정향 추출물의 항진균활성 및 항진균물질의 분리, 동정 = Antifungal Activity of Eugenia caryophyllata extracts and identification of antifungal compounds

국문 초록 (Abstract)

무좀균인 Trichophyton mentagrophytes와 Microsporum audinii에 대한 정향추출물의 항진균력을 확인하고 유효농도를 결정하였다. 또한 유효성분을 분리한 후 그 구조를 확인하였다.
균의 최소저해 농도 (MIC)를 측정한 결과 두 종의 무좀균 모두 농축원액 대비 6.25%(w/v)의 농도에서 최초로 균의 증식이 저해되었다. Paper disc agar diffusion법을 사용하였을 때도 동등한 항진균 효과가 관측되었다. 정향추출물은 대표적인 항진균제인 Amphotericin B과 비슷한 수준의 항진균력을 나타내었다. 용매분획을 실시하여 3가지 용매를 사용하여 분획한 결과 얻어진 헥산 분획물, 클로로폼분획물, 에틸아세테이트분획물, 수용성 분획물 증에서 hexane fraction 이 가장 높은 수율(89.4%)로 얻어졌으며 가장 항균활성효과가 높은 것으로 나타났다. 이 hexane 분획을 silica gel column chromatography를 통해 분리하여 항균활성이 가장 큰 분획(F2)을 수득하였고 이로 부터 다시 silica gel column chromatography 및 thin layer chromatography를 통해 분획물 중에 가장 큰 항균성을 나타내는 분획(F22)을 수율 23.3%로 분리하였다. 정제된 F22 분획의 EI-MS 와 ^(1)H-NMR ^(13)C-NMR 결과로부터 활성물질의 구조를 동정한 결과 eugeno1 (C_(10)H_(12)O_(2)) 인 것으로 확인하였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

This Eugenia caryophyllata extract was evaluated for its antifungal properties against two species of athlete's foot fungi, Trichophyton mentagrophytes and Microsporum audinii. The essential oil exerted a good antifungal activity against two athlete's foot fungi providing complete growth inhibition at concntration of 6.25%(v/v), which indicates that the activity of essential oil was as equivalent as amphotericin B. Also similar results are obtained by paper disc agar diffusion method. Eugenia caryophyllata extracts was sequentially partitioned into h-hexane, chloroform, ethyl acetate and water-souble fractions. Among four fractions, n-hexane fraction with a yield 89.4% (w/w) showed the highest antifungal activity against some athlete's foot fungi. Antifungal compounds in n-hexane fraction were further purified by using silica gel open column chromatography and thin layer chromatography with a final yield of 23.3% (w/w). Chemical structure of the purified antifungal compound was characterized by instrumental analysis such as EI-MS, ^(1)H-NMR, ^(13)C-NMR As a result of analysis the compound was identified as eugenol.

목차 (Table of Contents)

• 목차
• 요약 = ⅰ
• 표목차 = ⅱ
• 그림목차 = ⅳ
• Ⅰ. 서론 = 1
• Ⅱ. 재료 및 방법 = 6
• 1. 실험재료 = 6
• (1) 사용균주 및 배지 = 6
• (2) 정향추출물 = 7
• 2. 실험방법 = 9
• (1) 정향추출액의 무좀곰팡이에 대한 항진균 효과 측정 = 9
• (2) MIC 측정법 = 9
• (3) 항균성분의 분리 및 정제 = 10
• 1) 용매분획 = 10
• 2) Silica gel colum chromatography = 13
• (4) 항진균화학구조 결정 = 14
• 1) EI-MS = 14
• 2) (1)^H-NMR 및 (13)^C-NMR = 16
• Ⅲ. 결과 및 고찰 = 17
• 1. Amphotericin B의 항진균력 = 17
• (1) Paper disc agar diffusion 법에 따른 항진균 활성 = 17
• (2) 최소 저해농도 측정에 따른 항진균 활성 평가 = 18
• 2. 정량 추출물의 항진균 활성 = 22
• (1) Paper disc agar diffusion 법에 따른 항진균 활성 = 22
• (2) 최소 저해농도 측정 = 23
• 3. 항진균성분의 분리 및 동정 = 27
• (1) 정향추출물의 용매 계통 분획 = 27
• 4. 정향추출물의 항진균성분 화학구조 동정 = 36
• 참고문헌 = 39
• ABSTRACT = 44