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MC3T3-E1 조골세포의 분화와 무기질화에 대한 우유 유래 Extracellular Vesicles의 효과
권재희(JaeHee Kwon),서현주(Hyun-Ju Seo),권인숙(In-Sook Kwun),백문창(Moon-Chang Baek),조영은(Young-Eun Cho) 한국식품영양과학회 2022 한국식품영양과학회지 Vol.51 No.11
현재 골다공증 예방 및 치료에 사용되는 bisphosphonate와 estrogen은 파골세포의 활성을 지연시켜 뼈 재흡수를 억제하는 약물로써는 유효하나 이미 소실된 뼈 질량을 회복시킬 수는 없다. 또한 만성 질환인 골다공증에 약리학적 치료를 위한 약물보다는 천연 및 무독성의 식품 단백질에 의한 치료가 골다공증의 예방 및 치료에 더 유효한 방법이 될 수 있다. 따라서 본 연구에서는 MC3T3-E1 전조골세포을 이용하여 우유 유래 extracellular vesicles(EVs)가 조골세포의 분화 및 무기질화에 미치는 영향을 확인하였고, 골다공증과 같은 골질환을 예방 및 치료할 수 있는 효과적이고 안전한 소재임을 조사하였다. 우유 유래 EVs를 분화배지에 0, 1, 5, 10 μg/mL 농도가 되도록 제조하여 MC3T3-E1 세포에 처리하여 3일 및 7일 동안 배양하였고 ALP 활성도, Von Kossa 및 alizarin red 염색법 등에 의해 조골세포의 활성 변화를 분석하였다. 초원심분리에 의해 분리된 우유 유래 EVs의 평균 직경은 156±2.5 nm였으며, EV 관련 마커 단백질인 CD63 및 유청단백질 특이적 마커인 락토페린의 존재를 immunoblot 분석을 통해 확인하였다. MTT 분석 결과는 우유 유래 EVs가 3일째에 조골세포 증식을 증가시키는 것으로 나타났다. 세포 외 ALP 활성은 3일째에 우유 유래 EVs 농도가 증가함에 따라 유의하게 증가하였다. Von Kossa 및 alizarin red 염색 결과 우유 유래 EVs 처리 후 3일 및 7일에 용량 의존적 방식으로 광물화된 결절이 유의하게 증가하였다. 본 연구 결과에서 우유 유래 EVs가 조골세포의 증식, 분화 및 광물화를 자극하여 골다공증과 같은 골 질환을 예방 및 치료할 수 있는 안전한 소재로서의 가능성을 확인하였다. Osteoporosis, which is caused by the structural weakness of bone tissue, is a systemic skeletal disease that decreases bone mass and increases the risk of fractures. For the aging population, osteoporosis is a major cause of morbidity and health expenditure. The objective of the present study was to investigate the potential anti-osteoporotic properties of cow milk-derived extracellular vesicles (EVs) on the differentiation and mineralization in osteoblastic MC3T3-E1 cells. MC3T3-E1 cells were cultured in 0, 1, 5, and 10 μg/mL cow milk-derived EVs for 3 and 7 days. It was observed that the average diameter of EVs from cow milk isolated by ultracentrifugation was 156±2.5 nm, and the presence of EV-associated marker protein CD63 and whey protein-specific marker lactoferrin was confirmed by immunoblot analysis. Our results determined that cow milk-derived EVs were increased osteoblastic cell proliferation and extracellular alkaline phosphatase (ALP) activity. Markedly, cow milk-derived EVs were significantly elevated the mineralized nodules in a does dependent manner for 3 and 7 days. Taken together, our results clearly demonstrated that cow milk-derived EVs may be useful in preventing osteoporosis by stimulating osteoblastic differentiation and mineralization.
권재희 ( Jaehee Kwon ),박은선 ( Eunsun Park ) 한국유아교육학회 2020 INTERNATIONAL JOURNAL OF EARLY CHILDHOOD EDUCATION Vol.26 No.2
The purpose of this study is to investigate pre-service teachers’ awareness of endocrine disrupting chemicals (EDCs), their exposure-reducing behaviors, and their needs for education about such chemicals. Data were collected from 222 pre-service teachers in early childhood programs at two Korean universities. The results of this study reveal that most pre-service teachers are aware of EDCs, and they have some knowledge and a high level of sensitivity to their negative effects. However, they do not take the active initiative to decrease exposure to these chemicals in their everyday lives. In addition, their class experiences do not significantly affect their awareness of EDCs or influence behaviors that reduce exposure to the chemicals. Thus, they present a high level of educational need regarding EDCs. Based on the findings, we discuss how to provide future early childhood educators with necessary education about EDCs.