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포인세티아로부터의 dihydroflavonal-4-reductase(DFR) 유전자의 분리 및 분석 : Euphorbia pulcherrima
구자정,박영두 경희대학교 생명자원과학연구원 2004 硏究論文集 Vol.23 No.-
본 연구는 포인세티아 포염색을 결정하는 화색관련유전자 dihydroflavonal-4-reductase(DFR)을 분리하고 그 기능을 분석하기 위해 수행되었다. DFR specific primer를 제작하여 RT-PCR을 통해 498 bp의 단편을 얻었으며 염기서열 분석을 통해 Gerbera hybrid와 98%의 상동성을 갖는 DFR 유전자임을 확인하였다. 기능 분석을 위하여 분리된 DFR 유전자를 CxVMV promoter에 의해 조절되는 식물 발현 벡터 Agrobacterium을 이용하여 담배(Nicotiana tobaccum cv. Havana SR1)에 형질전환하였다. 형질 전환 식물체는 잎 절편체를 재조합 벡터를 포함한 A. nanefaciens LBA440에 접종한 후 1, 2차 배지에서 신초 및 뿌리를 유도함으로서 확보할수 있었다. 1차 PCR에 의해 marker 유전자의 전이가 확인된 개체는 온실에서 재배하여 자가수분 및 채종을 하였으며 genomic DNA를 추출하여 DFR 유전자가 담배 genome 내로 전이되었음을 PCR로 다시 확인하였다. 채종된 종자는 후대 유전 분석을 위해 kanamycin이 첨가된 파종배지에서 선발중에 있다. DFR specific primer was designed to isolate dihydroflavonal-4-reductase (DFR) from Euphorbia pulcherrima cv. Feedom Red. The DFR gene fragment was isolated through RT-PCR with a set of primers designed based on homologous coding region present in DFR genes from divergent sources. To analyze the function of DFR gene, an antisense-orineted DFR gene fragment amplified by RT-PCR was cloned into a binary vector PILTAB 357 for plant transformation. This construct was introduced into Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 and used for transformation into the Nicotiana tabaccum cv. Havana SRI. The transformation of the antisense-orineted DFR gene into tobacco was confirmed by PCR.
왕겨 피복에 따른 만삼 종자발아와 육묘를 위한 트레이, 토양 및 차광처리 효과
이수광,구자정,조원우,강호덕 韓國林學會 2013 한국산림과학회지 Vol.102 No.1
본 연구는 왕겨 피복에 따른 만삼의 종자발아와 육묘에 미치는 트레이, 토양 및 차광처리 효과를 구명하기 위해 수행되었다. 한 달 간 성장시킨 유묘를 경기도의 특정지역에 이식하여 재배 가능성 또한 살펴보았다. 그 결과 왕겨 피복 대조구의 발아율은 8%인 반면, 왕겨 피복 처리구의 발아율은 78%로 현저한 차이를 나타내었다. 트레이, 토양 및 차광을 달리한 조건에서 만삼의 생육특성은 차광 무 처리 트레이 50구 TKS 토양 처리구에서 초장 11.9 cm,엽수 71매, 엽폭 3.1 cm, 엽장 2.6 cm 및 근장 14.3 cm로 가장 양호한 생육특성을 나타내었으며, 생리적 특성은 차광 무 처리 TKS+펄라이트 처리구에서 증산량 3.9 mmol·m-2s-1, 광합성능 9.1 μmol·m-2s-1 및 수분이용효율 2.2 μmol·m-2s-1 로 가장 양호하였다. 하지만 경제성, 생육 및 생리적 특성과 육묘기간의 생존율을 종합하여 고려하면 차광 무 처리 혹은 30% 차광조건에서 200구 트레이의 TKS 및 TKS+펄라이트 처리구에서 30~45일 간 육묘 후 포지에 이식하는 것이 적합 할 것으로 보여진다. 특히 경기도 지역에서 5 개월 간 재배 시 88~96%의 생존율과 개화까지 가능하여 경기도 지역에서도 만삼 재배의 가능성을 확인 할 수 있었다. 하지만 재배 실험 시 차광 무 처리의 일부 개체는 황화현상과 위조현상이 발생하였다. 따라서 만삼 재배에는 30% 및 70% 차광처리가 필요한 것으로 판단된다. This study was conducted to determine the effects of rice hull cover on seed germination and tray types, soil types, shading conditions for seedling growth of Codonopsis pilosuala. We also examined the feasibility of cultivation of small seedlings transplanted in the Gyeonggi-do area for a month. Under control condition, the seed germination was 8% whereas it dramatically increased to 78% under rice hull cover treatment. Under the different conditions (tray types, soil types, and shading conditions), young seedlings showed the best quality without shading in TKS soil of 50 plug cell tray, with the growth characteristics of plant height (11.9 cm), number of leaves (71), leaf width (3.1 cm), leaf length (2.6 cm), and root length (14.3 cm). Seedling quality was the best without any shading in TKS+perlite, with the physiological characteristics of evaporation (3.9 mmol·m-2s-1), carbon assimilation (9.1 μmol·m-2s-1), and water use efficiency (2.2 μmol·m-2s-1). Considering the economical, morphological, physiological and survival rate of the seedlings, it was an ideal method for transplanting seedlings in the field after they have been grown for 30-45 days in TKS and TKS+perlite of 200 plug cell tray in 0% or 30% shaded conditions. As the results of 5 months examination on the possibility to cultivate Codonopsis pilosuala in the Gyeonggi-do area, 88% to 96% of survival rate was observed with normal induced flowers. Therefore, cultivation of Codonopsis pilosuala was possible in the Gyeonggi-do area. While there were symptoms of etiolation and wilting under no shading condition, they did not appear in 30% and 70% shading conditions. Therefore, cultivation of Codonopsis pilosuala is considered to be necessary 30% or 70% shading.