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      • 표식유전자를 이용한 담배와 감자의 원형질체 융합

        박태은,정해준,Park, Tae-Eun,Chung, Hae-Joun 배재대학교 자연과학연구소 1991 自然科學論文集 Vol.4 No.-

        표식 유전자를 이용하여 체세포 잡종체를 선발하기 위한 연구의 일환으로 감자조직에는 T-DNA를 도입하여 식물호르몬 무첨가 배지에서도 생장가능한 형질전환체을 획득하고, 담배조직에는 NPT H gene을 도입하여 kanamycin에 대해서 저항성을 나타내는 형질전환체를 획득하여 각각의 특성구명과 원형질체를 유리하여 도입된 유전자 marker를 이용해서 융합을 시도한 바 그 결과는 다음과 같다. 1. 감자 괴경에서 Agrobacterium tumefaciens Ach5와 A. rhizogenes ATCC15834를 접종하여 crown gall tumor 및 hairy root를 유기하였으며 이러한 tumor조직은 식물 호르몬 무첨가 배지에서 생장이 가능하였다. 2. 감자에서 유기된 hairy root로부터 callus 형성은 2.4-D 2mg/1 첨가된 MS 배지에서 가장 양호하였으며 casein hydrolysate 1g/1가 첨가하면 유연 한 callus의 증식이 더욱 왕성하였다. 3. Activated charcoal이 0.5~2.0g/1 첨가된 배지에서는 crown gall tumor callus의 절단면이 갈변되는 것을 방지 할 수 있어 생존률을 높일 수 있었으나 hairy root에서는 갈변되어 고사되었다. 4. 2, 4-D 2mg/1와 casein hydrolysate 1g/1를 첨가한 배지에 hairy root callus를 현탁배의한 결과 양호한 많은 callus 덩어리들을 단시간에 얻을 수 있었다. 5. $Tri^-$parental mating으로 NPTII gene이 coding되어있는 binary vector인 pGA643을 wild type 및 disarmid된 Agrobacterium 내에 도입하여 Agrobacterium tumefaciens Ach5/pGA643, A.tumefaciens $A_4T$/pGA643, A. tumefaciens LBA4404/pGA643를 획득하였다. 이 세 개의 conjugant를 사용하여 0.7% agarose gel 상에서 pGA643을 확인하였다. 6. pGA643이 도입왼 Agrobacterium tumefaciens LBA4404와 담배 조직과 동시배양하여 kanamycin $100\mug$/ml 첨가된 배지에 생존하는 callus를 선발하였으며 동일배지에서 callus의 증식이 가능하였다. 7.형질전환된 담배 callus로부터 식물체 형성은 BA 2mg/1를 첨가한 배지에서 가능하였다. 8. 재분화된 담배의 엽조직은 kanamycin.이 $1000\mug$/ml 첨가된 MS 배지에서도 왕성히 callus가 유기되어, 이는 재분화체에서도 NPTII gene이 그대로 유지되고 있음을 확인할 수 있었다. 9. 담배의 정상 shoot와 형질전환된 shoot를 kanamycin이 $100\mug$/ml이 함유된 MS배지에 기내삽목한 결과, 정상 shoot는 발근이 되지 않고 황화 되었으나 형질전환된 shoot는 발근이되었으며 정상적으로 생장을 하였다. 10. 감자의 T-DNA가 도입된 현탁배양 callus는 cellulase 2%, macerozyme 2%, dricelase 1%에서 양호하게 유리되었다. 11. Osmoticum으로서 mannitol 농도 0.8M에서 담배와 감자의 두 조직 모두 원형질체유리가 가장 효과적이었다. 생존력은 T-DNA가 도입된 감자의 hairy root를 callus로 탈분화 시킨 후 현탁배양한 callus가 mannitol 0.5M에서 97%를 나타냈고, 그리고 NPTII gene이 도입된 담배의 엽조직은 mannitol 0.7M에서 94%로 최고를 타나냈다. 12. 원형질체 융합은 PEG solution 처리 15분 후부터 관찰되기 시작하여 20분에 완전히 융합되었고, 융합된 원형질체는 선발 marker인 호르몬 무첨가 및 kanamycin 첨가배지에서 배양 5일 후에 세포벽이 재생되었으며 4주일 후부터 colony들이 관찰되었다. These studies were carried out to select somatic hybrid using selectable marker genes of Nicotiana glauca transformed by NPTII gene and Solanum tuberosum transformed by T- DNA, and to study characteristics of transformant. The results are summarized as follows. 1. Crown gall tumors and hairy roots were formed on potato tuber disc infected by A. tumefaciens Ach5 and A. rhizogenes ATCC15834. These tumors and roots could be grown on the phytohormone free media. 2. Callus formation from hairy root was prompted on the medium containing 2, 4 D 2mg/I with casein hydrolysate lg/l. 3. The survival ratio of crown gall tumor callus derived from potato increased on the medium containing the activated charcoal 0. 5-2. 0mg/I because of the preventions on the other hand, hairy roots were necrosis on the same medium. 4. Callus derived from hairy root were excellently grown for a short time by suspension culture on liquid medium containing 2, 4-D 2mg/I and casein hydrolysate lg/l. 5. The binary vector pGA643 was mobilized from E. coli MC1000 into wild type Agrobacteriurn tumefaciens Ach5, A. tumefaciens $A_4T$ and disarmed A. tuniefaciens LBA4404 using a triparental mating method with E. ccli HB1O1/pRK2013. Transconjugants were obtained on the minimal media containing tetracycline and kanamycin. pGA643 vectors were confirmed by electrophoresis on 0.7% agarose gel. 6. Kanamycin resistant calli were selected on the media supplemented with 2, 4-D 0.5mg/1 and kanamycin $100\mug$/ml after co- cultivating with tobacco stem explants and A. tumefaciens LBA4404/pGA643, and selected calli propagated on the same medium. 7. The multiple shoots were regenerated from kanamycin resistant calli on the MS medium containing BA 2mg/l. 8. Leaf segments of transformed shoot were able to grow vigorusly on the medium supplemented with high concentration of kanamycin $1000\mug$/ml. 9. Kanamycin resistant shoots were rooting and elongated on medium containing kanamycin $100\mug$/ml, but normal shoot were not. 10. For the production of protoplast from potato calli transformed by T-DNA and mesophyll tissue transformed by NPTII gene, the former was isolated in the enzyme mixture of 2.0% celluase Onozuka R-10, 1.0% dricelase, 1.0% macerozyme. and 0.5M mannitol, the latter was isolated in the enzyme mixture 1.0% Celluase Onozuka R-10, 0.3% macerozyme, and 0.7M mannitol. 11. The optimal concentrationn of mannitol in the enzyme mixture for high protoplast yield was 0.8M at both transformed tobacco mesophyll and potato callus. The viabilities of protoplast were shown above 90%, respectively. 12. Both tobacco mesophyll and potato callus protoplasts were fused by using PEG solution. Cell walls were regenerated on hormone free media supplemented with kanamycin after 5 days, and colonies were observed after 4 weeks culture.

      • KCI등재

        국내 2+4년제 약학대학 졸업생의 취업 현황에 따른 임상약학 관련 교과과정에 대한 고찰

        박태은,강민구 한국임상약학회 2021 한국임상약학회지 Vol.31 No.4

        Background: This study aims to determine whether the new 6-year pharmacy curriculum is designed to help students in their career path based on the employment status of the current 2+4 pharmacy school graduates. Methods: An online survey was conducted to the pharmacists who graduated from Woosuk University College of Pharmacy between 2015 and 2021. The survey questions included the current employment status of the graduates and their feedback on the clinical pharmacy curriculum at Woosuk University. Results: There were a total of 104 graduates who responded to the survey out of 312 graduates of whom the school had current contact information. Most of the graduates are currently working in a community pharmacy (63.5%), followed by hospital pharmacy (27.9%) and pharmaceutical industry (4.8%). Although most graduates were satisfied with clinical pharmacy courses at our college, many thought there needs to be a reinforcement or improvement in the curriculum, including pharmacotherapy and pharmacy practice experiences as well as social pharmacy courses. Conclusion: Based on our study, clinical and social pharmacy are the courses that teach the knowledge and skills required in community and hospital pharmacy and yet, are most in need of improvement. As most graduates work in a community or hospital pharmacy, it is necessary to improve our pharmacy curriculum so that they can learn and demonstrate their clinical skills effectively.

      • KCI등재

        집단 음악 활동이 통합어린이집 장애 유아와 비장애 유아의 상호작용에 미치는 영향

        박태은,문지영 (사)한국예술치료학회 2023 한국예술치료학회지 Vol.23 No.2

        본 연구의 목적은 악기연주 중심의 집단 음악 활동이 통합어린이집 내의 장애 유아와 비장애 유아의 상호작용에 미치는 영향을 알아보는 것이었다. 연구대상은 서울특별시 S구 B동의 S어린이집의 만 5세 유아 20명으로 실험집단과 통제집단에 각각 10명씩 배치되었다. 실험집단은 12주간 주 1회씩 12회기에 걸쳐 악기연주 중심의 집단음악 활동에, 통제집단은 통합어린이집의 기존 일과에 참여하도록 배치하였다. 본 연구에서는 사회성 기술 척도(K-SSRSP), 또래놀이 상호작용 척도(PIPPS)를 사용하여 악기연주 중심의 집단 음악 활동이 통합어린이집 내의 장애 유아와 비장애 유아의 상호작용에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 자료 분석은 집단 간 비교를 위해 독립 t 검정과 ANCOVA를 사용하였으며, 집단 내 비교를 위해 대응 t 검정을 사용하였다. 이에 따른 연구 결과는 다음과 같다. 첫째, 실험집단과 통제집단 간 사회성 기술 점수에 있어 통계적으로 유의미한 차이를 보였다. 또한, 실험집단 내 사회성 기술 점수도 통계적으로 유의미한 차이를 보였다. 둘째, 실험집단과 통제집단 간 또래 놀이상호작용 점수에 있어 통계적으로 유의미한 차이를 보였다. 또한, 실험집단 내 또래 놀이 상호작용 점수도 통계적으로 유의미한 차이를 보였다. 이러한 연구 결과는 악기연주 중심의 집단 음악 활동이 통합어린이집의 장애유아와 비장애 유아의 상호작용에 효과적인 중재가 될 것이라 기대한다.

      • KCI등재

        국내 약학대학 학생들의 표준화 환자를 활용한 복약상담 교육 및 OSCE에 대한 인식

        박태은,강민구,Park, Tae Eun,Kang, Minku 한국임상약학회 2022 한국임상약학회지 Vol.32 No.1

        Background: Woosuk University College of Pharmacy delivered patient counseling education and administered Objective Structured Clinical Examination (OSCE) by utilizing standardized patients (SP) in Introductory Pharmacy Practice course. Surveys were conducted to examine students' perception of SP and its impact on experiential education. Methods: Students learned patient counseling by didactic lecture and role-play, followed by hands-on practice with SP. Then, patient counseling skills were assessed during OSCE by utilizing SP. The first survey was conducted immediately after OSCE, and the second survey after the completion of Pharmacy Practice Experiences (PPEs). Results: According to the surveys, majority of the students agreed that utilizing SP was effective in building confidence for conducting patient counseling, reflecting on strengths and weaknesses of communication skills, and preparing for PPEs. It was particularly more effective than role-play in simulating patient counseling in a real pharmacy and reflecting on oneself. Also, OSCE was an appropriate method to assess patient counseling skills and utilizing SP for this purpose was well-suited. Conclusion: Although it is very new in South Korea, other developed countries are already widely utilizing SP, and its importance and necessity have been proven by several studies. Therefore, Korean colleges of pharmacy should begin discussing how to utilize SP to improve students' communications skills and implementing OSCE to evaluate those skills.

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