염산록사티딘아세테이트의 생체이용률시험 및 생물학적 동등성시험 지침작성 = Bioavailability study to establish bioequivalence guidances of roxatidine acetate HCl

국문 초록 (Abstract)

본 연구는 염산록사티딘아세테이트를 함유하는 의약품의 효율적이고 표준화된 생물학적동등성 시험법 지침을 확립하고자 서로 다른 3기관 성균관대학교 (연구책임자: 유선동, 제1세부기관), 서울대학교 (연구책임자: 김종국, 제2세부기관), 강원대학교 (연구책임자 : 김경호, 제3세부기관)에서 염산록사티딘아세테이트의 활성대사체인 록사티딘의 혈장 중 정량법을 확립 검증하고 생물학적 동등성 시험에 필요한 구체적인 표준시험 지침을 작성하는 것을 목표로 하였다. 제1세부기관에서 개발한 LC/MS를 이용한 체내의 록사티딘 혈중 농도분석법을 나머지 2세부기관에서 검증하여 각 세부기관별로 분석방법에 대한 유효성을 평가하여 개발된 분석법을 검증하였다. 각 세부기관에서 개발된 분석법은 2 - 500 ng/ml의 농도범위에서 측정되었고, r2>0.9994 의 직선성을 보였다. 평균 일내, 일간 정확성은 각각 92.9 - 108.8%와 88.9 - 110.0%였으며, 평균일내, 일간 정밀성은 각각 0.8 - 8.8%와 1.5 - 7.6%였다. 또한 회수율 및 안정성시험을 통하여 분석방법을 검증하였다. (주) 한독약품-사노피 아벤티스파마의 록산캅셀 75 mg (염산록사티딘아세테이트로서 75 mg)을 시험약으로 “생물학적동등성 시험기준” (식품의약품안전청 고시 제2002-60호, 2002. 11. 22) 에 준하여 각 시험기관별로 8명의 건강한 성인을 대상으로 생체이용률 시험을 수행하였다. 채혈은 록산캅셀 1 캅셀 (염산록사티딘아세테이트로서 75 mg)을 투약하기 직전 및 투약후 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 24시간 총 12시점에서 실시하였으며 개발된 분석방법을 이용하여 록사티딘의 혈중 농도를 측정하였다. 약물동력학적 파라메터는 K-BE test 2002로 산출하였으며 그 결과 각 세 부기관의 평균곡선하면적 (AUCt), 평균최고혈중농도 (Cmax), 평균최고혈중농도 도달시간 (Tmax), 그 리고 평균소실 반감기 (t₁/₂)의 범위는 각각 816.0 - 1850.2 ng∙hr/ml, 110.8 - 237.6 ng/ml, 2.2 -2.9 hr, 그리고 4.6 - 5.8 hr이었다. 얻어진 분석법 검증 결과와 피험자들의 약동학적 파라메터를 바탕으로 록사티딘아세테이트의 생물학적 동등성 시험지침을 작성하였다. 마련된 생물학적동등성 표준지침은 향후 실시될 생물학적동등성 시험의 효율성을 중대시키고 시험결과의 객관성과 신뢰성을 확보하여 국내 생물학적동등성 시험의 기반기술의 정립 및 확산에 기여할 것으로 기대된다.○ 연구목표 : 본 연구는 염산록사티딘아세테이트를 함유하는 의약품의 효율적이고 표준화된 생물학적동등성 시험법 지침을 확립하고자 3개의 시험기관이 참여하여 염산록사티딘아세테이트의 활성대사체인 록사티딘의 혈장 중 약물의 정량법을 확립 검증하고 생물학적 동등성 시험에 필요한 구체적인 표준시험 지침을 작성하는 것을 목표로 하였다.
○ 연구내용 : 제1세부기관에서 개발한 LC/MS를 이용한 체내의 록사티딘 혈중 농도분석법을 나머지 2세부기관에서 검증하여 각 세부기관별로 분석방법에 대한 유효성을 평가하여 개발된 분석법을 검증하였다. 각 세부기관에서 개발된 분석법은 2 - 500 ng/ml의 농도범위에서 측정되었고, r2>0.9994 의 직선성을 보였다. 평균 일내, 일간 정확성은 각각 92.9 - 108.8%와 88.9 - 110.0%였으며, 평균일내, 일간 정밀성은 각각 0.8 - 8.8%와 1.5 - 7.6%였다. 또한 회수율 및 안정성시험을 통하여 분석방법을 검증하였다. (주) 한독약품-사노피 아벤티스파마의 록산캅셀 75 mg을 시험약으로 “생물학적동등성 시험기준” (식품의약품안전청 고시 제2002-60호, 2002. 11. 22)에 준하여 8명의 건강한 성인을 대상으로 생체이용률 시험을 수행하였다. 채혈은 록산캅셀 1 캅셀 (염산록사티딘아세테이트로서 75mg)을 투약하기전 그리고 투약후 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 24시간 총 12시점에서 실시하였 으며 개발된 분석방법을 이용하여 록사티딘의 혈중 농도를 측정하였다. 약물동력학적 파라메터는 K-BE test 2002로 산출하였으며 산출된 곡선하면적 (AUCt), 최고혈중농도 (Cmax), 최고혈중농도 도달시간 (Tmax), 그리고 소실 반감기 (t₁/₂)는 각각 816.0 - 1850.2 ng∙hr/ml, 110.8 - 237.6 ng/ml, 2.2 - 2.9 hr, 그리고 4.6 - 5.8 hr이었다. 얻어진 분석법검증 결과와 피험자들의 약동학적 파라메터를 바탕으로 록사티딘아세테이트의 생물학적 동등성 시험지침을 작성하였다.
○ 연구성과(응용분야 및 활용범위포함) : 본 연구의 수행을 통해서 얻어진 염산록사티딘아세테이트를 함유하는 제제에 대한 생물학적 동등성시험의 지침은 향후 타 연구기관에서 수행 할 의약품의 생물학적동등성 시험기간을 단축하고 결과에 대한 객관성을 높이는 등 효율적인 생물학적동등성 시험의 국내 시행을 지원할 것으로 기대된다. 이는 대체조제 의약품의 품목 확대에 기여할 수 있으며 대체조제의 활성화와 이를 통한 국내 의료보험재정의 안정화에도 기여할 수 있을 것으로 기대된다. 또한 국내 피험자의 록사티딘에 대한 약동학적 파라메터와 혈장중 농도 정량법은 록사티딘의 체내동태 연구와 인구학적 약물동태 연구등의 학문적 연구 및 기타 약물요법 및 새로운 제제의 개발에 필요한 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 기대된다. 개발된 LC/MS 분석법은 향후 국제 SCI 학술지에 투고할 계획이다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The purpose of this study was to develop and validate an LC/MS assay method for the determination of roxatidine, an active metabolite of roxatidine acetate, in human plasma and to establish specific guidelines for its bioequivalance test. The study was performed at three laboratories: Pharmacokinetic Laboratory at Sungkyunkwan University (principal investigator: Sun Dong Yoo), Pharmaceutical Laborabory at Seoul National University (principal investigator: Chong Kook Kim), and Pharmaceutical Analytical Chemistry Laboratory at Kangwon National University (principal investigator: Kyeong Ho Kim). A sensitive LC/MS assay method was first developed at the principal institution and evaluated by two other institutions. The assay was linear over concentration range from 2 - 500 ng/ml, with r²>0.9994. The mean intra- and inter-day assay accuracy ranged from 92.9 - 108.8% and 88.9 - 110.0%, respectively, and the mean intra- and inter-day precision ranged from 0.8 - 8.8% and 1.5 - 7.6%, respectively. The recovery and stability tests were also performed. Bioavailability studies of roxatdine acetate were performed in eight healthy male volunteers at each institution. One capsule of Roxan® (roxatidine acetate hydrochloride, 75 mg, Handok-Sanofi-Aventis Pharma) was administered orally, and blood samples were obtained at prior to and 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, and 24 hr after administration. Plasma concentrations of roxatidine were determined by the validated LC/MS assay method. Pharmacokinetic parameters of roxatidine were calculated by K-BE test 2002. The average AUCt, Cmax, Tmax and t1/2 ranged from 816.0 - 1850.2 ng∙hr/ml, 110.8 - 237.6 ng/ml, 2.2 - 2.9 hr, and 4.6 - 5.8 hr, respectively. In conclusion, the results obtained from this study may be utilized to establish bioequivalence guidelines of roxatidine.