난관배양액이 처녀발생유기된 돼지난포란의 체외발달에 미치는 영향 = Effect of Porcine Oviductal Conditioned Medium on in Vitro Development of Chemically Activated Porcine Follicular Oocytes

국문 초록 (Abstract)

본 연구는 난관배양액이 돼지수정란의 체외발달에 미치는 효과를 규명키 위하여 수행하였다. 돼지 미성숙 난포란은 TCM-199, Ham's F-10 그리고 Whitten's 배양액에 10% 난포액과 호르몬(PMSG : 10IU/㎖, HCG : 10IU/㎖)을 첨가 20시간 배양하고 호르몬을 첨가하지 않는 배양액에서 20시간 추가 배양하여 총 40시간동안 배양하여 체외성숙을 유도하였다. 체외성숙후 0.1% hyaluronidase로 난구세포를 제거하고 15% FCS가 함유된 TCM-199으로 3회 세척하고 TCM-199에 15% FCS와 10% ethanol 혼합액에 세척한 난자를 옮겨 10분간 배양 처녀발생을 유기하였다. 처녀발생 6시간후 전핵형성율은 체외성숙배양액으로 TCM-199을 사용했을 때 56.4%, Ham's F-10의 경우 58.3%, Whitten's 배양액의 경우 74.0%를 보였다. 처녀발생 유기 48시간째 난할율은 TCM-199을 사용했을 때 45.7%, Ham's F-10에서 45.4%, Whitten's배양액에서 39.2%를 보였으며 세종류의 배양액에 POCM을 첨가 배양했을 때 TCM-199에 44.8%, Ham's F-10에서 45.4%, Whitten's배양액에서 43.7%로 나타났다. 처녀발생육 난자를 96시간 체외배양시킨 결과 상실배 발달율이 POCM을 첨가 했을 때 첨가하지 않은 시험구에 비하여 유의적으로 높았다(P<0.05)

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The effect of porcine oviductal conditioned medium(POCM) on in vitro development of chemically activated porcine oocytes was studied. Porcine oocytes were cultured in TCM-199, Ham's F-10 and Whitten's medium with hormonal supplements for 20h and 40h additional culture without hormonal supplements. After in vitro maturation, the denuded oocytes were washed 3 times with TCM-199 contaning 15%(v/v) ethanol to induce pathenogenetic activation. At 6h after activation, pronuclea formation rates were 56.4% in TCM-199, 59.3% in Ham's F-10 and 74.0% in Whitten's maturation medium. At 48h after activation, 45.7%, 45.4% and 39.2% of oocytes claved in TCM-199, Ham's F-10 and Whitten's culture medium, respectively. And 44.8%, 45.5% and 43.7% of oocytes were claved in TCM-199, Ham;s F-10 and Whitten's culture medium supplemented with POCM, respectively. The rates of moular were higher in culture medium with POCM than without POCM at 96h after activation.(P<0.05)