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효소의 전기영동에 의한 trichoderma속 균의 종내, 종간 잡종의 동정
민경렴,박희문,하영칠 한국미생물학회 1989 미생물학회지 Vol.27 No.1
In order to evaluate the applicability of enzyme electrophoresis for the identification of intra/interspecific hybride obtained by the protoplast fusion in Trichoderma, soluble proteins, intracellular soluble enzymes and extracellular $\beta$-glucosidase were analyzed by polyacrylamide gel electrophorsis. As the results, patterns of soluble protein, and isozyme patterns of peroxidase, malate dehydrogenase, and $\beta$-glucosidase in hydrids were defferent from those in parental and wild type strains. Therefore, it was established that the analysis of protein pattern by electrophoresis could be applied to isolate and identify the hybrids from the protoplast fusion.
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분리 핵을 이용한 Trichoderma koningii의 형질전환
민경렴,박희문,하영칠,정재훈 충남대학교부설 생명공학연구소 1991 생물공학연구지 Vol.1 No.-
Trichoderma koningii의 영양요구성 돌연변이주인 CUT 121로부터 얻은 원형질체를 야생형인 ATCC 26113의 핵과 혼합하여 PEG 용액을 처리한 결과, 독립영양형의 형질전화체가 30% 이상의 빈도로 생성되었다. 이 독립영양형 군체로부터 얻은 분리체 중의 하나는 xylanase의 활성이 야생형보다 3배 가량 증진되었으며, 다른 세포외 다당류 분해효소능도 야생형과 유사한 수준을 나타내었다. 분리체의 DNA 함량, 인위적인 분리양상 및 동위효소 양상 등을 조사 분석한 결과, 독립영양형의 형질전환체는 실험에 사용된 두 핵간의 유전물질교환에 의하여 생성된 형질전환체로 판명되었다. 이상의 결과로부터 Trichoderma속 균류의 균주개량법으로, 핵전이법이 통상의 원형질체 융합법보다 효율적인 것으로 판명되었다. When protoplasts from auxotrophic mutant of Trichoderma koningii CUT121(Lys^-, Met^-) were mixed with isolated nuclei of wild type T. koningii ATCC 26113 and treated with PEG solution, protrophic colonies were produced with frequency of more than 30 percent. One of segregants from prototrophic colonies showed increased xylanase activity and other polysaccharide-hydrolyzing activities comparable to those of wild type strain. Through measurement of DNA contents, induced segregation, and analysis of isozyme patterns, it was revealed that the prototrophic colonies were transformants resulted from exchange of genetic materials between the two kinds of nuclei used. These results suggest that nuclei transfer technique is more efficient than conventional protoplast fusion technique for strain improvement of Trichoderma species.
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분리 핵을 이용한 Trichoderma koningii의 형질전환
민경렴,박희문,하영칠,정재훈 한국산업미생물학회 1990 한국미생물·생명공학회지 Vol.18 No.6
Trichoderma koningii의 영양요구성 돌연변이주인 CUT 121로부터 얻은 원형질체를 야생형인 ATCC26113의 핵과 혼합하여 PEG용액을 처리한 결과, 독립영양형의 형질전환체가 30% 이상의 빈도로 생성되었다. 이 독립영양형 군체로부터 얻은 분리체 중의 하나는 xylanase의 활성이 야생형보다 3배 가량 증진되었으며, 다른 세포외 다당류 분해효소능도 야생형과 유사한 수준을 나타내었다. 분리체의 DNA 함량, 인위적인 분리양상 및 동위효소 양상 등을 조사 분석한 결과, 독립영양형의 형질전환체는 실험에 사용된 두 핵간의 유전물질 교환에 의하여 생성된 형질전환체로 판명되었다. 이상의 결과로부터 Trichoderma 속 균류의 균주개량법으로, 핵전이법이 통상의 원형질체 융합법보다 효율적인 것으로 판명되었다. When protoplasts from auxotrophic mutant of Trichoderma koningii CUT121(Lys^-, Met^-) were mixed with isolated nuclei of wild type T. koningii ATCC 26113 and treated with PEG solution, protrophic colonies were produced with frequency of more than 30 percent. One of segregants from prototrophic colonies showed increased xylanase activity and other polysaccharide-hydrolyzing activities comparable to those of wild type strain. Through measurement of DNA contents, induced segregation, and analysis of isozyme patterns, it was revealed that the prototrophic colonies were transformants resulted from exchange of genetic materials between the two kinds of nuclei used. These results suggest that nuclei transfer technique is more efficient than conventional protoplast fusion technique for strain improvement of Trichoderma species.
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Triton X-100이 Trichoderma koningii의 성장 및 형태에 미치는 영향
박희문,민경렴,맹필재,하영칠 충남대학교부설 생명공학연구소 1992 생물공학연구지 Vol.2 No.-
Triton Ⅹ-100이 Trichoderma koningii의 성장 및 형태에 미치는 영향을 조사하기 위하여, Triton Ⅹ-100 첨가 여부에 따른 각 종 성장계수의 변화를 조사하여 보았다. 액체 배양시 Triton Ⅹ-100의 첨가에도 불구하고, specific growth rate과 doubling time은 변화가 없었으나, Triton Ⅹ-100을 첨가한 경우, 군체의 방사상 성장률이 감소하였다. 이러한 현상은 Triton Ⅹ-100에 의하여 균사의 분지 형성이 촉진되고, 격막형성이 촉진되어 격막 간의 간격이 짧아져 나타나는 것으로 확인되었다. We investigated the effect of Triton Ⅹ-100 on the growth and morphology of Trichoderma koningii by comparing various parameters representing the growth of mold in the presence or absence of Triton Ⅹ-100. The specific growth rate and doubling time of T. koningii were not affected by the addition of 0.05% Triton Ⅹ-100 into solid medium also resulted in decrease in the colony radial growth rate and this response was correlated with the formation of mycelia which showed increase in branching and septation in the presence of Triton Ⅹ-100.
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Triton X-100이 Trichoderma koningii의 성장 및 형태에 미치는 영향
박희문,민경렴,맹필재,하영칠 한국미생물학회 1991 미생물학회지 Vol.29 No.5
We investigated the effect of Triton X-100 on the growth and morphology of Trichoderma koningii by comparing various parameters representing the frowth of mold in the presence or absence of Triton X-100. The specific growth rate and doubling time of T. koningii were not affected by the addition of 0.05% Triton X-100 in batch culture. However, in the presence of Triton X-100, cultures reached its stationary phase earlier and showed reduced level in total yield of biomass. The addition of Triton X-100 into solid medium also resulted in decrease in the colony radial growth rate and this response was correlated with the formation of mycelia which showed increase in branching and septation in the presence of Triton X-100.
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