혈청이 마우스 간 세포주 BNL CL.2의 Nitric Oxide 생성에 미치는 영향 = Effects of Serum on Nitric Oxide Production in Embryonic Mouse Liver Cell Line BNL CL.2

국문 초록 (Abstract)

마우스 간 세포주인 BNL CL.2의 시험관내 배양에서 혈청과 IFN-γ가 세포주의 nitric oxide(NO) 생성과 세포 손상에 미치는 영향을 알아보기 위한 실험을 하였다. 혈청이 공급된 배양에서 IFN-γ에 의한 세포 생존율은 거의 변동이 없었으나, 혈청을 제거한 배양에서는 약 65%의 생존율이 유지되었으며, NO 생성 억제제인 N -monomethy-L-arginine (NMA)의 첨가는 농도 의존적으로 세포의 생존율을 감소시켰다. 혈청이 제거된 BNL CL.2세포주는 IFN-γ단독 처리에서도 NO 를 생성할 수 있었으며, IFN-γ와 lipopolysaccharide (LPS)의 복합 처리는 세포주의 NO 생성을 상승적으로 증가시켰다. 또한 protein tyrosine kinase (PTK) inhibitor인 herbimycin A와 genistein에 의해서 NO 생성이 억제되어 PTK의 활성이 혈청이 고갈된 BNL CL.2 세포에서 NO의 생성에 중요한 역할을 담당하고 있기 때문으로 판단된다. IFN-γ의 독성은 혈청을 제거시킬 때 NO 생성 억제제에 상승적으로 간 세포를 손상시키며, 이때 NO가 IFN-γ에 의해 유도된 손상을 어느 정도 억제시키는 것을 알 수 있었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Nitric oxide (NO) plays an important role in immunologic defense, and influences upon the functioning of secretory tissues and cells. It also exhibits cytotoxic／cytostatic activity as one of major operating effectors of the cellular immunity system. We investigated the effects of serum on the cell damages and NO production in the mouse liver cell line BNL CL.2 to establish the role of NO. We observed that, when BNL CL.2 cells were cultured in serum-free medium, they were induced to cell damage by the stimulation of IFN-γalone or IFN-γplus LPS. Serumstarved cells showed large amount of nitrite accumulation and NO synthase (NOS) expression in response to IFN-γalone in dose-and time-dependent manners, but serum-supplied cells did not. The production of NO was blocked by protein tyrosine kinase (PTK) inhibitors, genistein and herbimycin. These results suggest that the deprivation of serum in the BNL CL.2 cell culture medium might primed with the cells to produce NO when the cells are triggered by IFN-γ and the involvement of PTK signal transduction pathway in the expression of NOS gene in murine hepatocytes.