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Cloning of ada Gene of E. Coli K12 into E. Coli ada Mutants
백영진,정선호,양철학,Baik, Young-Jin,Chung, Sun-Ho,Yang, Chul-Hak 생화학분자생물학회 1986 한국생화학회지 Vol.19 No.3
E. coli ada 변종인 I-27을 MNNG-변이화 방법으로 분리하였다. 이 I-27 변종은 MNNG, MMS와 같은 간단한 알킬화 시약에 대해 증가된 민감성을 나타내었고 MNNG에 대한 적응반응을 유도하지 못하였다. 이 변종은 $O^6$-methylguanine methyltransferase와 3-methyladenine DNA glycosylase II 효소의 활성을 유도하지 못하였다. E. coli K12의 DNA를 제한효소 PstI으로 부분 가수분해한 뒤 pBR322 vector에 접합하여 ada 유전자를 cloning하였다. 재조합 plasmid인 pEMT1은 ada 변종인 I-27이 MNNG에 저항성을 나타내도록 하였으며, 또 유도되지 않은 상태에서도 methyltransferase의 활성을 나타내도록 하였다. pEMT1을 제한효소 Hind III로 가수분해하여 pBR322에 접합시킨 뒤 I-27에 넣어서 subcloning을 하였으며 이 때의 재조합 plasmid인 pEMT2는 Hind III 로 가수분해 한 pEMT1의 3.1 kb 크기의 DNA 조각을 포함하고 있었다. An Escherichia coli ada mutant, I-27, was isolated by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) treatment. This mutant showed increased sensitivity to simple alkylating agents such as MNNG and methyl-methanesulphonate (MMS) and was unable to induce the adaptive response to MNNG. The I-27 was defective in inducing activities of $O^6$-methylguanine methyltransferase and 3-methyladenine DNA glycosylase II. The $ada^+$ gene was cloned from wild type E. Coli K12 by ligating bacterial DNA partially digested with PstI into pBR322. The recombinant plasmid, obtained above, gave MNNG resistance to ada mutant, I-27, and resulted in the constitutive synthesis of methyltransferase. Further subcloning of pEMT1 was achieved by ligating a Hind III digest of pEMT1 into pBR322 and transforming it into the 1-27, an ada mutant. The resultant recombinant plasmid, pEMT2, contained a 3.1 kb Hind III fragment of the pEMT1 DNA.
백영진 한국공업화학회 2016 한국공업화학회 연구논문 초록집 Vol.2016 No.1
초임계 이산화탄소 발전 시스템 기술은 초임계 상태의 이산화탄소를 사용하여, 기존 발전 기술에 비해 높은 열효율과 단순한 레이아웃, 소형화된 터보기계 및 열교환기를 통해서 작은 공간에서도 높은 열효율로 전력을 생산할 수 있는 잠재력을 가진 것으로 평가되고 있으며, 최근 화력, 원자력 및 태양열 등의 발전 분야에서 활발히 연구되고 있다. 이와 관련, 한국에너지기술연구원(KIER)에서는 1단계 연구로서 1축 터빈-발전기-압축기 유닛을 기반으로 하는 초임계 이산화탄소 브레이튼 사이클 실험 루프를 제작 및 시운전 하였으며, 현재 진행중인 2단계 연구에서는 두개의 터빈과 두개의 재생기를 갖는 초임계 이중 브레이튼 사이클 시스템을 개발하고 있다.