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      • SCIESCOPUSKCI등재

        연골 재생을 위한 젤라틴과 젤란검을 혼합한 하이드로젤 평가

        정은(Jeong Eun Song),송야성(Yah Seong Song),전성현(Sung Hyun Jeon),최일남(Il Nam Choi),김초민(Cho Min Kim),강길선(Gilson Khang) 한국고분자학회 2017 폴리머 Vol.41 No.4

        천연 다당류인 젤란검은 내열성, 내산성, 내효소성이 우수하여, 널리 조직공학적으로 응용을 위해 사용된다. 그러나 젤란검은 낮은 세포 부착력을 갖는 단점이 있다. 따라서 본 연구에서는 연골 세포 부착 효율을 증진시키기위해, 젤란검 무게당 0, 10, 20 및 30 wt%의 젤라틴이 포함된 젤라틴/젤란검(G/GG) 하이드로젤을 제작하였다. 제작된 G/GG 하이드로젤의 물리적, 화학적 특성을 평가하기 위해, 압축강도, SEM, FTIR을 평가하였다. 또한 하이드로젤에서 연골 세포의 세포 부착력 및 기능적 유지를 관찰하기 위하여, MTT, RT-PCR을 수행하였다. 그 결과, 21일에 20 wt% G/GG 하이드로젤의 연골 세포 증식률은 0, 10, 및 30 wt%의 G/GG 하이드로젤보다 1.058, 1.051 및 1.04배 높게 나타났으며, 타입 2 콜라겐 유전자 발현 역시 각각 1.35, 1.21 및 1.16배로 관찰되었다. 그러므로, 20 wt% G/GG 하이드로젤은 연골 재생을 위한 생체재료로 활용할 수 있을 것으로 기대된다. Gellan gum is a natural polysaccharide with good heat, acid and enzymes resistance, and widely used for tissue engineering application. However, one of the drawbacks of gellan gum is lower cell attachment. Hence, in this study, gelatin/ gellan gum (G/GG) hydrogels containing 0, 10, 20, and 30 wt% of gelatin per gellan gum weight were prepared for improvement of chondrocyte attachment efficiency. The mechanical and chemical properties of prepared G/GG hydrogel were evaluated using compression strength, scanning electron microscopy and FTIR. Also, the cellular proliferation and functional maintenance of chondrocytes in hydrogel was assessed by MTT analysis, and RT-PCR. The results showed that 20 wt% G/GG hydrogel was 1.058, 1.051 and 1.04 folds higher chondrocyte proliferation compared to 0, 10 and 30 wt% and Type-II collagen gene expression was 1.35, 1.21 and 1.16 folds at 21 days, respectively. Thus, 20 wt% G/GG hydrogel can be envisioned as a useful biomaterial for future cartilage regeneration applications.

      • KCI등재

        탈미네랄화된 골분 스펀지에서 쥐지방줄기세포의 골분화 유도

        김창현(Chang Hyun Kim),장나금(Na Keum Jang),김도경(Do Kyung Kim),송야성(Yah Seong Song),정은(Jeong Eun Song),강길선(Gilson Khang) 한국고분자학회 2017 폴리머 Vol.41 No.1

        탈미네랄화된 골분(DBP)은 콜라겐, 칼슘 그리고 프로테오글리칸을 포함한다. DBP는 조직공학 분야에서 널리 사용되는 생체재료로, 새로운 뼈나 연골 성장의 기초를 다지는데 도움을 주는 생체 활성 분자를 포함한다. 본 연구에서는 천연 생체재료인 DBP를 1, 2, 3% 비율의 스펀지형태로 제작하였다. 또한 체내 지방에서 쉽게 얻을 수 있는 쥐지방줄기세포(rASCs)를 DBP 스펀지에 파종한 후, 골분화를 확인하기 위해 다음과 같은 연구를 실시하였다. 먼저, 세포의 부착과 증식의 효과를 확인하고자 SEM과 MTT분석을 실시하였으며, 골분화의 발현 정도와 잠재력 확인을 위해 ALP 활성과 RT-PCR을 실시하였다. 조직화학적 염색은 쥐에 DBP 스펀지를 이식한 후 1주, 4주 및 8주 후에 적출하여, Alizarine Red S 염색과 Von Kossa 염색을 통해, 생체 내에서 골분화의 효과를 확인하였다. 그 결과, 1% DBP 스펀지가 rASCs의 골분화능을 증가시키는데 적합한 환경을 제공한다는 것을 확인할 수 있었다. Demineralized bone particle (DBP) is a well-studied biomaterial, composed of collagen, calcium and proteoglycan. It is widely used in tissue engineering and regenerative medicine, because it contains powerful bioactive molecules that facilitate new bone or cartilage growth. Herein, we fabricated 1, 2 and 3% sponges using natural biomaterial DBP and studied its efficiency in rat adipose stem cells (rASCs) as models. After rASCs were seeded on DBP sponges, we evaluated rASCs adhesion, proliferation, cell attachment, proliferation and osteogenesis using SEM, MTT, and bone differentiation expose using ALP assay, RT-PCR in vitro. Histological examinations were performed at 1, 4 and 8 weeks after implantation DBP sponge to assess the effect of bone differentiation in vivo using Alizarin Red S, Von Kossa staining. We found that 1% DBP sponge can provide suitable environment for bone differentiation of rASCs.

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