Catalase Induced by All-Trans Retinoic Acid Is Involved in Antiproliferation of 36B10 Cells

박우윤,유재란 대한방사선종양학회 2010 Radiation Oncology Journal Vol.28 No.4

Purpose: All-trans retinoic acid (ATRA) has antiproliferative effects against brain tumor cells. Recently, ATRA has been reported to induce catalase. We investigated whether catalase induction by ATRA is associated with its antiproliferative effects. Materials and Methods: 36B10 cells were exposed to 0∼50μM ATRA for 24 or 48 hours and mRNA, protein, and activity of catalase were measured. Reactive oxygen species (ROS) were measured using 2',7'-dichlorofluorescin diacetate. A clonogenic assay was used to confirm the cytotoxic effect. Results: The mRNA, protein, and activity of catalase were found to increase in a concentration- and incubation- time-dependent manner. The increase in catalase activity induced by ATRA was decreased by the addition of 3-amino-1,2,4-triazole (ATZ). ROS was also increased with ATRA and decreased by the addition of ATZ. The decrease in cell survival induced by ATRA was partly rescued by ATZ. Conclusion: Catalase induction by ATRA is involved in ROS overproduction and thus inhibits the proliferation of 36B10 cells.

뇌종양 세포에서 troglitazone과 온열치료의 병용 효과

박우윤 충북대학교 의과대학 충북대학교 의학연구소 2006 忠北醫大學術誌 Vol.16 No.2

-본문참고-

The Combined Effect of Fast Neutron and Hyperthermia according to the Sequence and Interval in MKN-45 Cells

박우윤,류성렬,조철구,Park, Woo-Yoon,Yoo, Seong-Yul,Cho, Chul-Koo The Korean Society for Radiation Oncology 1999 Radiation Oncology Journal Vol.17 No.1

목적 : 온열치료는 엑스선 또는 감마선 등 LET 가 낮은 방사선에 대한 세포 및 조직에서의 반응을 증강시킬 수 있음이 이미 잘 알려져 있다. 그러나 다른 종류의 방사선과 온열치료의 상호작용에 대해서는 연구가 미미한 실정이다. 따라서 저자들은 속중성자와 온열치료의 순서 및 시간간격에 따른 병용효과를 파악하고자 이 연구를 시행하였다. 재료 및 방법 : 사람 위암세포주인 MKN-45 세포에서 1.5Gy 의 중성자조사 전후 각 6, 4, 2, 0(5분) 시간 간격으로 41$^{\circ}C$ 또는 43$^{\circ}C$ 에서 30분간의 온열치료 시행하여 세포생존율을 측정하였다. 결과 : MKN-45 의 D$_{0}$ 와 n 은 각각 0.8Gy 와 2.5 이었고, 1.5Gy 에서의 생존분획은 0.36($\pm0.34$) 이었다. 시간 간격에 따른 상호작용력은 대부분 1 과 2 사이였으나, 41$^{\circ}C$ 의 온열치료후 4 또는 6시간에 시행한 중성자조사에서는 상호작용력이 각각 3.0 과 2.7 이었다. 결론 : 속중성자와 온열치료의 병용효과는 주로 상가적(additive) 이나, 약온열치료(41$^{\circ}C$, 30분) 가 4 또는 6시간 전에 시행된 경우 후속 중성자조사에 대한 내성이 유발될 수있다. Purpose : It has been well established that the response of cells and tissues to low LET radiations (X- or gamma-ray) can be enhanced by combining with hyperthermia. However, there has been relatively little work of hyperthermia on the possible modification of either cellular or tissue responses to other types of radiation. So, we investigated the combined effect of fast neutron irradiation and hyperthermia according to the sequence and time interval of the two. Materials and Methods : In MKN-45 cells, a human stomach cancer ceil line, suwiving fractions were measured according to the sequential treatment of 0, 4, 2, 0 hour-intewal for fast neutron irradiation (1.5 Gy) combined with hyperthermia (41 $^{\circ}C$ for 30 min or 43$^{\circ}C$ for 30 min). Results : D$_{0}$ and n of MKN-45 for neutron were 0.8 Gy and 2.5, respectively. The surviving fraction by 1.5 Gy of neutron was 0.36$\pm$0.34. Interacting powers were mostly ranged between 1 and 2, but they were 3.0 and 2.7, respectively for hyperthermia (41 $^{\circ}C$ for 30 min) fellowed by neutron irradiation 6 and 4 hours later. Conclusion : The combined effect of fast neutron (1.5 Gy) and hyperthermia (41 $^{\circ}C$ or 43$^{\circ}C$ for 30min) is largely independently additive. Preceding mild hyperthermia (41 $^{\circ}C$ for 30 min) 4 or 6 hours before neutron may cause decreased sensitivity to subsequent neutron irradiation.

고관절 전치환 성형술후 관절주의 골 형성 예방을 위한 방사선요법

박우윤,박찬일 한국의학사 1986 診斷과治療 Vol.6 No.3

백서 사구체 상피세포에서 방사선에 의한 Fibronectin, Pai-1, MMP 발현의 변화

박우윤,김원동,정영,하태선,김재성,조문준 대한방사선종양학회 2006 Radiation Oncology Journal Vol.24 No.1

Purpose: Renal irradiation can lead to the development of radiation nephropathy, and this is characterized by the accumulation of extracellular matrix and final fibrosis. To determine the possible role of the glomerular epithelial cell, the radiation-induced changes in the expression of its genes associated with the extracellular matrix were analyzed. Materials and Methods: Rat glomerular epithelial cells (GEpC) were irradiated with a single dose of 0, 2, 5, 10 and 20 Gy with using 6 MV LINAC (Siemens, USA), and the samples were collected 6, 24, 48 and 72 hours post-irradiation, respectively. Northern blotting, western blotting and zymography were used to measure the expression level of fibronectin (Fn), plasminogen activator inhibitor-1 (Pai-1), matrix metalloproteinases-2, 9 (MMP-2, 9), tissue inhibitor of metalloproteinase-2 (TIMP-2), tissue-type plasminogen activator (t-PA) and urokinase-type plasminogen activator (u-PA). Results: Irradiation with a single dose of 10 Gy resulted in a significant increase in Fn mRNA since 24 hours post-irradiation, and a single dose of 5 and 10 Gy significantly increased the Fn immunoreactive protein measured 48 hours post-irradiation. An increase in Pai-1 mRNA and protein was also observed and especially, a single dose of 10 Gy significantly increased the mRNA measured 24 and 48 hours post-irradiation. The active MMP-2 measured 24 hours post-irradiation slightly increased in a dose dependent manner, but this increase did not reach statistical significance. The levels of MMP-9, TIMP-2, t-PA and u-PA appeared unaltered after irradiation. Conclusion: Irradiation of the glomerular epithelial cells altered the expression of genes associated with the extracellular matrix, implying that the glomerular epithelial cell may be involved in the development of radiation nephropathy. 목 적: 방사선에 의한 신장손상은 궁극적으로 신장 섬유화로 인한 신부전으로 나타나며 여기에는 세포외기질의 변화가 동반된다. 방사선 신장손상에서 신사구체 상피세포의 역할을 알아보기 위하여 방사선에 의한 세포외기질과 연관된 여러 유전자 발현의 변화를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 백서 사구체 상피세포(rat glomerular epithelial cell; GEpC)에 6 MV 선형가속기(Siemens, USA)를 이용하여 0, 2, 5, 10, 20 Gy의 단일 방사선량을 조사한 후 각각 6, 24, 48, 72시간에 시료를 채취하였다. Northern blot, Western blot, zymography를 이용하여 fibronectin (Fn), plasminogen activator inhibitor-1 (Pai-1), matrix metalloproteinases-2, 9 (MMP-2, 9), tissue inhibitor of matrix metallproteinase-2 (TIMP-2), tissue-type plasminogen activator (t-PA), urokinase-type plasminogen activator (u-PA)의 발현을 측정하였다. 결 과: GEpC에 대한 10 Gy 단일 방사선 조사후 24시간부터 Fn mRNA가 유의한 증가를 나타냈으며 48시간에 측정한 Fn 단백질은 5, 10 Gy의 방사선량에서 유의하게 증가되었다. 방사선조사에 의해서 Pai-1 유전자의 발현도 mRNA 및 단백질 단계에서 증가되었으며, 특히 10 Gy 조사 후 24, 48시간에 측정한 mRNA의 증가는 통계적으로 유의하였다. GEpC에 방사선조사 후 24시간에 측정한 MMP-2 활성형은 방사선량에 따라 증가하였으나 통계학적 유의성은 없었다. 그밖의 MMP-9, TIMP-2, t-PA와 u-PA는 아무런 변화를 나타내지 않았다. 결 론: 방사선에 의하여 GEpC에서 세포외 기질과 관련된 유전자 발현의 변화가 관찰되었으며 이는 방사선 신장손상에 GEpC가 관여함을 나타낸다.

인체 암세포주에서 방사선감수성의 지표간의 상호관계

박우윤,김원동,민경수,Park, Woo-Yoon,Kim, Won-Dong,Min, Kyung-Soo 대한방사선종양학회 1998 Radiation Oncology Journal Vol.16 No.2

목적 : 임상에서 발생빈도가 높은 위선암, 폐선암, 망막세포종, 자궁경부 편평상피암의 4가지 인 체암세포주(MKN-45, PC-14, Y-79, HeL)를 이용하여 방사선조사후 세포생존분획 및 세포생존곡선의 모양을 결정하는 지표를 구하고 방사선조사후 손상 회복정도를 측정하여 이들 여러 지표간의 상관관계 여부를 구명하기 위하여 본실험을 시행하였다. 대상 및 방법 :각 세포주의 방사선감수성을 보기 위하여 1, 2, 3, 5, 7 및 10Gy의 방사선을 1 회 조사하였고 방사선조사후 준치사손상 회복정도를 보기 위하여 5Gy씩 2회의 방사선조사를 0, 1, 2, 3, 4, 6 및 24시간 간격으로 시행하였다. 세포의 생존분획은 $Sperman-K\"{a}rbor$ 방법으로 세포집락형성능력을 측정하여 산출하였으며 생존곡선의 수학적 분석은 linear-quadratic(LQ), multitarget-single hit(MS) 모형과 mean inactivation $dose(\v{D})$를 이용하였다. 결과 : 방사선조사후의 세포생존 실험결과 2Gy에서의 세포생존분획(SF2)은 0.174에서 0.85까지 다양하게 나타났으며 Y-79는 유의하게 낮은 SF2를, PC-14는 높은 SF2를 나타내었다(p<0.05, t-test). LQ model로 분석한 방사선 세포생존곡선의 분석결과 Y-79, MKN-45, HeLa, PC-14에서 ${\alpha}$가 각각 0.603, 0.355, 0.275, 0.102이었고 ${\beta}$는 각각 0.005, 0.016, 0.025, 0.027이었다. MS model로 분석한 결과는 Y-79, MKN-45, HeLa, PC-14에서 Do가 각각 1.59, 1.84, 1.88, 2.52였고 n은 0.97, 1.46, 1.52, 1.69를 보였다. 한편 Gauss-Laguerre방법으로 계산한 $\v{D}$는 Y-79, MKN-45, HeLa, PC-14에서 각각 1.62, 2.37, 2.61, 3.95였다. SF2가 감소함에 따라 ${\alpha}$값은 증가하였고 Do, $\v{D}$값은 감소하였으며 이들간의 Pearson 상관계수는 각각 0.953, 0.993, 0.999였다. (p<0.05). 분할조사에 의한 준치사손상 회복정도는 약 4시간 내외에 포화상태에 도달하였으며 포화상태의 recovery ratio(RR)는 2에서 3.79 사이였다. RR은 방사선감수성의 지표인 SF2, ${\alpha}$, ${\beta}$, Do, $\v{D}$과 통계학적으로 유의한 상관관계를 나타내지 않았다. 결론 : 본 연구의 결과 네가지 인체상피암세포주의 내재적 발사선감수성은 서로 상이하였으며 Y-79가 가장 민감하였고, MKN-45와 HeLa는 각각 중등도의 방사선감수성을 나타냈으며 PC-14는 방사선감수성이 가장 낮았다. 이와같은 감수성의 차이는 SF2, ${\alpha}$, Do와 $\v{D}$의 차이로 나타났으며 띠들간에는 밀접한 상관관계를 나타내었다. 방사선에 의한 준치사손상 회복력은 MKN-45와 HeLa에서 높게 나타났고 회복력과 방사선감수성과는 무관하였다. 각 암세포주에 따르는 이와같은 지표들은 향후 방사선치료 효과를 높이기 위한 방사선생물학 실험의 기초 자료로서 이용되어 질 수 있을 것이다. Purpose : We conducted clonogenic assay using human cancer cell lines (MKN-45, PC-14, Y-79, HeLa) to investigate a correlation between the parameters of radiosensitivity. Materials and Methods : Human cancer cell lines were irradiated with single doses of 1, 2, 3, 5, 7 and 10Gy for the study of radiosensitivity and subrethal damage repair capacity was assessed with two fractions of 5Gy separated with a time interval of 0, 1, 2, 3, 4, 6 and 24 hours. Surviving fraction was assessed with clonogenic assay using $Sperman-H\"{a}rbor$ method and mathematical analysis of survival curves was done with linear-quadratic (LQ) , multitarget-single hit(MS) model and mean inactivation dose$(\v{D})$. Results : Surviving fractions at 2Gy(SF2) were variable among the cell lines, ranged from 0.174 to 0.85 The SF2 of Y-79 was lowest and that of PC-14 was highest(p<0.05, t-test). LQ model analysis showed that the values of $\alpha$ for Y-79, MKN-45, HeLa and PC-14 were 0.603, 0.356, 0.275 and 0.102 respectively, and those of $\beta$ were 0.005, 0.016, 0.025 and 0.027 respectively. Fitting to MS model showed that the values of Do for Y-79. MKN-45, HeLa and PC-14 were 1.59. 1.84. 1.88 and 2.52 respectively, and those of n were 0.97, 1.46, 1.52 and 1 69 respectively. The $\v{D}s$ calculated by Gauss-Laguerre method were 1.62, 2.37, 2,01 and 3.95 respectively So the SF2 was significantly correlated with $\alpha$, Do and $\v{D}$. Their Pearson correlation coefficiencics were -0.953 and 0,993. 0.999 respectively(p<0.05). Sublethal damage repair was saturated around 4 hours and recovery ratios (RR) at plateau phase ranged from 2 to 3.79. But RR was not correlated with SF2, ${\alpha}$, ${\beta}$, Do, $\v{D}$. Conclusion : The intrinsic radiosensitivity was very different among the tested human cell lines. Y-79 was the most sensitive and PC-l4 was the least sensitive. SF2 was well correlated with ${\alpha}$, Do, and $\v{D}$. RR was high for MKN-45 and HeLa but had nothing to do with radiosensitivity parameters. These basic parameters can be used as baseline data for various in vitro radiobiological experiments.

Correlation Between Response to Induction Chemotherapy and Subsequent Radiotherapy in Previously Untreated Patients with Squamous Cell Carcinomas of the Head and Neck

박우윤,류성렬,고경환,조철구,박영환,심윤상,오경균,이용식,Park Woo Yoon,Yoo Seong Yul,Koh Kyoung Hwan,Cho Chul Koo,Park Young Hwan,Shim Youn Sang,Oh Kyung Kyoon,Lee Yong Sik The Korean Society for Radiation Oncology 1990 Radiation Oncology Journal Vol.8 No.2

유도화학요법과 방사선치료후 종양 관해의 상호 관련성을 파악하고자 1986년부터 1989년까지 원자력병원에서 소정의 충분한 유도화학요법과 근치적 방사선치료를 받은 국소적으로 진행된 두경부 악성종양 환자 60예에 대한 후향적 분석을 시도하였다. 유도화학요법은 CDDP를 기본으로한 복합요법을 2 내지 3회 시행한바, 20예에서 Bleomycin+CDDP(BP), 37예에서 5-FU+CDDP(FP), 그리고 3예에서 BP/FP의 교대요법을 시행하였으며, 방사선은 병소에 따라서 65 Gy 내지 75 Gy 또는 그이상을 조사하였다. 유도화학요법에 의한 종양의 관해율은원발병소에서는 $80\%$(48/60), 경부임파절에서는 $79\%$(31/39)였으며, 약제, T-병기, 그리고 N-병기에 의한 통계적 유의성은 관찰되지 않았다. 방사선조사 6개월후 원발부위에서는 $67\%$(40/60)의 완전관해를, 경부임파절에서는 $77\%$(30/39)의 완전관해를 보인바, 이를 유도화학요법에 의한 관해 유무에 따른 차이를 분석한 결과 원발부위에서는 유도화학요법에 의한 관해(완전관해 또는 부분 관해)를 얻었던 48예중 39예에서 완전관해를 얻었으나($81\%$), 관해를 얻지못한 12예에서는 1예에서만이 방사선 치료에 의해 완전관해를 얻을 수 있었으며 ($8\%$) (p<0.0005), 경부임파절에서는 유도화학요법에 의해 관해를 얻었던 32예중 28예에서 완전관해를 얻은 반면 ($90\%$), 관해를 얻지 못한 8예에서는 2예에서만이 방사선 치료에 의해 완전관해를 얻을 수 있었던바($25\%$) (p<0.001), 모두 통계적으로 유의한 차이를 보였다. 한편 이를 원발부위, T-병기 그리고 N-병기에 따라 분석해본 결과, 특히 T-병기중 T3, 4에서는 유의한 차이가 관찰되었으나(p<0.0005), T1, 2에서는 유의한 차이가 관찰 되지 않았다(0.3<p), 따라서 유도화학요법과 방사선치료에 의한 종양의 관해 정도는 대체적으로 상호연관성이 관찰되고 있으나, 초기 병변에서는 이러한 현상이 관찰되지 않는바 유도화학요법에 의해 관해가 없더라도 방사선 치료에 의해 완전관해를 얻을 수 있을 것이다. To determine the correlation between the response to induction chemotherapy and subsequent radiotherapy we analyzed the clinical records of 60 patients with locally advanced carcinoma of the head and neck retrospectively who had completed a full course ($2\~3$ cycle) of induction chemotherapy and curative radiotherapy in Korea Cancer Center Hospital between 1986 and 1989. Chemotherapy was administeredd with CDDP+Bleomycin (BP) in 20, CDDP+5-FU (FP) in 37, and hybrid of BP and FP in three patients. Radiotherapy was giver conventionally with a dose of 65 to 75 Gy or more over seven to eight weeks according to the size of lesion. Response rates following induction chemotherapy were $80\%$ for the tumors and $879\%$ for the nodes whereas complete reponse rates were $12\%\;and\;13\%$, respectively. Six months after radiotherapy $67\%$ of the tumors and $77\%$ of the nodes achieved a complete response. Among the 48 tumor responders and the 31 nodal responders to chemotherapy,39 ($81\%$) and 28 ($90\%$), respectively, achieved complete response after radiotherapy. Thus, whether or not the tumor and node respond to induction chemotherapy was predictive of the response to subsequent radiotherapy (p<0.0005 in tumor, p<0.0001 in node). By reanalyzing according to disease subsets (i.e. primary site, T-stage, N-stage) this relationship was not observed at T1-T2 disease (p>0.3). Therefore the tumor or node's response to induction chemotherapy is a predictor for subsequent radiotherapy except in T1-T2 tumors, and complete response to radiotherapy can be expected despite the failure of induction chemotherapy in $T_1-T_2$ tumors.

췌장암의 방사선치료

박우윤,박찬일 한국의학사 1986 診斷과治療 Vol.6 No.7

백서 뇌종양 세포주에서 all―trans 레티노인산과 방사선의 병용에 의한 세포 생존능의 변화

박우윤 충북대학교 의학연구소 2002 忠北醫大學術誌 Vol.12 No.2

연구목적: 악성 뇌종양은 수술후 방사선치료가 주된 치료법이나 5년 생존율이 5% 이하로 새로운 치료법의 개발이 필요하다. 레티노인산은 세포의 분화를 유도하고 증식억제 효과가 있어 각종 암의 치료 및 예방에 사용되고 있다. all-trans 레티노인산 (all-trans retinoic acid: atRA)은 뇌종양세포의 증식억제 효과가 있는 것으로 알려져 있으나 atRA와 방사선치료의 병용에 대한 보고는 없다. 따라서 본 연구에서는 뇌종양세포에서 atRA와 방사선의 병용에 따른 세포생존능의 변화를 보고자 하였다. 대상 및 방법: 36B10 백서교종세포를 대상으로 방사선과 atRA를 병용하여 단일집락군형 성능을 측정하였다. 결과: 2.5 Gy 와 5 Gy에서 방사선 단독에 이한 세포 생존분획은 각각 0.44와 0.052 이었으나, atRA 50uM의 병용에 의해 각각 0.19, 0.017 로 감소되었다. 결론: atRA는 방사선에 의한 뇌종양 치료 효과를 증진시킬 것으로 기대된다. Purpose: The authors have attempted to analyze the effectiveness of making tuft and fixing the distal interphalangeal joint in extension with a K-wire in patients whose injured finger were left over 3 weeks without treatment for the tendinous mallet finger. Materials and Methods: Eleven fingers of eleven patients were analyzed who were treated operatively from August 1997 to March 2001. The average follow-up period was 7 months(3-9 months). The average age of the patients was 19 years(2 years 3 months-48 years). Four out of the 11 cases were children under age of 15. The average duration between injury and operation was 12 months(3 weeks-7 years). All cases were treated by only one surgeon(Seo, JB) and with same procedure, just cutting and reattaching the extensor tendon tightly(tuft) and fixing the joint in extension. Crawford method was used for evaluating the patients. Results: Ten out of eleven patients(91%) came out to be satisfactory according to Crawford method. Excellent in 7 cases, good in 3, fair in 1, respectively. Four patients whose duration between injury and surgery seemed to be too long(4 months, 9 months, 3 years, 7 years respectively), have not showed excellent results. Excellent results were reported in all children. On the contrary, the age of the patient who had the poorest result was 48 years(the oldest in our series). Which hands or which fingers were injured seemed to have not made any differences. So as the surgery was performed earlier and the patients were younger, the results were better. Conclusion: We advocate that it is possible to treat operatively and to get good results in patients with neglected mallet finger deformities. But it should be emphasized that the earlier the operation is performed, and the younger the patients are, the better the results are.

암세포에서 EGCG와 온열치료의 병용효과

박우윤 충북대학교 의학연구소 2006 忠北醫大學術誌 Vol.16 No.1

-본문참고-