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        ELISA 에 의한 B . t . 살충성독소 단백질의 정량

        이재용,박호용,강상순,김정일,한문희 ( Jae Yong Lee,Ho Yong Park,Sang Sun Kang,Jeong Il Kim,Moon Hee . Han ) 생화학분자생물학회 1986 BMB Reports Vol.19 No.1

        An ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) method was studied for rapid and sensitive detection of entomocidal toxins of Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki and israelensis, potent microbial insecticides. Crystalline toxins were purified with a Telebrix double layer density centrifuge and antisera were prepared from rabbits, respectively. Using these antisera, both indirect and sandwich ELISA methods were examined and compared. Both ELISA systems were demonstrated to be sensitive and specific for the respectable toxins. The minimum detectable concentrations of toxins were about 2-10 ng toxin/㎖.

      • Enzyme Linked Immunosorbent Assay for the Quantitative Detection of Bacillus thuringiensis Entomocidal Crystalline Protein

        이재용,박호용,강상순,김정일,한문희,Lee, Jae-Yong,Park, Ho-Yong,Kang, Sang-Sun,Kim, Jeong-Il,Han, Moon-H. 생화학분자생물학회 1986 한국생화학회지 Vol.19 No.1

        미생물 살충제로서 그 가능성이 크게 안식되고 있는 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki와 israelensis의 결정성독소 단백질을 신속 간편하게 정량화하기 위하여 ELISA 방법을 시도하였다. Telebrix 밀도 이중층 원심분리에 의하여 각 결정성 독소단백질을 분리 정제하고, 정제된 독소 단백질에 대한 항혈청은 토끼로부터 제조하였다. 제조한 항혈청을 사용하여 indirect ELISA와 sandwich ELISA를 수행한바, 정밀하고 특이성을 갖은 독소단백질 정량이 가능하였다. indirect ELISA와 sandwich ELISA에서 그 정밀도는 거의 같았으며, 독소 단백질의 최소강지농도는 약 2-10 ng/ml 이었다. An ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) method was studied for rapid and sensitive detection of entomocidal toxins of Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki and israelensis, potent microbial insecticides. Crystalline toxins were purified with a Telebrix double layer density centrifuge and antisera were prepared from rabbits, respectively. Using these antisera, both indirect and sandwich ELISA methods were examined and compared. Both ELISA systems were demonstrated to be sensitive and specific for the respectable toxins. The minimum detectable concentrations of toxins were about 2-10 ng toxin/ml.

      • KCI등재

        다문화가정 초등학생의 과학탐구능력과 과학에 대한 태도 및 과학학습에 대한 태도 분석

        권보경(Bo kyung Kwon),강상순(Sang Sun Kang),천재순(Jae sun Chun) 학습자중심교과교육학회 2016 학습자중심교과교육연구 Vol.16 No.12

        본 연구는 다문화가정 초등학생의 과학학습에 대한 어려움과 지원방안을 알아보는 것을 목적으로 하였다. 이를 위해 경기도의 두 초등학교 5, 6학년 다문화가정 학생(75명)과 일반가정 학생(144명)의 과학탐구능력 및 과학에 대한 태도 검사를 하여 비교·분석하였고 다문화가정 초등학생 10명을 대상으로 과학학습에 대한 태도를 알아보기 위하여 면담을 실시하였다. 그 검사지 결과들은 독립표본 t-검정을 통해 유의 수준 .05에서 비교·분석하였고, 면담내용은 전사하여 의미 있는 진술을 토대로 주제를 도출하여 분석하였다. 연구 결과, 과학탐구능력은 전체 평균과 두 하위 영역 모두에서 다문화가정 초등학생들이 일반가정 초등학생보다 낮았다(p<.05). 면담을 통해 볼 때 이는 다문화가정 학생들이 과학 학습 시 과학용어의 뜻과 실험기구와 시약의 용도 사용방법에 대해 생소함을 느끼는데 기인하는 것으로 보인다. 전체 과학에 대한 태도는 차이가 없었으나 하위 영역 중 과학적 태도 부분에서는 다문화가정 학생들이 일반가정 학생들 보다 높았다(p<.05). 각 영역의 하위 요소들을 비교해볼 때 과학과 관련된 흥미 영역에서는 다문화가정 학생들이 과학관련 활동에 대한 흥미에서만 일반가정 학생들 보다 높았다(p<.05). 과학적 태도 영역에서는 자진성, 비판성, 끈기성 요소에서 다문화가정 학생들이 평균 점수에서 높은 점수를 보였으며(p<.05) 그 외 하위 요소에서는 통계적으로 유의미한 차이를 보이지 않았다 (p<.05). 다문화가정 초등학생들은 실험활동과 과학 체험 활동을 매우 즐거워하나 가정에서의 체험기회가 부족하기에 공교육 차원에서의 다양한 과학체험활동의 활성화를 필요로 한다. The purpose of this study is to investigate the difficulties that multicultural students face in science studies to support them. For this purpose, the tests of the science process skills and attitudes toward science tests were conducted to 75 multicultural students and 144 general students who were in the fifth and sixth grades at two elementary schools in Gyeonggi province. In addition, semi-structured interviews were carried out to 10 multicultural students to find out their ideas about science learning. The study results were compared and analyzed using an independent t-test while the interviews were transcribed to be identified and analyzed in the ideas of science learning. According to the study, the science process skills of multicultural students were found to be lower than those of general students(p<.05). This result were from that they are not familiar with the scientific terminology, laboratory equipment and use of chemical agents. Whole attitudes toward science of multicultural students were not different from those of general students(p<.05). Multicultural students, however, were shown to have higher scores than general students in scientific attitude, the sub-category of the attitudes toward science(p<.05). And interests in science related activities, voluntary, criticism, patience of multicultural students were was found to be higher than those of general students(p<.05), and other sub-elements of the attitudes toward science were not different from those of general students(p<.05). The interview results show that multicultural students quite enjoy science experiments and activity. And it is needed to invigorate diverse science activities in public schools as multicultural students have few opportunities for science activities at home.

      • KCI등재후보
      • KCI등재

        방선균 유래 이차대사 생합성 유전자 분석용 DNA Microarray 제작 및 해석

        남수정,강대경,이기형,김종희,강상순,장용근,홍순광,Nam Soo Jung,Kang Dae-Kyung,Rhee Ki Hyeong,Kim Jong-Hee,Kang Sang Sun,Chang Yong Keun,Hong Soon-Kwang 한국미생물학회 2005 미생물학회지 Vol.41 No.2

        다양한 균주들을 대상으로 무작위로 신물질을 스크리닝하는 방법은 많은 노력과 시간이 소요되는 방법이며, 신물질을 발견하는 비율도 계속 낮아지고 있다. 따라서 기존 균주들을 대상으로 microarray 기술을 이용한 target-directed screening기술의 개발은, 학문적 뿐만 아니라 산업적으로도 중요한 의미를 가진다. 본 연구에서는, 이미 분리된 방선균각각의 유전체를 대상으로 microarray 분석을 통해, 새로운 생리활성 물질 생산균주 및 생합성 유전자를 확보할 수 있는 기법을 개발하기 위한 기초실험을 수행하였다. 즉, 기존에 알려진 생리활성물질 생합성 유전자들을 확보하여 DNA chip을 제조하였으며, 유전체 염기서열이 밝혀진 S. coelicolor 균주를 대상으로 그 효율성을 검증하였다. 전체적으로 유전자 상동성이 높을수록 반응감도도 높은 편이었으나, 이러한 상환관계가 일치하지 않는 유전자들도 있었다. 이와 같은 문제는, probe 유전자의 G+C 비율$(\%)$을 서로 비슷하게 구성하거나, 반응조건을 최적화 시킨다면 DNA chip의 효율성을 더욱 높일 수 있을 것으로 판단된다. DNA microarray를 통한 생리활성물질 발굴 연구는 세계적으로도 보고된 바 없는 새로운 접근방법으로서, 본 연구에서 시도하고 있는 방법은 발굴 target과 대상을 지정하고 시도되기 때물에, 효율면에서 무작위 스크리닝과는 비교되지 않을 정도로 높을것으로 예상된다. 또한 본 연구와 같은 접근방법을 최적화 시킨다면, 방선균뿐만 아니라 다른 미생물부터 생리활성물질 및 생합성유전자 스크리닝에도 효과적으로 응용할 수 있을 것이다. Streptomyces produces many kinds of secondary-metabolites including antibiotics. Screening of a new compound and elucidation of a biosynthetic pathway for the secondary metabolites are very important fields of biology, however, there is a main problem that most of the identified compounds are already researched compounds. To solve these problems, a microarray system that is based on the data related to the biosynthetic genes for secondary-metabolites was designed. For the main contents of DNA microarray, the important genes for the bio-synthesis of aminoglycosides, polyenes group, enediyne group, alpha-glucosidase inhibitors, glycopeptide group, and orthosomycin group were chosen. A DNA microarray with 69 genes that were involved in the bio-synthesis for the antibiotics mentioned above was prepared. The usability of the DNA microarray was confirmed with the chromosomal DNA and total RNA extracted from S. coelicolor whose genomic sequence had already been reported.

      • Chromosome region maintenance 1에 의한 ULK2의 핵 외부로의 이송

        박도원경 ( Park Do Won Kyoung ),강상순 ( Sang Sun Kang ) 충북대학교 과학교육연구소 2018 과학교육연구논총 Vol.34 No.1

        우리의 선행 연구로 ULK2가 PY-NLS를 통해 핵 안으로 이동 할 수 있다는 것이 입증했기 때문에 단백질이 핵에서 세포질로 어떻게 이동 되는지는 자연스러운 질문이다. ULK2에서 NES (Fx<sub>2-4</sub>Fx<sub>2-4</sub>LxL/I)모티프로 아미노산 서열을 검사했을 때, C terminal domain에서 추정 CRM1 결합 추정 모티프 (<sup>38</sup>iksinkknlsksqill<sup>53</sup>)를 확인했다. 따라서 ULK2가 CRM1 과 상호 작용하여 핵 밖으로 이동 하는지 여부를 조사했고 그 결과 CRM1 이 C-terminal domain에서 ULK2의 추정 NES motif mutant (<sup>38</sup>iksinkknlsksqill<sup>53</sup>: I51D 돌연변이)를 통해 ULK2 wild type과 CRM1 과 상호 작용을 비교했다. CRM1 과의 ULK2 의 상호 작용은 ULK2의 subcellular localization를 매개하며, 또한 자가소화활성의 억제를 유도한다는 증거를 찾았다. 따라서, 이번 연구로 ULK1 과 구별되는 특성 중 하나인 핵 안 밖으로의 이동에 의한 ULK2 (핵과 세포질 사이의 셔틀 단백질)조절과 활성화에 기반을 둔 분자 메커니즘 존재에 대한 새로운 이론을 제공한다. Uncoordinated Dl-like kinase 2 (ULK2), a member of the serine/threonine kinase family,plays an essential role in the regulation of autophagy in mammalian cells. Because of the role of autophagy in normal cellular homeostasis and multiple diseases, better mechanistic insight into this process may result in the development of novel therapeutic approaches. Previously, we reported that a potential NES motif in the N-terminal domain of ULK2 required to import into the nuclear. Here, we present evidence that ULK2 associates with chromosome region maintenance 1(CRM1) tor its export from the nucleus, reverselv. We identified a potential NES motif (<sup>38</sup>iksinkknlsksqill<sup>53</sup>) in the S/P space domain of ULK2; this motif is similar to the consensus NES motif (FX<sub>2-3</sub>FX<sub>2-3</sub>LXL/I). Using a pull-down approach,we observed that ULK2 interacts physically with CRM1 both in vivo and in vitro. Confocal microscopy confirmed the co-localization of ULK2 and CRM1. Localization of ULK2 to the nuclear region was disrupted by mutations in the putative CRM 1-binding motif (<sup>38</sup>iksinkknlsksqill<sup>53</sup>a<sup>38</sup>iksinkkn IsksqDll<sup>53</sup>; 15 ID). Furthermore, in transient transfection assays, absence of the CRM1 binding site mutant (nuclear localization form) was associated with a substantial decrease in autophagy activity (but decrease in the in vitro serine-phosphorylation) compared with ULK2 wild type. Thus, we suggest that CRM1 interacts with ULK2 through ULK2’s putative NES motif and exports it from the nucleus to the cytoplasm thereby playing a role as a shuttle protein.

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