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낙우송(Metasequoia glyptostroboides)으로부터 분리한 flavonoid의 금속단백분해효소-9 발현 억제 활성
양재영,이호재,고영희,권병목,전효곤,Yang Jae-Young,Lee Ho-Jae,Kho Yung-Hee,Kwon Byoung-Mok,Chun Hyo Kon 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.2
기질 금속단백분해효소(MMP)는 기저막이나 간질성 조직 등에 있는 세포외기질 성분을 분해하여 상처 치유, 태아의 발생, 종양세포의 침윤과 전이 등을 포함하여 조직이 재구성되는 과정에서 생리학적 및 병리학적인 과정 양쪽 모두에 매우 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 MMP-9 유전자의 발현을 억제하는 물질을 천연물에서 탐색하였고, 탐색된 시료 중에서 높은 역가를 가진 낙우송과의 Metasequoia glyptostroboides가 선택되었다. 여러 가지 flavonoid 성분을 가지고 있는 Metasequoia glyptostroboides를 이용하여 4개의 biflavonoid와 2개의 monoflavonoid 구조의 물질을 분리하였고, 이 flavonoid들은 sciadopitysin, isoginkgetin, bilobetin, 2, 3-dihydrohino-kiflavone, luteolin, apigenin으로 정제하여 구조를 밝히고 zymography, WST-1을 이용한 세포독성시험, northern blot 등의 실험을 통하여 각 화합물의 구조적인 특성과 함께 MMP-9 유전자 발현을 억제하는 효과가 있는 것을 확인하였다. Matrix metalloproteinases (MMPs) are a family of structurally and functionally related zinc-dependent enzymes responsible for proteolytic degradation of extracellular matrix components such as base membrane or interstitial stroma. MMPs play an important role in a variety of physiological and pathological tissue remodeling processes, including wound healing, embryo implantation, tumor invasion and metastasis. Since MMP-9 (gelatinase B) has unique ability to cleave type IV collagen, gene expression of MMP-9 has been focused on as a pharmacological target. Flavonoids are a class of compounds that are widely spread in plants. In the coures of screening for the suppressors of MMP-9 gene expression from natural products, Metasequoia glyptostroboides was selected. Six flavonoids, sciadopitysin, isoginkgetin, bilobetin, 2,3-dihydrohinokiflavone, luteolin and apigenin were purified as suppressors of MMP-9 gene expression from M. glyptostroboides. The suppressing activity of the isolated flavinoids on the MMP-9 gene expression was measured by gelatin zymography and Nothern blot analysis.
$2{\beta}$, $3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid처리에 의한 인간 간암세포주 HepG2의 apoptosis 유도
유기현,이종민,황보전,송명종,양혜정,백남인,김성훈,김대근,권병목,박미현,정인식,Yoo, Ki-Hyun,Lee, Jong-Min,HwangBo, Jeon,Song, Myoung-Chong,Yang, Hye-Joung,Baek, Nam-In,Kim, Soung-Hoon,Kim, Dae-Keun,Kwon, Byoung-Mok,Park, Mi-Hyun,Chung, 한국응용생명화학회 2006 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.49 No.4
Triterpenoid를 포함하고 있는 $2{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid를 애기마름으로부터 분리하였다. 이것은 pentacyclic triterpenes의 공통 구조를 가지며 amyrin ursolic acid 그룹에 속해 있다. 본 연구에서는 이 화합물의 독성 영향을 인간 간암 세포주인 HepG2에서 조사하였다. $2{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid는 처리한 양에 비례하여 HepG2 세포주에서 독성을 보였다. 그리고 Confocal microscopy 결과는 $2{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid를 HepG2 세포에 처리한 시간에 비례하여 녹색 형광의 증가를 보여주었다. $2{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid는 또한 HepG2 세포의 sub-G1 cell population 뿐만 아니라 DNA 분절(fragmentation) 현상의 증가를 보여 주었다. 이러한 결과는 $22{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid가 HepG2 세포에서 apoptosis를 통한 세포 사멸 유도를 의미한다. [ $2{\beta},\;3{\alpha}$ ], 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid was isolated from Trapa pseudoincisa S. et Z. It has a common structure of pentacyclic triterpenes and belongs to the amyrin ursolic acid group. The cytotoxic effect of this compound was investigated in human hepatoma cell line HepG2. $2{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid showed dose-dependent cytotoxicity in HepG2 cells. Confocal microscopy data showed that green fluorescence was increased in $2{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid treated-HepG2 cells in a time-dependent manner. $2{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid also increased the sub-G1 cell population of HepG2 cells as well as ladder-like DNA fragmentation. Taken together, our results indicate that $2{\beta},\;3{\alpha}$, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid induced apoptosis in HepG2 cells.
쑥갓세포의 현탁배양에 의한 ${\beta}-sitosterol$ 생산
김현철,정하영,이소연,정호용,김유정,백남인,김성훈,최근원,김대근,권병목,박미현,정인식,Kim, Hyun-Chul,Chung, Ha-Young,Lee, So-Youn,Chung, Ho-Yong,Kim, You-Jung,Baek, Nam-In,Kim, Soung-Hoon,Choi, Geun-Won,Kim, Dae-Keun,Kwon, Byoung-Mok,Park 한국응용생명화학회 2005 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.48 No.4
[${\beta}-sitosterol$]은 식물 스테롤로서 인간의 전립선암과 대장암 세포의 성장을 억제하고 생체내 콜레스테롤 농도를 감소시킨다. 본 연구에서는 쑥갓세포 배양에서 ${\beta}-sitosterol$ 생산의 최적화 연구를 수행하였다. 그래서 쑥갓(Chrysanthemum coronarium L.)으로부터 캘러스 유도는 NAA와 BAP의 농도가 각각 1 mg/l의 조합에서 최적이었으며 이들 캘러스로부터 현탁배양 세포주를 확립하였다. 현탁 배양시 초기 세포농도 2 g DCW/l에서 조성이 각각 1배인 탄소원(30 mg/l), 질소원(1900 mg/l $KNO_3$, 1650mg/l $NH_4NO_3$), 무기인산원(170 mg/l)을 포함하는 MS 배지에서 ${\beta}-sitosterol$ 생산이 최적으로 나타났다. Shake-flask를 이용한 현탁배양에서 ${\beta}-sitosterol$의 최대 생산량은 $150{\mu}g/g$ DCW이었다. 그리고 공기부유식 생물반응기의 배양에서는 100 cc/ml의 통기량에서 ${\beta}-sitosterol$의 생산이 $142.8{\mu}g/g$ DCW으로 나타났다. [${\beta}-sitosterol$] is a plant sterol that reduces cholesterol levels and inhibits the growth of human prostate and colon cancer cells. Optimal conditions for ${\beta}-sitosterol$ production were examined from cell suspension cultures of Chrysanthemum coronarium L. The callus induction was optimal in MS medium containing 1 mg/l NAA and 1 mg/l BAP. Cell suspension culture was also established from the callus. Optimal ${\beta}-sitosterol$ production was obtained when the cells were cultured at an initial density of 2 mg DCW/l in MS medium containing 1 X sucrose (30 mg/l), 1 X nitrogen (1900 mg/l $KNO_3$, 1650 mg/l $NH_4NO_3$), and 1 X phosphate source (170 mg/l). In cell suspension cultures of C. coronarium L. using shake flasks, the peak content of ${\beta}-sitosterol$ was $150{\mu}g/g$ DCW. In cell suspension cultures of C. coronarium L. using an air-lift bioreactor, the maximum ${\beta}-sitosterol$ content of $143.8{\mu}g/g$ DCW was obtained at an air-flow rate of 100 cc/min.
미생물,발효,생물공학 : 2β, 3α, 23-trihydroxyrus-12-ene-28-oic acid 처리에 의한 인간 간암세포주 HepG2의 apoptosis 유도
유기현 ( Ki Hyun Yoo ),이종민 ( Jong Min Lee ),황보전 ( Jeon Hwangbo ),송명종 ( Myoung Chong Song ),양혜정 ( Hye Joung Yang ),백남인 ( Nam In Baek ),김성훈 ( Soung Hoon Kim ),김대근 ( Dae Keun Kim ),권병목 ( Byoung Mok Kwon ),박 한국응용생명화학회 2006 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.49 No.4
토양으로부터 Candida albicans의 균사형태에 선택적인 활성을 나타내는 미생물로부터 항진균 물질의 탐색
김성욱,남지연,권병목,손광희,복성해 한국산업미생물학회 1995 한국미생물·생명공학회지 Vol.23 No.2
Candida albicans의 dimorphic 현상을 이용하여 C. albicans의 위상균사 형태에서만 항진균 활성을 나타내는 물질을 탐색하고 개발하기 위하여 토양으로부터 분리한 약 2,900여종의 미생물을 대상으로 항진균 활성을 조사하여, C. albicans의 위상균사 형태에서만 항진균 활성을 나타내는 한 균주를 선별하고 Streptomyces sp. A393으로 동정하였다. Streptomyces sp. A393 균주가 생산하는 화합물의 분리와 정제는 XAD-7, silica gel, preparative TLC 및 HPLC로 행하였으며 분자량은 774, 790, 804, 820이었다. 이 화합물은 macrolide 항생물질인 oligomycin A, B, C, E와 동일한 구조를 나타내었으나 항진균 활성을 나타내지 않는 것으로 보고된 oligomycine E는 위상균사 형태의 평판에서 항진균 활성(6∼25 ㎍/㎖)을 나타내었다. To search and develop the compounds exhibiting antifungal activities against the mycelial phase of Candida albicans, approximately 2,900 microorganisms isolated from soil were examined for antifungal activity. Among them, a strain with preferential activity against the mycelial phase of Candida albicans was isolated and identified as Streptomyces sp. A393. Isolation and purification of compounds A393 showing antifungal activity against the mycelial phase C. albicans were performed using XAD-7 column chromatography, silica gel chromatography, preparative thin layer silica gel chromatography, and HPLC. The molecular weights of compounds isolated from Streptomyces sp. A393 were determined as 774, 790, 804 and 820. These compounds appeared to have a structure of macrolide antibiotics, oligomycin A, B, C and E. Especially, oligomycin E. which is formerly reported to have no antifungal activity, showed antifungal activity against the mycelial phase of Candida albicans.