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PCR을 이용한 국내시장에 유통중인 유전자재조합 콩 및 가공식품의 모니터링
김묘영,김재환,김현중,박선희,우건조,김해영,Kim, Myo-Young,Kim, Jae-Hwan,Kim, Hyun-Joong,Park, Sun-Hee,Woo, Geon-Jo,Kim, Hae-Yeong 한국응용생명화학회 2003 한국농화학회지 Vol.46 No.4
본 연구에서는 PCR을 이용하여 국내시장에 유통중인 원료콩과 가공식품에 epsps 또는 pat 유전자가 삽입된 유전자재조합 콩(GMS)의 사용여부를 모니터링하였다. 이러한 GMS의 검출을 위해 3쌍의 primer set을 제작하였고, 각각의 primer들은 GMS에 삽입된 유전자와 특이적으로 반응하여 PCR산물을 생성하였다. 2001년 표시제가 시행되기 이전에 생산된 콩 가공식품과 이후의 제품에 대해 각각 모니터링을 수행하였으며, 표시제 이전에 생산된 제품의 경우 대부분의 미국산 원료에서 epsps가삽입된 CMS가 검출되었으나, 표시제 이후에는 검출되지 않았다. A method using PCR was developed for the monitoring of genetically modified soybean (GMS) and GMS derived foods utilized in the market. We designed 3 pairs of specific oligonucleotide primers based on epsps and pat inserted in GMS and ferritin gene as internal standards. Template DNAs isolated from soybean and processed foods were used for multiplex PCR with 3 primer sets. PCR, used with specific primer sets for GMS detection, showed the amplified DNA fragments with GMS template DNA. In this study, GMS containing epsps was detected from soy processed foods manufactured before GM food labeling system, however, GMS containing epsps or pat was not detected from soy processed foods manufactured after GM food labeling system.
PCR을 이용한 국내시장에 유통중인 유전자재조합 콩 및 가공식품의 모니터링
김묘영,김재환,김현중,박선희,우건조,김해영 한국응용생명화학회 2003 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.46 No.4
본 연구에서는 PCR을 이용하여 국내시장에 유통중인 원료콩과 가공식품에 epsps 또는 pat 유전자가 삽입된 유전자재조합 콩(GMS)의 사용여부를 모니터링하였다. 이러한 GMS의 검출을 위해 3쌍의 primer set을 제작하였고, 각각의 primer들은 GMS에 삽입된 유전자와 특이적으로 반응하여 PCR산물을 생성하였다. 2001년 표시제가 시행되기 이전에 생산된 총 가공식품과 이후의 제품에 대해 각각 모니터링을 수행하였으며, 표시제 이전에 생산된 제품의 경우 대부분의 미국산 원료에서 esps가 삽입된 GMS가 검출되었으나, 표시제 이후에는 검출되지 않았다. A method using PCR was developed for the monitoring of genetically modified soybean (GMS) and GMS derived foods utilized in the market. We designed 3 pairs of specific oligonucleotide primers based on epsps and pat inserted in GMS and ferritin gene as internal standards. Template DNAs isolated from soybean and processed foods were used for multiplex PCR with 3 primer sets. PCR, used with specific primer sets for GMS detection, showed the amplified DNA fragments with GMS template DNA. In this study, GMS containing epsps was detected from soy processed foods manufactured before GM food labeling system, however, GMS containing epsps or pat was not detected from soy processed foods manufactured after GM food labeling system.
PCR 방법과 면역학적 분석법을 이용한 두부와 비지에서 GM 콩의 검출법
김묘영,김해영,김재환 한국응용생명화학회 2005 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.48 No.1
To monitor GM soybean in soybean processed foods, tofu and biji, we prepared tofu and biji containing 0%,1%, 3%, 5% and 100% GM soybean, respectively. We examined epsps gene inserted in soybean by PCR and EPSPS protein expressed in soybean using western blotting and lateral flow strip test to compare the sensitivity of these methods. A PCR product of 123 bp inserted in GM soybean was detected in all tofu and biji containing 1%, 3%, 5% and 100% GM soybean with the exception of 0% samples; however, the size of 600 bp inserted in GM soybean was only detected in tofu containing 100% soybean and in biji containing 5% and 100% soybean. In the protein level, GM soybean product was only detected in tofu and biji containing 100% GM soybean by western blotting. In addition, only biji containing 100% GM soybean was detected by lateral flow strip test. We concluded that in order to detect GM soybean efficiently in processed food, the PCR method is more sensitive than immunological methods. With the PCR method, small size product with approximately 100 bp in PCR product is sensitive to detect GM soybean in processed foods.
PCR을 이용한 식품 내 Salmonella 균주의 신속 검출방법
정상훈,김묘영,김현중,김태운,유상렬,김해영,Jung, Sang-Hun,Kim, Myo-Young,Kim, Hyun-Joong,Kim, Tae-Woon,Ryu, Sang-Ryeol,Kim, Hae-Yeong 한국응용생명화학회 2003 한국농화학회지 Vol.46 No.3
여러 종류의 식품에서 Salmonella 균주를 손쉽고 빠르게 검출하기 위하여, Salmonella 장독소 유전자(stn)를 기초로 제작한 primer (STN1, STN2)를 이용하여 PCR을 수행한 결과 617 hp의 특이적인 DNA단편을 얻을 수 있었다. PCR 민감도는 순수 배양한 균체에서 추출한 template DNA는 1 pg까지 검출이 가능하였고, 직접 균체를 template로 이용한 경우에는 $10^2\;cells$까지 검출이 가능하였다. Salmonella typhimurium을 인위적으로 접종시킨 식품에서는 식품 1 g당 $10^3{\sim}10^4$ cells까지 검출할 수 있었다. 이러한 결과는 PCR을 이용하여 Salmonella에 오염된 식품에서 이들 균주를 간편하고 신속하게 검출할 수 있을 것이다. This study was carried out to investigate the simple and rapid detection of Salmonella species in different kinds of food using PCR method. The specific primer sets (SIN1 and SIN2) was designed and utilized to amplify a 617 bp DNA fragment from salmonella species. The sensitivity of PCR was 1 pg of purified template DNA or $10^2$ cells from pure culture. The detection limit of Salmonella typhimurium on agarose gel electrophoresis was $10^3{\sim}10^4$ cells/g in the artificially contaminated food samples. These results suggested that this simple method could be applied to industrial fields for detection of Salmonella species in food.