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김지영,국민지,배인희,김해권,Kim, Ji Young,Koog, Min Ji,Bae, In Hee,Kim, Haekwon The Korean Society for Reproductive Medicine 2005 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.32 No.1
연구목적: ADAMs은 metalloprotease/disintegrin domain을 가진 transmemebrane glycoprotein으로써 지금까지 30개 이상의 ADAM 및 10개 이상의 ADAMTS가 알려져 있다. 이들의 기능은 포유동물의 수정 시 sperm-egg binding과 fusion, myoblast fusion, integrin과의 결합 등에 직접 관여하거나, TNF-alpha 등의 생체신호전달물질이 세포로부터 분비될 때에 이들의 구조를 변화시켜 활성화시키는 효소작용, 그리고 dendritic cell differentiation 등에 관여하는 것으로 알려져 있다. 그러나 자궁내막 조직에서의 유전자 및 단백질 발현 여부에 관해서는 거의 보고되어 있지 않고 있다. 본 연구에서는 착상 전후 시기의 생쥐 자궁조직에서 ADAM-8, 9, 10, 12, 15, 17 그리고 ADAMTS-1의 유전자가 발현하는 지를 알아보았다. 연구 재료 및 방법: 본 연구에서는 생쥐의 자궁조직을 대상으로 ADAM-8, 9, 10, 12, 15, 17 그리고 ADAMTS-1을 선정하여, 초기 임신 기간에서의 유전자 발현 여부를 조사하였고 이 결과를 바탕으로 자궁조직에서의 이들 유전자들의 생리적인 기능을 규명하고자 하였다. 결 과: 임신한 생쥐 자궁조직에서의 ADAM-8, 9, 10, 12, 15, 17 그리고 ADAMTS-1의 유전자 및 단백질의 발현 양상을 RT-PCR 방법을 이용하여 알아본 결과, 조사된 ADAM 종류와 임신 날짜별로 다르게 나타났다. ADAM-8의 유전자 전사체는 임신 1일째 매우 강하게 발현되었으나 임신 3일째로 진행되면서 감소하다가 이후 다시 임신 5일째가 되면서 증가하는 양상을 보였다. ADAM-9, 10, 17 그리고 ADAMTS-1의 경우는 임신 1일째에서 5일째까지 유전자의 발현 양상이 크게 변하지 않았고 ADAM-12와 ADAM-15의 유전자 전사체는 임신 1일에서 5일로 진행되면서 현저하게 증가되는 양상을 보였다. 이후 임신 6일에서 8일에서는 생쥐 배아가 착상된 부위와 비 착상부위로 나누어 유전자의 발현 양상을 관찰한 결과, 조사된 ADAM 모두 비착상 부위보다 착상부위에서 유전자 전사체의 발현이 크게 증가되는 것으로 나타났다. 결 론: 이상의 결과로 미루어 ADAM 유전자는 임신초기 착상과정과 임신 단계에 따른 자궁의 조직 재구성에 중요한 역할을 할 것으로 생각된다.
생쥐난자의 성숙에 따른 투명대의 FITC-casein 결합양상
윤혜진,김지수,김해권,이영기,이준영 서울여자대학교 자연과학연구소 1996 자연과학연구논문집 Vol.7 No.-
The structural changes of the ZP of mouse oocytes during maturation in vivo and in vitro were examined by using the fluorescence staining method. When immature GV oocytes isolated from mouse ovarian follicles were stained with FITC-casein, their ZP exhibited a mixture of numerous bright spots and thready fluorescence with faint milky background. In contrast, when mature oocytes with a polar body obtained either from ovarian follicles 11 h after hCG injection or from oviducts 17 h after hCG injection were stained similarly, their ZP exhibited only a little spotty fluorescence without any distinct fluorescence staining regardless of their source. ZP of cumulus-enclosed oocytes(CEO) after culture for 17h in the presence of FBS also showed only a few spotty fluorescence staining similar to that of ZP of in vivo matured oocytes. However, ZP of CEO cultured in the presence of BSA showed a numerous bright spots like that of immature GV oocytes. Addition of PMSG to the culture medium did not make any difference. When oocytes were freed from cumulus cells and then assigned to culture, ZP of oocytes exhibited numerous spotty fluorescence whether they were cultured with FBS or BSA. From these observations, it is suggested that ZP of mouse oocytes undergo structural changes during meiotic maturation as revealed by differential staining properties with FITC-casein. In addition, serum and cumulus cells appears to play important roles in the structural changes of ZP of oocytes acompanied during in vitro maturation.