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Eukaryotic cell growth is tightly linked with the availability of nutrients like as amino acids and glucose. When the intracellular amino acid level is sufficient for cell growth, the target of rapamycin (TOR) signaling pathway is activated and plays crucial roles in cell growth by regulating translation, ribosome biogenesis and so on. In contrast, when cells are starved from amino acids, macroautophagy is induced and functions for maintaining cellular homeostasis under starvation. In the first part, I studied a crosstalk between TOR complex 1 (TORC1) pathway and amino acid signaling. Using a genome-wide protein localization study, I found that Stp1 disappeared from the nucleus upon inactivation of TORC1 by rapamycin, suggesting the involvement of Stp1 in the TOR signaling pathway. Supporting this notion, knockout mutant for the STP1 gene was found to be hypersensitive to rapamycin, and overexpression of Stp1 conferred resistance to rapamycin. Interestingly, I found that the rapamycin-induced disappearance of Stp1 from the nucleus resulted from Stp1 degradation, which was dependent on the activity of a protein phosphatase 2A (PP2A)-like phosphatase Sit4, a well-known downstream effector of TORC1. Taken together, these findings highlight an intimate connection between the amino acid-sensing pathway and the rapamycin-sensitive TOR signaling pathway. In the second part, I investigated an interesting bidirectional regulation between TORC1 and autophagy. It has been reported in various model organisms that autophagy and TORC1 signaling are strongly involved in eukaryotic cell aging, and decreasing TORC1 activity extends longevity by an autophagy-dependent mechanism. Thus, to expand our knowledge of the regulation of eukaryotic cell aging, it is important to understand the relationship between TORC1 signaling and autophagy. I showed that mutant cells with weak TORC1 activity maintain autophagy longer than wild-type cells, and TORC1 is partially reactivated under ongoing nitrogen starvation by an autophagy-dependent mechanism. In addition, I found that Atg13 is gradually rephosphorylated during prolonged nitrogen starvation, and the kinase activity of Atg1 is required for Atg13 rephosphorylation. These data suggest that TORC1 can be substantially, but not fully, reactivated in an autophagy-dependent manner under ongoing starvation, and reactivated TORC1 eventually plays a role in the attenuation of autophagy. In conclusion, I have shown a fine tuning between TORC1 and autophagy in accordance with the availability of amino acids. This bidirectional regulation makes cells respond properly to their extracellular environment and maintain cellular homeostasis even under amino acid starvation.
The purpose of this study examined on the change of cardiovascular function at round in boxing athletes. This study employed eighth boxing athletes as experimental subjects were from H university, cardiovascular function(Heart Rate, Blood Pressure) and blood components(Leukocyte, Erythrocytes, Hemoglobin, Hematocrit) responses during the submaximal exercise(level of 85%) with bicycle ergometer and boxing athletic(3rounds/3minutes) for the purpose of observation of blood state. The results at this experiment were as follows; 1. Heart Rate in submaximal exercise significantly(P<.05) increased at after exercise, Boxing athletic significantly(P<.05) increased at after 3round. And recovery time in submaximal exercise significantly(P<.05) decreased at 5minutes and 30minutes after, Boxing athletic significantly(P< .05) decreased at 5minutes and 30minutes after. T-test on the change of Heart rate quantities at time showed significant difference in the after exercise(P< .01>, recovery stages after 5minutes and 10minutes(P<.05). 2. Systolic Pressure in submaximal exercise significantly(P<.05) increased at after exercise, Boxing athletic significantly increased at after Iround(P<.Ol), 2round 3round(P<.05). And recovery time in submaximal exercise significantly(P< .05) decreased at 5minutes and l0minutes 30minutes after, Boxing athletic significantly(P<.05)decreased at 5minutes and l0minutes 30minutes after. T-test on the change of systolic pressure quantities at time showed significant(P<.05) difference in the after exercise, recovery stages after 5minutes and l0minutes 30minutes. Diastolic Pressure in submaximal exercise significantly(P<.05) increased at after exercise, Boxing athletic significantly increased at after 1round 2round(P<.Ol), 3round(P<.05). And recovery time in submaximal exercise significantly(P< .05) decreased at l0minutes and 30minutes after, Boxing athletic significantly(P<.05) decreased at l0minutes and 30minutes after. T-test on the change of diastolicpressure quantities at time showed significant(P<.05) difference in the after exercise, recovery stages after l0minutes and 30 minutes. 3. Leukocyte in submaximal exercise significantly(P<.0l) increased at after exercise, Boxing athletic significantly increased at after around 3round(P<.0l), 1round(P<.05). And recovery time in submaximal exercise significantly(P< .05) decreased at 5minutes and l0minutes after, Boxing athletic significantly(P<.05) decreased at 5minutes and l0minutes after. T-test on the change of systolic pressure quantities at time showed significant difference in the after exercise(P<.0l), recovery stages after 5minutes and 10minutes(P<.05). Erythrocytes in submaximal exercise significantly (P< .05) increased at after exercise, Boxing athletic significantly increased at after 3round(P<.0l), 1round 3round(P<.05). And recovery time in submaximal exercise significantly(P<.05) decreased at l0minutes and 30minutes after, Boxing athletic significantly(P>.05) decreased without change. T-test on the change of diastolic pressure quantities at time showed significant(P<.0l) difference in the after exercise, recovery stages after 5minutes l0minutes and 30minutes. 4. Hemoglobin in submaximal exercise significantly(P<.05) increased at after exercise, Boxing athletic significantly(P<.05) increased at after 1round and around 3round. And recovery time in submaximal exercise and boxing athletic significantly (P> .05) decreased without change. T-test on the change of diastolic pressure quantities at time showed significant difference in the after exercise and recovery stages after l0minutes(P<.05), recovery stages after 5minutes and 30minutes(P<.01). 5. Hematocrit in submaximal exercise significantly(P<.05) increased at after exercise, Boxing athletic significantly increased at after 1round and 2round 3round(P<.05). And recovery time in submaximal exercise significantly(P<.05) decreased at 5minutes and l0minutes after, Boxing athletic significantly decreased at 5minutes and l0minutes after(P<.05), 30minutes(P<.l). T-test on the change of systolic pressure quantities at time showed significant difference in the after exercise and recovery stages 5minutes, l0minutes(P<.05), recovery stages after 30minutes(P<.01).
Applications of Advanced Analytical Methods for Food Safety
최근 들어 세계화(globalization)와 자유 무역 협정(FTA)의 확대로 인하여 다양한 식품들이 보다 자유롭게 국내로 수입되고 있다. 또한, 경제규모의 증가와 웰빙(well-being) 식품에 대한 관심이 증가하면서 식품의 안전을 확보하는 것이 중요한 사회적 문제로 대두되고 있다. 현재, 대부분의 식품 검사는 개별 식품의 기준 및 규격에 따라 이루어지고 있다. 하지만, 유통 및 수입 식품에 대한 다양한 검사에도 불구하고, 멜라민 사고 등 수 많은 식품 사고가 지속적으로 발생하고 있다. 특히 최근에 발생한 멜라민 분유 파동 등을 겪으면서 식품 감시 체계 전반에 대한 고찰이 필요하게 되었다. 현재의 식품 검사 시스템은 일반적으로 이미 알려진 물질 (target analyte)에 대해 초점이 맞춰져 있다. 하지만, 식품에는 식품 고유의 성분과 함께 식품 첨가물, 오염 물질, 의약품 유사물질 등 훨씬 다양한 non-target analyte가 존재한다. 이러한 non-target analyte 중에는 미지의 유해물질이 포함되어 있을 가능성이 매우 높다. 따라서, 기준규격으로 관리되고 있지 않은 미지의 유해물질을 검지할 수 있는 새로운 검사 체계의 구축이 절실하다고 하겠다. 이는 기존의 target analysis와 함께 non-target analysis가 함께 이루어질 때 완성될 수 있을 것이다. 일반적으로 non-target analysis는 non-target 스크리닝과 non-target 프로파일링, 그리고 non-target fingerprinting의 분석기법으로 구분할 수 있으며, 이들 분석기법을 활용함으로써, 식품 중의 유해물질을 검지해 낼 수 있을 것이다. 본 연구에서는 식품의 안전 확보를 위한 다양한 분석적 접근을 시도함으로써 식품의 안전 확보를 위한 기초 자료를 제공하고자 하였다. 죽순 가공품 중 미지물질이 검출되어, NMR과 LC-MS/MS 등을 이용하여 그 구조를 규명하였으며, 수입 와인에 대한 원산지 판별 및 안전 확보를 위하여 headspace GC-MS를 이용하여 휘발성 성분들에 대한 프로파일링 분석을 수행하였다. 또한, 식품 중 한약재로 사용이 되고 있는 당귀의 진위판별을 위하여, GC-MS를 이용한 대사체 분석을 수행하였다. 그 결과 (Z)-ligustilide와 함께 (E)-ligustilide, α-phellandrene 등이 당귀 시료에서 특이적으로 검출되었으며, 이들 성분을 활용하여 당귀와 형태학적으로 유사한 한약재들로부터 당귀를 구별할 수 있는 기초 자료를 제시하였다. 추가적으로 조사식품에 대한 안전 확보를 위하여, 기존의 분석법을 보완할 수 있는 대체 분석법 개발을 수행하였다. 기존의 열발광분석법의 단점을 보완하기 위하여 silicate mineral 대신에 iron-containing mineral을 target으로 하여 분석법을 개선하였으며, 향신료에 대한 적용 결과 기존의 방법과 유사한 결과를 얻을 수 있었다. 이상으로 본 연구에서는 식품의 안전 확보를 위한 다양한 분석적 접근을 시도하였다. 미지물질 규명 연구를 통하여 식품 중 미지의 유해물질을 규명하기 위한 방법론을 제시하였으며, 한약재에 대한 판별이나 조사식품에 대한 검지법의 경우 다양한 시료에 대한 검증이 이루어진다면, 그 활용가치가 매우 높을 것으로 사료된다. Food safety is considered as an important issue, because of globalization and increase of free-trade agreements (FTA) with many countries. Currently, most of the food inspections are carried out based on the standard and specification of individual food items. Despite of the intensive inspections, a number of food accidents occur continuously as exemplified by melamine accident. Therefore, it needs to reconsider the current analytical method for food. Current food analysis methods are focused on selected known compounds, which are defined as target analytes. However, there are much more non-target analytes in food products, including food components, food additives, contaminants, drug analogs, etc. Therefore, to secure food safety, establishment of new food analysis system is needed. It could be achieved by combining target and non-target analysis. In general, the non-target analyses include non-target screening, metabolic profiling, and metabolic fingerprinting. Using these analytical methods, we can identify the potentially hazardous unknown compounds more easily in food. In this study, several analytical approaches were examined to ensure food safety. In the HPLC-RI analysis for sucralose in bamboo shoots, a putative sucralose was detected. The identity of the unknown compound was revealed by HPLC-PDA, HPLC-ESI/MS/MS and NMR experiments. Finally, the chemical structure of the unknown compound was elucidated as 4-(4-dihydroxymethylphenoxy)benzaldehyde. Metabolic profiling of imported wines for the identification of potentially unknown hazardous compounds was carried out. Also, metabolic fingerprinting of Angelica sinensis (Danggui) and A. dahurica (Baizhi) samples was carried out to distinguish one from the other. The GC-MS method turned out to be an appropriate method for the discrimination of A. sinensis from A. dahurica. An alternative thermoluminescence (TL) method for the identification of irradiated foods was examined. TL method is the most widely used method for the identification of irradiated foods. However, in order to use this method, silicate minerals should be isolated from food samples. The process for the isolation of silicate minerals is time consuming and laborious. As alternative approach, we have investigated the applicability of the TL method using iron-containing minerals instead of silicate minerals. As a result, the TL method using iron-containing minerals could be an excellent method for the identification of irradiated foods containing no silicate minerals and/or containing iron-containing minerals.
신춘식 전남대학교 교육대학원 2001 국내석사
본 연구는 교육의 주민자치 정신 구현과 단위 학교운영의 자율성 확대를 위한 학교운영위원회의 운영상의 문제점을 분석하고 그 운영 개선 방안을 탐색·제시함으로써 학교운영위원회의 운영 효과를 극대화하는 데 목적을 두었다. 이러한 연구목적을 달성하기 위하여 구체적으로 다음과 같은 연구문제들이 설정되었다. 첫째, 현행 학교운영위원회의 운영실태는 어떠한가? 둘째, 학교운영위원회의 문제점은 무엇인가? 셋째, 학교운영위원회의 개선 방안은 무엇인가? 이러한 문제들을 규명하기 위하여 문헌고찰과 조사연구를 병행하였다. 조사도구는 외국의 학교운영 관련 위원회가 주는 시사점과 선행연구에서 사용한 것을 기초로 지도교수의 자문을 얻어 제작한 설문지를 사용하였다. 연구대상은 K광역시 소재 45개 공립 초등학교 운영위원 532명을 대상으로 하였으며, 자료처리에 사용된 통계는 SPSS/PC^+ 프로그램을 이용한 χ² 검증으로 하였다. 이와 같은 과정을 거쳐 얻어진 연구 결과는 다음과 같다. 먼저, 학교운영위원회의 운영 실태와 관련하여 학교운영위원회의 성격으로는 심의기구가 바람직하며, 사안에 따라 의결·심의·자문하는 기구도 병행해야 한다는 반응이었다. 교원위원의 조건으로는 학교에 협조적인 교원이 되어야 하며, 학부모위원으로는 교육에 식견이 풍부하고 관심이 있는 사람이 선출되어야 한다는 반응이었다. 학교장 및 교사 초빙제에 대한 필요성을 선호했으며 학교운영위원회의 심의사항 중 방과 후, 방학중 교육 및 수련활동은 학생들의 다양한 교육욕구를 충족시키기 위해서 반드시 필요한 기능으로 심의되어야 한다는 반응이었다. 학교운영위원회의 회기는 3월 1일부터 다음해 2월 28일까지로, 운영횟수는 2개월 마다 1회로 해야 하며, 주요 안건 처리는 무기명 투표로 처리해야 한다는 것이었다. 둘째, 학교운영위원회의 문제점과 관련하여 지역위원은 각계 전문가를 선출해야 하고 교육감은 지역특성에 맞는 교육 시책 구현 의지가 강한 사람이 선출되어야 하며, 효과적인 의결 정족수는 재적위원 과반수 이상의 출석과 출석위원 과반수 이상의 찬성으로 처리하는 것이 바람직하며, 학교운영위원회의 조성 및 운용방법은 학교운영위원회의 결정으로 조성해야 한다는 반응이었다. 운영회의는 공개하여 학부모, 교사 등이 참관토록 해야 하며, 학교운영위원회의 조직·구성 및 운영은 지역 실정에 맞게 자율적으로 구성·운영하는 방안이 강구되어야 한다는 것이었다. 셋째, 학교운영위원회의 개선 방안으로는 운영위원들은 학교교육의 동반자 역할 및 협력자의 역할을 수행해야 하며, 학교운영위원회가 정착되면 다수가 민주적으로 의사 결정을 하는 학교, 스스로 결정하는 자주적인 학교, 수요자 요구를 반영하는 학교교육을 하게 될 것이라는 반응이었다. 학교측과 학부모의 갈등이 심할 때 학부모위원과 교원위원 들간에 중재위원회를 두어 해결하며, 학교장과 학부모 대표, 운영위원장이 모여 협의하여 해결책을 찾아야 한다는 반응이었다. 학교운영위원회의 조기 정착을 위한 시급한 과제는 학부모와 교원의 적극적인 참여가 이루어져야 한다는 반응이었으며, 학교운영위원회의 활동은 축소된 기능으로 어느 정도 정착되어 발전에 기여하게 된다는 반응이었다. 앞으로 개선할 사항은 학교 실정에 맞는 교육프로그램 개발 등 창의성 및 자율성을 확보하는 문제가 시급하다는 것이었다. This study is aimed at finding of the citizen autonomy of the education and analysis the problems and suggestion the improvement plans so we obtain the greatest management effect of the school management committee. Accomplishing this aim, the following theme is setting. First, what are the conditions of improvement strategies of the school management committee? Second, what are the problems of the school management committee? Third, what are the improvement strategies of the school management committee? To answer these questions, I do the documents study and investigation study. The questionnaire based on the current issues of school management committee was made and used. The sample were 532 school management committee members from 45 public elementary schools in K-City. The x₂(chi-square) test using SPSS/PC+ Program for statistical significance was used. The results of the study are as follows; First, commissioners think it is good the character of the school management committee is the consideration organization in connection with the management condition of the school management committee. And they think it has to be gone abreast of decision, consideration and consultation organization according to the case. Teacher members have to be elected as coordinators of the school and parents of students have to be elected who know and concern about the education. The commissioner prefer the system of the engagement principal and teacher. Education and activities after and during a vacation are surely needed for satisfying the students educational desire so this function has to be deliberated. The session of the school management committee is from March 1st to February 28th of next year and it has to be held once per two month. The important agenda has to process ballot. Second, the problems of the school management committee are that They have to select experts of every field for the community members and they have to select persons whose realization of educational policy is strong. The effective voting quorum is the attendance of over a half out of the number enrolled commissioners and placet of over a half out of the number attended commissioners. The committee has to be open to the public so parents of students and teachers can participate in the committee. The committee needs voluntary organization and management according to the community's conditions. Third, for the improvement strategies of the school management committee are that. They have to fulfill the role of a companion and cooperator of school education. They think if the committee is settled down, a large number of people take in decision-making democratically and demands of demander is reflected in the determine. And they say it's better making the medication organization so when school and parent of student cause trouble, they can settle a dispute. They think the committee need positive and sincere participation of teachers and parents of students. It press that the committee attains independency and initiation like developing education program taking r into account school's actuality.
Conformational Analysis in Solution of Protein Kinase C betaII (660-673) by NMR
한글초록:단백질 인산화 효소 C 는 serine/threonine단백질 인산화 효소의 일종으로 세포의 신호 전달에 있어 중요한 인자로 알려져 있다. 특히, 단백질 인산화 효소 베타 II (PKC II)는 PKC의 11가지 이성단백질 중 한 가지로 세포의 증식에 중요하게 관여하는 인자이다. PKC II는 평상시에는 불활성인 상태로 세포액에 존재하다 세포가 분열을 위한 G2/M 기에 도달하게 되면, 핵막으로 이동하여 활성화 된 후 핵막 단백질인 lamin B를 인산화 시킴으로써 세포의 증식을 가능하도록 해 준다. PKC II의 활성화 과정에서 Thr500, Thr641, Ser600 위치에 자가인산화가 일어나게 되고, 그 결과 PKC II의 활성화가 촉진되게 된다. 이때, C-말단의Ser660-Phe-Val-Asn-Ser-Glu-Phe-Leu-Lys-Pro-Glu-Val-Lys-Ser673으로 구성된 PKC II V5 펩타이드 부분에 인산화가 됨으로써 생기는 PKC II와 Ca2+의 결합 친화도 증가와 PKC II 의 전체적인 구조 변화에 대한 구조적인 정보를 얻기 위해, PKC II V5 펩타이드의 구조를 결정하였다. 이와 함께, Ser660위치의 인산화 결과 생기는 구조적인 변화를 알아보기 위해 분자 모델링을 이용한 Ser660Glu 변이 펩타이드의 구조 분석을 수행하였다. 자연형의 경우 Ser660의 수산기가 Asn663의 감마 카보닐 산소와 수소결합을 하여 친수성 수산기가 안쪽으로 향하고 소수성 C H2 부분이 밖으로 향한 반면, 변이형의 경우 자연형과 달리 수소 결합을 하지 않아 친수성 표면을 형성하는 것을 알 수 있었다. 결과적으로, PKC II V5 펩타이드 부분에 인산화가 일어나게 되면 Ser660 주위의 친수성 표면이 증가하게 되어 PKC II의 Ca2+, 기질, ATP 등에 대한 결합 친화도가 증가하게 되는 것으로 생각 되었다. 또한, 자연형 펩타이드와 변이형 펩타이드의 구조를 비교한 결과 구조적인 차이점이 거의 없는 것을 확인 하였고, 따라서 Ser660의 인산화 결과 생기는 PKC II와 막 구성 성분인 PG와의 친화력의 증가는 PKC II V5 펩타이드 자체의 구조적인 변화에 기인한 것이 아니라 PKC &II 전체 구조의 변화에 의한 것이라고 생각 되었다 영문초록:Protein kinase C (PKC) II is one of isozymes of protein kinase C which belongs to a phospholipids dependent serine/threonine protein kinase. It is known that PKC II is translocated into the nucleus during G2/M phase of cell cycle and has roles in cellular proliferation. Phosphorylation at Thr500, Thr641, and Ser660 triggers the activation of PKC II. The extreme C-terminal motif of PKC II known as PKC II V5 peptide (660-673) consists of Ser660-Phe-Val-Asn-Ser-Glu-Phe-Leu-Lys-Pro-Glu-Val-Lys-Ser673. In order to provide information about the role of phosphorylation of the II V5 peptide in increase of Ca2+ binding affinity and in effect on the conformation change of the whole PKC II, authors tried to determine the solution structure of the II V5 peptide. In addition, a mutated II V5 peptide of Ser660Glu was studied using molecular modeling. Unlike wild-type, because the mutant did not show hydrogen bonding between Glu660 and Asn663, the side chain including carboxyl group of Glu660 is exposed to the surface. The change of Ser660 with Glu660 increases the hydrophilicity which causes the surface area around glutamate enlarged. As a result, it is considered that an increment of the hydrophilicity of the mutant effects on the binding affinity for the membrane, which is expected to be another factor for the increment of binding affinity to Ca2+ and substrate. Also, molecular modeling of mutant II V5 peptide suggested that alternation of membrane binding affinity upon phosphorylation is not due to the conformational change of the II V5 peptide but the overall structural change of PKC βII