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        Zoogloea ramigera 115와 Zoogloea ramigera l15SLR의 중금속 흡착능 비교

        이한기,배우철,진욱,정욱진,이삼빈,정병철,Lee, Han-Ki,Bae, Woo-Chul,Jin, Wook,Jung, Wook-Jin,Lee, Sam-Pin,Jeong, Byeong-Chul 한국미생물·생명공학회 1998 한국미생물·생명공학회지 Vol.26 No.1

        Capsular polymer인 zooglan을 생산하는 Z. ramigera 115와 수용성 slime polymer 생산 변이주인 Z. ramigera l15SLR의 중금속 제거능을 비교하였다. 중금속 5종($Cd^{2+}$, $Co^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Ni^{2+}$, $Fe^{2+}$)의 최저 생장저해농도는 두 균주 모두 유사하였다. $Cd^{2+}$을 첨가하지 않은 경우에 비해 $Cd^{2+}$ 500ppm을 첨가한 액체 배지에서의 생체량은 Z. ramigera 115는 24%, Z. ramigera l15SLR은 50%로 감소하였고 동일한 생체량에 대하여 Z. ramigera 115SLR이 Z. ramtgera 115보다 $Cd^{2+}$을 1.5배 더 제거하였다. 세포와 polymer를 분리하여 중금속 흡착능을 비교한 결과 polymer가 세포보다 높은 흡착량을 나타냈으며 최적 중금속 흡착 pH는 7.5였다. Langmuir 흡착등온선과 Freundlich 흡착등온선을 분석한 결과 $Cd^{2+}$에 대하여 Z. ramigera l15SLR polymer는 Z. ramigera 115 및 이온 교환 수지보다 높은 최대흡착량과 흡착안정성을 보여서 홉착제로서 유용할 것으로 판단된다. Heavy metal removal by Z. ramigera 115 and soluble slime polymer producing mutant Z. ramigera 115SLR was investigated. Both strains showed similar tolerance against $Cd^{2+}$, $Co^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Ni^{2+}$ and $Fe^{2+}$. When cells were cultivated in the presence of 500 ppm $Cd^{2+}$, the mutant strain removed 1.5 fold more metal than the wild type did at same biomass. Metal adsorption capacities were in the order of Z. ramigera l15SLR polymer > Z. ramigera 115 polymer > Z. ramigera 115 cell >Z. ramigera l15SLR cell. The optimum pH for metal adsorption was 7.5. Langmuir and Freundlich isotherms indicated that Qmax and 1/n of Z. ramigera l15SLR polymer were 164.2 mg $Cd^{2+}$/g dw and 0.496, respectively. These results showed that the polymer of Z. ramigera l15SLR could be used as an effective metal adsorbate.

      • Purification and Characterization of Peroxidase from Streptomyces sp. ND002

        한윤전,정병철 명지대학교 자연과학연구소 2002 자연과학논문집 Vol.21 No.-

        본 실험은 아조계 염료인 congo-red에 대한 분해능이 밝혀져 있는 Streptomyces sp. ND002균주에서 peroxidase를 분리·정제하여 그 역할을 규명하는데 목적을 두고 수행되었다. Streptomyces sp. ND002 균주를 pH 7.0의 조건에서 DJMM배지를 사용하여 배양을 실시한 결과 최고 5Units/ml의 세포 외 peroxidase 활성을 나타내었다. 균주 배양액을 이용하여 Q sepharose FF anion exchange column, Superdex 200 pg gel filtration column, Phenyl sepharose HP hydrophobic interaction column, Mono Q HIR anion exchange column chromatography를 통하여 최종적으로 speecific activity가 68.63 U/mg protein인 peroxidase를 부분 정제하였다. 정제과정 중 perosidase 활성이 분리되어 나타나는 것으로 보아 streptomyces sp. ND002 균주는 최소 3종류 이상의 2,4-DCP 분해능을 지니는 peroxidase를 세포 외로 분비하는 것으로 보이며, 부분 정제된 peroxidase에 대한 특성 파악 결과 pH7.5와 30℃의 온도에서 활성이 높게 나타남을 확인할 수 있었고, 중성이상의 pH와 4℃에서 보존성이 높다는 결과를 얻었다. 또한 분리과정 중 peroxidase 활성을 나타내는 fraction에서 색을 뛴다는 사실을 통해 wave scan한 결과 400nm의 파장에서 높은 흡광도를 나타내며, heme protein inhilbitor인 NaN_3, KCN를 넣어주고 활성을 측정한 결과 NaN3의 경우 98%, KCN의 경우 54%의 활성의 감소가 확인되었다. 이상의 결과로 미루어 보아 현재 부분 정제된 peroxidase 는 기존의 Streptomyces viridosporus T7A에서 분리된 ALiP-P3와 같은 특징을 지니는 heme-peroxidase로 사료된다. Streptomyces sp. ND002 is a gram-positive soil actinomycetes secreting an uncharacterized 2,4-dichlorophenol (DCP) oxidizing enzyme, whose activity is similar to the previously know Actinomycetes Lignin Peroxidase (ALiP). This extracellular peroxidase was purified from Streptomyces sp. ND002 by Q-sepharose, Superdex 200pg, Phenyl sepharose HP, Mono Q HIR column chromatography. The highest level of peroxidase activity was observed at pH7.5 and 30℃. The purified peroxidase was inhibited by 1 mM sodium azide and potassium cyanide treatment. Additionally, purified peroxidase exhibited and absorption spectrum at 400 nm. Thus, these results and observations suggest that this perxidase is heme protein, like ALiP-P3.

      • SCOPUSKCI등재

        Tylosin 생성 우수 균주선별과 Tylosin 발효

        이상희,정병철,이계준 한국산업미생물학회 1995 한국미생물·생명공학회지 Vol.23 No.6

        S. fradiae NRRL2702로부터 MNNG와 UV 처리에 의해서 tylosin 생성능이 증진된 S. fradiae MNU20균주를 선별하였다. MNU20이 최대 tylosin 생성능을 갖는 최적 배지 조성은 soluble starch 4 g, glucose 1 g, corn steep liquor 1 g, soy beanoil 7.5 ml, KH_2PO_4 0.2 g, Na_2S_2O_3·5H_2O 1 g, CaCO_3 2 g, NaCl 2 g, CoCl_2·6H_2O 0.001 g, 증류수 1리터였다. MNU20의 최적 플라스크 배양에서 glucose는 tylosin 생성을 저해하였고 valine과 succinate는 증진시켰으며 valine에 의한 증진 효과가 높았으며 natural zeolite에 의한 암모늄 이온 trapping 효과에 의해서 tylosin생성능이 증진되었다. 특히 이들의 첨가 시기는 tylosin 생성능의 증진에 중요한 요인이었다. A tylosin-hyperproductive mutant of S. fradiae MNU20 was isolated among 3500 strains obtained from either MNNG- or UV-treated Streptomyces fradiae NRRL2702. The composition of optimal medium for tylosin production was formulated as followed as: 4 g soluble starch, 1 g glucose, 1 g corn steep liquor, 7.5 ml soy bean oil, 0.2 g KH_2PO_4, 1 g Na_2S_2O_3·5H_2O, 2 g CaCO_3, 2 g NaCl, 0.001 g CoCl_2·6H_2O in 1 liter of distilled water. With the optimal medium, S. fradiae MNU20 was able to produce 159 mg tylosin (g biomass)^-1, indicating that tylosin productivity of Streptomyces fradiae NRRL2702 was increased 14 times higher by mutation. When the effect of valine, succinate, and natural zeolite on tylosin production was investigated by using the optimal medium, these substances essentially enhanced tylosin production and their addition time during culture period appeared to be critical for the increase of tylosin production.

      • 미생물을 이용한 카드뮴 제거

        배우철,정욱진,정병철,장승욱 明知大學校 自然科學硏究所 1997 자연과학논문집 Vol.15 No.-

        오염하천인 중랑천에서 중금속 내성세균 J7을 분리하여 생육과 카드뮴 흡착특성을 조사하였다. 회분배양에 미치는 카드뮴의 영향을 조사한 결과 카드뮴을 첨가하지 않았을 경우에는 비생장속도 0.32hr¹유도기 1시간, 카드뮴 106ppm의 경우에는 0..6hr¹, 12시간, 카드뮴 265ppm의 경우에는 0.04hr¹, 24시간으로 카드뮴 농도 증가에 따라 비생장속도의 감소와 유도기의 증가를 나타냈다. 카드뮴 제거량은 106.2㎎/g DCW, 191.6㎎/g으로 카드뮴 농도의 증가에 따라 높게 나타났다. 최적 카드뮴 흡착 pH는 8.0으로 이때 78㎎/g/ DCW의 효율을 나타냈다. 이처럼 생장시의 제거량이 생장후의 단순흡착량보다 더 높게 나타나는 것으로 미루어 생장시에는 카드뮴 첨가에 의한 유도과정에 의해 단순흡착량보다 더 높게 나타나는 것으로 미루어 생장시에는 카드뮴 첨가에 의한 유도과정에 의해 단순흡착외의 다른 중금속 제거기작도 작용하는 것으로 여겨진다. J7에 의한 카드뮴 흡착은 Langmuir 흡착등온식에 적합하였고 Scatchard Plot에서 직선을 나타낸 것으로 보아 단층 흡착이고 카드뮴의 농도 변화에 흡착능이 큰 영향을 받지않는 안정된 상태를 갖는 것으로 보인다. 낮은 농도에서 흡착제의 효율을 확인하는 Freundlich 흡착등온식에서 흡착강도 (1/n)이 0.3178로 흡착제로의 사용가능성이 높고 흡착능(K) 은 1.331로 높게 나타났다. Cadmium tolerant bacterium J7 was isolated from Jungrang stream and investigated in terms of growth and cadmium adsorption properties. The specific growth rate of the bacterium was 0.32hr¹at Oppm of cadmium concentration, and the lag phase continued for lhour. But when the cadmium concentration was 106ppm. the specific growth rate and the duration of lag phase were 0.06hr¹ and 12hour, respectively. When initial cadmium concentration was 265ppm, they were 0.04hr¹ and 24hour. This result showed that the specific growth rate decreased but the lag phase increased as the cadmium concentration increased. The quantities of cadmium removed by J7 was 106.2㎎ cadmium/ g dry cell weight at 106ppm and 191.6㎎/g at 265ppm of cadmium. The maximum cadmium adsorption of pre-grown cell was 78 ㎎/g at pH 8.0 The removal capacitiy of growing cell was higher than adsorption capacites of resting cell after growth, and this indicates the addition of cadmium induced another metal -removing mechanism of the cell. Langmuir isotherm and scatchard plot were suitable models to explain the cadmium removal by J7. This indicates that single layer adsorption and the change of cadmium concentration has little effect on adsorption capacity of the bacterium, The Frendlich isotherms was available to measure the adsorption efficiency at low metal concentration. Adsorption strength(1/n) was 0.3178 and capacity(K) was 1.331. This indicates the possiblity of the application of the bacterium as an adsorbate at low metal concentration.

      • SCOPUSKCI등재

        Zoogloea ramigera 115와 Zoogloea ramigera 115SLR의 중금속 흡착능 비교

        이한기,배우철,진욱,정욱진,이삼빈,정병철 한국산업미생물학회 1998 한국미생물·생명공학회지 Vol.26 No.1

        Capsular polymer인 zooglan을 생산하는 Z. ramigera 115와 수용성 slime polymer 생산 변이주인 Z. ramigera 115SLR의 중금속 제거능을 비교하였다. 중금속 5종(Cd^2+, Co^2+, Cu^2+, Ni^2+, Fe^2+)의 최저 생장저해농도는 두 균주 모두 유사하였다. Cd^2+을 첨가하지 않은 경우에 비해 Cd^2+ 500 ppm을 첨가한 액체 배지에서의 생체량은 Z. ramigera 115는 24%, Z. ramigera 115SLR은 50%로 감소하였고 동일한 생체량에 대하여 Z. ramigera 115SLR이 Z. ramigera 115보다 Cd^2+을 1.5배 더 제거하였다. 세포와 polymer를 분리하여 중금속 흡착능을 비교한 결과 polymer가 세포보다 높은 흡착량을 나타냈으며 최저 중금속 흡착 pH는 7.5였다. Langmuir 흡착등온선과 Freundlich 흡착등온선을 분석한 결과 Cd^2+에 대하여 Z. ramigera 115SLR polymer는 Z. ramigera 115 및 이온 교환 수지보다 높은 최대흡착량과 흡착안정성을 보여서 흡착제로서 유용할 것으로 판단된다. Heavy metal removal by Z. ramigera 115 and soluble slime polymer producing mutant Z. ramigera 115SLR was investigated. Both strains showed similar tolerance against Cd^2+, Co^2+, Cu^2+, Ni^2+ and Fe^2+. When cells were cultivated in the presence of 500 ppm Cd^2+, the mutant strain removed 1.5 fold more metal than the wild type did at same biomass. Metal adsorption capacities were in the order of Z. ramigera 115SLR polymer>Z. ramigera 115 polymer>Z. ramigera 115 cell>Z. ramigera 115SLR cell. The optimum pH for metal adsorption was 7.5. Langmuir and Freundlich isotherms indicated that Qmax and 1/n of Z. ramigera 115SLR polymer were 164.2 ㎎ Cd^2+/g dw and 0.496, respectively. These results showed that the polymer of Z. ramigera 115SLR could be used as an effective metal adsorbate

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