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      • KCI등재

        Evaluation of Pollen Viability of Nakdongbyeo, Two Transgenic Rice Lines, ItsHybrids with Weedy Rice, and Subsequent Selfed Progenies : F₂ and F₃

        Sita Ram Ghimire(기미어 시다람),Eun-Young Sohn(손은영),Dong-Hyun Shin(신동현),In-Jung Lee(이인중),Kil-Ung Kim(김길웅) 한국생명과학회 2009 생명과학회지 Vol.19 No.7

        본 연구는 비유전자변형 계통 (낙동벼)과 2개의 다른 promoter (maize ubiquitin과abscisic acid)를 각각 삽입한 유전자변형 벼와 abscisic acid promoter이용한 유전자변형 계통을 잡초성벼 (Oryza sativa)와 인공수정 한 후 다음세대인 F₁, F₂, F₃의 화분활력, 형태형성, 생장차이를 비교하여 평가하였다. 화분이 열개된 후 3-{4,5dimethylthiazolyl-2}-2,5-diphenyl monotetrazolium bromide (MTT)반응을 살펴본 결과, Nakdongbeyo에서 86%, ABC-promoter 이용한 유전자변형 벼에서 75%, maize ubiquitin promoter 이용한 유전자변형 벼에서 62%, F1에서 68%, F₂에서 79% 및 F3에서 78%의 각각 최대 화분활력을 보여주었다. 유전자변형 계통과 잡초성벼와의 교잡종의F₁, F₂, F₃ 세대간의 화분활력을 비교하였을 때 화분 열개된 후 20분까지는 유의한 차이를 보이지 않았으나, 40분에서 90분 사이에서는 F₃의 화분활력이 다른 두 세대 F₁, F₂보다 높게 나타났다. 화분을 열개된 90분 후 F₃ 세대 에서 최대 화분 활력이 36.2% 이었고 F2 세대 에서는 화분 활력이 최소 3.5% 보였다. 따라서 화분에 의해 벼의 유전자가 다른 계통으로 전이되는가를 조사하기 위하여 연차실험을 수행하였는데, 결론적으로 두 유전자변형 계통으로부터 잡초성벼로 유전자가 전이될 위험성이 나타날 것으로 보였다. This experiment was conducted to evaluate pollen viability of Nakdongbyeo, transgenic rice lines, an F1 hybrid from a cross between Milyang weedy rice and ABC-promoter transgenic rice line containing basta-resistant (bar) gene and subsequent selfed progenies, F₂ and F₃. The reaction of pollen with 3-{4,5 dimethylthiazolyl-2}-2,5-diphenyl monotetrazolium bromide (MTT) as a staining chemical immediately after pollen shedding showed maximum pollen viability of 86% in Nakdongbeyo, 75% in ABC-promoter transgenic rice line, 62% in ubiquitin-promoter transgenic line, 68% in F1, 79% in F₂ and 78% in F₃. Viability gradually declined during subsequent observations at 20-minute intervals. However, there was a drastic decline in pollen viability after 40 minutes of pollen shedding. The mean difference of pollen viability among rice lines and time was highly significant, indicating significantly different pollen viabilities at different time intervals. Maximum viability of 36.2% was observed in F₃ and minimum viability of 3.5% was found in F₂ at 90 min after pollen shedding. Results of this experiment on pollen viability and longevity elucidate potential risks of pollen-mediated flow of herbicide-resistant gene from transgenic rice lines and possible integration of it into the weedy rice population.

      • KCI등재

        Genetic Characteristics of Progeny of the Hybrids Between a Glufosinate Resistant Transgenic Rice and Weedy Rice (Oryza sativa L.)

        Sita Ram Ghimire(기미어 시다람),Eun-Young Sohn(손은영),Dong-Hyun Shin(신동현),In-Jung Lee(이인중),Kil-Ung Kim(김길웅) 韓國雜草學會 2009 Weed&Turfgrass Science Vol.29 No.1

        본 연구는 Glufosinate-ammonium 저항성 유전자 변형벼와 잡초성벼 간의 교잡종과 후대의 유전적 특성을 조사하기 위하여 2004년부터 2007년까지 경북대학교 실험실습포장에서 수행되었으며, 저항성 벼는 낙동벼에 제초제 저항성 유전자와 ABC-promoter 또는 Ubiqitin promoter을 형질전환 시킨 것을 사용하였다. ABC-promoter을 지닌 형질전환체와 잡초성벼의 F₁ 교잡종은 임성이 높아 유전적 통합이 높은 것으로 나타났고, 교접종 F₂ 집단의 Glufosinate-ammonium에 대한 반응은 멘델의 분리법칙에 따라 나타났다. 이와 같은 사실은 형질전환체의 제초제 저항성이 교잡종의 후대에 전달된다는 것이다. F₁ 세대의 출수 및 성숙기는 양친보다 약 30일 가량 지연되었고, F₂ 세대의 약 25%는 잡초성벼와 비슷한 출수기를 보였다. 출수기와 종자 탈립성은 잡초성벼의 형질을 따르는 것으로 나타났다. Experiments were conducted for four consecutive yeary (2004~2007) in the greenhouse of Experiment and Practice Sation, Kyungpook National University to determine genetic characteristics of the hybrids in the succeeding generations. F₁ hybrids were obtained by crossing weedy rice with the glufosinate-ammonium resistant lines harboring ABC-promoter and ubiquitin promoter transegenic lines, respectively. F₁ hybrid obtained from crossing between weedy rice and ABC-promoter transgenic rice found to have greater chances of genetic integration because of its higher rate of spikelet fertility. The response to the recommended dose of glufosinate-ammonium at 30 DAS (days after seeding) in F₂ followed Mendelian pattern of segregation. This indicated that herbicide-resistant trait acquired from transgenic lines introgressed in the progeny generations. The days to heading and maturity in F₁ was delayed by as much as 30 days than the both parents. However, heading/flowering of F₂ was found highly variable, with approximately one fourth of the tillers maturing earlier like that of weedy rice parent. In this study, segregation to glufosinate response, heading dates, and shattering of seeds in F₁, F₂ and F₃ were acquired from weedy parent.

      • KCI등재

        Identification and Management of Sulfonylurea-resistant Biotype of Scirpus planiculmis in Reclaimed Paddy Fields, Korea

        Tae-Seon Park(박태선),Chung-Kil Kang(강충길),Jae-Eup Park(박재읍),Bon-Il Ku(구본일),Hong-Kyu Park(박홍규),Sita Ram Ghimire(기미어 시다람),Young-Doo Kim(김영두),Jae-Kwon Ko(고재권) 韓國雜草學會 2009 Weed&Turfgrass Science Vol.29 No.2

        Sulfonylurea(SU)계 제초제에 대한 저항성 새섬매자기가 한국의 서산 간척지 논에서 발생한 것이 확인되었다. SU 제초제 저항성 새섬매자가 발생한 논은 1990년부터 13년 동안 연속적으로 SU계 혼합 제초제를 사용하였다. 온실 조건에서 서산과 무안에서 채취한 새섬매자기 구경을 이식 후 10일에 azimsulfuron, bensulfuron-methyl, cinosulfuron, ethoxysulfuron, imazosulfuron 그리고 pyrazosulfuron-ethyl을 처리하였을 때 무안의 새섬매자기는 각 제초제 추천량에서 방제가 되었으나 서산의 새섬매자기는 추천량의 5배량에서도 20-40% 생존되었다. 생체중 50%를 억제하는 각 제초제의 농도(GR50)는 두 지역에서 채취한 새섬매자기 간에 현저한 차이가 있었으며, 서산의 매자기에 대한 6 종류의 GR50은 무안의 새섬매자기 대한 GR50값 보다 47-100배 높게 나타났다. 또한 무안과 서산의 새섬매자기에서 추출한 acetolactate synthase(ALS)에 대한 pyrazosulfuron-ethyl의 50% 억제 농도(I50)각각 0.8 nM과 409 nM로 나타나, 서산의 새섬매자기가 무안의 새섬매자기 보다 511배 높은 저항성을 가지고 있음을 확인하였다. SU계 제초제 저항성 새섬매자기를 효과적으로 방제하기 위한 제초제 선발 결과 benzobicyclone이 효과적이었다. 간척지 담수직파논에서는 파종 전에 이행성 비선택성 제초제인 glyphosate SL를 처리한 다음, 파종 후 10일에 benzobicyclone+azimsufuron+metamifop GR를 처리하는 것이 매우 효과적이었다. A suspected biotype of Scripus planiculmis to be resistant to sulfonylurea (SU) herbicides was identified in Seosan reclaimed paddy fields in Korea. The fields have been cultivated for monocultural rice production with wet-direct seeding method and continuously treated with SU-based herbicide mixtures for thirteen years since 1990. In greenhouse studies, 6 different SU herbicides, such as azimsulfuron, bensulfuron-methyl, cinosulfuron, ethoxysulfuron imazosulfuron and pyrazosulfuron-ethyl, completely controlled the Muan assession of S. planiculmis at the recommended dose rate of each herbicide, however, the Seosan accession of S. planiculmis biotype was survived 20 to 45% even treated with 5 times higher dose of each recommended rate of all herbicides treated. The GR50 values of 6 SU herbicides for Seosan accession of S. planiculmis were 47 to 100 times higher than those for Muan accession of S. planiculmis. The I50 values pyrazosulfuron-ethyl to acetolactate synthase (ALS) extracted from Sean and Muan accession of S. planiculmis were 409 nM and 0.8 nM, respectively. The I50 value of Seosan was 511 times higher than that of Muan accession. These results suggested that the Seosan accession of S. planiculmis have strong resistant characteristics to 6 SU herbicides, respectively, indicating that resistance might be due to the alteration in the target site of ALS. In the pot experiment, benzobicyclon having different mechanisms of action from SU herbicides had excellent controlling effects on the resistant biotype when their plant height were applied below 5 cm. The management in reclaimed paddy fields was very effective under the treatment of systematic herbicides such as foliar applied glyphosate SL at 15 days before seeding followed by benzobicyclon-included herbicides at 10 days after seeding.

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