수두백신의 역가시험법 표준화를 위한 연구 = Study on Standarization for the Potency Assay Method of Varicella Vaccine

국문 초록 (Abstract)

수두(chicltenpo즈) 및 대상포진(shingles)의 예방을 위해 사용되는 수두 생 바이러스 백근은 현재 국내 -외 제조사들이 정상사람 2배체 폐 태아 세포 주들을 이용하여 바이러스를 배양 · 증식시켜 생산하고 있으나, 품질관리를 쒸한 역가 시험에는 t·fRC튼 띤 LB딘EL 세포 주외에 제조사가 설정한 세포 주를 이용하고 있으며, 역파신험 방법인 fH Ui'rFO Plaque 3SSaIT에도 조사별로 다소 차이가 있는 시헌법을 사용하고 있다. 그러므로 일반적으로 세포 주간우 감수성 차이, 계대력(passa딩e level)간의 차이,varicelta-zoster virus(4'2V) diluent medium 등에 의한 차이에 의해 역가시힘 결과에 많은 차이를 나타낼 수 있다. 이에 본 연구에서는 역가 시험 결과꼭 편차를 촉소화 할 수 있는 시헌방법을 극힙하고자 Ok퍼 백신 주와 세로 주간 및 기타 요인에 따른 차이를 비교 분석하고 이를 표준확하여 일관겅있는 국가 및 제조사의 품질관리예 활용하고 나아가 수두 생 바이러스 백신 역가시헌 국가 표준품 거달에 활용하고자 하는데 목적이 운.다. 수두 생 바이러스 빅신의 역가 시험에 영향을 띠칠 수 꿀.는 모민으로 우선 바이러스 흡착에 사용되는 1#Z)·'diluent medium이 가장 큰 오인으로 확인되.고. 현개까기 최종적으로 if4 sucrose, 10% FBS, 0.1% sodiun) rrlonog)utamate in PBS(-), fIH 7.2가 가당 두수글 L'z).「 린luent medium 조성으로 확인되었단. 또한 '·:~l포 주별로 다소의 차이는 잇.으나 최대 바이러스 흡착시간은 90분으론:÷잰착인 되었다. 다른 negati)Fe effect를 보일 수 있는 요인으로 항생물질 및 항츤 제인 fuugiBone이 곡이러스의 역가에 영향을 미치는 것으로 확인되었다 따라서 이러한 항생물 띤 항균제를 standard solid agarose overla?·(5.tO) 시헌방법에는 사용하지 않는 것이 역가 시험의 편차를 줄일 수 있는 요인이라 판단된다. 최적의 조건하데서 Oka 수두 백신 주의 j 종의 세포 쭈에 대한 역가시험 수행 결과 각 세포 주의 감수성의 차이는 크지 않았으나, 반복시헌에 대한 표준편차는 다소 차이를 나타났다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Until now in Korea, the international and domestic vaccine maufacturers produce and sale live attenuated daricella vaccines, used to prevent chickenpox and shinglees, which are propagated in and done the potency test with various originated human diploid embryonic lung cells. Also manufacturers perform in vitro plaque assay with a little different methods to their quality control tests. Therefore, in general, there is slight or big difference among in vitro plaque assay results because of the difference in susceptibility of various originated human diploid embryonic lung cells and in assay methods. The purpose of this study is to confirm what factors occurring deviation to establish the standardized method which minimize deviation intracellularly and intercellularly. Eventually the standadized method will be used in consistent national and manufacturer's quality control and moreover intra and inter laboratory's validation assay of national standard for live varicella vaccine candidate. We confirmed VZV diluent medium was the biggest factor influencing in vitor plaque assay and the excellent composition of VZV diluent medium was final 5% sucrose, 10% FBS, 0.1% sodium monoglutamate in PBS(-), pH 7.2. We confirmed 90 minutes was maximum and optimum VZV adsorption time, but a little different among cells Also we recommended not use antibiotics and antimycotic, fungizone in standard solid agarose overlay assay in varicella potency test. Eventually 5 different originated human diploid embryonic lung cells showed little difference in susceptibility to Oka vaccine strain, but showed a lot of difference in reproducibility.