방 생성의 주요 전사인자인 PPARγ와 C/EBPα의 유전자 발현조절을 통해 지방 분화억제 및 지방 축적을 효과적으로 감소시키는 것으로 보이며, 효과가 있는 농도가 100 μg/mL로 천연물질로써 비교적 낮은 농도에서 효과가 나타나는 것으로 보아 항비만 소재로의 개발 가능성이 있을 것으로 사료된다. To evaluate the anti-obesity effect of Agrimonia pilosa L., this study investigated that ethyl acetate extract from A. pilosa L. (EAAP) suppresses lipid accumulation and inhibits expression of adipogenic marker genes, such as peroxisome proliferator activated receptor γ (PPARγ), CCAAT-enhancer-binding protein α (C/EBPα), glucose transporter 4 (GLUT4), and adiponectin in 3T3-L1 preadipocytes. We demonstrated that EAAP inhibited adipocyte differentiation and expression of PPARγ and C/EBPα mRNA levels in a dose-dependent manner. In addition, EAAP reduced the PPARγ transcriptional activity stimulated by rosiglitazone in HEK 293T cells and decreased the expression of GLUT4 and adiponectin in 3T3-L1 cells. These results suggest that EAAP inhibits preadipocyte differentiation and adipogenesis by blocking of PPARγ and C/EBPα gene expression in 3T3-L1 cells.

산유자 잎 에탄올 추출물의 미백, 주름억제, 항염증 및 항산화 효능

이재연 ( Jae Yeon Lee ),안은경 ( Eun Kyung Ahn ),고혜진 ( Hye Jin Ko ),조영락 ( Young Rak Cho ),고운철 ( Woon Chul Ko ),정용환 ( Yong Hwan Jung ),최경민 ( Kyung Min Choi ),최미래 ( Mi Rae Choi ),오좌섭 ( Joa Sub Oh ) 한국응용생명화학회(구 한국농화학회) 2014 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.57 No.4

본 연구는 제주도 해변의 벌판에서 드물게 자라는 산유자(Xylosma congesta) 잎 에탄올 추출물의 화장품 기능성 소재로서의 활용 가능성을 알아보기 위하여 cell culture model 및 invitro assay system을 이용하여 미백, 주름개선, 항염증 및 항산화 활성을 분석하였다. 그 결과 산유자 잎 에탄올 추출물은 B16F10 세포에 세포독성 없이 효과적으로 α-MSH에 의해 유도된 melanin 합성을 억제함으로써 높은 미백 활성을 가지는 것이 관찰되었다. CCD-986SK 세포를 이용하여 산유자 잎 에탄올 추출물의 주름개선 활성 능력을 procollagen 합성시험을 통해 분석한 결과, 양성 대조군으로 사용한 TGF-β 만큼은 아니지만 농도별로 각각 120, 122%의 procollagen 합성을 증가시키는 것을 통하여 산유자 잎 에탄올 추출물의 주름개선 활성을 확인하였다. 또한 RAW 264.7 murine macrophage를 이용하여 NO 생성 억제능을 분석함으로써 산유자 잎 에탄올 추출물의 항염증 활성 정도를 측정한 결과, LPS에 의해 유도된 NO 생성이 산유자 잎 에탄올 추출물의 농도 의존적으로 감소하는 결과를 얻을 수 있었다. DPPH 법, ABTS 법, ORAC 법을 이용하여 항산화 활성을 분석한 결과, 50 μg/mL의 농도에서 DPPH및 ABTS 라디칼 소거능이 각각 75.2, 99.1% 증가하는 것이 확인 되었다. ORAC activity assay kit를 이용하여 항산화 활성을 측정한 결과 산유자 잎 에탄올 추출물의 농도에 따라 높은 항산화 활성이 관찰 되었고, DPPH와ABTS 라디칼 소거능 결과와 유사하게 50 μg/mL의 농도에서 가장 높은 항산화 활성(573.74±0.79 μM TE/g)을 나타내었다. 이러한 결과를 통하여 산유자 잎 에탄올 추출물이 높은 미백과 주름개선, 항염증 및 항산화 활성을 나타내는 것을 확인 할 수 있었으며, 기능성 화장품 소재로서의 활용가능성을 제시 할 수 있었다. In the present study, we investigated the biological activities of Xylosma congesta leaf ethanol extract (XCO) using a variety of in vitro and cell culture model systems for antimelanogenic, anti-wrinkle, anti-inflammatory and anti-oxidant activities. First, XCO markedly inhibited α-melanocyte stimulating hormone-stimulated melanin synthesis in B16F10 cells. Secondly, XCO marginally induced procollagen synthesis in CCD-986SK cells. Thirdly, XCO dose-dependently suppressed lipopolysaccharideinduced nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 cells. XCO did not affect cell viability at different concentrations used in this study, indicating that XCO-mediated inhibition of melanin,procollagen and NO synthesis is not mediated by cytotoxicity. Finally, XCO was found to exert anti-oxidant effect. Taken together, these findings demonstrate for the first time that XCO possesses anti-melanogenic, anti-wrinkle, anti-inflammatory andanti-oxidant activities, and suggest further evaluation and development of XCO as a functional supplement or cosmetic that may be useful for whitening skin, reducing wrinkles and treating inflammatory responses.

효모의 재조합 변이주를 이용한 인간 Centromeric Alphoid DNA Repeat의 안정성에 관한 연구

김광섭,신영선,이상엽,안은경,도은주,박인호,임선희,선우양일,Kim, Kwang-Sup,Shin, Young-Sun,Lee, Sang-Yeop,Ahn, Eun-Kyung,Do, Eun-Ju,Park, In-Ho,Leem, Sun-Hee,SunWoo, Yang-Il 한국미생물학회 2007 미생물학회지 Vol.43 No.4

Centromere는 채세포분열과 생식세포분열 등 맡은 주요 기능을 담당하는 고도로 분화된 구조이다. Alphoid DNA (${\alpha}$-satellite)는 인간뿐 아니라 모든 영장류의 염색체 내 centromere에서 발견되는 반복서열의 대부분을 차지한다. 인간 인공염색체(Human Artificial Chromosome, HAC)의 개발에서 가장 핵심적인 부분은 centromere의 분리 및 안정적인 유지에 있다. 이 영역은 출아효모에서 alphoid DNA 반복서열을 hook으로 이용하여 Transformation-associated recombination (TAR) cloning법을 사용하여 선택적으로 분리할 수 있다. 이러한 실험방법으로 먼저 repeat array를 rolling-circle amplication (RCA)를 통하여 약 5 kb까지 길이를 연장시킨 후, 효모내에서 상동성재 조합을 이용한 TAR cloning법을 사용하여 분리할 수 있다. 이렇게 분리된 35 kb-50 kb 길이의 4종류의 centromeric DNA repeat arrays (2,4,5,6 mer)를 사용하여, 반복서열의 안정성 유지를 조사하기 위해 상동성재조 합 변이주인 rad51, rad52, rad54를 사용하여 비교 분석하였다. 야생주, rad51과 rad54 변이주를 이용하여 형질전환을 수행한 결과, 반복서열의 크기에 있어서 많은 변화를 나타내었다. 반면, rad52 변이주는 야생주와 다르게 형질전환빈도가 매우 낮은 비율로 나타났으나, centromeric DNA repeat array의 안정성은 3배 이상으로 높게 나타냈다. 이러한 결과들을 미루어, rad52 변이주를 사용하여 centromeric DNA repeat arrays의 형질전환실험에서 발생하는 맡은 변이를 줄일 수 있을 것으로 보인다. 이러한 유전적 방법은 HAC 제작에서 반복서열의 유지에 훨씬 효율적으로 사용할 수 있을 것으로 사료된다. The centromere is a highly differentiated structure of the chromosome that fulfills a multitude of essential mitotic and meiotic functions. Alphoid DNA (${\alpha}$-satellite) is the most abundant family of repeated DNA found at the centromere of all human chromosomes, and chromosomes of primates in general. The most important parts in the development of Human Artificial Chromosomes (HACs), are the isolation and maintenance of stability of centromeric region. For isolation of this region, we could use the targeting hook with alphoid DNA repeat and cloned by Transformation-Associated Recombination (TAR) cloning technique in yeast Saccharomyces cerevisiae. The method includes rolling-circle amplification (RCA) of repeats in vitro to 5 kb-length and elongation of the RCA products by homologous recombination in yeast. Four types of $35\;kb{\sim}50\;kb$ of centromeric DNA repeat arrays (2, 4, 5, 6 mer) are used to examine the stability of repeats in homologous recombination mutant strains (rad51, rad52, and rad54). Following the transformation into wild type, rad51 and rad54 mutant strains, there were frequent changes in inserted size. A rad52 mutant strain showed extremely low transformation frequency, but increased stability of centromeric DNA repeat arrays at least 3 times higher than other strains. Based on these results, the incidence of large mutations could be reduced using a rad52 mutant strain in maintenance of centromeric DNA repeat arrays. This genetic method may use more general application in the maintenance of tandem repeats in construction of HAC.

방풍통성산 및 대시호탕의 항비만효과 분석: 단일기관 무작위배정 이중맹검 임상시험 프로토콜

오지홍,심혜윤,차지윤,김호석,김민지,안은경,이명종,이준환,김호준,Oh, Jihong,Shim, Hyeyoon,Cha, Jiyun,Kim, Ho Seok,Kim, Min Ji,Ahn, Eun Kyung,Lee, Myeong-Jong,Lee, Jun-Hwan,Kim, Hojun 한방비만학회 2020 한방비만학회지 Vol.20 No.2

Objectives: The aim of this study is to evaluate the effects of Bangpungtongseong-san (Fangfengtongsheng-san, BTS) and Daesiho-tang (Dachaihu-tang, DST) on weight loss and improvement in lipid metabolism and glucose metabolism. Furthermore, we intend to develop a prediction model for drug effects through the analysis of the single nucleotide polymorphism (SNP), gut-microbiota, and the expression of immune-related biomarkers. Methods: This study is a single-center, randomized, double-blind, parallel-design clinical trial. One hundred twenty-eight participants will be assigned to the BTS group (n=64) and DST group (n=64). Both groups will be administered 4 g medication three times a day for up to 2 weeks. The primary outcomes is weight loss. The secondary outcomes include bioelectrical impedance analysis, waist circumstance, body mass index, total cholesterol, high-density lipoprotein, triglyceride, insulin resistance. The exploratory outcomes include 3-day dietary recall, food frequency questionnaire, quality of life questionnaire, gut microbiota analysis, immune biomarkers analysis, and SNP analysis. Assessment will be made at baseline and at week 4, 8, and 12. Conclusions: This protocol will be implemented by approval of the Institutional Review Board of Dongguk University. The results of this trial will provide a systematic evidence for the treatment of obesity and enable more precise herbal medicine prescriptions.

Abietane Diterpenes and Prenylated C6-C3 Compound from the Stems of Illicium cambodianum

Yeon Woo Jung(정연우),Ji Eun Lee(이지은),Han Na Cha(차한나),Won Sik Jeong(정원식),Jung A Lee(이정아),Eun Kyung Ahn(안은경),Jae Shin Kang(강재신),Won Hee Kim(김원희),Chun Whan Choi(최춘환),Seong Su Hong(홍성수) 한국약용작물학회 2020 한국약용작물학회 학술대회논문집 Vol.2020 No.1

한국형 발효차로부터 테아플라빈 최적 추출조건 확립과 항염증 효과

손경현(Gyeong Hyun Son),강은주(Eun-Ju Kang),김종철(Jong Cheol Kim),김용덕(Yong Duck Kim),정유석(Yu Seok Jeong),이종국(Jong Gug Lee),안은경(Eun-Kyung Ahn),이정아(Jung A Lee),조경환(Kyoung Hwan Cho) 한국차학회 2014 한국차학회지 Vol.20 No.2

To industrialize the production of the theaflavins, the extraction patterns and quantity were examined from green tea, oolong tea, Puer-tea, and Korean-type fermented tea, which has different degree of fermentation. As a result, the Korean-type fermented tea has a larger amount of theaflvins. Based on this experiment, Korean-type fermented tea was extracted using two different extraction methods, 50% ethanol in hot-water and 50% ethanol with sonication. The optimal extraction method was found to be 50% ethanol in hot-water. All extracts showed no cell toxicity according to the MTT assay. To test the anti-inflammation effects of the tea extracts, NO inhibition activity was analyzed with the RAW 264.7 cells treated with LPS to generate NO. The result showed that the Korean-type fermented tea (50% ethanol in hot-water) extract was most effective against NO generation. Theaflavin류의 효과적 인 추출을 위해 각각의 다류 녹차, 한국형 발효차, 우롱차 그리고 보이차를 대상으로 theaflavin류의 열수 추출 양상을 조사하였다. 그 결과 80℃, 열수 추출조건에서 theaflavin류가 많이 추출된 다류는 한국형발효차로 확인 되었다. 이와 같은 결과를 바탕으로 발효차의 추출조건에 따른 theaflavin류의 최적의 추출 조건을 도출하고자, 중량비에 따른 10배수, 20배수, 50배수, 100배수(w/w)의 열수로 추출을 하여 theaflavin류의 용출 양상을 조사한 결과 20배수에서 가장 높은 추출 수율을 보였다. 20배수로 추출 방법을 달리한 발효차 추출물을 대상으로 초음파 추출, 열수 추출물을 비교하였다. 초음파 추출물의 추출 조건은 70% ethanol, 증류수, 50% ethanlol용미로 추출하였다. 초음파 추출물의 theaflavin류 추출양의 경우 70% ethanol 추출물이 8701.61 ppm으로 가장 많이 용출이 되었으며, 50% ethanol추출물의 경우 8653.8 ppm으로 가장 적게 추출되었다. 그리고 열수 추출물 추출조건은 50% ethanol, 증류수로 열수 추출을 하였다. 열수 추출물의 theaflavin류 용출 양상을 분석한 결과, 증류수추출물은 1011.44ppm으로 가장 적게용출되었으나, 50% ethanol 추출물의 경우 9403.3ppm으로 초음파 추출, 열수 추출 두 가지 추출방법 중 가장 많이 용출됨을 확인하였다. 또한, 각각의 방법으로 추출된 추출물의 세포독성 실험 결과, 모든 발효차 추출물에서 독성이 없는 것으로 확인되었다. 항염증 효과를 알아보기 위하여 nitric oxide (NO) 저해 활성을 측정을 한 결과, 50% ethanol을 이용한 열수 추출물이 NO 발생 이 적은 것으로 확인되었다. 결론적으로 효과적인 theaflavin류의 추출 수율이 높고, 세포독성이 없으며, 항염증효과가 좋은 추출방법은 50%ethanol을 이용하여 열수 추출하는 방법이 도출되었다. 본 연구 결과는 한국형 발효차 또는 그 응용제품의 성분연구에 기초자료로 활용이 되길 기대한다.

율무근의 식물화학적 성분 연구 및 Tyrosinase 저해 활성

최윤혁 ( Yun-hyeok Choi ),최춘환 ( Chun Whan Choi ),이재연 ( Jae Yeon Lee ),안은경 ( Eun-kyung Ahn ),오좌섭 ( Joa Sub Oh ),홍성수 ( Seong Su Hong ) 한국응용생명화학회 2017 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.60 No.1

본 연구는 천연 미백소재 탐색을 위하여 율무(C. lachryma-jobivar. ma-yuen) 부산물 추출물의 tyrosinase 저해활성을 검증하였으며, 그 중에서 뿌리 추출물은 159.3 μg/mL의 IC50 값을 나타내었다. 율무 뿌리 추출물의 순차적 용매 분획에 대한 활성 검증 후 가장 활성이 우수한 EtOAc 분획물에 대하여 DiaionHP-20 column chromatography, MPLC및 preparative HPLC를 수행해 율무근으로부터 여섯 개의 화합물을 정제하였고, 이 물질들의 구조 분석은 LC-MS와 NMR 데이터 해석을 바탕으로 진행하여 각각 (+)-icariol A₂ (1), zhepiresionol (2), 4-hydroxybenzaldehyde(3), trans-ρ-coumaric acid (4), N-(2-hydroxy-4-methoxyphenyl)-2-hydroxyacetamide (5), coixol (6)로 구조를 규명하였다. 화합물 1은 이 식물에서 처음으로 분리되었으며, 화합물 5는 자연계로부터 처음으로 분리된 화합물로 확인하였다. 이들 화합물 중 4-hydroxybenzaldehyde (3), trans-ρ-coumaric acid (4)와 coixol (6)은 순서대로 707.4, 6.5, 62.4 μM의 IC₅₀값을 나타내어 대조군으로 사용한 arbutin (IC₅₀ =618.7 μM)과 비교시 유사하거나 우수한 활성을 확인하였다. 이로 미루어 보아, 율무근 추출물과 활성물질의 tyrosinase 저해활성을 확인할 수 있었으며, 율무근 추출물의 미백소재로서의 적용 가능성을 확인할 수 있었다. In the course of screening tyrosinase inhibitory activity, EtOAc-soluble fraction of Coix lachryma-jobi var. mayuen Stapf. (Gramineae) roots showed significant inhibition. Further fractionation of the EtOAc-soluble fraction resulted in six compounds, which were identified as (+)-icariol A₂ (1), zhepiresionol (2), 4-hydroxybenzaldehyde (3), trans-ρ-coumaric acid (4), N-(2- hydroxy-4-methoxyphenyl)-2-hydroxyacetamide (5), and coixol (6). The chemical structures of these compounds were identified on the basis of spectroscopic methods (MS, 1D and 2D NMR) and comparison with literature values. Compound 1 was first reported from this plant. Also, this is the first time that the isolation of compound 5 has been reported from nature source. Among the isolated compounds, compounds 4 and 6 showed enzyme inhibitory activity, with IC₅₀ values of 6.5 and 62.4 μM, respectively, in comparison with these of positive control, arbutin.

Short Communication: Bioactive Materials : Inhibitory Effects of Soyasaponins on Antigen-induced Degranulation in RBL-2H3 Cells

양승환 ( Seung Hwan Yang ),이정아 ( Jung A Lee ),이재연 ( Jae Yeon Lee ),안은경 ( Eun Kyung Ahn ),신태선 ( Tai Sun Shin ),찌갱쯔카모토 ( Chigen Tsukamoto ),정규화 ( Gyuhwa Chung ),서주원 ( Joo Won Suh ) 한국응용생명화학회 2015 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.58 No.3

Soyasaponins are glycosylated, which gives rise to a wide diversity of structures and functions. We evaluated for inhibitory effects of 4 soyasaponins on antigen-induced degranulation in RBL-2H3 Cells. 4 soyasaponins had shown dose-dependently inhibited histamine and β-hexosaminidase.