산민들레 종자의 발아특성 연구

신소림,임윤경,권혁준,김수영 한국약용작물학회 2016 한국약용작물학회지 Vol.24 No.3

Background: Many Taraxacum spp. plants are widely used in medicine, but some of them have propagation problems, such as strong dormancy and poor germination rates. This study investigated the effects of temperature, gibberellic acid (GA3), and potassium nitrate (KNO3) on seed germination in Taraxacum ohwianum. Methods and Results: The seeds (NIBRGR0000135524) were exalbuminous, and their length and width were 4.54 ± 0.032㎜ and 0.97 ± 0.029㎜, respectively. Various germination temperatures were tested (15, 20, 25, and 30℃), the optimum temperature for germination was found to be 20℃ (31.3%). High temperature (30℃) resulted in non-typical seedlings (thickened and crumpled cotyledons, with a restricted root system). To increase the germination capacity, GA3 (200, 500, and 1,000 ㎎/ℓ ) or KNO3 (20, 50, 100, 200, and 500 ㎎/ℓ ) solutions were used as pre-soaking solutions instead of water. The GA3 treatments increased the germination percentage and rate, but germination percentage was higher with the KNO3 treatments. Under the 50 - 200 ㎎/ℓ KNO3 treatments, the germination percentage exceeded 80% after 12 days, and 50 ㎎/ℓ KNO3 was notably effective (91.2% after 15 days). Conclusions: T. ohwianum seeds showed improved germination at low temperatures. The best method for germination was presoaking in 50 ㎎/ℓ KNO3 for 24 h, in the dark at 4℃, and then incubating the germinated seed at 20℃ for 15 days.

개고사리의 기내 포자체 재생에 미치는 배지구성물질 및 배양방법의 영향

신소림,이철희 한국자원식물학회 2011 한국자원식물학회지 Vol.24 No.2

Present studies are carried out to find media components and culture methods for in vitro propagation of Athyrium niponicum and to establish the optimal economic masspropagation systems. Among pinnae, petiole and rhizome segments only rhizome segments produced young plants. Rhizome segments showed vigorous plant regeneration on 1/2MS medium and supplement to 1% sucrose and 50 mgㆍL-1 NaH2PO4 were promoted the plant regeneration from rhizome segments. Kinetin was better than BA for plant regeneration and combination with 2 μM kinetin and 5 μM IBA was most efficient for plant regeneration. Solid or liquid medium with or without 0.1% activated charcoal in modified 1/2MS medium (1% sucrose, 50 mgㆍL-1 NaH2PO4, 2 μM kinetin, 5 μM IBA, pH 5.8) were used to find the optimal culture methods. The plant regeneration from rhizome segments were most vigorous on solid medium without activated charcoal. The addition of activated charcoal were inhibited the plant regeneration from rhizome segments not only on solid medium but also liquid stationary or suspension culture. 본 연구는 개고사리의 기내 조직배양 시 적정 배지구성물질과 배양방법을 구명하여 효율적인 대량생산체계를 구축하기 위하여 시행하였다. 개고사리의 엽신, 엽병 및 근경의 절편 중 근경의 절편에서만 포자체가 분화되었다. 근경의 절편으로부터 포자체의 재생을 촉진시키기 위해서는 1/2MS배지가 가장 적합하였으며, 배지 내 sucrose는 1%, NaH2PO4는 50 mg·L-1으로 첨가하는 것이 가장 효과적이었다. 생장조절물질은 BA보다 kinetine을 첨가하는 것이 포자체의 분화를 촉진하는데 적합하였으며, kinetin 2 μM와 IBA 5 μM를 혼용하여 첨가하는 것이 근경의 절편으로부터 포자체를 형성하는데 가장 효과적이었다. 포자체 형성에 가장 효과적인 것으로 나타난 변형 1/2MS배지(sucrose는 1%, NaH2PO4는 50 mg·L-1, kinetin 2 μM와 IBA 5 μM, pH 5.8)에 활성탄을 0 또는 0.1% 첨가하여 고체 또는 액체배지에서 배양한 결과, 개고사리 근경의 절편은 고체배지에서 포자체의 재생 및 생육이 가장 우수하였다. 배지에 활성탄을 첨가하는 것은 고체, 액체 정치 및 액체 현탁배양 모두에서 근경 절편의 포자체 분화를 억제하였다.

고사리 전엽체의 증식에 미치는 배지구성물질과 배양방법의 영향

신소림,이무열,최재선,이철희,Shin, So-Lim,Lee, Moo-Yeul,Choi, Jae-Sun,Lee, Cheol-Hee 한국자원식물학회 2009 한국자원식물학회지 Vol.22 No.4

본 연구는 식용 양치식물인 고사리의 대량번식체계를 확립하기 위하여 기내에서 전엽체 증식에 미치는 배지종류, 당의 종류와 농도, agar 농도, 전엽체 접종량 및 배양기간의 영향을 구명하기 위하여 수행되었다. MS배지를 기본으로 하여 배지구성물질을 1/4${\sim}$2배 첨가한 배지와 Hyponex를 0.1${\sim}$0.4%에서 전엽체를 배양한 결과 2MS배지에서 전엽체의 생육이 가장 왕성하였으며, MS배지 구성물질들 중 인산염이 고사리 전엽체의 증식에 가장 영향이 큰 것으로 나타났다. 탄소원의 종류 및 농도별로는 sucrose와 glucose 공히 1% 이상을 첨가한 구에서 전엽체의 생육이 비슷한 경향을 보였다. Agar의 첨가량은 전엽체의 증식에 큰 영향을 미치지 않았으며, agar를 첨가하지 않은 액체배지에서도 전엽체 증식이 왕성하였다. 액체배지 100 mL에 전엽체를 각각 100과 200 mg 접종하여 22일 동안 진탕배양한 결과, 전엽체는 20일 이후에는 증가속도가 완만해지는 경향을 보였으며, 초기 접종량이 20일 후 전엽체 증식에 큰 영향을 미치지 않으므로 100 mg을 곱게 다져 진탕배양 한 후, 20일 후 계대배양 하여 증식시키거나, 기외로 이식하여 포자체를 형성하는 것이 유리한 것으로 사료되었다. Present studies were conducted to evaluate the effects of medium strength(MS and Hyponex), carbon sources and their concentrations, agar concentrations, and inoculation amounts on prothallus propagation of Pterdium aquilinum var. latiusculum(Desv.) Underw. ex Hell in vitro. The optimum MS medium strength for prothallus propagation was 2MS concentration. Phosphate source was most effective for prothallus growth of P. aquilinum var. latisculum. The addition of 1% sucrose or glucose to MS medium promoted prothallus multiplication. Growth of prothallus was not affected by agar concentration. Propagation of homogenized prothallus was vigorous even in liquid medium. Chopped gametophytes(100 and 200 mg) were inoculated on 250 ml ${\Delta}$flask with 100 mL of 2MS concentration medium and suspension culture was done at 100 rpm for 22 days. After 20 days, prothallus multiplication slowed down, so 100 mg of chopped prothalli is recommended for initial inoculation, since initial amount of inoculum did not affect subsequent prothallus multiplication. Consequently after 20 days of suspension culture, prothallus should be subcultured or transplanted outside of growing vessels.

고비의 항산화활성 증가를 위한 효율적인 추출조건 탐색

신소림,이철희 한국자원식물학회 2011 한국자원식물학회지 Vol.24 No.2

This study was conducted to investigate the optimum condition of extraction from fronds of Osmunda japonica to increase antioxidant compounds and antioxidant activity. Powder (1 g) of lyophilized fronds were mixed with three different solvents (MeOH, 80% EtOH and water). Extraction was carried out using not only by immersion (room temp.), heating (60℃) and stirring (200 rpm) for 6 h, but also by sonication in 42 kHz ultrasonic bath for 15, 30 and 45 min. Extracts were filtered, and adjusted up to 50 mL to determine contents of soluble solids, total polyphenols and total flavonoids. Antioxidant capacity was measured by radical scavenging activity of 0.15 mM DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) and 7.4 mM ABTS [2,2´-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)] radical. Among the solvents, MeOH and 80% EtOH appeared to be effective for extraction. Extract obtained from sonication in MeOH for 15 min resulted high polyphenol contents (45.15 mg · g^(-1) db) and DPPH radical scavenging activity (RC50= 0.35 mg · mL^(-1)). The highest flavonoid contents was obtained from immersion or heating extraction with MeOH (38.10~38.10 mg · g^(-1) db). ABTS radical scavenging was high in same extraction with 80% EtOH (RC50= 0.21~0.22 mg · mL^(-1)). Altogether, our results indicate that the extraction using ultrasonic bath with MeOH as a solvent (for 15~30 minutes) was the most effective way not only for increasing various antioxidant activities but also for saving labor and time in case of fronds of Osmunda japonica. 본 연구는 고비의 성엽으로부터 항산화 물질 추출과 항산화 활성을 증가시키기 위한 적정 추출 조건을 구명하기 위하여 시행하였다. 동결건조 한 다음 분쇄한 고비 성엽 1 g을 메탄올, 80% 에탄올, 물 등 3종류의 용매와 혼합한 다음 상온에서 침지, 60℃의 항온 수조에서 가열, 200 rpm에서 교반하여 6시간동안 추출하거나 42 kHz의 초음파 수조에서 15, 30, 45분 동안 추출하였다. 추출물은 여과한 다음 최종 볼륨을 50 mL로 정량하여 가용성고형분, 총 폴리페놀 및 총 플라보노의 함량을 구하였으며, 항산화활성은 0.15 mM의 DPPH와 7.4 mM의 ABTS radical 소거능으로 측정하였다. 고비 성엽 추출물의 항산화 효과를 증가시키기 위해서는 메탄올과 80% 에탄올을 용매로 사용하는 것이 효과적인 것으로 나타났다. 메탄올을 용매로 초음파 수조에서 15분 동안 추출했을 때 총 폴리페놀의 함량(45.15 mg·g^(-1) db)과 DPPH radical 소거활성(RC50=0.35 mg·mL^(-1))이 가장 우수하였으며, 총 플라보노이드의 함량은 메탄올을 용매로 상온침지 또는 가열추출하였을 때(38.10~38.10 mg·g^(-1) db), ABTS radical 소거활성은 80% 에탄올을 용매로 상온침지 또는 가열추출하였을 때 가장 우수하였다(RC50=0.21~0.22 mg·mL^(-1)). 연구의 결과, 초음파 수조를 이용한 추출은 노력과 시간을 절감할 수 있는 효율적인 추출방법으로 생각되었으며, 고비의 성엽은 메탄올을 용매로 15~30분 동안 초음파 수조에서 추출하는 것이 추출물의 다양한 항산화활성을 증가시키는데 가장 적합한 것으로 나타났다.

늘어진장대(Arabis pendula L.) 종자의 형태적 특성 및 발아조건

신소림,임윤경,권혁준,김유리,김수영 한국자원식물학회 2017 한국자원식물학회지 Vol.30 No.1

This study aimed to investigate the morphological characteristics and optimal germination conditions in seeds of Arabis pendula L., a traditionally edible and medicinal plant. The external seed shape was circular-obovate with narrow wings and dark brown. The seed length and width were 1.25 ㎜ and 1.47 ㎜, respectively. The seeds were exalbuminous and the embryo was a bent type. Seed germination was the highest (49.7%) at 20°C under dark conditions among the various temperature and light conditions applied. However, under the dark condition, the seedling was weak, overgrown, and the cotyledons were small and folded. To improve the germination and growth of seedlings, the seeds were pre-treated with GA3 solutions of varying concentrations (0, 200, 500, and 1,000 ㎎/L). The seed germination and seedling growth were effectively improved by GA3 pre-treatment. The germination rate was the highest (97.3%), mean germination time was the shortest (8.1 days), and a vigorous growth of seedlings was observed upon pre-soaking the seeds in 500 ㎎/L GA3 solution. In conclusion, the best method for germination was pre-soaking in 500 ㎎/L GA3 (4℃, dark, 24 h) and incubating the seeds at 20℃ for 15 days. 본 연구는 식의약소재로 활용 가치가 높은 늘어진장대(Arabis pendula L.)의 대량증식을 위한 기초연구로 종자의형태적 특성과 발아특성을 규명하고, 최적 발아조건을 규명하고자 수행되었다. 늘어진장대 종자는 종피에 날개가 있는 원형으로 색은 진갈색이며, 너비 1.47 ㎜, 길이 1.25 ㎜이고, 배는 굴곡형이며 무배유종자이다. 온도와 광조건 실험에서, 종자 발아는 20℃, 암조건에서 가장 우수하였다(49.7%). 그러나암조건에서는 유묘가 약하고 웃자랐으며, 자엽이 작고 말려있는 특징을 보였다. 종자 발아와 유묘의 생육을 촉진하기 위하여 종자를 다양한 농도의 GA3 희석액(0, 200, 500, 1,000 ㎎/L) 에 침지하여 전처리 한 후 파종하였다. 연구 결과, GA3 희석액500 ㎎/L 처리구에서 종자 발아율이 가장 높고(97.3%), 발아소요기간이 짧았으며(8.1일), 유묘의 생육 또한 왕성하였다. 연구의 결과, 늘어진장대 종자의 최적 발아조건은 GA3 500 ㎎ /L 희석액에 침지처리(4℃, dark, 24시간)하여 20℃에 파종하여 15일 동안 발아시키는 것으로 확인되었다.

Pteris cretica ‘Wilsonii’의 전엽체 기내 대량번식 및 형태형성에 미치는 배지 구성물질 및 배양 방법

신소림,황주광,이철희 한국화훼산업육성협회 2009 화훼연구 Vol.17 No.2

Pteris cretica ‘Wilsonii’의 대량생산에 적합한 배양 환경을 구명하기 위하여 연구를 수행하였다. 포자는 7주 안에 모두 발아하였다. Knop과 Hyponex배지에서 전 엽체 증식이 왕성하였지만, 전엽체의 생육에는 Hyponex 배지가 더 유용하였다. MS배지에서는 전엽체가 괴사하 였으며, 질소급원과 sucrose의 농도를 조절한 경우에도 sucrose 무첨가구를 제외한 모든 첨가구에서 전엽체가 괴사하였다. Sucrose 1%와 agar 0.6%를 첨가한 Hyponex배지가 전엽체의 증식과 생육에 가장 적합한 것으로 나타났다. 접종방법을 달리한 결과, Hyponex배 지에서는 다져서 접종하는 전엽체의 증식 및 생육에 효과적이었지만, MS배지에서는 전엽체의 군집을 4등 분하여 접종한 처리구에서 전엽체의 증식 및 생육이 우수하였다. 고체배지에서 배양하는 것이 액체배지에서 배양하는 것보다 효과적이었다. 액체배양은 전엽체의 괴사를 유도하였다. 액체진탕배양한 전엽체는 생육은 우수하였으나 고체배양한 전엽체에 비하여 증식이 억 제되었다. The most effective conditions of in vitro culture were studied for mass propagation of Pteris cretica ‘Wilsonii’. Spores of the species germinated within 7 weeks. The greatest proliferation was obtained with Knop and Hyponex media, but growth was more effective in Hyponex medium. MS medium induced necrosis of prothalli in all strength of nitrogen and sucrose except in case of 0% sucrose. Hyponex medium supplemented with 1% sucrose and 0.6% agar promoted propagation and growth of prothalli. In Hyponex medium, optimal inoculation method was homogenization, but in MS medium dividing colonies of prothalli was more effective. Culturing on solid medium was more effective than liquid culture method. Liquid culture induced necrosis of prothalli. Shaking cultured prothalli showed good growth, but propagation was inhibited compared to those cultured on solid medium.

청나래고사리와 고비 지상부의 효율적인 phytoecdysteroids 추출조건

신소림,이철희 한국자원식물학회 2011 한국자원식물학회지 Vol.24 No.4

본 연구는 양치식물로부터 phytoecdysteroids의 추출효율을 향상시키기 위하여 시행하였다. 청나래고사리와 고비의 잎(엽상체)을 동결건조 한 후 곱게 분쇄하여 MeOH, 80% EtOH, H2O(nano pure grade)를 용매로 하여 50배 추출하였으며, 각 용매별로 6시간 동안 침지, 교반(200 RPM), 60℃ 환류냉각추출하거나 42 kHz의 초음파수조에서 15, 30, 45분 동안 추출하였다. 추출물은 C18 cartridge로 정제하여 분석하였으며, HPLC를 이용하여 각 추출물의 20- hydroxyecdysone(20E)과 ponasterone A(PonA)의 함량을 조사하였다. 3종류의 용매를 6가지 방법으로 추출한 결과, 청나래고사리와 고비의 추출물 모두 MeOH를 용매로 30분 동안 초음파 추출했을 때 20E와 PonA의 용출량이 증가하였으며, 엽상체 건물중 1 g당 청나래고사리와 고비의 20E 함량은 66.76과 104.48 μg, PonA의 함량은 53.43와 43.82 μg이었다. This study was carried out to investigate the effective extraction condition for increase of phytoecdysteroids from fronds of Matteuccia struthiopteris (FMS) and Osmunda japonica (FOJ). Lyophilizated fronds were mixed with three different solvents (MeOH, 80% EtOH or water) and then extraction was carried out by using six different methods, such as, immersion (room temp.), heating (60℃), stirring (200 rpm) for 6 h, or sonication in 42 kHz ultrasonic bath for 15, 30 and 45 minutes. Contents of 20-hydroxyecdysone (20E) and ponasterone A (PonA) were measured by using HPLC after purification of the extracts by C18 cartridge. Altogether, our results indicate that the extraction using sonication with MeOH as a solvent (for 30 minutes) was the most effective condition for 20E and PonA from both MFS and FOJ. Resulting contents of 20E from FMS and FOJ were 66.76 and 104.48 μg·g^(-1) and PonA were 53.43 and 43.82 μg·g^(-1), respectively.

청나래고사리의 기내 포자체 재생에 미치는 배지 구성물질의 영향

신소림,이철희 한국화훼산업육성협회 2009 화훼연구 Vol.17 No.2

본 연구는 청나래고사리의 기내 포자체 유묘를 이용한 효율적인 대량생산 방법을 개발하기 위하여 시행되었다. 유묘의 엽신, 엽병, 근경을 곱게 다져 활성탄 0.1%를 첨가한 1/2MS배지에 배양한 결과, 근경의 절편에서만 포자체 유묘가 생산되었다. 곱게 다진 근경 절편은 1/2MS 배지에서 포자체 재생이 가장 왕성하였으며, sucrose 농도를 2%로 조절하고 NaH2PO4 50 mgL-1을 첨가할 경우 포자체 재생이 더욱 촉진되었다. Kinetin과 BA를 단용 또는 NAA, IBA와 각각 혼용하여 배양한 결과, kinetin 1 μM 단용 처리구에서 포자체 재생이 가장 왕성하였다. BA 첨가구에서는 분열조직의 증식이 왕성 하였으나. 분열조직이 포자체로 분화되지 못하는 특징을 보였다. 변형 1/2MS 배지(sucrose 2%, NaH2PO4 50mgL-1, kinetin 1 μM, pH 5.8, agar 0.8%)에 활성탄 0 또는 0.1%를 첨가하여 고체, 액체 정체, 액체 진탕배양한 결과, 포자체 재생은 액체 진탕배양시 가장 왕성하였으며, 활 성탄의 첨가는 포자체 재생을 촉진하였다. This study was carried out to investigate the efficient in vitro mass propagation methods for juvenile sporophytes of Matteuccia struthiopteris. Chopped segments of pinnae, petiole and rhizome were cultured on 1/2MS with 0.1% activated charcoal. Among these explant sources only rhizome segments produced young sporophytes, regenerating vigorously on 1/2 MS medium. Adjusting sucrose concentration to 2% and supplement to 50 mgL-1 NaH2PO4 in 1/2MS medium proved to be more efficient for plant regeneration. Various combinations of growth regulators such as kinetin, BA, NAA, and IBA were added to the growing media, and the best sporophyte regeneration was obtained by 1 μM kinetin. The BA addition resulted in vigorous proliferation of meristematic tissues, but without differentiation to sporophytes. Three types of culture methods, solid using agar, liquid stationary, and liquid shaking culture, were employed with or without activated charcoal. The addition of 0.1% activated charcoal to modified 1/2MS media (2% sucrose, 50 mgL-1 NaH2PO4, 1 μM kinetin, pH 5.8 and 0.8% agar) yielded highest sporophyte regeneration in liquid shaking culture.

자생 양치식물 지상부와 근경 메탄올 추출물의 항산화 효과

신소림,이철희 한국자원식물학회 2010 한국자원식물학회지 Vol.23 No.1

Phenolic compound contents and scavenging activity on DPPH and ABTS radicals in twelve fern species were studied by analysing ultrasonification extraction of dried aerial parts and rhizomes using methanol solvent. Total polyphenol content ranged from 2.97 to 140.1 mg per 1 g dried sample and 0.80 to 49.58 mg·g-1 fresh sample. Highest polyphenol content was obtained with aerial part of Davallia mariesii and Polystichum lepidocaulon. Total flavonoid content of dried sample was 2.56~34.91 mg·g-1 and fresh sample 0.71~11.49 mg·g-1. Higher flavonoids were obtained with dried aerial part of Dryopteris crassirhizoma, but with fresh aerial part of P. lepidocaulon. In general, total polyphenol content was higher in rhizomes, except in case of total flavonoid. Scavenging effects on DPPH and ABTS radicals was higher with rhizome extracts compared to aerial parts. The rhizome of Polystichum polyblepharum showed highest effects on both radicals. However, the amount of fresh sample for RC50 with consideration of water content and extraction yield. P. lepidocaulon aerial part was more advantageous than P. polyblepharum rhizome. All the fern extracts except for the Coniogramme japonica extract demonstrated superior scavenging effects on ABTS radicals, being similar activity of ascorbic acid and BHT. 메탄올을 용매로 12종 양치식물의 지상부와 근경의 건조시료를 초음파추출하여 페놀성 물질 함량 및 DPPH와 ABTS radical 소거능을 측정하였다. 총 폴리페놀의 함량은 건조시료 1 g에 2.793~140.014 mg·g-1, 생시료 1 g에 0.779~49.579 mg·g-1으로 다양하게 나타났으며, 넉줄고사리와 더부살이고사리의 지상부에서 총 폴리페놀 함량이 높았다. 총 플라보노이드 함량은 건조시료 1 g에 2.559~34.909 mg·g-1, 생시료 1g에 0.714~11.487 mg·g-1으로 나타났다. 건조시료 중에는 관중 지상부, 생시료 중에는 더부살이고사리의 지상부에서 총 플라보노이드 함량이 가장높았다. 총 폴리페놀은 지상부보다 근경에 많이 함유된 경향을 보였으나, 총 플라보노이드는 지상부에 많았다. DPPH와 ABTS radical 소거능은 지상부보다 근경 추출물에서 높게 나타났다. 총 폴리페놀은 지상부보다 근경에 많이 함유된 경향을 보였으나, 총 플라보노이드는 지상부에서 함량이 많았다. DPPH와 ABTS radical 소거능은 지상부보다 근경 추출물에서 높게 나타났다. DPPH radical 소거능과 ABTS radical 소거능 모두 나도히초미 근경 추출물에서 가장 우수하였다. 그러나 시료의 수분함량과 추출수율을 고려하여 RC50을 나타내는데 필요한 생시료의 양을 계산한 결과, 나도히초미 근경보다는 더부살이고사리 지상부가 DPPH와 ABTS radical 소거용 식물소재로 적합하였다. 양치식물의 추출물은 특히 ABTS radical 소거능이 매우 우수하였으며, 가지고비고사리 추출물을 제외한 대부분의 시료가 ascorbic acid 또는 BHT와 유사한 소거활성을 보였다.

Pteris cretica 'Wilsonii'의 기내 식물체 재생에 미치는 배지구성물질의 영향 및 기외순화

신소림,이철희 한국자원식물학회 2009 한국자원식물학회지 Vol.22 No.5

Adventitious shoots were induced from pinnae, petiole and rhizome in Pteris cretica 'Wilsonii' in order to develop the efficient mass propagation method, using in vitro culture. Only homogenized rhizome segments could regenerate young sporophytes. Efficient regeneration of multiple shoots was obtained on the one-eighth strength MS medium containing 1% sucrose, and 50 mg·L-1 NaH2PO4. To achieve higher rate of regeneration from rhizome segments, rhizome segments were exposed to growth regulators for 2 months and then subcultured on hormone-free medium. The greatest shoot regeneration was obtained by 1μM kinetin with 5 μM NAA. BA was effective in formation of GGB(kind of meristems), but they showed low shoot regeneration rate. Plants obtained from present experiments were transplanted to examine good environmental conditions for acclimation. Juvenile plants obtained by the one-eighth strength MS medium showed highest survival rate and vigorous growth at the seedling stage. 기내배양을 이용하여 Pteris cretica 'Wilsonii'의 효율적인 대량번식법을 개발하기 위한 목적으로 근경, 엽신 및 엽병조직으로부터 식물체 재분화를 유도하였다. 그 결과, 균질화된 근경의 절편에서만 신초가 재생되었다. 식물체 재분화를 유도하는데 적합한 배지는 1%의 sucrose와 50mg·mL-1의 NaH2PO4를 첨가한 1/8MS배지였다. 근경 절편으로부터 식물체의 재생을 촉진하기 위하여 생장조절물질이 첨가된 배지에서 2달 동안 절편을 배양한 후, 생장조절물질을 첨가하지 않은 배지로 이식한 결과, 1μM의 kinetin과 5μM의 NAA를 혼용첨가한 처리구에서 신초의 재생이 가장 왕성하였다. BA 첨가구에서는 분열조직의 일종인 GGB가 다량 유도되었으나, 형성된 GGB에서 신초 재생율은 낮은 것으로 나타났다. MS배지의 적정 무기물 및 비타민의 농도를 구명하는 실험을 마친 뒤, 형성된 유묘를 이용하여 기외순화 시킨 결과, 1/8MS배지에서 형성된 유묘가 생존율이 가장 높았으며, 생육 또한 왕성하였다. 추가 주요어: 양치식물, NaH2PO4, 생장조절물질, 포자체, 조직배양