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      • Effect of Recombinant Growth Differentiation Factor 9 (GDF 9) and Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP 15) on MAPK and MPF Signals in Porcine Oocytes in vitro maturation

        Zi-Li Lin(임자력),Jung-Woo Kwon(권정우),Nam-Hyung Kim(김남형) 충북대학교 동물생명과학연구소 2013 동물생명과학연구 Vol.5 No.-

        배란전의 난포들에서 난구세포와 난모세포의 복합체에서 성숙의 과정은 난모안에서의 감수분열의 진행과 난구세포의 팽창을 포함한다. 이러한 과정들은 MPF(Maturation/M-phase promotion factor)와 MAPK(mitogen-acticated protein kinase) 신호들의 활성화를 요구한다. 그리고 CEEF(Cumulus expansionenablingfactor)는 난구세포 팽창을 위해 요구된다. GDF9(Growth differentiation factor 9)와 BMP15(bone morphogenetic protein 15)는 난모세포에서 분비되는 인자와 과립막세포의 확산과 분화를 조절하는 TGF-β(Transforming growth factor beta)과에 속하는 요인들이며 이들의 난모세포 성숙과 난구세포 팽창에서의 역할은 쥐와 인간에서 잘 알려져 있다. 여기에서는 GDF9 BMP15가 CEEF가 될 것이라고 가설을 세우고 기록하였다. 분자메커니즘 수준에서의 관찰을 위하여 c-mos(MAPK의 조절 아단위)와 cyclinb1과 cdc-2(MPF 조절 아단위)의 발현양상을 연구하였다. 우리는 GDF9과 BMP15가 난모세포 성숙과정 동안에 모계 유전자와 SB431542(TGFβ-GDF9Ⅰreceptor ALK4/5/7 억제인자)의 비정상적인 발현을 상당히 야기하여 이를 평가할 수 있었다. 결과는 poly (A)-test PCR조사에 의해서 뒷받침되었다. 이와 함께, GDF9과 BMP15가 MAPK와 MPF 통로를 조절하며 돼지 난모세포의 세포질의 성숙을 촉진하기 위하여 CEEF가 됨을 알수 있었다. The maturational processes in cumulus-oocyte cell complexes (COCs) of preovulatory follicles that include resumption of meiosis in the oocyte and expansion of the cumulus oophorus. Both processes require activation of maturation/M-phase promotion factor (MPF) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signals. And, cumulus expansion-enabling factor (CEEF) that is absolutely required for cumulus expansion. Growth differentiation factor 9 (GDF 9) and bone morphogenetic protein 15 (BMP 15) are oocyte-secreted factors and members of the transforming growth factor beta (TGF-β) family, regulating the proliferation and differentiation of granulosa cells, their roles in oocyte maturation and cumulus expansion were well known in mouse and human. Here, it was reported that GDF 9 and BMP 15 were hypothesized to be the CEEF. To further explore the underlying molecular mechanisms, expression pattern of c-mos (regulatory subunit of MAPK), cyclinb1 and cdc-2 (regulatory subunit of MPF) were studied. We found that GDF9 and BMP15 could evaluate the maternal genes, and SB431542 (a TGFβ-GDF9 type I receptor ALK4/5/7 inhibitor) significantly caused these aberrant expression during oocyte maturation. The data was supported by poly (A)-test PCR analysis. Together, GDF 9 and BMP 15 might be the CEEF to regulate MAPK and MPF passways and promote porcine oocyte cytoplasmic maturation.

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