Improvement of Human Erythropoietin Expression by IRES- mediated Multicistronic Vector in Chinese Hamster Ovary Cells

Seunghee KANG,Yeon-Gu KIM,Shin-Young KANG,KH RYU,Eun Gyo LEE,Soojin LEE 한국생물공학회 2015 한국생물공학회 학술대회 Vol.2015 No.4

A novel regulatory element (E77) isolated from CHO‐K1 genomic DNA enhances stable gene expression in Chinese hamster ovary cells

Kang, Shin‐,Young,Kim, Yeon‐,Gu,Kang, Seunghee,Lee, Hong Weon,Lee, Eun Gyo WILEY‐VCH Verlag 2016 BIOTECHNOLOGY JOURNAL Vol.11 No.5

<P><B>Abstract</B></P><P>Vectors flanked by regulatory DNA elements have been used to generate stable cell lines with high productivity and transgene stability; however, regulatory elements in Chinese hamster ovary (CHO) cells, which are the most widely used mammalian cells in biopharmaceutical production, are still poorly understood. We isolated a novel gene regulatory element from CHO‐K1 cells, designated E77, which was found to enhance the stable expression of a transgene. A genomic library was constructed by combining CHO‐K1 genomic DNA fragments with a CMV promoter‐driven GFP expression vector, and the E77 element was isolated by screening. The incorporation of the E77 regulatory element resulted in the generation of an increased number of clones with high expression, thereby enhancing the expression level of the transgene in the stable transfectant cell pool. Interestingly, the E77 element was found to consist of two distinct fragments derived from different locations in the CHO genome shotgun sequence. High and stable transgene expression was obtained in transfected CHO cells by combining these fragments. Additionally, the function of E77 was found to be dependent on its site of insertion and specific orientation in the vector construct. Our findings demonstrate that stable gene expression mediated by the CMV promoter in CHO cells may be improved by the isolated novel gene regulatory element E77 identified in the present study.</P>

Cryotherapy for cosmetic purpose: Cryolipolysis

( Seunghee Kang ) 대한피부과학회 2022 대한피부과학회 학술발표대회집 Vol.74 No.1

부인과암에서 조직내 삽입 방사선치료

강승희(Seunghee Kang),전미선(Mison Chun),강해진(Haejin Kang),정철(Chil Jung),손정혜(Jeong Hyae Son) 대한방사선종양학회 1998 Radiation Oncology Journal Vol.16 No.2

목 적 : 원발성 혹은 재발한 부인과암(자궁경부암, 질암, 및 외음부암)에서 질부위의 병소에 추가선량를 조사하기 위한 기존의 방법들 즉, 실린더(cylinder)를 이용한 강내치료와 바늘(needle)을 사용한 조직내 평면삽입(single plane implant)만으로는 이상적인 선량분포를 얻기 힘든 경우가 많다. 저자들은 방광 및 직장에 대한 조사선량을 최소화하면서 질내의 병소에 국한하여 고선량의 방사선을 효과적으로 조사하기 위해 체적삽입(volume implant)이 가능한 기구(applicator 혹은 template)를 고안, 자체 제작하여 사용하고 있으며 이를 소개하고자 한다. 대상 및 방법 : 1994년 8월부터 1998년 2월까지 9명의 환자를 대상으로 아주대학교병원에서 조직내 방사선치료를 시행하였다. 이들은 질벽에 재발한 자궁경부암(5명), 원발성 자궁경부암(3명), 원발성 질암(1명)으로 치료받았다. 첫 3명의 환자는 기구없이 바늘을 평면삽입하였고 이후에는 병변의 위치 및 크기 등을 고려할 때 주위정상조직에 대한 선량을 줄이면서 종양에는 균등한 선량분포로 고선량의 방사선을 조사하기 위해서는 체적삽입이 유리할 것으로 판단되어 기구를 고 안, 자체 제작하였다. 바늘은 일반적인 조직내 삽입용(Microselectron, Nucletron)을 사용하였고 이는 저선량율(LDR) 및 고선량율(HDR) 근접치료 모두에서 사용 가능하였다. 6명중 3명은 50cc 주사기를 이용하여 만든 초기 단계의 기구를 사용하였다(1차 형태). 이러한 초기 단계의 기구는 표면이 매끈하지 못하여 질점막을 손상시킬 수 있고 바늘 삽입후 기구가 움직이지 않도록 회음부에 고정시키는 날개부위가 없는 단점이 있었다. 나머지 3명의 환자는 이러한 단점을 보완하고 종양의 크기 및 위치에 따라 좀 더 많은 바늘을 삽입할 수 있도록 새롭게 고안한 기구를 사용하였다(2차 형태). 재료는 투명 아크릴 혹은 치과용 몰드(mold) 소재(Provil )를 사용하였으며 회음부에 기구를 고정시키기 위한 날개를 만들었다. 2차 형태의 기구를 사용한 환자중 마지막 1명은 종양의 위치를 고려하여 삽입할 수 있는 바늘의 갯수를 증가시켜서 새로이 제작하였다. 실제로 환자에게 시술하기 전에 예비치료계획을 시행하여 필요한 동위원소의 수량 및 배열을 결정하였다. 결 과 : 자체 제작한 기구를 사용함으로써 바늘을 일정간격으로 삽입하는 것이 용이해졌으며 시술 시간을 단축시킬 수 있고 삽입방향이 잘못되어 여러번 바늘을 찌르는 경우가 적어져 조직에 대한 손상을 줄일 수 있었다. 손쉽게 구할 수 있는 재료를 사용하여 병소에 따라 개별화가 가능한 값싸고 유용한 기구의 제작이 가능함을 확인하였으며 이를 통해 좀 더 이상적인 선량분포곡선을 얻을 수 있었다. 3명의 환자에서 바늘 삽입후 컴퓨터 단층촬영을 시행하여 배열의 정확성과 방광 및 직장에 조사되는 선량을 감소시킬 수 있음을 확인하였다. 마지막 추적관찰시 원발성 종양으로 치료받았던 3명의 환자 모두가 국소제어되었으나 재발하여 치료하였던 경우에는 모두 국소재발하였다. 결 론 : 저자들은 부인과암에서 근접치료시 환자의 종양 특성에 따라 기구를 적절하게 고안하여 적은 비용으로 비교적 손쉽게 자체 제작하여 사용함으로써 효과적인 조직내 삽입 방사선치료를 시행할 수 있었다. Purpose : It is not a simple task to achieve the ideal isodose curve with a standard vaginal applicator or single plane needle impant in the paravaginal tissue when primary or recurrent gynecological neoplasms(cervical cancers, vaginal cancers and vulvar cancers) are treated as a boost following external beam radiotherapy. The authors introduce the development and construction of a simple, inexpensive, customized applicator for volume implant to maximize the radiation dose to the tumor while minimizing the dose to the rectum and the bladder. Materials and Methods : Nine patients underwent Ir-192 transperineal interstitial implantation for either recurrent(5 cases) or primary(3 cases) cervical cancers or primary vaginal cancer(1 case) between August 1994 and February 1998 at Ajou university hospital. First 3 cases were performed with a single plane implant guided by digital palpation. Because of inadequate isodose coverage in the tumor volume in first 3 cases, we designed and constructed interstitial vaginal applicator for volume implant to improve tumor dose distribution and homogeneity while sparing the surrounding normal tissue. Our applicators consist of vaginal obturator and perineal template that made of the clear acrylamide and dental mold material(Provil ). The applicators were customized individually according to the tumor size and its location. Both HDR and LDR irradiation were given with these applicators accomodating 6 Fr needles(Microselectron, Nucletron). The pretreatment planning prior to actual implant was performed whenever possible. Results : Needles can be inserted easily and evenly into the tumor volume through the holes of templates, requiring less efforts and time for the implant prodecure. Our applicators made of materials available from commercial vendors. These have an advantage that require easy procedure, and spend relatively short time to construct. Also it was possible to fabricate applicators to individualize according to the tumor size and its location and to achieve the ideal isodose coverage. We found an accurate needle arrangement and ideal dose distribution through the CT scan that was obtained in 3 cases after needle implant. Three patients with primary cervical and vaginal cancers were controlled locally at final follow up. But all recurrent cases failed to do so. Conclusion : The authors introduce inexpensive, simple interstitial vaginal templates which were self-designed and constructed using materials available from commercial vendors such as acrylamide and dental mold material(Provil).

노후주거지 재생을 위한 골목길 개선 방안 -광양읍 도시재생사업지역을 대상으로-

강승희(SeungHee Kang),박근모(GeunMo Park),이진학(JinHak Lee),안재락(JaeRak Ahn) 대한공간정보학회 2020 한국공간정보학회 학술대회 Vol.2020 No.6

광양읍 원도심은 도시재생사업이 진행 중인 중소도시로 광양제철소 건설과 시가지확장으로 인한 급격한 발전과 원도심의 쇠퇴가 진행되었다. 광양읍의 도시공간은 자연발생적 가로와 필지에 계획도로망이 개설됨으로서 주거지의 연속성이 분절되었으며, 블록 내부는 세가로에 연결되어 형성된 전통주거지로 한옥밀집지를 형성하며 옛 모습을 간직하고 있다. 원도심의 인구감소와 고령화, 공 · 폐가의 증가로 쇠퇴 현상이 뚜렷하며, 생활기반시설의 매설과 설치로 인한 정돈되지 않은 상태의 골목환경은 주거환경을 악화시키고 있다. 본 연구는 광양 주거의 변천사와 생활사를 간직하고 있는 광양읍 원도심 한목밀집지의 한옥과 골목의 물리적 · 공간적 환경의 특성을 분석하여 주거지 재생을 위한 기초자료를 구축하고,골목재생을 통한 노후주거지의 정주환경 개선방안을 제시하고자 한다.

The Scattering and Absorption Effects of Fluorescence Spectroscopy in a Real Time Optical Biopsy

Han, Seunghee,Muller, Markus G.,Kang, Seunghee,Kang, Haejin Korean Society of Medical Physics 2001 의학물리 Vol.12 No.1

생물학적 조직(Biological Tissue)에서 얻어내는 형광(Fluorescence)은 산란(Scattrering), 흡수(Absorption), 그리고 형광체(Fluorophores)가 원인이 되는, 인트린식 형광(Intrinsic Fluorescence)들에 관한 정보를 갖고 있다. 생물학적 조직의 형광스펙트럼은 조직 내에 존재하는 흡수체(Absorber)와 산란물질(Scatters)들의 영향을 받기 때문에 다른 조직의 생화학적인 인트린식 형광을 선형적인 조합으로 해석할 수 없었다. 생물학적 조직 같은 터비드 매질(Turbid Media)로부터 실험적으로 형광을 얻어서 산란과 흡수의 영향을 조사하기 위하여 본 연구소에서 제작한 장치를 소개하고, 넓은 범위의 흡수체와 산란물질의 농도를 갖고 제작한 조직 팬텀(Tissue Phantom)에 대한 형광과 반사(Reflectance) 스펙트럼을 측정하였다. 형광스펙트럼에 존재하는 산란과 흡수의 왜곡(Distortion)을 제거하기 위하여, 반사스펙트럼에 포함된 산란과 흡수 정보를 이용하는 ‘광자 이동 모델(Photon Migration Model)’을 적용하였고, 이러한 조직모델에 대한 인트린식 형광을 얻었다 연구 결과, 모델 값과 실제 인트린식 형광 스펙트럼이 훌륭하게 일치함을 확인하였다. 이런 연구를 하게된 동기는, 인간의 조직이 병들어서 진화하면 조직의 생화학적 구성의 변화가 발생하고 이때 인트린식 형광의 변화가 생기기 때문이다 결론적으로, 조직에 대한 실시간 광학적 생검에서 병든 조직과 정상조직을 단지 형광스펙트럼만으로 구분하는 것은 어렵지만, 인트린식 형광을 이용하면 가능하다. The fluorescence emanating from a biological tissue contains information about scattering, absorption and the intrinsic fluorescence (fluorescence only due to fluorophores). Becaue fluorescence spectra of biological tissue are often significantly affected by the presence of tissue absorbers and scatterers, the measured tissue fluorescence cannot be interpreted as a linear combination of intrinsic fluorescence spectra of different tissue biochemical. We conducted experiments to examine the influence of scattering and absorption on the experimentally measured fluorescence of a turbid medium such as biological tissue. Therefore, we acquired fluorescence and reflectance spectra of tissue phantoms with a wide range of scatterer and absorber concentrations. By applying a photon migration model, which uses the scattering and absorption information contained in reflectance spectra to remove their distortion also present in fluorescence spectra, we extract the intrinsic fluorescence of these tissue models. We achieved excellent agreement between modeled and actual intrinsic fluorescence spectra. The motivation for this research is that intrinsic fluorescence spectra are expected to change with progression of disease in human tissue, due to changes in the tissue biochemical composition. It is not possible to distinguish the two tissue types by using only the measured fluorescence, however clear separation can be achieved with the intrinsic fluorescence in real time optical biopsy.

신한옥 지원 체제 구축을 위한 정책 및 과제

강승희(Kang, Seunghee),정영수(Jung, Youngsoo) 대한건축학회 2014 대한건축학회 학술발표대회 논문집 Vol.34 No.2

객체 탐지 기법과 기계학습 라이브러리를 활용한 단감 등급 선별 알고리즘

노승희(SeungHee Roh),강은영(EunYoung Kang),박동규(DongGyu Park),강영민(Young-Min Kang) 한국멀티미디어학회 2022 멀티미디어학회논문지 Vol.25 No.6

Histone deacetylase regulates high mobility group A2-targeting microRNAs in human cord blood-derived multipotent stem cell aging

Lee, Seunghee,Jung, Ji-Won,Park, Sang-Bum,Roh, Kyounghwan,Lee, Su Yeon,Kim, Ju Han,Kang, Soo-Kyung,Kang, Kyung-Sun SP Birkhäuser Verlag Basel 2011 Cellular and molecular life sciences Vol.68 No.2

<P>Cellular senescence involves a reduction in adult stem cell self-renewal, and epigenetic regulation of gene expression is one of the main underlying mechanisms. Here, we observed that the cellular senescence of human umbilical cord blood-derived multipotent stem cells (hUCB-MSCs) caused by inhibition of histone deacetylase (HDAC) activity leads to down-regulation of high mobility group A2 (HMGA2) and, on the contrary, to up-regulation of p16<SUP>INK4A</SUP>, p21<SUP>CIP1/WAF1</SUP> and p27<SUP>KIP1</SUP>. We found that let-7a1, let-7d, let-7f1, miR-23a, miR-26a and miR-30a were increased during replicative and HDAC inhibitor-mediated senescence of hUCB-MSCs by microRNA microarray and real-time quantitative PCR. Furthermore, the configurations of chromatins beading on these miRNAs were prone to transcriptional activation during HDAC inhibitor-mediated senescence. We confirmed that miR-23a, miR-26a and miR-30a inhibit HMGA2 to accelerate the progress of senescence. These findings suggest that HDACs may play important roles in cellular senescence by regulating the expression of miRNAs that target HMGA2 through histone modification.</P><P><B>Electronic supplementary material</B></P><P>The online version of this article (doi:10.1007/s00018-010-0457-9) contains supplementary material, which is available to authorized users.</P>

Antibacterial Analysis of Extracts from Selected Tropical Plants and Study on Potential Application to Antimicrobial Substance

Seunghee KIM,Jeongho LEE,Hyerim SON,Ji Yeh HONG,Min Young JEONG,Su Jin CHOI,Kang Hyun LEE,Rusea GO,Sangho CHOI,Hah Young YOO 한국생물공학회 2021 한국생물공학회 학술대회 Vol.2021 No.10

Since ancient times, some plants with antibacterial, anti-inflammatory and antioxidant properties have been used in traditional medicine. In this study, the tropical plants from Malaysia were obtained by the International Center for Biological Materials Research (IBMRC), and the antibacterial activity of 87 samples was investigated. The antibacterial activity was determined by the disc diffusion method using gram-positive and gram-negative bacteria. As a result, 6 extracts that significantly represented an inhibition zone against Gram-positive bacteria are as follows: Rhodamnia uniflora, Melastoma molle, Ochanostachys amentacea, Syzygium attenuatum, Melastoma muticu, Garcinia mangostana. In addition, extracts from G. mangostana and Leea indica showed antibacterial activity against Gram-negative bacteria. In conclusion, it was confirmed that extract from G. mangostana has high antibacterial activity and can be used as an antimicrobial substance with a wide range because it can be applied to both gram-positive and gram-negative.