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기상요소가 누에 우량교배조 지역적응시험의 작황에 미치는 영향
손봉희 ( Bong Hee Sohn ),강필돈 ( Pil Don Kang ),류강선 ( Kang Sun Ryu ),정이연 ( I Yeon Jung ),김용순 ( Yong Soon Kim ),김기영 ( Kee Young Kim ),김미자 ( Mi Ja Kim ) 한국잠사학회 2007 한국잠사곤충학회지 Vol.49 No.2
기온, 강수량 등 기상요인이 누에에 미치는 영향을 조사하기 위해 뽕나무 재배조건, 토양, 기후조건이 다른 누에 우량교배조 지역적응시험 수행지인 전국 8개소를 대상으로 2006년 춘추잠기 양잠기상과 작황 영향 조사를 실시하였다. 2006년 춘추잠기 기상요소의 특징은 전국 평균 애누에때, 큰누에때, 섶중때의 기온은 각각 17.7℃, 19.8℃, 21.5℃로 예년대비 평균 1℃ 높았으며, 강수량은 각각 15.1mm, 6.9mm, 7.0mm로 큰누에때와 설중때는 예년대비 평균 22.9mm 적었다. 일조시수는 유충 기간 동안은 예년보다 1.7시간 짧았으나 섶중때는 예년과 큰 차이 없었다. 즉, 예년대비 기온이 높고 강수량이 적어 가뭄현상을 보였던 2006년 춘잠기 작황은 예년에 비해 화용비율이 낮고, 수견량이 약 1kg 적었으며 전견중이나 견층비율은 다소 높았다. 추잠기 기상요소의 특징은 애누에때, 큰누에때, 섶중때의 기온은 각각 25.1℃, 20.5℃, 19.9℃로 예년대비 애누에때의 기온은 약 1℃ 높았으며 큰누에때는 1.3℃ 낮았다. 섶중때는 거의 같은 수준을 보였다. 강수량은 각각 10.2mm, 4.6 mm, 3.7mm로 예년과 대비하여 큰 차이가 없었다. 즉, 예년과 비슷한 양상을 보였던 추잠기 기상은 2006년 추잠기 작황에도 별다른 영향을 주지 않았다. 즉, 전견중과 견층중은 예년과 큰 차이 없어 견층비율의 변화도 없었던 평작 수준이었다. Investigation of atmospheric data and rearing results was conducted to analyze the effects of atmospheric factors such as temperature and precipitation on silkworm in 8 rearing places in which local adaptation test was being conducted with different mulberry growth condition, soil and atmosphere during spring and autumn rearing season of 2006. The atmospheric characteristics of spring rearing time are as follows. The average temperatures of young silkworm, old silkworm, mounting were 17.7℃, 19.8℃, 21.5℃ respectively, and 1℃ higher than normal year. The precipitation of young silkworm, old silkworm, mounting were 15.1 mm, 6.9 mm, 7.0 mm, respectively, and 22.9 mm lower than normal year in old silkworm and mounting. The daylight hours in larval stage was 1.7 hour shorter than normal year, but no difference in mounting. Thus precipitation was lower and temperature was higher than normal year in 2006. The rearing results of 2006 were 1kg lower than normal year in cocoon yields per 10,000 3rd molted larvae, single cocoon weight and cocoon shell percentage were a little higher. The atmospheric characteristics of spring rearing season are as follows. The average temperatures of young silkworm, old silkworm, mounting were 25.1℃, 20.5℃ and 19.9℃ respectively, temperature in young silkworm was 1℃ higher than normal year, and temperature in old silkworm was 1.3℃ lower than normal year. The precipitation of young silkworm, old silkworm, mounting were 110.2 mm, 4.6 mm, 3.7 mm, respectively and there were little differences compared to normal year. The atmospheric condition of 2006 which was similar to normal year did not affect the autumn rearing results of 2006. Namely, the single cocoon weight and cocoon shell weight were not different from normal year, and the same was cocoon shell percentage.
락토페린 유전자도입 piggyBac 벡터에 의한 누에 형질전환
김용순 ( Yong Soon Kim ),손봉희 ( Bong Hee Sohn ),김기영 ( Kee Young Kim ),정이연 ( I Yeon Jung ),김미자 ( Mi Ja Kim ),강필돈 ( Pil Don Kang ) 한국잠사학회 2007 한국잠사곤충학회지 Vol.49 No.2
락토페린 cDNA 유전자를 도입시킨 누에 형질전환 실험을 수행한 결과, 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. 사람 GI-101 세포주의 mRNA로부터 클로닝 된 락토페린 cDNA 유전자의 개시코돈 ATG와 종결코돈 TAA를 포함하는 open reading frame(2,136 bp) 영역을 확인하였다. 2. Sf9 배양세포의 조추출물 시료에 의한 Western blot 분석 결과, 락토페린으로 추정되는 약 80kDa의 단백질 발현을 확인하였다. 3. 누에 형질전환에 높은 전이효율과 활성을 나타내는 트랜스포존을 이용한 전이벡터 pPIGA3GFP를 개조하여 락토페린 cDNA를 삽입시킨 전이벡터 pPT-HLf를 구축하였다. 4. DNA 미량 주사법에 의한 누에 형질전환 개체의 발현 비율은 약 6.7% 정도를 나타냈다. 5. 형질전환 누에(G0) 동일한 세대간 교배 및 처리하지 않은 성충간의 역교배에 의한 차세대(G1) 개체로부터 락토페린 유전자와 동일한 크기의 2.1 kb DNA단편을 확인 할 수 있었으며, 형질전환 G1 세대의 조출출물 시료에 의한 Western blot 분석 결과, 표준 락토페린 항체와 반응하는 약 80 kDa의 단백질 발현을 확인할 수 있었다. Lactoferrin, an ion-binding 80-kDa glycoprotein, has been suggested to have many biologic activities, such as facilitating ion absorption and having antimicrobial and anti-inflammatory effects. Several of these activities are likely to only be facilitated by human lactoferrin because they depend on the binding of human lactoferrin to specific receptor. To produce recombinant human lactoferrin to animal foods using transgenic silkworm, Bombyx mori L, we have cloned and sequenced the cDNA encoding for a human lactoferrin (HLf) from the mRNA in mammary tumor line (GI-101). As a result, the 2.5-kb fragment of HLf gene was cloned with pGEM-T vector and then this fragment was sequenced. In the nucleotide sequence analysis, single open reading frame of the 2,136-bp encoding for a polypeptide of 712 amino acid residues was detected. On the other hand, we constructed a recombinant plasmid (pPT-HLf), containing human lactoferrin gene for germ line transformation of the silkworm using a piggyBac transposon-derived vector. A non-autonomous helper plasmid encodes the piggyBac transposase. Approximately 6.7% of individuals in the G0 silkworms expressed green fluorescent protein (GFP). PCR analyses of GFP-positive silkworms (G0 and G1) revealed that independent insertions occurred frequently. Furthermore, Western blot analysis showed that the recombinant HLf expressed in hemolymph has the same molecular weight (80 kDa) as a native protein. On the basis of these experiments, expression of HLf in next generation of transgenic silkworm is now in process.