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      • 관계적 멘토링이 경력몰입에 미치는 영향 : 멘토링 특성의 조절효과 분석

        정택진 연세대학교 교육대학원 2018 국내석사

        RANK : 247631

        The purpose of this study was to empirically test the effects of the relational mentoring on the career commitment of Korean private sector workers and to examine the moderating effect of the mentoring characteristics in that relation. The research questions were as followers; first, how does the relational mentoring attribute to the career commitment?; Secondly, does the mentoring characteristics moderate the relation between the relational mentoring and the career commitment. The research participants were 266 employees who have at least six months of work experience at Korean private company participating recently in the mentoring program. Besides, SPSS Statistics, SPSS 22.0, was used to validate the research questions, and conducted descriptive statistic analysis, exploratory factor analysis, reliability test, and Pearson's correlation analysis. Also, multiple regression analysis and hierarchical analysis were examined. A summary of the results of the study was shown below. First, it was found that the sub-factors (personal learning and growth, inspiration, self-affirmation, reliance on communal norms, shared influence and respect, trust and commitment) of the relational mentoring functions positively impacted on the career commitment. The most important order of the sub-factors was reliance on communal norms > self-affirmation > shared influence and respect > personal learning and growth > inspiration > trust and commitment. Second, it was also verified that the role of mentoring and the organizational identity partially had the moderating effect on the relationship between the relational mentoring and the career commitment. But whether the mentoring relationship is formal or informal had nothing to do with the moderating effect. Accurately, the role of mentoring had positively the moderating effect on personal learning and growth, shared influence and respect, trust and commitment. Moreover, the organizational identity of mentoring had the moderating effect regarding self-affirmation, reliance on communal norms, shared influence and respect, trust and commitment. Positive effects such as personal learning and growth, influence and respect, trust and commitment profoundly affected on protege more than it did on mentor. Enthusiastic influence of the career commitment regarding self-affirmation, reliance on communal norms, shared influence and respect, trust and commitment was strongly represented in the relationship within the company, not the relations outside of the company. Through the research, it was confirmed that the relational mentoring focusing on reciprocity and communality concerning quantum viewpoint of both mentor and protege had a pivotal role in the career commitment. In other words, both mentor and protege were strongly encouraged to do interactive and cooperative learning and growing. Active interacting with each other also inspired themselves to do the divergent and inventive thinking. Beyond, their ideal self-affirmation was figured out and identified through the relation that they have. Both mentor and protege were committed to each other without repayment, and they indeed respected. They had a positive effect on themselves based on trust and commitment. The relational mentoring allowed both mentor and protege to have the emotional bond with their career and current job, and actively motivated them to accomplish the career goal as well. Especially protege could be convinced to focus on the career commitment by raising recognition of the qualified mentoring relationship. This mechanism adequately implemented on the within company mentoring better than on the outside. Based on the results of the study, it was clarified that relational mentoring at private company had to be exploited to raise the level of the career commitment of employees, and a proposal, implication, and following study was discussed. 본 연구의 목적은 국내 사기업 직장인의 관계적 멘토링이 경력몰입에 미치는 영향을 검증하고, 관계적 멘토링과 경력몰입 간의 관계에서 멘토링 특성의 조절효과 여부를 실증적으로 검토하는데 있다. 이를 위한 연구문제는 다음과 같다. 첫째, 관계적 멘토링은 경력몰입에 어떤 영향을 미치는가? 둘째, 관계적 멘토링과 경력몰입의 관계에서 멘토링 특성이 조절하는가? 본 연구는 국내 사기업에서 멘토링 관계를 맺고 있는 총 경력 6개월 이상의 직장인 266명을 대상으로 하였다. 또한 연구문제의 검증을 위해서 SPSS 22.0 통계프로그램을 사용하였고, 기술통계분석, 탐색적 요인분석 및 신뢰도 검증, 피어슨(Pearson) 상관분석, 그리고 다중회귀분석 및 위계적 회귀분석을 실시하였다. 연구결과의 요약은 다음과 같다. 첫째, 관계적 멘토링의 하위요소인 학습 및 성장, 영감, 자기 확인, 공동규범 의존, 영향 및 존중, 신뢰 및 헌신은 모두 경력몰입에 긍정적 영향을 미쳤다. 영향력이 큰 순서는 공동규범 의존>자기 확인>영향 및 존중>학습 및 성장>영감>신뢰 및 헌신이다. 둘째, 관계적 멘토링과 경력몰입의 관계에서 멘토링 특성 중 멘토링 역할과 멘토링 조직동일성은 부분적으로 조절효과가 있었으며, 멘토링 유형은 조절효과가 없었다. 구체적으로 멘토링 역할은 학습 및 성장, 영향 및 존중, 신뢰 및 헌신에서 조절효과가 있었으며, 멘토링 조직동일성은 자기 확인, 공동규범 의존, 영향 및 존중, 신뢰 및 헌신에서 조절효과가 있었다. 즉 학습 및 성장, 영향 및 존중, 신뢰 및 헌신이 경력몰입에 미치는 긍정적 영향은 멘토 보다 프로테제에게 더 강하게 나타났다. 또한 자기 확인, 공동규범 의존, 영향 및 존중, 신뢰 및 헌신이 경력몰입에 미치는 긍정적 영향은 멘토/프로테제의 사외 관계 보다는 사내 관계에서 더 강하게 나타났다. 연구 결과를 통해 멘토와 프로테제에 대한 양자적 관점에서 상호성과 공동성에 초점을 맞춘 관계적 멘토링이 경력몰입에 중요한 역할을 하고 있음을 확인하였다. 즉 멘토와 프로테제 모두 멘토링 관계를 통해 상호 학습하고 성장하며, 신선하고 새로운 방식의 사고를 할 수 있도록 상호 영감을 주며, 관계를 통해 진정한 자아의 모습과 이상적인 자아의 모습을 확인한다. 또한 공동성에 기반하여 서로에게 보답을 바라지 않은 채 서로 도우며, 신뢰와 헌신을 기반으로 서로 존중하고 영향을 미치게 된다. 관계적 멘토링 관계는 멘토와 프로테제가 자신이 현재 가지고 있는 직업과 경력에 대한 심리적인 애착을 갖게 해주며, 경력 목표를 달성하고자 하는 동기부여도 제공한다는 결론을 내릴 수 있다. 특히 프로테제의 경우 멘토링 관계의 질적 수준에 대한 인식을 높임으로써 경력에 더욱 몰입하도록 유도할 수 있으며, 사외 관계의 멘토링 보다는 사내 관계의 멘토링 관계가 보다 유효하다고 할 수 있다. 이 결과를 바탕으로 사기업 직장인의 멘토링 활동을 통한 경력몰입 수준을 높이기 위한 인적자원개발 측면의 실천방안을 모색하였으며 연구의 시사점 및 후속 연구를 위한 제언을 논의 하였다.

      • 성령쇄신운동에 관한 영성신학적 고찰 : -그리스도교 성령 이해 및 오순절 운동과의 비교를 중심으로

        정택진 가톨릭대학교 대학원 2021 국내석사

        RANK : 247631

        성령쇄신운동은 일종의 성령운동으로서, 1960년대 후반 가톨릭 교회에서 시작되었다. 성령과 그 은사에 관한 새로운 관심을 불러일으키며 성령쇄신운동은 빠르게 성장하였다. 하지만 많은 긍정적 영향에도 불구하고 성령쇄신운동에 대한 비판적 시선과 부정적 평가들도 적지 않았다. 특히나 한국 가톨릭 교회에서는 성령쇄신운동에 대한 연구가 부족할 뿐만 아니라, 성령운동에 대한 거부감으로 그 긍정적 측면이 잘 활용되고 있지 못하다. 이에 따라 본 논문은 성령쇄신운동에 관해 영성신학적으로 고찰하기 위한 목적으로 작성되었다. 성령쇄신운동은 일종의 성령운동으로 볼 수 있기 때문에, 본 논문은 그리스도교의 성령 이해, 특히 영성사 안에서 나타났던 여러 성령운동을 살펴봄으로써 성령쇄신운동을 평가하는 기준을 마련하였다. 또한, 성령쇄신운동은 20세기 초에 시작되어 크게 번성한 개신교회의 오순절 운동의 영향을 받았고, 공통된 측면이 많기 때문에, 본 논문은 오순절 운동과의 비교를 통해서 성령쇄신운동을 평가하였다. 연구를 통해 성령쇄신운동은 그리스도교 성령론에 부합하는 건전한 성령운동임을 확인하였다. 또한, 성령쇄신운동을 비롯한 성령운동은 교회와 그리스도교 교의 안에서 전개될 때 그리스도인의 영적성장에 이바지 할 수 있다는 점도 알 수 있었다. 한편, 성령쇄신운동에서는 오순절 운동에 비해 소외계층의 자발적 참여와 그에 대한 관심이 두드러지지 않아, 보완이 필요해 보인다. 성령쇄신운동은 또한 교회일치적 측면에서 긍정적 영향을 끼칠 수 있다는 점도 확인할 수 있었다. 본 논문은 성령쇄신운동이라는 현상에만 초점을 맞춘 다른 선행연구와는 달리, 성령쇄신운동을 그리스도교 성령 이해 및 오순절 운동과 비교하였다. 따라서 본 논문은 성령쇄신운동에 대한 올바른 이해와 객관적인 평가에 도움을 줄 수 있을 것으로 보인다. The Charismatic Renewal Movement is a kind of Holy Spirit movement that began in the Catholic Church in the late 1960s. Arousing new interest in the Holy Spirit and its gifts, the Charismatic Renewal Movement grew rapidly. However, despite many positive influences, there were also many critical positions and negative evaluations of the Charismatic Renewal Movement. Especially in Korea Catholic Church, not only because of lack of studies on the Charismatic Renewal Movement, but also because of the rejection of the Holy Spirit movement, its positive aspects are not being utilized well. Accordingly, this thesis was written for the purpose of spiritual theological consideration about the Charismatic Renewal Movement. Since the Charismatic Renewal Movement can be viewed as a kind of the Holy Spirit movement, this thesis established the criteria for evaluating the Charismatic Renewal Movement by investigating the christian understanding of the Holy Spirit, especially the various Holy Spirit movement that appeared in the spiritual history. In addition, since the Charismatic Renewal Movement was influenced by the Protestant Pentecostalism that began in the early 20th century and flourished greatly, and since there are many aspects in common, this thesis evaluated the Charismatic Renewal Movement through comparison with the Pentecostalism. Through research, it has been confirmed that the Charismatic Renewal Movement is a sound Holy Spirit movement that is consistent with the Christian Pneumatology. In addition, it was found that the Holy Spirit movement, including the Charismatic Renewal Movement, can contribute to the spiritual growth of Christians when unfolded in the Church and Christian Dogma. Meanwhile, in the Charismatic Renewal Movement, the voluntary participation of the underprivileged and interest in it are less prominent than the Pentecostalism, so it seems necessary to supplement it. It was also confirmed that the Charismatic Renewal Movement could have positive effects in terms of Ecumenism Unlike other previous studies that focused only on the phenomenon of the Charismatic Renewal Movement, this thesis compared the Charismatic Renewal Movement with the Christian understanding of the Holy Spirit and Pentecostalism. Therefore, this thesis seems to be able to help the correct understanding and objective evaluation of the Charismatic Renewal Movement.

      • 유비쿼터스 SPC 시스템을 위한 관리도 선정 및 설계에 관한 연구

        정택진 경희대학교 2009 국내석사

        RANK : 247631

        오늘날과 같은 치열한 경쟁 환경에서 품질과 생산성을 향상시키고 비용을 절감하는 것은 모든 기업들의 관심사이다. 하지만 현장에서는 통계적 공정관리에 관한 전문적인 지식을 갖춘 충분한 전문가가 없기 때문에 기업들은 많은 비용을 들여 기술자를 훈련하거나 교육을 실시하는 실정이다. 따라서 본 논문에서는 비전문가들도 전문가처럼 통계적 공정관리를 적용할 수 있도록 지원하는 유비쿼터스 컴퓨팅과 네트워크 환경의 전문가 시스템 기반 u-SPC(Ubiquitous-Statistical Process Control) 시스템에 필요한 관리도 선정 기법을 제안한다. 관리도 선정 기법의 개발을 통해 u-SPC 시스템에서는 생산현장의 상황과 여건 등의 질의를 사용하여 사용자와 대화식으로 적합한 관리도를 선택하고 설계한다. 또한 공정의 크고 작은 변동을 동시에 효율적으로 감지할 수 있는 관리도 타점 방법론인 SCC(Selective Control Charting Method)를 위한 CUSUM(Cumulative Sum)을 이용한 비율 결정기법을 제안한다. 시뮬레이션을 통해 CUSUM-based SCC의 성능을 평가하고 그 속성들을 분석한다. Most companies are concerned with improving the quality and productivity as well as reducing the cost in today's highly competitive environment. But companies train employees as expert due to lack of knowledge about SPC. Thus, this paper presents control chart selection techniques for u-SPC(Ubiquitous-Statistical Process Control) under the expert system of ubiquitous computing and network place that can be utilized by non-specialist without hard training or experiences. Users select and design suitable control charts by using questions of situation and conditions as communicating with the u-SPC system from control chart selection techniques. This paper proposes a CUSUM(Cumulative Sum) based method for determining the proportions of applying control charts under the SCC(Selective Control Charting Method) which is designed to quickly detect both small and large mean shifts at once in process. Simulation results for its performance are exhibited and properties of the proposed methods are analyzed.

      • 청각장애대학생의 수화통역서비스 만족 요인에 관한 연구

        정택진 가톨릭대학교 사회복지대학원 2010 국내석사

        RANK : 247631

        본 연구는 청각장애대학생이 학교에서 제공받는 교수-학습상황에서 수화통역서비스 만족도와 만족도에 영향을 주는 요인들에 대해 알아봄으로써 청각장애대학생들의 학업적응을 위한 합리적인 수화통역서비스 지원전략을 제시하는 데 목적이 있다. 구체적인 연구목적은 다음과 같다. 첫째, 청각장애대학생의 개인적요인과 의사소통유형 그리고 수화통역방식에 따른 수화통역서비스 만족도의 차이는 어떠한가?둘째, 청각장애대학생의 학업적응을 위한 효과적인 수화통역서비스 지원전략은 무엇인가? 조사대상자들은 청각장애대학생들로 나사렛대학교, 한국재활복지대학에서 수화통역서비스를 받고 있거나 받았던 재학생과 졸업생 110명을 대상으로 2009년 9월 21일부터 10월 16일까지 재학생들은 장애학생지원기관에 의뢰를 하였고 졸업생들은 연구자가 개별적으로 만나서 설문지 조사를 하였다. 연구를 통해 나온 결론은 다음과 같다. 첫째, 개인적 요인인 성별, 출신학교, 보청기 착용 여부, 인공와우 수술 여부, 청력손실정도와 장애등급, 독해력수준에 따른 수화통역서비스 만족도에는 차이가 없는 것으로 나타났다. 다만, 3세 이상에서 청력을 손실한 집단의 만족도가 3세 이하에서 청력을 손실한 집단보다 ‘수화통역사와의 친밀성’에서 만족도가 높아 제한적인 영향을 미치는 것으로 나타났다. 둘째, 의사소통유형에서 다른 사람들과 사용하는 주(主)의사소통수단이나 가족 중 수화사용자 여부에 따른 수화통역서비스 만족도에서는 통계적으로 유의한 차이가 없는 것으로 분석되었다. 그러나 수화를 배운 시기에 따른 만족도는 수화통역사와의 윤리성과 친밀성 2개의 요인에서 집단간 차이가 유의한 것으로 나타났는데 두 요인에서 모두 10세미만과 10대보다 20대의 만족도가 가장 높았다. 셋째, 개인적 요인, 의사소통유형, 통역방식요인의 세부 측정변수들이 개별적으로 만족도에 유의한 영향을 미치는 변수로는 ‘수화를 배운 시기’가 어릴수록 상대적으로 영향력이 가장 크고, 독해력의 수준이 낮거나 ‘가족이 수화를 사용하는 경우’가 비슷하고, ‘인공와우 수술을 안했을 경우가 상대적으로 낮았다. ‘송수신모델’은 유의한 수준은 아니나 영향변수로서의 일정한 잠재력이 있는 것으로 분석되었다. 연구 결과를 바탕으로 한 청각장애대학생의 학업적응을 위한 효과적인 수화통역서비스 지원전략은, 청각장애학생의 수화를 배운 시기나 가족의 수화사용여부, 독해력의 수준과 인공와우 수술 여부 등을 종합적으로 고려하고 청각장애학생을 존중하며, 통역시간을 잘 지키고, 친절과 친밀한 신뢰관계를 유지하고 교육수화통역 상황에서는 어느 정도 잠재력이 있는 ‘송수신모델 통역방식’을 바탕으로 수화통역서비스를 제공해야 한다는 것이다. 본 연구의 함의로는 첫째, 청각장애아동에게는 청능(聽能)훈련과 언어(言語)교육과 더불어 청각장애아동의 의사소통과 학업성취를 위해 조기(早期)에 수화(手話)를 배울 수 있도록 하고, 가족들에게는 청각장애아동과의 의사소통을 위해 수화를 배우도록 환경을 조성해야 한다는 것이다. 둘째, 청각장애대학생의 수화통역서비스 만족에 가장 큰 영향을 미치는 수화통역방식으로는 교수의 강의 내용을 그대로 전달하는 ‘단어 대 단어 치환’ 중심인 ‘송수신모델’ 방식이지만 그 외에도 다양한 방식의 수화통역모델이 상존(常存)하고 있다는 것을 인식해야 하고, 수화통역사는 맞춤통역서비스를 제공할 수 있도록 자기계발을 해야 한다. 본 연구의 제한점으로는 청각장애대학생의 개인적인 변인들 즉, 청력손실부위에 따른 특성과, 언어능력, 그리고 수화의 수용과 표현능력 등을 사전에 통제하지 못하였다. 또 학교에서 수화통역이 지원되는 구체적인 요인별 접근과 수화통역사의 수화통역 범위와 방식 및 수화통역 지원 과목 등의 통제가 이루어지지 못하여 변수 사이를 교차한 정보를 제시하는데 제한이 있다. 제언으로는 첫째, 청각장애학생들에게는 학습권과 선택권이 있음을 인식해야 한다. 둘째, 대학들은 청각장애인이 학교에 입학함과 동시에 모든 학습지원서비스를 제공해야 한다. 셋째, 거점 수화통역센터의 확대 개편이 필요하다. A Study on the Satisfaction Factors on Sign Language Interpreting Service of Deaf College students The purpose of this study was to identify the factors affecting deaf college students' satisfaction with the sign language interpreting service provided for in the teaching-learning situation and thereby, suggest some reasonable sign language interpreting service useful to the deaf college students for their adaptation to the school life. For this purpose, the following study points were set up; First, how about the differences of deaf college students' satisfaction with the sign language interpreting service depending on their demographic variables, communication types and sign language interpreting methods? Second, what would be the effective strategies supporting the sign language interpreting service for deaf college students' adaptation to the school life? For this study, the researcher sampled 110 deaf college students who were receiving the sign language interpreting service or who had received the service at Korea Nazarene University or Korea National College of Rehabilitation & Welfare. For the period from September 21 through October 16, 2009, the researcher asked the institutions to survey their students with a questionnaire designed by the researcher, while visiting the graduates personally for the survey. The results of this study can be summarized as follows; First, satisfaction with the sign language interpreting service did not significantly differ depending on such demographic variables as gender, academic background, hearing aid, artificial snail tube surgery, degree of inaudibility and rating of handicap and level of reading comprehension. Merely, those who had lost audibility at the age of 3 or older were more satisfied with the sign language interpreting service in terms of 'familiarity with sign language interpreters' than those who had lost audibility at the age of younger than 3. Second, satisfaction with the sign language interpreting service did not significantly differ depending on primary communication methods or whether other family members were using the sign language or not. However, satisfaction with the sign language interpreting service differed significantly in terms of morality and familiarity with sign language interpreters depending on the periods during which the subjects had learned the sign language interpreting service. In both therms, those in their 20's were more satisfied than those in their teens or younger. Third, as a result of analyzing the differences of satisfaction depending on demographic variables, communication types and interpretation methods, it was found that the earlier the subjects had learned the sign language, the factors were more influential, and that those with the lower the level of reading comprehension, or those with other family members using the sign language or those who had not undergone the artificial snail tube surgery were less satisfied. 'The transmission and receipt model' was an influential variable, though not significant. Summing up, the effective strategies supporting the sign language interpreting service for the deaf college students should take into consideration the period during which they learned the sign language, the family members using the sign language, the level of reading comprehension, the artificial snail tube surgery, etc., while respecting the deaf college students, keeping the service time, and maintaining a kind and close relationship of trust and thus, should provide for the sign language interpreting service based on 'the transmission and receipt interpretation model' which is deemed potential in the educational sign language interpreting situation. The implications of this study are summed up as follows; First, deaf children should be given opportunities to have auditory training and linguistic education as well as learn the sign language for communication and academic achievement, while their family members should be encouraged to learn the sign language for their communication with their deaf children. Second, the sign language interpretation method most affecting deaf college students' satisfaction with the sign language interpretation services is 'the transmission/receipt model' centered about 'substitution between words', delivering the contents of teacher's instruction intact to the students. However, other diverse sign language interpretation models exist, and therefore, sign language interpreters are obliged to make efforts for their self-development to provide for customized interpretation services. This study is limited in that it could not well control deaf college students' demographic variables such as damaged parts of the auditory organ, linguistic competence and accommodation and expression of the sign language. In addition, since this study could not take into consideration the specific factors of the sign language interpretation services of the school and could not control the variables regarding scope and methods of the sign language interpretation as well as the sign language interpretation subjects, the information crossing the variables might not be sufficient. The suggestions are put forwards as follows. First, we should be aware of deaf students' rights to learn and choose. Second, colleges are obliged to provide the deaf students with every possible learning support service. Third, region-wise sign language interpretation centers need to be expanded and reorganized.

      • 세포 스트레스에 의한 단백질 생합성 조절 효소의 활성변화에 관한 연구

        정택진 배재대학교 대학원 2006 국내석사

        RANK : 247631

        동물세포는 스트레스 환경에 처해 있을 때 생존을 위한 다양한 방어기작을 발동하는데 그 중에서 중요한 기작중의 한 가지가 단백질 생합성을 조절하는 것이다. 세포내의 단백질 생합성은 개시, 해독, 종결의 세 과정으로 나누어 진행된다. 단백질 생합성의 해독 과정은 mRNA에서 polypeptide를 형성한다. 산화 스트레스가 단백질 생합성을 방해하는 원인이 된다고 밝혀졌지만, 단백질 합성에 어떠한 영향을 주는지에 대해서는 밝혀지지 않았다. 따라서 산화 스트레스가 단백질 생합성의 해독 과정에 어떠한 영향을 주는지 알아보기 위해 본 연구를 수행하였다. 세포의 스트레스 환경에서 단백질 생합성을 조절하는 마지막 단계의 효소인 eukaryotic elongation factor-2 (eEF-2), eukaryotic elongation factor-2 kinase (eEF-2K)의 활성도 변화를 조사하면 스트레스와 단백질 생합성 기작간의 생리적 연관 관계에 대한 이해를 얻을 수 있다. eEF-2와 eEF-2K는 유전정보의 해독에서 신장 단계를 조절하는 주된 효소이다. 활성화된 eEF-2K에 의해 eEF-2가 인산화 되면 세포의 전체적인 단백질 생합성이 정지된다.활성산소종 (reactive oxygen species, ROS)과 저산소 상태와 같은 산화 스트레스가 단백질 생합성에 어떠한 영향을 주는지 알아보고자 세포를 hydrogen peroxide (H2O2)와 CN-로 처리하였다. H2O2를 시간에 따라 처리하였을 경우 eEF-2의 단백질 양은 거의 일정하게 유지되며 eEF-2의 인산화 정도는 짧은 시간에 증가한 후 일정 양을 유지한 후 3 시간 이후부터 감소한 후 18 시간에 다시 증가한 후 24 시간에 최고가 되며 시간이 흐를수록 점점 감소했다. eEF-2K의 단백질 양은 6 시간 이후에 증가하기 시작한 후 18 시간에 최고수준에 도달하여 그 수준이 지속되는 것을 확인하였다. eEF-2K의 인산화 정도는 6 시간까지 대조군에 비하여 증가한 후 시간이 흐를수록 조금씩 감소하는 것을 확인하였다. C^(-)로 세포를 10 분 동안 처리한 후 정상 배지로 교체해 주었을 경우 eEF-2의 단백질 양은 큰 변화를 관찰할 수 없었지만 eEF-2의 인산화 정도는 대조군 수준으로 회복된 후 3 시간 만에 최고로 증가하며 시간이 늘어날수록 대조군에 비하여 감소하는 것을 확인하였다. eEF-2K의 단백질 양은 대조군 수준으로 회복된 후 대조군에 비하여 감소하는 것을 확인하였고 eEF-2K의 인산화 정도는 3 시간까지 증가한 후 6시간 만에 대조군 수준으로 회복되고 그 이후에는 이 보다 더 감소하였다. H2O2와 CN-에 의한 세포 스트레스에 의해 세포는 에너지를 절약하기 위해 단백질 생합성을 정지시키는 방법 중 가장 효율적인 방법인 eEF-2의 인산화를 증가시킨다. 그로인해 세포는 단백질 합성이 정지된 후 필요에 의해 eEF-2의 인산화는 감소하고 탈 인산화가 증가하여 단백질 합성이 일어나게 되는 민감한 반응을 하는 것을 확인 할 수 있었다.HeLa 세포를 세포 주기상의 특정 기에 정지시키는 시약을 처리한 결과 1 mM hydroxyurea (HU)가 첨가된 배지에서 16 시간 배양하면 G1/S 기에 93%, 1 mM HU가 첨가된 배지에서 12 시간 배양 후 새로운 배지로 갈아주고 1 μM bisbenzimide hoechst 33342 fluorochrome (H33342)를 처리하면 G2/M 기에 91%, 1 μM Nocodazole (Noco)가 첨가된 배지에서 17 시간 배양하면 M 기에 97% 정지되는 것을 확인하였다. eEF-2의 단백질의 양은 G1/S 기에 증가하여 G2/M 기에 최대로 증가하고 M 기에는 대조군 수준이 되었다. eEF-2K의 단백질 양은 천천히 감소하다 M 기에 가장 낮아졌다. eEF-2의 인산화 정도는 M 기에 최고가 되며 G1/S, G2/M 기에서는 대조군보다 낮았다. eEF-2K의 인산화 정도는 G1/S 기에 최고 증가하고 G2/M 기에 증가하며 M 기에는 대조군에 비하여 감소했다. 정지된 세포에서 신장 인자의 위치를 확인 한 결과 세포질에 존재하며, 이 인자들에 의해 신장 단계가 조절되는 것을 확인하였다. G1/S, G2/M 기에는 DNA 복제를 위한 효소들과 세포 분열을 위해 필요한 단백질이 2 배로 증가해야 하기 때문에 단백질 합성이 많이 일어나야 하므로 eEF-2의 단백질의 양은 증가하고 인산화는 감소하는 양상을 보이는 것을 확인할 수 있었다. 반면 M 기는 세포가 분열하기 위한 단계로 단백질 합성이 일어나지 않기 때문에 eEF-2의 단백질의 양은 감소하고 인산화 정도는 증가하는 것을 확인할 수 있었다.따라서 세포 스트레스와 세포 주기에 따른 단백질 생합성 과정 중 해독과정은 eEF-2와 eEF-2K의 단백질 양과 인산화 상태의 평형에 의해 조절되는 것으로 보인다. Protein biosynthesis is one of essential processes of the cell in order to keep their life events under cellular stresses. Intracellular protein biosynthesis consist of three working steps; initiation, elongation, termination. The elongation phase of protein biosynthesis involves the correct decoding of the mRNA into the amino acid sequence of the encoded polypeptide. In most eukaryotes, two distinct protein elongation factors (eEF-1 and eEF-2) are required for elongation. Each is active as a complex with GTP. eEF-1 is a multimer and mediates the binding of the cognate aminoacyl-tRNA to the ribosome, while elongation factor-2 (eEF-2), a monomer, catalyses the movement of the ribosome relative to the mRNA. Elongation factor-2 kinase (eEF-2K) is a Ca^(2+)/calmodulin-dependent enzyme; therefore, it is also known as Ca^(2+)/calmodulin-dependent protein kinase Ⅲ. It is a highly specific kinase: the only known substrate it phosphorylates is eEF-2. The eEF-2 and eEF-2K are the key enzymes in translation of genetic information. That is, phosphorylates eEF-2 by active eEF-2K resulting in overall stop of protein biosynthesis in the cell. These two proteins are important indicators to understand cellular responses in protein synthesis against stresses.Reactive oxygen species (ROS) are potent oxidants capable of damaging all cellular components including DNA, protein, and membrane lipid. To protect against the toxicity of ROS, aerobic organisms are equipped with an array of defense mechanisms. The cellular mechanism of how ROS affect elongation step of translation is not well known. Especially, how the oxidative condition controls the balance among the activities of proteins involved in elongation procedure is not clear. For the different cellular oxidative condition, HeLa cells were treated with H_(2)O_(2) or CN- for designated period, and then the levels of eEF-2 and eEF-2K and phosphorylation were immunochemically determined.When the cells was treated with H_(2)O_(2), the protein level of eEF-2 was not changed. The phosphorylation level of eEF-2 was increased by H_(2)O_(2) and maximal phosphorylation reached in 24 h. The level of eEF-2K was increased and reached the highest level in 18 h. The phosphorylation level of eEF-2K also increased. When the cells was treated with CN^(-), the protein level of eEF-2 and its kinase were not changed. The phosphorylation level of eEF-2 was increased by CN^(-) and maximal phosphorylation reached within 3 min. The phosphorylation level of eEF-2K increased by CN_(-) and maximal phosphorylation reached in 5 min. The effect of recovery from 2 mM CN- treatment was examined. The protein level of eEF-2 was not changed. The maximal phosphorylation of eEF-2 was reached within 3 h. The level of eEF-2K was kept as basal level. The phosphorylation level of eEF-2K was increased in 3 h and returned to basal level within 6 h. Phosphorylation of eEF-2 and eEF-2K seemed to have increasing and decreasing pattern and due to oxidative stresses the result is H_(2)O_(2) and CN^(-), recovery. Phosphorylation of eEF-2 is the best method that reduces the energy in bad conditions under oxidative stresses. Under good conditions, phosphorylation of eEF-2 is reduced due to operation of protein synthesis.More than 90% of HeLa cells were effectively arrested at G1/S, G2/M, and M phases by the treatment of 1 mM hydroxyurea(HU) for 16 h, 1 mM HU (12 h)+1 μM Hoechst33342 for 12 h, and 1 μM Nocodazole for 17 h, respectively. HeLa cells were released from the arrest by the change of medium to normal one. The cellular response of protein synthesis to conditions imposing stresses on cell cycle process was investigated by this arrest/release method.The level of eEF-2 started to increased at G1/S and reach the highest at G2/M. M phase showed control level of eEF-2. The level of eEF-2K arrested at each phase showed a slow decrease with the lowest at M. Phosphorylation level of eEF-2 was highest at M whereas G1/S showed lower than control. That phosphorylation level of eEF-2K was highest at G2/M and lowest at M which was much lower than control. G1/S and G2/M phases were increased with phosphorylation of eEF-2K and decreased in phosphorylation of eEF-2. So these phases increased in eEF-2 due to increased in protein synthesis. G1 is the phase gap during the preparation of cells for DNA replication process. S phase is defined as the stage where DNA synthesis occurs. G2 is the second phase gap during the preparation of cells for the process of division. M phase was increased with phosphorylation of eEF-2 and decreased in phosphorylation of eEF-2K. So this phase decreased due to protein synthesis. M stands for mitosis, the phase where the replicated chromosomes are segregated into separate nuclei and cytokinesis take place to form two daughter cells.Accordingly, translation processes seemed to be well controlled by balancing the protein levels and phosphorylation status of eEF-2 and eEF-2K during the cell cycle and cellular stresses.

      • Development of anti-cancer vaccines by functional modulation of dendritic cells

        정택진 서울대학교 대학원 2013 국내박사

        RANK : 247631

        Introduction: Dendritic cells (DCs) are professional antigen presenting cells (APCs) which play a crucial role in immune responses. Recently, diverse strategies have been employed to develop DC-based therapeutic vaccines. However, DC-based immunotherapy has been hampered by the low migration efficacy of DCs to draining lymph nodes. To overcome this difficulty, multifunctional core-shell nanoparticles consisting of a superparamagnetic iron oxide core covered with a photonic ZnO shell were used to monitor the ex vivo antigen loading and in vivo tracking of DCs. In addition, reactive oxygen species (ROS) were considered as a possible stimulator of maturation and migration of DCs.Methods: In this study, Fe3O4-ZnO core-shell nanoparticles were synthesized and a novel ZnO-binding peptide (ZBP) was found to make use of the nanoparticles as an antigen carrier. The binding affinity between the nanoparticles and ZBP was determined by isothermal titration calorimetry. Ex vivo antigen loading and in vivo tracking of DCs were detected using imaging techniques. C57BL/6 mice with DCs containing the nanoparticle-carcinoembryonic (CEA) antigen complex were immunized to detect CEA specific T-cell immunity. Photosensitizer was used to generate intracellular ROS. Maturation and migration of DCs controlled by intracellular ROS using a photosensitizer were analyzed by diverse biochemical and imaging techniques. C57BL/6 mice were immunized with mature DCs pulsed with CEA peptides and then the CEA-specific cellular immunity was analyzed.Results: The nanoparticles were efficiently taken up by DCs within one hour without any reagents and detected in vitro by confocal microscopy and in vivo by magnetic resonance imaging. Mice immunized with DCs containing the nanoparticle-antigen complex showed enhanced antigen specific T-cell immunity. In addition, intracellular ROS surge generated by the photosensitizer induced maturation of DCs and significantly enhanced migration in vitro and in vivo. Enhanced chemotactic ability was caused by activation of p38 and JNK MAP kinases as well as RhoA GTPase. The frequency of CEA-specific, IFN-γ-producing CD4+ or CD8+ T cells increased after immunization with mature DCs controlled by intracellular ROS surge exhibited. Finally, mice immunized with DCs controlled by intracellular ROS surge showed enhanced CEA-specific T-cell responses, delayed tumor growth and better survival than that of the controls. Conclusions: Taken together, the core-shell nanoparticles could be applied to diverse DC-based immunotherapies that need to monitor antigen loading in vitro and track DCs in vivo to ensure consistent clinical efficacy. In addition, DCs controlled with photo-switchable generation of intracellular ROS surge with a photosensitizer could be applied to diverse DC-based cancer immunotherapies as an efficient DC-activating adjuvant. *This work is published in Nature Nanotechnology (Cho NH, Cheong TC, Min JH, Wu JH, Lee SJ, Kim D, et al. A multifunctional core-shell nanoparticle for dendritic cell-based cancer immunotherpay. Nature Nanotechnology. 2011;6(10):675-82). -------------------------------------Keywords: Dendritic cell, Immunotherapy, Nanoparticle, Reactive oxygen speciesStudent number: 2009-30612

      • 固體의 熱傳導係數 測定에 影響을 미치는 因子에 關한 硏究

        정택진 충남대학교 교육대학원 1990 국내석사

        RANK : 247631

        A steady state axial heat flow method is employed for mesurements of thermal conductivity of solids. General and specific factors which influence the thermal conductivity measurements on solids is discussed. The factors considered in the study comprise applied pressure, contact grease, outside insulation and flow rate of coolant.A summary of major results follows: 1) Thermal contact resistance is to be an important influence in the mesurement of thermal conductivity. Even when elaborate precautions are exercised, this influence cannot entirely eliminated.2) The application of pressure increases the measured value of thermal conductivity.3) Contact grease decreases thermal contact resistance remarkably, because thermal contact between test specimen and the standard cylinder.4) Well-equipped insulation makes the thermal conductivity measurement good.5) Variation of the flow rate of coolant does not influence the conductivity measurements.

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