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K562 세포주와 IL-2를 이용하여 말초혈액 단핵구로부터 자연살세포의 선택적 증폭
조덕,신시원,박정선,강현규,김상기,Nguyen Pham,TNZhu XW,신명근,서순팔,양동욱,남종희,김영진,이제중 대한혈액학회 2006 Blood Research Vol.41 No.1
배경: NK 세포를 이용한 면역치료를 위해서 사람의 말초혈액 단핵구로부터 NK 세포를 증폭시키려는 많은 연구가 있었다. 저자들은 말초혈액 NK 세포를 IL-2와 K562 세포주를 활용하여 선택적 증폭, 증폭된 NK 세포의 활성화 및 억제성 수용체의 발현 양상, 그리고 이들 NK 세포의 세포독 성능을 평가해 보았다.방법: 정상 성인 7명의 말초혈액 단핵구를 Cellgro SCGM 배지에 IL-2 (500IU/mL)와 feeder cell로 K562 세포주를 사용하여 14일간 배양을 하였고, NK 세포의 활성화 및 억제성 수용체를 분석하기 위해 배양을 하기 전의 NK 세포와 IL-2 단독배양법과 K562와 IL-2를 함께 사용한 배양법으로 72시간 배양한 NK 세포의 활성화 및 억제성 수용체를 분석하였다. 세포 독성능 평가는 증폭 전과 7일간 증폭된 NK 세포를 이용하여 K562 세포주를 표적세포로 하여 유세포를 활용한 독성 검사로 실시하였다. 결과: NK 세포는 7일간 배양 후 4.5배(범위 2.5~10) 증폭되었으며, CD3-CD56+ 세포는 56.5%를 보였다. IL-2 단독 혹은 IL-2와 K562를 함께 사용한 배양법에 의한 NK 세포의 수용체 중 CD158b (mean florescence intensity, MFI), CD158e1/e2 (MFI), NKp44 (MFI) 및 NKp46 (%)는 그 발현이 증가하였고, NKp30 (%), CD16 (MFI) 및 2B4 (MFI)는 그 발현이 감소하였다. 세포독 성능 평가에서 비 증폭된 NK 세포는 표적세포인 K562 세포주와 1:1 및 5:1에서 각각 9.0%와 27.6%를 살생했으며, 7일간 증폭된 NK 세포는 표적세포를 각각 36.9%와 57.2%를 살생했다.
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