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한련초 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물의 항산화, 항노화 및 항균 효과
이상래 ( Sang Lae Lee ),송바름 ( Ba Reum Song ),신혁수 ( Hyuk Soo Shin ),이윤주 ( Yun Ju Lee ),박수남 ( Soo Nam Park ) 대한화장품학회 2018 대한화장품학회지 Vol.44 No.3
한련초는 열대 및 아열대 지방에 서식하는 국화과 한련초속에 속하는 한해살이풀로 간 손상에 대한 보호효과, 살무사 독에 대한 해독효과, 항산화효과, 발모효과, 상처치유효과 등의 효능들이 확인된 바 있다. 더 나아가 본 연구에서는 한련초의 항산화 및 항노화효과를 확인하여 피부보호 소재로써의 가능성을 검토하고자 하였다. 이를 위해 한련초를 50% 에탄올로 추출한 추출물과 이를 다시 에틸아세테이트로 분획하여 얻은 분획물을 실험에 사용하였다. 항산화 지표인 FSC<sub>50</sub>과 OSC<sub>50</sub>을 측정한 결과, 에틸아세테이트 분획물의 OSC<sub>50</sub>은 항산화제로 잘 알려진 L-ascorbic acid 보다 2.7배 이상 뛰어난 것으로 나타났다. 이와 더불어 시료의 세포 내 활성산소종 소거능과 H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>로 유도된 세포손상에 대한 보호효과가 확인되었으며, 특히 <sup>1</sup>O<sub>2</sub>으로 유도된 사람 적혈구 광용혈에 대한 지연효과의 평가에서 64 μ g/mL의 에틸아세테이트 분획물이 적혈구 광용혈의 소요시간을 6배 이상 지연시켜 한련초의 우수한 항산화능을 반영해주었다. 한련초의 항노화 효과를 검증하기 위해 Hs68에서 추출한 엘라스타제에 대한 저해활성을 평가한 결과, 16 μ g/mL의 두 시료 모두 엘라스타제의 활성을 각각 6.8%와 14.0% 억제한 것을 확인하였다. 마지막으로 한련초가 식품 또는 화장품 등의 소재로 사용됨에 있어 화학적 방부제의 역할을 대체할 수 있을 가능성을 확인하기 위한 항균실험의 결과, 에틸아세테이트 분획물이 그람 양성 균주인 Staphylococcus aureus에 대해 mehyl paraben과 동등하거나 더 뛰어난 항균활성을 가진 것을 확인하였다. 이상의 실험결과들을 통해 한련초는 피부보호 소재 또는 천연방부제로서의 가능성을 가진 천연소재라 생각되며, 식품 또는 화장품 소재로서의 이용이 기대된다. An annual plant, Eclipta prostrata (Linn) is a member of the Asteraceae plant family and inhabited in tropical or subtropical regions of the world. Through many previous researches, E. prostrata has been extensively studied for its hepatoprotective effect, antivenom potential against viper venom, antioxidant, hair-growth, wound-healing efficacy and so on. In this study, for better understanding of the potential of E. prostrata as skin protectant, we conducted the experiments evaluating the antioxidant and antiaging efficacy. To this end, 50% ethanolic extract of E. prostrata and its ethyl acetate fraction were prepared and investigated. For the evaluation of antioxidant capacity of the samples, FSC<sub>50</sub> and OSC<sub>50</sub> were estimated. As a result, OSC<sub>50</sub> of ethyl acetate fraction was 2.7 times superior to OSC<sub>50</sub> of L-ascorbic acid, a well known antioxidant agent. Futhermore E. prostrata showed notable reactive oxygen species (ROS) scavenging effect and protective effect against H<sub>2</sub>O<sub>2</sub> in the celluar level as well. Especially, in the <sup>1</sup>O<sub>2</sub> induced hemolysis test, 64 μ g/mL of ethyl acetate fraction showed greater than 6 times increased retardation effect compare to control which means E. prostrata has remarkable antioxidant capacity. To validate the antiaging effect of the samples, we conducted elastase inhibition assay using elastase solution extracted from human skin fibroblasts, Hs68. As a result, 16 μ g/mL of each sample showed 6.8% and 14.0% of elastase inhibition respectively. Finally, antimicrobial activity of E. prostrata was assessed to validate the possibility as alternative preservative. From the result, ethyl acetate fraction showed oustanding antimicrobial activity as of methyl paraben, a well known chemical preservative. In conclusion, these results suggest that E. prostrata can be used as natural skin protectant or preservative as natural ingredient in food or cosmetics industry.
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정효진 ( Hyo Jin Jeong ),김아랑 ( A Rang Kim ),이건수 ( Keon Soo Lee ),박소현 ( So Hyun Park ),신혁수 ( Hyuk Soo Shin ),이상래 ( Sang Rae Lee ),송바름 ( Ba Reum Song ),이윤주 ( Yun Ju Lee ),안현진 ( Hyun Jin An ),이재덕 ( Jae Duk 대한화장품학회 2017 대한화장품학회지 Vol.43 No.2
본 연구에서는 풍선덩굴 잎 추출물 및 그 분획물에 대하여 항산화 활성 평가와 성분 분석을 수행하였다. 본 실험에는 풍선덩굴 건조 잎의 50% 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획 및 아글리콘 분획을 사용하였으며, 각각의 수율은 16.4, 0.9 및 0.3%로 나타났다. 자유라디칼 소거활성(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH, FSC<sub>50</sub>)은 에틸아세테이트 분획(92.5 μ g/mL)이 가장 큰 것으로 나타났으며, 이때 대조군인 (+)-α-tocopherol의 FSC<sub>5</sub>은 8.9 μ g/mL이었다. Fe<sup>3+</sup>-EDTA/H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>계를 이용한 활성산소 소거활성(총항산화능, OSC<sub>50</sub>)은 아글리콘 분획(4.2 μ g/mL)에서 가장 크게 나타났으며, 대조군인 L-ascorbic acid (1.5 μ g/mL)와 유사한 효과를 나타내었다. <sup>1</sup>O<sub>2</sub>로 유도된 사람 세포 손상에 대한 보호효과 측정에서 풍선덩굴 잎 추출물 및 분획은 모두 농도 의존적(5.0-25.0 μ g/mL)으로 세포보호효과를 나타냈다. 추출물/분획물 중에서 아글리콘 분획(τ<sub>50</sub>, 76.4 min)이 가장 큰 세포보호효과를 나타내었다. TLC, HPLC, LC/ESI-MS를 이용하여 풍선덩굴 잎추출물 중 에틸아세테이트 분획물에 대하여 성분 분석을 실시하였다. 그 결과, apigenin-7-O-glucuronide, apigenin-7-glucosdie 및 quercitrin hydrate 등의 플라보노이드가 함유되어 있음을 확인하였다. 이상의 결과 들은 풍선덩굴 잎 추출물 또는 분획이 항산화 기능성 화장품 원료로서 응용 가능성이 있음을 시사한다. In this study, the antioxidant effect and component analysis for extract and fractions of Cardiospermum halicacabum leaf were investigated. All experiments were performed with 50% ethanol extract, ethyl acetate fraction and aglycone fraction obtained from dried C. halicacabum leaf. The yields of extract and fractions were 16.4, 0.9 and 0.3% per dried powder, respectively. DPPH (1,1-phenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging activity (FSC<sub>50</sub>) of ethyl acetate fraction (92.5 μg/mL) was the greatest radical scavenging activity, but lower than (+)-α-tocopherol (8.9 μg/mL). In reactive oxygen species (ROS) scavenging activity (total antioxidant capacity, OSC<sub>50</sub>) on ROS generated in Fe<sup>3+</sup>-EDTA/H<sub>2</sub>O<sub>2</sub> system, aglycone fraction (4.2 μg/mL) was the highest total antioxidant capacity and similar to L-ascorbic acid (1.5 μg/mL). The cellular protective effects of C. halicacabum leaf extract and fractions on the <sup>1</sup>O<sub>2</sub>-induced cellular damage of human erythrocytes were exhibited at all concentration-dependent (5.0-25.0 μg/mL). Especially, aglycone fraction (τ<sub>50</sub>, 76.4 min) in 25.0 μg/mL showed the most protective effect among extracts. Components of the ethyl acetate fraction obtained from C. halicacabum extracts were analyzed by TLC, HPLC chromatogram and LC/ESI-MS. Results showed that the ethyl acetate fraction contained some flavonoids, such as apigenin-7-O-glucuronide, apigenin-7-glucosdie and quercitrin hydrate. These results suggest that the extracts and fractions of C. halicacabum leaf may be applied as antioxidant functional cosmetic raw materials.
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