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식중독균 항원(Salmonella typhimurium)에 의하여 생성된 계란항체(IgY) 특성과 항균 효과
백반석,한준표,배만종 동아시아식생활학회 1999 동아시아식생활학회지 Vol.9 No.2
This study was carried out to get a industrial information about a possibility of IgY antibody production, antimicrobial activity and properties of IgY antibody in egg yolk. The residual antibody activities of IgY were 91.5% after heating for 30min at 60℃. At the same time, these activities, were 73.2% after heating 15min at 65℃ and decreased vapidly at 70℃ and little antibody activity was left after heating for 15min at 80℃. When the prepared IgY was incubated at various pH ranges from 7 to 2 for 5hr at 37℃, the antibody activity was stable from pH 7 to 4 and remained to 69.8% at pH 3.
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식중독균 항원(Escherichia coli)에 의한 계란항체(IgY)생산성과 항체특성
백반석,배만종 경산대학교 생명자원개발연구소 2000 생명자원과 산업 Vol.4 No.-
식중독 균인 Escherichia coli를 항원으로 하여 산란계에 면역시켜 계란 항체(IgY)의 생산성과 항체의 특성을 조사하고자 실시하였다. 최초 면역후 형청내의 IgG는 1주부터 생성되기 시작하였으나, 난황내의 IgY는 2주부터 생성되기 시작하였다. 이것은 모체인 산란계에서 먼저 항체가 생성된 후 계란의 난황에 이행되어 농축되는 것으로 IgY의 생성과정을 확인하는 결과였다. 또한 혈청 및 난황내의 단백질 함량도 일반 대조군에 비해 다소 높은 경향을 보여 면역단백질의 증가를 뒷받침하였다. 본 실험에서 생산된 IgY는 65℃까지는 다소 안정된 경향을 나타내었으나, 70℃에서는 활성이 급격히 떨어지는 것으로 나타났다. pH에 대한 안정성은 비교적 안정하여 pH4에서도 90% 이상의 활성을 유지하였다. 이러한 결과로 볼 때 계란을 이용한 항체의 생산은 대량생산이 가능할 뿐만 아니라, 항원에 대한 특이성을 이용한 진단 kit제조, 의약품등 다양한 분야에 응용될 수 있으리라 기대된다. This study was investigated to make industrial base from discussion about production possible of IgY antibody, properties of IgY antibody in egg yolk. Immunoglobulin Y in egg yolk and immungoglobulin G in serum were obtained from hens which were immunized with Escherichia coli(ATCC 11775). The antibody titer were evaluate in serum and egg yolk by ELISA. After the initial immunization, the anti-Escherichia coli IgY antibody level in egg yolk increased from the two week, reaching its peak in the fifth week. On the other hand, the antibody level in the serum began to increase from the first week, reaching its peak in the eighth week. The residual antibody activities of IgY after heating at 60℃ for 30min and at 65℃ for 15min were 92%, 70% respectively, and decreased sharply at 70℃ and little antibody activity was left after heating at 80℃ for 15min. When the IgY preparation was incubated at various pHs ranging from 7 to 2 at 37℃ for 5hr. With result that the antibody acivity was stable from pH 5 to 4 and remained to 99% and 90% respectively.
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식중독균 항원(Salmonella typhimurium)에 의한 계란항체(IgY) 생산성과 분리 정제
한준표,백반석,배만종 동아시아식생활학회 1999 동아시아식생활학회지 Vol.9 No.2
This study was carried out to get a industrial information about a possibility of IgY antibody production, antimicrobial activity and properties of IgY antibody in egg yolk. After the initial immunization the anti-Salmonella typhimurium IgY antibody level gradually were decreased from firth week to tenth week. On the other hand, the antibody level in the serum were increased from the first week, reaching its peak in the sixth week. Molecular weights of IgY were estimated approximately 72~75KD in a heavy chain and 30~40KD in a light chain by electrophoresis.
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심호기,백반석,황성원,배만종 경산대학교 생명자원개발연구소 1996 생명자원과 산업 Vol.1 No.-
감초에서 분리한 각각의 추출물(HWE, ME, AE)을 BALB/c mouse에 투여하여 탐식작용, 용혈반형성, 용혈소 역가특정 및 Rosette형성 실험을 통해 감초가 면역응답에 미치는 영향을 조사하였다. 1. 탐식능 측정에서 복강침출세포(PEC)와 비장세포(spleen cell)는 CON군에 비하여 가각의 약물투여군이 Candida parapsilosis에 대한 효과가 약간 높은 경향을 나타냈지만 유의성은 없었다. 2. 용혈반 형성 및 용혈소 역가측정에서는 CON군에 비하여 HWE, ME, AE투여 군이 유의성을 나타냈다. 3. Rosette형성에 대한 측정에서는 CON군에 비하여 ME, AE투여 군이 높은 유의성을 나타냈다. 본 실험 결과에서 감초 추출물들은 Candida paraprapsilosis에 대하여 약간의 탐식증진효과를 나타냈으며, 항체생성세포의 용혈반 시험 및 용혈소 역가측정과 Rosette형성측정에서의 유의성을 나타낸 것은 감초가 세포성 면역을 주도하는 T세포를 활성화시킬 뿐만 아니라, 체액성 면역을 주도하는 B세포를 활성화시킨다는 것을 확인 할 수 있다. The inverstigation of effecting immune response on BALB/c mouse was experimented with hot water extract(HWE), 50% methanol extract(ME) and aaceton extract(AE) 〔which was extracted from Glycyrrhiza glabra〕. The experiment was carried out by phagocytosis, hemolytic plaque assay, hemolysin titration and rosette assay. Peritoneal exudative cells and spleen cells in phagocytosis ability; the experimental group has shown a slight increase in Candida parapsilosis(HWE, ME & AE). The experiment shows no relevant correlation. The experiment of hemolytic plaque assay and hemolysin titration was treated by HWE, ME and AE. The experimental group was treated by ME and AE through the measurement of rosette assay. The experimental group has given significant increase compared with the control. As the result, the extracts of Glycyrrhiza glabra (HWE, ME and AE) has effedted slightly to Cnadida parapsilosis in phagocytosis. The reason of effecting the immunocyte in hemolysin titration, rosette assay and hemolytic plaque assay ; Glycyrrhiza glabra has activated the T-cell which controlled cell mediated immunity. Same with B-cell which could also control humoral immunity.
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식중독균 항원(Salmonella typhimurium)에 의한 계란항체(IgY) 생산성과 항체특성 및 항균효과
백경연,손규목,배만종,백반석,한준표 경산대학교 생명자원개발연구소 1999 생명자원과 산업 Vol.3 No.-
본 연구는 식중독균을 항원으로 하여 산란계에 면역시킨 후 계란 항체(IgY)의 생산 가능성을 검토하고, 그 항체의 특성과 항균성을 조사하고자 실시하였다. 그 방법으로는 항원으로 사용된 Salmonella typhimurium(ATCC 14028) 등을 incomplete Freund's adjuvant와 동량으로 혼합하여 면역시킨 후 10주간 생산된 계란을 수집하여, 계란항체(IgY)의 분리 및 식중독균 항원에 대한 항체의 특성, 항균성, 생화학적 특성을 측정하였다. S. typhimurium 항원에 면역된 산란계의 계란항체(IgY)생산 및 증가를 측정한 결과, 산란계가 이들 항원에 면역반응을 일으켜 2주 후 혈청과 난황에서 각각 normal군에 비하여 뚜렷한 항체가 생성능을 보였으며, 혈청내의 IgG생성에 비하여 계란항체(IgY)의 생성이 다소 낮은 것으로 나타났다. 혈청 및 난황내의 단백질 함량은 normol군에 비하여 약간 높은 경향을 나타내어 산란계의 혈청 및 난황내의 단백질이 이들 항원에 의하여 증가하는 것으로 나타났다. DEAE-Sephacel column을 통과한 fraction은 두 개의 peak를 나타내었다. 각 fraction의 IgY농도를 ELISA법으로 확인한 결과 두 번째 peak에서 대부분 측정되었다. 분리 정제된 IgY의 분자량을 SDS-polyacrylamide 전기영동법으로 측정한 결과, heavy chain 72∼75KD, light chain 30∼40KD정도였다. Anti-S. typhimurium 항체의 온도에 대한 활성은 60℃에서 30분 가열시 91.5%, 65℃에서 15분 가열시 각각 73.2%의 활성도를 나타내었으며, 80℃에서 15분간 가열시는 거의 활성이 없는 것으로 나타났다. pH에 대한 안정성은 pH 7부터 pH 4까지는각각 98.7%의 활성도를 유지하다가 pH 3부터 급격히 감소하여, pH 2에서는 9.6%로 거의 활성도를 나타내지 않았다. 항균활성을 응집가, 생균수, disc diffusion susceptibility test 등으로 측정한 결과 anti-S. typhimurium 항체의 항균활성도는 매우 미약하게 나타났다. 이상의 결과에서, 본 실험에서 사용된 IgY는 항원에 대한 특이성 및 생화학적 특성 등을 고려해 볼 때 앞으로 식중독균 제거 및 예방 치료뿐만 아니라 식품산업 소재, 각종 질병예방을 위한 의약품 소재, 연구용 kit와 진단용 kit 및 축산분야 등 여러 분야에 응용될 수 있으리라 기대된다. This study was carried out to investigated to get a industrial information from discussion about productive a possibility if IgY antibody, antimicrobial activity and properties of IgY antibody in egg yolk. Immunoglobulin Y in egg yolk and immunoglobulin G in serum were obtained from gens which were immunized with Salmonella typhimurium(ATCC14028). These antibody titers were evaluated in serum and egg yolk by ELISA. After the initial immunization the anti-Salmonella typhimurium IgY antibody level gradually were decreased from firth week to tenth week. On the other hand, the antibody level in the serum were increased from the first week, reaching its peak in the sixth week. The residual antibody activities of IgY were 91.5% after heating for 30min at 60℃. At the same time, were 73.2% after heating 15min at 65℃ and decreased vapidly at 70℃ and little antibody activity was left after heating for 15min at 80℃. When the prepared IgY was stable from pH 7 to 4 and remained to 69.8% at pH 3, respectively.
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