외상후 스트레스 동물모델에서 공포기억에 미치는 원지의 효능 연구

조윤주 경희대학교 동서의학대학원 2015 국내박사

외상후 스트레스 동물모델에서 공포기억에 미치는 원지의 효능 연구 조윤주 경희대학교 동서의학대학원 동서의학과 한의학전공 지도교수: 류재환, 맹성호 외상후 스트레스 장애, Post-traumatic stress disorder(PTSD)는 극도의 스트레스성 경험 이후 지속적인 고통과 공포감을 느끼며, 정상적인 사회생활에 부정적인 영향을 끼치는 질환으로 현재 심각한 문제로 알려져 있다. 다른 스트레스성 질환과는 달리 PTSD는 원인규명이 명확하여, 공포가 형성되고 소거되는 과정에서 공포기억의 응고와 재응고를 억제, 공포기억의 소거를 촉진, 공포기억의 재설립 또는 재생억제를 통해 공포기억을 경감하거나 소거함으로써 치료효과를 기대할 수 있는 질환으로 다뤄진다. 현재까지 이에 대한 치료법으로 신경과학, 인지과학 분야에서 약물치료와 정신치료요법이 사용되어왔고 비교적 안전하게 병행 가능한 약물개발에 초점이 모아지고 있으나 효과적으로 적용 가능한 약물은 미비한 상황이여 동서의학분야의 다양한 연구가 이루어지고 있다. 원지는 동양의학에서 신경계를 안정시키는 약물로써, 현대의학에서는 신경보호효과, 학습능력 개선 효과, 항우울〮•항불안 효과제로 사용되어진다. 특히 PTSD동물모델에서 공포기억과 관련된 행동학적 변화들을 감소시킨 보고는 원지가 공포감정과 관련된 스트레스성 질환에 효과적인 약물로서의 가능성을 제시하였다. 본 연구에서는 원지가 공포기억의 형성을 감소시킨다는 선행연구의 결과에 따라 원지가 외상후 스트레스 동물모델에서 공포기억에 미치는 영향을 확인하고자 하였다. 이 연구를 위해 조건화 공포 패러다임 이용하였으며, 무조건적 자극(전기충격)과 조건적 자극(백색소음)의 조건적 자극에 따라 형성된 공포기억 형성기전에서 기억의 응고, 재응고, 소거, 재설립, 재생과정에 제어하는 원지의 효과를 단계별로 관찰하였다. 재응고 과정은, 맥락과 소리단서에 3분간 노출하여 생쥐의 공포반응을 측정하였다. 공포기억의 소거 효과는, 소리단서에 30회 반복노출 하거나 맥락에 30분간 노출한 후 생쥐의 공포반응을 측정하였다. 1회 전기충격으로 공포기억이 재생되어 발현이 되는 재설립 과정은, 30회의 조건적 자극으로 공포기억 소거 후 다른 맥락의 소리단서에 노출하여 측정하였다. 공포기억 형성기전의 과정별로 원지의 제어효과를 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 단1회 원지투여로 진행된 맥락과 소리단서의 반복적 노출에 의한 공포기억의 재응고, 소거에 대한 원지의 제어효과는 나타나지 않았다. 또한 원지는 맥락과 소리단서의 반복적 노출에 의한 공포기억 소거를 촉진하지는 않았지만, 공포기억 소거 후 공포기억이 재설립 되거나 새 맥락에서 재생되어 발현되는 정도를 감소시켰다. 위의 결과에 따르면, 원지는 공포기억이 재응고되는 과정을 감소시키거나, 공포기억 소거를 촉진 하는데 효과적이지 않았지만, 공포기억이 재설립 되고 재생되는 것을 감소시키는데 효과적 이였다. 이러한 결과는, 원지가 PTSD로 인한 기억의 흔적을 효과적으로 소거하여 공포기억이 재생되어 발현되는 것을 억제하며, 공포가 다시 재설립 되고 재생되는 과정에서 적용 가능한 치료약물로서의 가능성을 제시해 주었다. 본 연구는 외상후 스트레스 장애 환자에서 정확한 투여 시점을 찾기 위한 근거를 마련하였고, 기존의 다른 치료들과 병행하여 치료 효과를 기대할 수 있는 비교적 안전한 천연약재임에 의의가 있다.

악성종양에 사용되는 천연물약재의 항암효과에 대한 대체보완의학적 문헌고찰

오선민 경희대학교 동서의학대학원 2016 국내석사

본 연구에서는 본초에 관한 각종 문헌을 대상으로 선발된 418종의 천연약재를 1차적으로 항암활성 작용기전에 부합하는 암 종류로 분류하였으며, 2차적으로는 천연약재의 생리활성 물질 및 유효성분 등을 연구하였다. 총 418종류로 선발된 천연약재 중에서 111종류(26.55%)가 항암생리물질이 존재하는 것으로 조사되었으며, 폐암에 관련된 천연약재는 13종류(3.10%)로 가장많았고, 간암은 8종류(1.90%), 유방암은 7종류(1.67%), 자궁경부암, 백혈병, 전립선암, 위암은 5종류(1.20%)였으며, 대장암, 난소암, 고형암 등이 각각 4종류(0.95%)로 나타났다. 2014년 현재 우리나라 3대 사망원인은 암(악성신생물), 심장질환, 뇌혈관 질환으로 나타나고 있으며, 2004년 이후로 매년 사망원인 1위는 암으로 조사되고 있다. 그러나 암에 대한 현대의학은 꾸준하게 발전되고 있음에도 불구하고 서구 사회에서의 보완대체의학은 문화적, 교육적, 사회적 배경에 따라 다양한 형태로 발전되고 있으며, 이용 또한 급속하게 증가하고 있다. 또한 현대의학의 체계적 한계와 암 치료에서 발생하는 다양한 부작용에 대한 반발에서 우리나라에서도 보완대체의학의 존재감이 새롭게 조명되고 있으나 과학적 근거가 부족한 민간요법의 부작용 실태도 심각한 상황이다. 따라서 보완대체의학 차원에서 본 연구는 2차 암으로의 전이를 예방할 수 있는 식이요법과 기능성 식품으로서의 천연약재 활용에 과학적 기초자료를 제공하고자 한다.

Effects of Tetramethylpyrazine on Lipopolysaccharide-Induced Morphological Activation of Microglia in the Mouse Brain

김평수 경희대학교 동서의학대학원 2017 국내박사

ABSTRACT Effects of Tetramethylpyrazine on Lipopolysaccharide-Induced Morphological Activation of Microglia in the Mouse Brain Pyungsoo Kim Department of Oriental Medical Science Graduate School of East-West Medical Science Kyung Hee University (Supervised by Prof. Nak-Won Sohn, O.M.D., Ph.D.) Neuroinflammation is characterized by microglial activation and excessive releasing of pro-inflammatory mediators. Tetramethylpyrazine (TMP) exhibits neuroprotective effects and attenuates microglial activation. The purpose of this study was to evaluate the effects of TMP on morphological changes in microglia under neuroinflammatory conditions in vivo. Mice were treated intraperitoneally (i.p.) with a single dose of lipopolysaccharide (LPS; 3 mg/kg). Two doses (15 or 30 mg/kg) of TMP were administered orally; the first was administered one hour prior to LPS with the second administered 24 h post-injection. TMP treatment significantly reduced the expression of Iba1 and improved morphological indicators of microglial activation. TMP treatment significantly reduced microglial cell-body size and Iba1 expression levels in the brain tissue. This was accompanied by significantly extended processes in, and an increased territory area of individual microglial cells, particularly in the hypothalamus. TMP treatment also significantly inhibited the LPS-induced increase in TNF-α, IL-1β, COX-2, and iNOS expression in the brain tissue. In addition, TMP ameliorated the LPS-induced depressive-like effects. Using an in vivo animal model, the present study has shown that TMP attenuates the morphological activation of microglia in the brain. Tetramethylpyrazine이 lipopolysaccharide에 의한 생쥐 뇌조직의 형태학적 미세아교세포 활성화에 미치는 영향 김 평 수 경희대학교 동서의학대학원 동서의과학과 한의과학전공 (지도교수 : 손 낙 원) 중추신경계 염증은 미세아교세포 활성화와 과도한 염증성 매개물질들의 분비를 특징으로 한다. Tetramethylpyrazine (TMP)은 신경손상 보호 작용이 있으며 미세아교세포 활성화를 억제하는 작용이 있다. 본 연구에서는 TMP가 중추신경계 염증에서 미세아교세포의 형태학적 활성화에 미치는 영향을 관찰하고자 하였다. 생쥐에 lipopolysaccharide (LPS, 3 mg/kg)를 1회 복강주사하였으며, TMP를 15 mg/kg 또는 30 mg/kg의 용량으로 LPS 주사 1시간 전과 24시간 후 2회 경구투여 하였다. TMP는 Iba1 발현을 억제하고, 미세아교세포 활성화의 형태학적 지표들을 유의하게 변화시켰다. TMP는 미세아교세포체의 크기를 유의하게 감소시키고, 돌기들을 확장하여 개별 미세아교세포가 차지하는 영역을 유의하게 확장하였다. 이러한 형태학적 변화는 시상하부에서 특히 현저하였다. 또한 TMP는 LPS에 의해 증가된 뇌조직의 TNF-α, IL-1β, COX-2 및 iNOS 발현을 유의하게 억제하였으며, LPS에 의한 우울증 유사행동을 유의하게 개선하였다. 그러므로 본 연구는 in vivo 동물실험에서 TMP가 미세아교세포의 형태학적 활성화를 약화시키는 작용이 있다는 것을 보여 주었다.

녹각 홍삼 복합물이 운동능력 및 지구력에 미치는 영향

박송이 경희대학교 동서의학대학원 2016 국내석사

要約 녹각·홍삼 복합물 운동능력 및 지구력에 미치는 영향 목표: 녹각·홍삼 복합물의 운동능력 및 지구력에 미치는 영향을 알아보기 위해 4주령 SD rat으로 약물투여에 따른 Treadmill exercise test를 통해 운동시간을 비교하였고, 5주령의 ICR mouse로 Cold swimming test를 통해 수영 시간과 혈중 항피로 지표 lactic acid, Free fatty acid, LDH 및 근손상 지표 creatinine을 확인하여 비교하였다. 방법: 실험에서 사용한 녹각과 홍삼은 경희의료원 한방병원에서 구입하여 추출하여 사용하였고, CoQ10은 일동제약 코큐텐100mg 제품을 구입하여 사용하였다. 각 실험은 rat과 mouse에서 각각 대조군, 코큐텐 단독 투여군, 녹각·홍삼 복합물과 코큐텐 동시 투여군으로 나누어 실시되었으며, rat은 Treadmill exercise test를 통해 운동시간을 측정하여 운동능력의 향상 정도를 비교하였고, mouse의 경우 Cold swimming test를 통해 익수할 때까지의 수영 시간을 측정하고 혈중 항피로 지표 lactic acid, Free fatty acid, LDH 및 근손상 지표 creatinine을 확인하여 비교하였다. 체중은 주2회 측정되었고 1주간 적응시킨 뒤 2주간 사육하였다. 결과: (1) Rat을 이용한 Treadmill 실험에서는 녹각·홍삼 복합물과 CoQ10을 동시 복용하였을 때 운동능력이 증가하는 경향을 보이나 유의한 차이는 없었고 상위 4개 개체를 이용한 분석에서는 유의한 수준에서 녹각·홍삼 복합물과 CoQ10을 동시 투여한 Rat에서 현저히 운동능력이 늘어난다. (2) Mouse를 이용한 Cold swimming 실험에서는 CoQ10 단독 복용으로도 운동능력이 유의하게 늘어나고 녹각·홍삼 복합물과 CoQ10을 동시 복용하였을 때 유의한 수준으로 운동능력이 현저히 늘어난다. 운동능력이 늘어남에도 불구하고 근육의 피로도는 유의한 수준으로 줄어들었다. 결론: 녹각·홍삼·CoQ10 복합물은 운동능력의 향상과 지구력에 유의한 향상을 가져온다고 볼 수 있다. 하지만 이 녹각·홍삼 복합물이 개체 특이성을 갖는지에 대해서는 보다 구체적인 실험연구가 필요하다. abstract Ergogenic Effect of Extract with Old Antler and Red Ginseng Objective: This study evaluated the effect of extract with old antler and red ginseng on exercise and endurance capacity in rats and mice. Methods: The extract of old antlers and red ginseng was manufactured by the pharmacy department of Kyung Hee oriental medical hospital, and CoQ10 was used, manufactured by Ildong pharmacy CoQ10 100mg. 24 rats and 30 mice were divided into three groups; Contol, CoQ10 alone, extract with old antler and red ginseng and CoQ10. The ergogenic effect was evaluated by administering the extract with old antler and red ginseng and coenzymeQ10 to rats, and measuring the time to exhaustion during treadmill running and endurance capacity was assessed by measuring cold water swimming time and lactic acid, free fatty acid, LDH, and creatinine in each group's blood. One week from the end of treatment, we calculated time during the 2 weeks. Results: (1) In the treadmill test with rats, there is a tendency to increase in ergogenic effect, but it does not make a significant difference. (2) In the cold swimming test with the mouse, coenzymeQ10 group has an effect on increasing, while the extract with old antler and red ginseng, and the coenzymeQ10 group also has a pronounced effect on increasing. (3) In blood test of the three groups, the degree of muscle fatigue decreased, although the ergogenic effect increased. Conclusions: There was an ergogenic effect using the extract of old antler and red ginseng, but we need to study that extract that contains old antler and red ginseng and determine the individual specificity.

Aβ로 인한 기억손상과 염증에 대한 법제된 황의 보호효과.

마장원 경희대학교 동서의학대학원 2017 국내석사

고령화사회에 진입함에 따라 Alzheimer’s disease (AD)와 같은 신경퇴행성 질환이 증가하고 있지만 아직도 치료법은 확실하지 않아 최근 천연물에서 이 문제를 극복하고자 하는 노력이 이루어지고 있다. 법제된 황 (detoxyfied sulfur, DS) 는 예로부터 한의학과 대체의학분야에서 널리 이용되고 있지만, 항염증 효과 외에는 특정 질병에 대한 실험적 증거가 충분하지 않다. 따라서 이번 연구에서는 AD모델에서 DS가 손상된 학습 및 기억능력에 대한 보호효과와 항염증효과를 검증하고자 하였다. 이를 위하여 Aβ를 처리하여 AD에 대한 동물모델을 만들어 실험을 진행하였으며, 공간에 대한 학습 및 기억 능력을 시험할 수 있는 Morris 미로실험과 특정 단백질의 분포 및 발현량의 변화를 알아보기 위해 면역조직염색화학법, western blot을 이용하였다. Morris 미로 실험에서는 Aβ에 의해 증가한 도피시간을 DS를 함께 처리함으로써 감소시킬 수 있었고, 발판이 있는 공간에 머물러 있는 시간을 증가시켰다. 면역조직염색화학법 결과, DS가 AD모델에서 증가한 Aβ와 RAGE의 양성반응 영역을 줄였으며, western blot의 결과에서도 Aβ와 COX-2의 발현을 감소시키고, BDNF는 증가시켰다. 이러한 결과는 DS가 AD로 인해 손상된 공간학습능력, 공간 인식 및 기억능력 장애에 대해 보호효과가 있는 것으로 여겨지며 Aβ의 세포내 수준을 낮춰줌으로 염증반응 또한 줄여줄 것이라 여겨지는 바, DS는 AD병증을 극복하는데 가치있는 물질로 사려된다.

Antiangiogenic effect of ethanol extract of Vigna angularis via inhibition of pVEGFR2, pAkt and eNOS

권오성 경희대학교 동서의학대학원 2015 국내석사

Though dietary azuki bean (Vigna angularis) seed containing antioxidant proanthocyanidis was known to have multi-biological activities including antioxidant, hypotensive, anti-inflammatory and immunomodulatory activities, the anti-angiogenic activity of ethanol extract of Vigna angularis (EVA) was never reported so far. Thus, in the present study, the anti-anagigenic mechanism of EVA was examined in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). EVA showed weak cytotoxicity in HUVECs, while it significantly suppressed the VEGF induced proliferation of HUVECs. Consistently, wound healing assay revealed that EVA inhibited the VEGF induced migration of HUVECs. Also, EVA abrogated the VEGF induced tube formation of HUVECs in a concentration dependent fashion. Furthermore, matrigel plug assay showed that EVA significantly reduced the hemoglobin level of matrigel plug in mice compared to untreated control. Of note, EVA effectively attenuated the phosphorylation of FLK-1 for VEGFR2, and Akt as well as the expression of eNOS in VEGF treated HUVECs. Overall, our findings suggest that EVA inhibits angiogenesis in VEGF treated HUVECs via inhibition of pVEGFR2, pAkt, pERK and eNOS. 일상에서 자주 복용하는 적소두에는 항산화작용의 프로안토사이아닌 등을 포함한하여 항산화, 혈압강하, 항염증, 및 면역조절 작용 등 다양한 생리작용을 보이는 것으로 알려져 있으나 아직까지 혈관형성저해 작용은 보고된 바가 없다. 이에 본 연구에서는 적소두 에타놀추출물의 혈관형성저해작용을 실험적으로 입증하였다. 1. 적소두 에타놀추출물은 사람탯줄유래내피세포[HUVECs]에 약한 세포독성을 보였다. 2. 적소두 에타놀추출물은 혈관내피성장인자[VEGF] 처리된 사람탯줄유래내피세포[HUVECs]의 비정상적 증식을 대조군에 비해 유효하게 억제하였다. 3. 적소두 에타놀추출물은 Wound Healing Assay법에 의해 혈관내피성장인자[VEGF]처리된 사람탯줄유래내피세포[HUVECs]의 수복을 위한 이동성을 대조군에 비해 유효하게 억제하였다. 4. 적소두 에타놀추출물은 Tube Formation Assay법에 의해 혈관내피성장인자[VEGF]처리된 사람탯줄유래내피세포[HUVECs]의 수복을 위한 이동성을 대조군에 비해 유효하게 억제하였다. 5. 적소두 에타놀추출물을 1주간 C57BL6생쥐에 전처치한후 수행된 Matrigel Plug Assay법에 적소두 에타놀추출물은 혈관형성을 간접적으로 평가한 헤모글로빈 정량에서 헤모글로빈수치를 대조군에 비해 유의히게 억제하였다. 6. 적소두 에타놀추출물은 Western blotting법에 의해 혈관내피성장인자[VEGF]처리된 사람탯줄유래내피세포에서 혈관내피성장인자수용체2[VEGFR2] 및 Akt인산화를 억제하고, eNOS의 발현을 억제하였다. 이상의 결과로 적소두 에타놀추출물은 혈관내피성장인자수용체2 [VEGFR2] 및 Akt인산화를 억제하고, eNOS의 발현을 억제작용을 통해 혈관형성저해 작용을 나타내는 것으로 사려된다.

이동성 저하 노인의 스트레스 경로 및 회복탄력성의 대응효과 : 스트레스 대처 적응 모델을 중심으로

엄사랑 경희대학교 동서의학대학원 2018 국내석사

본 연구는 Lazarus와 Folkman(1984)의 스트레스-대처-적응 모델(Stress-Coping-adaptation Model)을 바탕으로 노인의 이동성 저하로 인한 스트레스 경로를 검증하는 하고, 스트레스 경로과정 중 스트레스를 대처할 수 있는 요인으로 회복탄력성을 분석하였다. 이를 위해 경희대학교 고령친화특성화대학원에서 수집한 2017 노쇠이해능력 실태조사(Frailty Literacy Survey) 자료를 활용하였으며, 최종분석대상자로 403명이 선정되었다. 연구의 목적을 달성하기 전 투입되는 변수들 중 상호 관련성이 있는 요인들을 추출하기 위해 요인분석을 실시한 다음 이동성 저하노인의 스트레스 경로를 파악하였다. 그 결과 연구모형의 모든 경로계수가 유의미 한 것으로 나타났다. 낙상경험이 많은 노인일수록 이동성이 저하되었으며, 이동성 수준이 낮아질수록 우울감을 높아졌다. 또한, 높은 수준의 우울감을 가지면 삶의 만족도가 저하되는 것으로 나타났다. 마지막으로 이동성 저하로 따르는 스트레스 경로에서 회복탄력성의 조절효과를 검증한 결과, 우울과 삶의 만족도 간의 관계에서 회복탄력성이 조절효과를 가지는 것으로 나타났다. 즉, 노인의 우울감이 높더라도 회복탄력성의 수준에 따라 삶의 만족도가 조절됨을 알 수 있었다. 따라서 본 연구는 국내에서 거의 연구되지 않은 노인의 이동성의 스트레스 경로를 실증적으로 검증함으로써 학문적·실천적 함의와 더불어 노년기 이동성을 위한 정책적 제언을 제시하였다. ased on the Lazarus and Folkman's Stress-Coping-adaptation theoretical framework (1984), this study aims to examine the coping effect of self-resilience on the stress process of older adult from Mobility. The study selected the 403 people from the data of the 2017 Survey of the Frailty Literacy in Korea. And the data were analyzed with SPSS 12.0 and AMOS 5.0 for conducting multi-group analysis. As a result, all path coefficients of the study model were significant. The mobility of the elderly who had experienced falls was decreased, and the lower the level of mobility was the higher the depression. Also, high levels of depression was decreased life satisfaction. Finally, as a result of verifying the moderating effect of resilience in the stress path following mobility degradation, resilience in the relationship between depression and life satisfaction showed moderate effect. Namely, even though the depression of the elderly was high, the satisfaction of life was controlled by the level of resilience. Therefore, this study suggests policy implications for the improvement of Mobilty in old age as well as academic and practical implications by empirically verifying the stress path of mobility of the elderly in Korea.

고지방식이유도 실험용 Rat에서 Statin 및 한약2종 투여에 따른 혈중 지질, 조직 변화 비교 연구

박성운 경희대학교 동서의학대학원 2017 국내석사

주요한 고지질혈증 약물인 pravastatin과 병용 투여하였을 때 고지혈증 치료 효과를 상승시킬 수 있는 한약재를 찾고자 본 실험을 시행하였으며 한의학에서 한습사(寒濕邪)로 인한 질환에 많이 사용되며 주요성분으로 담즙 분비 증가 등의 약리 효능이 입증된 후박(厚朴)과, 상대적으로 연구가 덜 되었지만 고지혈증에 효과가 있을 가능성이 높다고 생각되는 하수오(何首烏)를 실험에 함께 이용하였다. 실험용 쥐를 일반 식이를 섭취하는 그룹(10마리), 고지방식이(45% fat diet) 섭취 대조군(10마리), 고지방식이와 함께 statin을 투여하는 그룹(10마리), 고지방식이와 함께 후박-하수오, statin을 병용투여하는 그룹(10마리)으로 무작위하게 나누어 실험에 이용하였다. 열흘간의 적응 기간 후 체중 측정, 고지방식이 및 시약 투여를 2주간 병행하며 1주 간격으로 체중 측정하였고, 시약 투여 그룹의 경우 시약을 2주간 1일 1회 경구투여하였고 고지방식이 섭취 대조군의 경우 동량의 물을 공급하였다. Pravastatin은 쥐 1마리당 매 회 3mg을 물 4cc에 녹여 투여하였고, 후박-하수오는 쥐 1마리당 매 회 후박 가루 400mg, 하수오 가루 400mg을 섞어 물 4cc에 녹여 투여하였다. 실험 마지막 날 모든 동물을 ether 흡입 마취 하에 심장 채혈 후, CBC 검사는 ㈜녹십자랩셀에, 생화학 검사는 ㈜옵티팜에 의뢰하였다. 혈중 지질에 미치는 영향을 알아보기 위해 혈청의 HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, Triglyceride, Total cholesterol 함량을 분석하였으며, 간(肝) 손상에 미치는 영향을 알아보기 위해 혈청의 AST, ALT 함량을 분석하였고, 신장(腎臟) 손상에 미치는 영향을 알아보기 위해 BUN, Creatinine 함량을 분석하였다. 그 외에 영양 지표의 변화를 알아보기 위해 Total Protein, Albumin, CBC를 분석하였다. 채혈 후 복부 절개하여 Liver와 Aorta를 적출해 formalin 시약에 넣어 고정시킨 다음 ㈜옵티팜에서 조직 절편을 만들었다. 실험 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 고지방식이 투여 기간(2주)이 너무 짧아 Normal군과 Control군의 실험 전후 체중이 거의 비슷하였지만, 후박-하수오, statin 병용 투여군의 결과를 통해, 후박-하수오 제제가 실험용 Rat의 체중 증가를 억제한다고 볼 수 있다. 후박-하수오 제제는 HDL-cholesterol 증가에 긍정적 효과가 있지만, LDL-cholesterol과 Total cholesterol을 증가시킨다. 한편 후박-하수오가 statin과 병용될 때에는 Triglyceride 상승을 억제하는 효과가 있다. 후박-하수오 및 statin의 2주간 투여는 간(肝) 및 신장(腎臟) 손상을 유발하지 않았으며, 영양에 미치는 악영향 또한 없었다. 조직 검사 결과에서는 Normal군과 Control군에서 간의 지방축적 병변이 관찰되지 않았지만, Statin 단독 투여군과 후박-하수오, statin 병용 투여군을 상대 비교했을 때 후박-하수오 병용 투여가 지방간 발생 감소에 도움을 준다고 볼 수 있다. 이상 결론은 실험용 rat을 이용한 in vivo 실험으로 한약의 약효가 서서히 나타나는 특성 상 후박-하수오 단독 투여 그룹은 2주 안에 효과가 나타나기 어려울 것으로 판단되어 실험에서 제외하였기 때문에 한약에 독립적인 의미를 부여하기는 어렵다. 또한 고지방식이 투여 기간이 짧아 Normal군과 Control군의 차이가 뚜렷하게 나타나지 않아 정확한 비교가 어려웠다. 향후 후박-하수오를 단독 투여하는 그룹을 추가하고 고지방식이 투여 기간을 늘린 연구가 추가적으로 필요할 것이다. Objectives: This preclinical study is aimed to compare dyslipidemic effect of pravastatin with that of herbal medicine in rats. Methods: The powder of the cortex of Magnolia officinalis Rehd. et Wils., and the root of Polygonum multiflorum Thunb. was manufactured by the pharmacy department of Kyung-Hee Korean medicine hospital, and Pravastatin (CJ pharmaceutical) was used. In total, 40 rats were divided into 4 groups: Normal (10 rats), Control (10 rats), Statin alone (10 rats), the powder of the cortex of Magnolia officinalis Rehd. et Wils., and the root of Polygonum multiflorum Thunb. and pravastatin (MO-PM-S group. 10 rats). Control group, Statin alone group, MO-PM-S group were made obese by giving high-fat (45%) diet. After 2weeks of drug administration, we compared dyslipidemic effect of pravastatin with that of herbal medicine in rats by analyzing lipid profiles, measuring body weights and taking biopsies (liver, aorta). Results: Change of body weight of MO-PM-S group is significantly lower than that of Control group. The MO-PM-S group got a little higher HDL-cholesterol level, LDL-cholesterol level, and Total Cholesterol level than the other three groups. On the other hand, Statin alone group’s Triglyceride level was much higher than the other three groups. In biopsies, 30% of Statin alone group and 10% of MO-PM-S group showed mild histopathologic findings in the liver. And no remarkable lesions were observed in the aortas of all the groups. Conclusions: The cortex of Magnolia officinalis Rehd. et Wils., and the root of Polygonum multiflorum Thunb. have a lowering effect on body weight, and a raising effect on HDL-cholesterol level. However, the herbal mixture has a raising effect on LDL-cholesterol level and total cholesterol level. On the other hand, the herbal mixture has a lowering effect on Triglyceride level when it is used with statin. In liver biopsies, the group administered with both herbal mixture and statin showed less histopathologic findings than the group administered with statin alone. This means herbal mixture helps to prevent fatty degeneration of liver. Key words: Dyslipidemic effects, Pravastatin, Herbal medicine, Magnolia officinalis, Polygonum multiflorum

지모 (Anemarrhena asphodeloides) 추출물의 간 보호 및 항 섬유화 효과에 관한 연구

정지운 경희대학교 동서의학대학원 2017 국내석사

간경화는 만성적인 간 손상에 대한 반응으로 간 섬유화 반응이 지속되어 발생한다. 현대 한의학에서도 간경화 치료에 관한 다양한 한약재 연구가 이루어지고 있으나 간경화 치료에 대한 지모의 효능에 관한 실험적 연구는 아직까지 이루어진 바가 없다. 본 연구는 DMN 으로 간경화를 유발한 생쥐에게 지모 추출물을 투여하여 손상된 간세포의 회복 및 항 섬유화 반응에 지모 추출물이 미치는 영향을 확인하였다. 실험에서 사용한 지모는 Puremind Medicinal Herbs (Youngchen, Korea) 에서 구입하여 동결 건조 추출물을 얻어 사용하였다. 각 실험은 정상군, DMN 단독 투여군, DMN 및 지모 추출물 병행 투여군, DMN 및 Lactulose 병행 투여군으로 나누어 실시되었다. 정상군을 제외한 실험동물에게 4주간 DMN (10 mg/kg) 으로 간경화를 유발하고 증류수, 지모 추출물 혹은 Lactulose (250 mg/kg) 를 4주간 하루 1회 경구 투여하였다. 간의 병리적 상태 및 간 기능을 평가하기 위해 혈청 생화학적 지표, COX-2, α-SMA 을 측정하고 비교 관찰한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 지속적인 DMN 투여로 생쥐의 체중 감소가 발생하였으나 지모 추출물은 이를 회복시켰다. 지모 추출물은 DMN 투여로 유발된 생쥐의 간 섬유화 반응에 대하여 혈중 AST, ALT 수치를 유의성 있게 개선하는 효과를 보였으며 알부민 수치 역시 개선하는 경향을 보였으나 통계학적 유의성은 없었다. 또한 지모 추출물은 DMN 투여로 유발된 간 조직의 충혈과 붕괴, 대량의 심각한 간세포 괴사, 뚜렷한 단핵구 세포 침윤물 등 간 조직의 변형 및 이상을 유의하게 감소시켰으며 높아진 COX-2 와 α-SMA 발현 정도를 유의하게 감소시켰다. 이러한 결과를 미루어 보았을 때 지모 추출물은 DMN 투여로 인한 간 손상으로부터 방어하여 감소된 체중을 회복시키고 염증 반응 및 섬유화 반응을 억제하여 간 보호 효과를 지니는 것으로 판단된다. 지모 추출물은 간성상세포 활성을 억제하여 염증 반응 및 간 조직의 섬유화 반응을 개선시키므로 간경화에 대한 효과적인 치료제로 사용될 수 있음을 보여준다. 지모의 간 보호 및 항 섬유화 효과에 대해 안정성 및 신뢰성에 관한 추가적인 연구가 필요하며 이를 위해 간경화에 대한 지모의 치료 기전 및 적절한 치료 농도 선정에 관한 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

외상성 뇌손상을 받은 3주령 생쥐에서 성년기의 행동 변화 및 풍부 환경의 효과

방수용 경희대학교 동서의학대학원 2015 국내박사

Either environmental enrichment in an adapted Marlau cage (n=16) or standard housing (n=20) was provided for five weeks following moderate (n=18) or sham (n=18) traumatic brain injury in 3-week C57Bl/ 6 mice using an electically controlled cortical impact device with 3-mm metal impounder driven into a 5-mm left parietal craniectomy at target velocity of 4 m/s, depth of 2 mm, and dwell of 255 ms. Four weeks following surgery, motor function and activity in the rotarod, pole test, and open field test; spatial and visual memory in the water plus maze and novel object test; and anxiety- and depression-like behavior in the elevated plus maze and tail suspension test were assessed. In addition, Simple Neuroassessment of Asymmetric impairment (SNAP) tests conducted 96 hours following surgery were used as a subacute measure of injury severity. Traumatic brain injury was found to reduce function in the SNAP test, ability to balance in the rotarod test, and anxiety-like behavior in the elevated plus maze. Environmental enrichment appeared to generally enhance motor coordination in the rotarod, spatial memory in the novel object test, anxiety-like behavior in the open field test and elevated plus maze, as well as attenuated the decrease in exploratory behavior of novel objects relative to empty spaces. No significant interactions between the two factors were found, suggesting the failure of environmental enrichment to conditionally enhance the functional abnormalities of brain-injured relative to control subjects. These results beg further study of the limitations of environmental enrichment with regard to post-traumatic regeneration of neural structures and recovery of associated functions. Keywords: Traumatic brain injury, Environmental enrichment, Behavioral tests 3주령 C57Bl/6 생쥐를 대상으로 외상성 뇌손상(Traumatic Brain Injury)을 유발시킨 후, 4주간 풍부화 환경(Environmental Enrichment)을 제공한 후, 운동 기능, 인지 기능, 감정 기능을 평가하여 환경 풍부화가 행동 변화에 미치는 효과를 알아보았다. 실험에 사용한 환경 풍부화 케이지는 Marlau사의 디자인을 응용하여 자체 제작 하였으며 피질 충격기를 이용하여 외상성 뇌손상을 가하였다. 실험군은 일반 케이지에서 사육한 SHAM 수술군 (n = 10)과 TBI군 (n=10) 그리고 환경 풍부화 케이지에서 사육한 SHAM 수술군 (n = 8), TBI군 (n = 8)으로 구성하였다. 외상성 뇌손상의 손상 정도를 측정하기 위해 신경행동지수 평가(SNAP)를 시행하였으며, rotarod, open field test, pole test, water plus maze, novel object test, elevated plus maze, tail suspension test 측정하여 운동기능, 인지기능, 감정기능을 비교 분석하였다. TBI 그룹은 SNAP test에서 운동능력, 감각기능, 평형 유지력, 반사기능과 rotarod test에서 운동균형 능력, EPM에서 불안행동을 감소시키는 효과가 나타났으며, 환경 풍부화 그룹은 rotarod에서 운동균형, WPM에서 습관성 학습, OFT center zone와 EPM에서 불안 행동을 향상시켰다. 외상성 뇌손상 후 환경풍부화 환경은 운동기능, 인지기능, 감정기능 장애에 직접적인 행동 변화에 향상된 영향을 주지 않았다. 이러한 결과에서 외상 후 신경구조의 재생과 관련된 기능 회복에 관한 환경 풍부화에 대한 후속 연구를 제안한다. 키워드 : 외상성 뇌손상, 환경 풍부화, 행동 검사