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        사상성 진균 Aspergillus nidulans에서 forkhead 유전자인 fkhF의 구조와 기능 분석

        박미혜,김현영,김종화,한갑훈,Park, Mi-Hye,Kim, Hyoun-Young,Kim, Jong-Hwa,Han, Kap-Hoon 한국미생물학회 2009 미생물학회지 Vol.45 No.4

        Genome analysis of a model filamentous fungus, Aspergillus nidulans, revealed that there are six putative forkhead genes. Among them, fkhF (AN8949.2) showed A. nidulans-specific. fkhF gene is located in chromosome VII and composed of 2,337 bp coding region for 778 amino acid. Since little is known about the involvement of the forkhead proteins in the developmental process of the filamentous fungi, including A. nidulans, we generated a deletion mutant of fkhF gene and analyzed. Deletion of fkhF resulted in less-dense conidiophore formation in a solid culture. However, the sexual developmental process or cleistothecia formation was normal. Furthermore, fkhF deletion mutant produced conidiophores and conidia under the submerged culture, suggesting that the fkhF gene is involved in repression of inappropriated induction and maturation of asexual developmental process but not in sexual development. 사상성 모델 진균인 Aspergillus nidulans에 존재하는 forkhead 유전자들의 구조와 기능을 체계적으로 연구하기 위해 유전체 분석을 통해 forkhead 도메인을 가지고 있는 6개의 forkhead 유전자를 발견하였다. 이들 중 4개의 유전자들은 다른 진균에서 발견되는 forkhead 유전자들과 전반적인 유사성이 있었으나, 2개의 유전자들은 다른 종에서는 보존되어있지 않은 A. nidulans 특이적인 유전자들이었다. A. nidulans 특이적 forkhead 유전자들 중 하나인 fkhF(AN8949.2) 유전자는 염색체 7번에 위치하고 있고, ORF는 2,337 bp로 구성되어 있으며 778개의 아미노산을 암호화하고 있는 것으로 추정되었다. 예상되는 FkhF 단백질의 N-말단 부위에 보존된 forkhead 도메인을 가지고 있었으며, 이 유전자의 기능을 분석하기 위해 유전자제거 돌연변이 균주를 제조하였다. fkhF 유전자 결손돌연변이주는 유성분화 유도 조건 등을 포함한 여러 고체배지 배양 조건에서 유성분화에는 영향을 미치지 않았으나 무성포자병(conidiophore)의 생성 밀도와 성숙도에 영향을 주는 것으로 관찰되었고, 야생형과 달리 진탕배양시에 무성포자병을 형성함이 관찰되었다. 이는 fkhF 유전자가 A. nidulans의 부적절한 무성분화를 억제하고 정상적인 무성포자 성숙과정에 관여하는 유전자라는 것을 보여준다.

      • KCI등재

        가교결합 아피오스 전분의 이화학적 특성

        박미혜(Mi Hye Park),김미라(Meera Kim) 동아시아식생활학회 2014 東아시아食生活學會誌 Vol.24 No.3

        본 연구에서는 아피오스로부터 전분을 추출하여 epichlorohydrin으로 가교결합을 시킨 후 가교결합 아피오스 전분의 이화학적 특성을 분석하였다. 가교결합 아피오스 전분은 치환도가 증가함에 따라 몰가교화도가 0.1225에서 3.5124로 비례적으로 증가하였으며, FT-IR을 측정한 결과, CLAP-2%는 에테르 결합으로 인하여 1,646 ㎝<SUP>?1</SUP>과 2,930 ㎝<SUP>?1</SUP>에서 피크의 강도가 강해져 가교결합 반응이 이루어졌음을 확인할 수 있었다. 천연 아피오스 전분의 X-선 회절도는 2θ=15.1, 17.1, 17.9, 23.2°에서 피크가 나타나는 전형적인 A형 전분 형태를 나타내었으며, 가교결합 아피오스 전분은 가교화에 의해 회절도와 상대결정화도에 큰 변화를 보이지 않아 무결정 영역에서 가교결합 반응이 일어난 것으로 추정되었다. 아피오스전분 입자를 SEM으로 관찰한 결과, 전분 입자는 구형 또는 타원형 모양을 나타내었으며, 가교결합 아피오스 전분은 천연 아피오스 전분과 비교하였을 때 전체적인 형태에는 변화가 없는 것이 관찰되었다. 색도는 가교결합이 진행되면서 명도와 청색도가 변화하였으며, 청가는 천연 아피오스 전분과 가교결합 아피오스 전분 사이에 유의적인 차이가 나타나지않았다. Apios (Apios americana Medikus) belongs to Leguminosae and is called ‘American groundnut’, ‘Potato bean’, and ‘wild bean’. Apios is native to the Northern United States but is not widely distributed in Korea. In this study, cross-linked apios starch was prepared by reaction with epichlorohydrin, followed by characterization. FT-IR spectroscopy confirmed the degree of cross-linking of apios starch. X-ray diffraction patterns of native apios showed typical ‘A’ type as peaks at 15.1, 17.1, 17.9 and 23.2°, and cross-linking did not affect relative crystallinity and X-ray diffraction patterns of the starch. Scanning electron micrographs showed that apios starch granules were smooth with a globular shape, and there was little damage to starch granules after cross-linking. The lightness value of cross-linked apios starch was lower than that of native apios starch, whereas the redness value was not significantly different between cross-linked apios starch and native apios starch. Blue value showed that cross-linking of starch did not affect the iodine reaction of starch.

      • KCI등재

        백합 구근 추출물의 항산화 활성 및 인체 암세포에 대한 독성효과

        박미혜(Mi Hye Park),김미라(Meera Kim) 동아시아식생활학회 2018 東아시아食生活學會誌 Vol.28 No.6

        본 연구에서는 백합 구근의 기능성 식품 소재로서의 이용 가능성을 확인하기 위하여 백합 구근을 에탄올과 물로 추출하여 추출물을 제조한 후, 각 추출물의 총 폴리페놀 함량, 총 플라보노이드 함량, 항산화 활성 및 암세포에 대한 세포독성을 측정하였다. EL은 WP보다 총 폴리페놀과 총 플라보노이드를 더 많이 함유하고 있는 것으로 나타났으며, DPPH 라디칼 소거능에서는 50∼1,000 μg/mL의 농도에서 EL의 DPPH 라디칼 소거능이 WL보다 유의적으로 높게 나타났다. ABTS 라디칼 소거능 측정에서도 EL이 WL에 비해 높은 라디칼 소거능을 보여 DPPH 라디칼 소거능 실험 결과와 일치하였으며, 1,000 μg/mL에서 83.93%의 높은 ABTS 라디칼 소거능을 보였다. 백합 구근 추출물의 인체 암세포에 대한 세포독성 효과를 측정한 결과, MTT assay에서 EL과 WL은 400 μg/mL에서 HeLa에 대해 90% 이상의 높은 세포독성을 나타내었으며, EL은 A549과 Hep3B에 대해서도 400 μg/mL의 농도에서 94.14%와 83.07%의 높은 세포독성을 나타내 암세포 증식억제 효과가 우수함을 보여주었다. SRB assay에서도 EL은 400μg/mL 농도에서 HeLa에 대해 91.57%의 높은 세포독성을 보였고, 암세포에 대해 모든 농도에서 WL보다 EL이 유의적으로 높은 세포독성을 나타내었다. 이상의 연구결과를 볼 때, 백합 구근 에탄올 추출물은 높은 항산화 활성 및 암세포에 대한 우수한 증식 억제 효과를 가지고 있는 것으로 확인되어 기능성 식품 소재로서 이용 가능성이 높을 것으로 보인다. Lilium davidii has been used as a traditional herbal medicine to treat bronchitis and neuralgia in Asia. This study investigated the antioxidant activities and cytotoxicities of ethanol extract (EL) and hot-water extract (WL) of dried Lilium davidii root. Antioxidant activities of the Lilium davidii extracts were evaluated by 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay and 2-2-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS) assay. Antioxidant activities of the EL and WL were concentration-dependent in both methods, and EL showed higher antioxidant activity than WL in both assays. In addition, the total polyphenol and flavonoid contents of EL (104.44 mg GAE/g and 22.92 mg QE/g) were higher than those of WL (86.80 mg GAE/g and 15.87 mg QE/g). Cytotoxicities of the extracts in human cancer cells (HeLa, Hep3B, and A549) were evaluated by thiazoly blue tetrazolium bromide (MTT) and sulforhodamine B (SRB) assays. The cytotoxicity of EL in the tested cancer cells was higher than that of the WL. In particular, the cytotoxicity of EL in HeLa cells in the MTT and SRB assays was 92.19% and 91.57% at 400 μg/mL, respectively. Additionally, the extracts showed strong inhibitory effects on cancer cell growth. Overall, the results of this study suggest that EL has excellent antioxidant activity and cytotoxicity, making it a valuable resource for the development of natural functional materials.

      • KCI등재

        대학생의 소비행복 실천 수기의 질적분석과 함의

        박미혜(Park, Mi Hye) 한국생활과학회 2014 한국생활과학회지 Vol.23 No.5

        This study is to analyze essays on the practices of consumption happiness which the students who took the class ‘consumption and happiness’ wrote. To do this, 108 essays which the students submitted in both semesters in 2013 were analyzed qualitatively. As a result, the 4 themes such as ‘reflection on the life of consumption’, ‘practices’, ‘changes’, ‘recognized meanings of the class’ were extracted. Firstly, some students were reflective on their acts of consumption in everyday life. They have consumed in an undisciplined, unthoughtful manner and have experienced various negative emotions in their consumption, and have the motive of change. Secondly, the study showed the consumption of clothes, eating, house, leisure, body, digital, wedding is variously included in their practices of consumption. In the category of common practices, ‘sharing consumption giving a bigger happiness’, ‘sustainable consumption caring about the earth and the next generation’, ‘smart consumption through discipline’, ‘responsible consumption considering community and producer’, ‘field trips and consumption of experience as learning’ are included, and ‘meaningful feeling of happiness through practices’ are extracted. Thirdly, they have experienced positive changes such as reduction in consumption desire and increased concern with mind, relationship and conscious consumption. Fourthly, students think of the class as a necessary, useful, practical subject, and have a precious opportunity to learn many aspects they dont think about before, and dont practice, and say that they persistently continue to practice. Therefore, to promote the happiness as a consumer and consumer citizen leader in the society, its necessary to offer a related class in more universities.

      • KCI등재

        창출과 영지버섯 균사체 발효 추출물의 항산화 활성 및 인체 암세포주에 대한 세포독성 분석

        박미혜 ( Mi Hye Park ),김미라 ( Mee Ra Kim ) 한국식품영양학회 2017 韓國食品營養學會誌 Vol.30 No.3

        Ganoderma lucidum has been traditionally used as a medicine for treatment of bronchitis, arthritis, and high blood pressure, and it has been reported to display many biological activities including anticancer and immune activities. Since mushroom mycelium is known to have excellent biological activities together with mushroom fruiting body, studies on biological activities of mushroom mycelium have been actively conducted. Thus, the present study compared the biological activities before and after the cultivation of Ganoderma lucidum mycelium on Atractylodes rhizoma. When the radical scavenging activity was assessed by the DPPH assay, ARGL (ethanol extract of Atractylodes rhizoma mycelium fermented with Ganoderma lucidum) showed radical scavenging activity of 5.58~82.56% at concentrations of 10~500 μg/assay, while AR (ethanol extract of Atractylodes rhizoma) showed radical scavenging activity of 5.27~72.08% at the same concentrations. When measured by using the ABTS assay, ARGL showed higher radical scavenging activity than AR, which was consistent with the result obtained by the DPPH assay. In the MTT assay, the cytotoxicity of ARGL against all cell lines was higher than that of AR. In particular, the cytotoxicities of AR and ARGL against Hep3B at a concentration of 400 μg/assay were 71.81% and 86.40%, respectively. In addition, the result obtained by the SRB assay was consistent with the result obtained by the MTT assay. According to the results mentioned above, there is a high probability that medicinal herb cultures using mycelium can be used as sources of functional foods since the cytotoxicities against cancer cells and antioxidant activities increased when the mycelium was fermented with Atractylodes rhizoma.

      • KCI등재

        청각장애학생의 통합교육에 대한 초등학교 교사의 인식과 경험

        박미혜 ( Park Mi-hye ),권순우 ( Kwon Soon-woo ) 대구대학교 한국특수교육문제연구소 2020 특수교육저널 : 이론과 실천 Vol.21 No.4

        [목적] 본 연구는 청각장애학생의 바람직한 통합교육을 위하여 초등학교 교사의 인식과 경험을 통한 현재 통합교육의 개선 과제를 알아보는 연구이다. [방법] 이를 위해 청각장애학생을 담당하거나 담당했던 초등학교 교사 10명과 개별적인 면담을 실시하였고, 현상학적 접근을 바탕으로 인간이 가지는 경험의 의미와 본질을 탐구하고 다양한 현상 안에 내포된 깊은 의미까지 탐색하고자 하였다. [결과] 본 연구의 결과를 요약해 보면 다음과 같다. 첫째, 청각장애학생의 통합교육에 대한 초등학교 교사의 인식에서는 연구참여자들은 통합교육에 대한 긍정적인 인식과 필요성을 가지고 있었지만 청각장애학생 지도의 한계를 경험하였고, 이에 전문적인 연수의 필요성을 인식하면서 담임교사로서의 다양한 노력과 지원의 한계를 인식하는 4가지 과정으로 범주화하였다. 이를 통해 연구참여자들이 청각장애학생 지도에 더 나은 교사로 변화를 소망하는 과정을 탐색할 수 있었다. 둘째, 청각장애학생의 통합교육 개선 과제는 4가지로 범주화하였다. 연구참여자들은 청각장애학생의 의사소통 개선이 가장 우선 시 되어야 하는 부분으로 인식하였고, 청각장애학생의 사회성 증진을 위한 소통의 장을 마련할 필요성을 탐색할 수 있었다. [결론] 현재 교사양성 체제 변화가 필요함을 시사하였으며, 또한 청각장애자녀에 대한 수용 및 홀로 서기 지원, 국가의 질적이고 안정적인 특수교육 지원 및 전문 인력 확보 등을 제시하였다. [Purpose] The purpose of this study is to find out the current improvement tasks through elementary school teachers’ perception and experience for the desirable inclusive education of students with the hearing impairment. [Method] For this study, ten classroom elementary school teachers having experienced teaching students with hearing impairment in general elementary schools were participated in the study by using the method of individual in-depth interview. Based on the phenomenological approach, it’s to explore the meaning and nature of human experiences, the deep meanings contained within various phenomena. [Results] The results of this study are summarized as follows. First, in the elementary school teachers' perception of hearing impaired students, that was categorized into a four-step process that participants had positive perception and necessity of the full inclusive education for the hearing impaired students, but they experienced the limitation of teaching skills, so they felt to need the professional training. And also as the main teacher for hearing impaired students, they had tries many things for them but they recognized the limitation of supports for them. Through this process, it showed that participants hoped to be changed to be a better teacher for the hearing impaired students. Second, the improvement tasks of full inclusive education for students with hearing impairments were categorized into a four-step process. participants recognized that the most important thing for them was to improve communication ability, and to make communication place for improving social skills of the students with hearing impairment. [Conclusion] suggesting that there’s a need for the change of the teachers’ training system, supports of acceptance and standing alone for the hearing impaired children, national supports for qualified and stable special education, expanded professional personnel employment.

      • KCI등재

        임신말기 자간전증 산모와 정상 산모의 태반에서 Superoxide Dismutase활성화 및 Superoxide Dismutase Genetic Polymorphism에 관한 연구

        박미혜 ( Mi Hye Park ),김영주 ( Young Joo Kim ),안정자 ( Jung Ja Ann ),김종일 ( Jong Il Kim ),전선희 ( Sun Hee Chun ) 대한주산의학회 2006 大韓周産醫學會雜誌 Vol.17 No.2

        목적 : 자간전증 산모 및 정상산모에서 산화적 스트레스의 민감한 생물학적 표지물질인 소변내 malondialdehyde (MDA)와 태반내의 항산화제인 망간 superoxide dismutase (Mn-SOD) 활성도 및 태반내 Mn-SOD 유전자 다형성증 차이를 비교분석 하고자 한다. 방법 : 임신 제3삼분기 산모중 자간전증 산모 20예와 정상 산모 20예를 대상으로 산모의 소변 및 분만후 태반을 채취하였다. 소변내 MDA은 high performance liquid-chromatography (HPLC)에 의하여 측정되었고 태반내의 Mn-SOD 활성도는 Western blotting으로 태반내 Mn-SOD 유전자 다형성증은 RCR-RFLP기법으로 분석되었다. 통계적 분석은 Student`s t-test와 Chi-square가 사용되었다. 결과 : 1) 자간전증 산모의 소변내 MDA 농도(4.43±2.37 ug/g)는 정상 혈압산모의 농도(4.39±1.17 ug/g)와 유의한 차이가 없었다(p>0.05). 2) 자간전증산모의 태반내 Mn-SOD 활성도는(1.04±0.04 U/ml protein)는 정상 혈압산모의 활성도(1.44±0.34U/ml protein)에 비해 떨어져 있는 경향을 보였으나 통계적으로 유의한 차이가 없었다(p>0.05). 3) 태반에서 확인된 Mn-SOD 유전자 다형성 양상은 자간전증산모와 정상 혈압산모에서 유의한 차이가 없었다(x2=0.06, p>0.05). 결론 : 자간전증 산모 및 정상산모사이에서 산화적 스트레스의 민감한 생물학적 표지물질인 소변내 malondialdehyde (MDA)와 태반내의 항산화제인 Mn-SOD 활성도 및 태반내의 Mn-SOD의 유전자적 다형성사이의 차이점이 보이지 않아 산소스트레스가 임신중독증의 병태생리에 중심이라는 명확한 증거는 얻지 못했다. 하지만 향후 더 많은 자간전증 산모를 대상으로 산화적 스트레스에 대한 더 많은 연구가 이루어져야 하겠다. Objective: Our purpose was to investigate urinary malondialdehyde (MDA), manganese superoxide dismutase (Mn-SOD) activity and polymorphism in placental tissues of women with preeclampsia and to evaluate oxidative stress in the pathophysiology of preeclampsia. Methods: Urins and placental tissues were obtained from 20 normal and 20 preeclamptic women at 3rd trimester. Urinary MDA was assayed by an high performananec liquid chromatography (HPLC). The placental Mn-SOD activity was assayed by westen blotting and The placental Mn-SOD genotyping was assayed by PCR-RFLP. Data were analyzed statistically using Student`s t-test and Chi-square test. Results : 1) Urinary concentration of MDA was not significantly different in preeclampsia (4.43±2.37 ug/g) as compared with normotensive pregnancy (4.39±1.17 ug/g). 2) Preeclamptic women had similar Mn-SOD activity in placenta (1.04±0.04 U/mL protein) as compared with normotensive pregnancy (1.44±0.34 U/mL protein). 3) No significant difference in the polymorphismthe of Mn-SOD genotype in placenta was observed between preeclampsia and normotensive pregnancy (x2=0.06, p>0.05). Conclusion : The findings in this study do not show that oxidative stress might be a pathogenetically relevent process causally contributing to the disease, and polymorphism in the Mn-SOD genotype in placenta do not seem to be risk factors for preeclampsia.

      • KCI등재후보

        보문 : Aspergillus nidulans forkhead 유전자 fkhE의 구조와 기능 분석

        박미혜 ( Mi Hye Park ),김현영 ( Hyoun Young Kim ),김종화 ( Jong Hwa Kim ),한갑훈 ( Kap Hoon Han ) 한국균학회 2010 韓國菌學會誌 Vol.38 No.2

        A homothallic filamentous fungus Aspergillus nidulans has been used as the a model organism for studying growth and development for eukaryotic system. Various studies about specific transcription factors have been performed for elucidating the molecular mechanisms of growth, asexual and sexual developmental processes. Among them, the fkhE gene (AN2025.3) is located in chromosome VII and contains an ORF encoding 718 amino acid polypeptide intervening with two short introns. The cDNA sequencing revealed that at least four types of alternative splicing events were occurred when the fkhE gene was transcribed. The putative FkhE polypeptide contains a conserved forkhead domain and a bipartite nuclear localization signal at it`s N-terminus and C-terminus, respectively. Deletion of fkhE resulted in impaired conidiophore formation in a solid medium. However, the sexual developmental process or cleistothecia formation was normal. Furthermore, fkhE deletion mutant produced conidiophores and conidia under the submerged culture, indicating that the fkhE gene is involved in asexual developmental process similar to the fkhF gene.

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