LPS로 유도된 RAW 264.7세포에 대한 벼메뚜기(Oxya chinensis sinuosa) 에탄올 추출물의 항염증 효과

윤영일(Young-Il Yoon),정미연(Mi Yeon Chung),황재삼(Jae-Sam Hwang),구태원(Tae-Won Goo),안미영(Mi-Young Ahn),이영보(Young-Bo Lee),한명세(Myung-Sea Han),윤은영(Eun-Young Yun) 한국생명과학회 2014 생명과학회지 Vol.24 No.4

본 연구에서는 벼메뚜기 에탄올 추출물의 항염증 효능을 분석하기 위해 LPS로 염증 유도된 RAW 264.7 세포를 이용하였다. OCE의 항염증 효능을 확인 하기 위해서, 염증 유도된 RAW 264.7 세포에 대해 OCE 농도 의존적으로 염증성 사이토카인인 TNF-α와 IL-6의 유전자발현 및 단백질 생성을 감소시킴을 real-time PCR과 ELISA로 확인하였다. 또한, NF-κB p65의 핵으로 이동이 차단됨을 면역형광염색으로 확인하였으며, iNOS와 COX-2 단백질 발현을 감소시키는 것을 Western blot 분석으로 확인하였다. 이상의 연구결과를 통해 벼메뚜기는 염증에 의한 NF-κB p65의 활성과 TNF-α와 IL-6의 생성과 iNOS 및 COX-2의 발현을 억제하는 항염증 효능을 갖고 있는 것을 확인하였다. Although the grasshopper Oxya chinensis sinuosa has long been used as food in Korea, there is little data on its functional effects. In this study, we investigated the anti-inflammatory effect of O. c. sinuosa ethanol extract (OCE) in RAW 264.7 mouse macrophage cells treated with lipopolysaccharide (LPS) for induction of inflammation. First, we determined that there is no cytotoxicity at 2,000 μg/ml or less of OCE in RAW 264.7 cells. To evaluate the anti-inflammatory effects of OCE, we investigated expression levels of pro-inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-6, and pro-inflammatory enzymes such as inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclo-oxygenase- 2 (COX-2) in LPS-induced RAW 264.7 cells. In addition, we examined whether OCE could inhibit translocation of NF-κB p65 into the nucleus in LPS induced RAW 264.7 cells. As a result, we found that the mRNA and protein levels of TNF-α and IL-6 decreased in LPS-induced RAW 264.7 cells after treatment with OCE in a dose-dependent manner. In addition, we confirmed a 2,000 ug/ml concentration of OCE inhibited translocation of NF-κB p65 by immunnostaining and Western blot analysis, and a decrease in the protein expression levels of iNOS and COX-2. Accordingly, we suppose that OCE has an anti-inflammatory effect through down-regulation of TNF-α, IL-6, iNOS, and COX-2 related to NF-κB p65 inflammatory signaling pathways.

LPS로 염증 유도된 RAW 264.7세포에 대한 참콩풍뎅이(Popillia flavosellata) 에탄올 추출물의 항염증 효과

윤영일(Young-Il Yoon),황재삼(Jae-Sam Hwang),김미애(Mi-Ae Kim),안미영(Mi Young Ahn),이영보(Young-Bo Lee),한명세(Myung Sae Han),구태원(Tae-Won Goo),윤은영(Eun-Young Yun) 한국생명과학회 2015 생명과학회지 Vol.25 No.9

본 연구에서는 참콩풍뎅이(Popillia flavosellata) 에탄올 추출물(PFE)의 항염증 효능을 분석하기 위해 PFE를 농도별(500, 1,000, 2,000 ㎍/ml)로 대식세포인 RAW 264.7에 처리 시 최고 처리농도인 2,000 ㎍/ml까지 통계적인 유의성 있는 독성이 없음을 확인하였다. LPS (100 ng/ml)로 염증 유도된 RAW 264.7 세포에 PFE를 농도별(500, 1,000, 2,000 ㎍/ml)로 동시 처리 시 농도 의존적으로 염증성사이토카인인 TNF-α와 IL-6의 단백질 생성을 통계적인 유의성(p<0.001)있게 억제함을 확인하였다. 또한 염증 유도된 RAW 264.7 세포에 PFE 동시 처리 시 NF-κB p65의 핵으로 이동이 차단됨과 iNOS와 COX-2의 단백질 발현을 감소시키는 것을 확인하였다. 이상의 연구결과를 통해 참콩풍뎅이는 염증에 의해 활성화된 TLR-4 신호전달과정을 조절하는 NF-κB p65의 활성과 염증성사이토카인 TNF-α와 IL-6의 생성 및 염증성효소 iNOS와 COX-2의 생성을 억제하는 항염증 효능이 있음을 확인하였다. The beetle Popillia flavosellata has been no reported its functional effects. In this study, we investigated the anti-inflammatory effect of P. flavosellata ethanol extract (PFE) on RAW 264.7 mouse macrophage cells treated with lipopolysaccharide (LPS) for the induction of inflammation. First, we examined the cytotoxicity of PFE in the RAW 264.7 cells at a concentration of 2,000 μg/ml or less. To evaluate the anti-inflammatory effects of PFE, we investigated the expression levels of proinflammatory cytokines, such as tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-6, and proinflammatory enzymes, such as inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in LPS-induced RAW 264.7 cells. In addition, we examined whether PFE inhibited the translocation of nuclear factor kappa B (NF-κB) p65 into the nucleus in the LPS-induced RAW 264.7 cells. We found that the protein levels of TNF-α and IL-6 were decreased in the LPS-induced RAW 264.7 cells after the treatment with PFE in a dose-dependent manner. In addition, we confirmed that PFE inhibited the translocation of NF-κB p65 into the nucleus, as well as the protein expression levels of iNOS and COX-2. Accordingly, we propose that PFE exerts an anti-inflammatory effect through the down-regulation of NF-κB p65, TNF-α, IL-6, iNOS, and COX-2 via the toll like receptor (TLR)-4 inflammatory signaling pathway.

N-Acetyl-L-Cysteine에 의한 생쥐 골수유래 가지세포의 기능적 활성화 저해

정영주(Young-joo Jeong),맹형건(Hyung Gun Maeng),김민규(Min Kyu Kim),강재승(Jae Seung Kang),이왕재(Wang Jae Lee),황영일(Young-il Hwang) 대한해부학회 2008 Anatomy & Cell Biology Vol.41 No.2

N-acetyl-L-cysteine (NAC)은 thiol기를 포함하는 화합물로서, glutathione (GSH)의 전구체로 작용하여 포유류 세포 내에서 항산화제로 작용한다. 또한 항염기능이 있으며 호산구나 B세포, 가지세포 (dendritic cell, DC)와 같은 면역세포 들에 여러 가지 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 특히 가지세포에 작용하여 활성화를 억제하거나 가지세포에 의한 Th2 반응 유도에 관여한다고 알려져 있다. 그러나 이들 연구는 세부적인 사항에 있어서 그 결과가 서로 상치하는바가 많으며, 또한 조절T세포의 관점에서는 연구된 바가 없다. 따라서 본 연구에서는 NAC 처리가 가지세포 활성화에 미치는 영향을 재확인하였고, NAC 처리된 가지세포의 T세포 활성 능력 저하, 또는 Th2 반응 유도 여부를 알아보았다. 활성화 시 가지세포에서 증가하는 활성산소기 (reactive oxygen species)는 NAC 처리로 낮아져서, NAC이 가지세포에 항산화작용을 나타냄을 확인하였다. NAC 처리로 가지세포에서 보조자극인자인 CD40과 CD86의 발현이 저해되었으며, 활성화 시 정상적으로 낮아지는 포식기능은 처리된 NAC의 농도에 비례하게 보존되었다. 활성화 시 분비되는 IL-6, IL-10, IL-12는 모두 감소하였다. 이러한 NAC-DC와 함께 배양한 T세포의 증식이나 Th1 cytokine인 IFN-γ, Th2 cytokine인 IL-5의 분비가 모두 저하되어 Th1/Th2의 편중 없이 가지세포의 T세포 자극능력이 전반적으로 감소하였음을 나타내었다. 또한 T세포 배양액에서 IL-10과 TGF-β의 농도 역시 NAC-DC로 자극된 경우에 현저히 줄어서, NAC-DC에 의한 T세포 증식 감소 등은 조절T세포 유도에 의한 것이 아니라 T세포 무반응이 유도된 때문임을 나타내 주었다. N-acetyl-L-cysteine (NAC) is a thiol-containing compound and acts as a precursor for glutathione (GSH). It behaves as an antioxidant in mammalian cells and also exerts anti-inflammatory effects. NAC is also known to affect several immune cells including eosinophils, B cells, T cells, and dendritic cells (DC) in many aspects. Even though it has been reported that NAC inhibits DC activation and shifts the immune response to Th2, these studies exhibit some contradictory results in detail and do not give any information with respect to the induction of regulatory T cells. In this study, we re-analyzed the effects of NAC on DC during their activation. We also evaluated whether it induced T cell anergy, Th1/Th2 shift, or regulatory T cells. NAC suppressed the elevation of intracellular reactive oxygen species during DC activation. In parallel, it down-regulated surface expression of CD40 and CD86, suppressed the decrease of phagocytic function, lowered the secretion of cytokines such as IL-6, IL-10, and IL-12. All these effects showed dose-dependency. Thus, it seems likely that NAC inhibited DC activation with regard to their phenotype and cytokine secretion. When we evaluated the T cell-stimulating capacity of these NAC-DC, T cell proliferation and secretion of both Th1 (IFN-γ) and Th2 cytokine (IL-5) were decreased. This implies that the T cell-stimulating activity of NAC-DC decreased without any shift to Th1 or Th2 cytokine (IL-5). The secretion of IL-10 and TGF-β in the supernatants were also decreased, which suggests that the decrease of T cell proliferation and cytokine secretion is due to the induction of T cell anergy, rather than regulatory T cells.

Primary Cultures of Drosophila melanogaster Gut Cells for Studies of Intestinal Stem Cell Regulation

Young-Il Yoon(윤영일),Jae-Sam Hwang(황재삼),Tae-Won Goo(구태원),Myung-Sae Han(한명세),Mi-Young Ahn(안미영),Eun-Young Yun(윤은영) 한국생명과학회 2012 생명과학회지 Vol.22 No.5

초파리는 발생과 질병연구를 위한 모델 곤충으로 널리 이용되어 왔다. 본 연구에서도 초파리를 모델곤충으로 한 장질환 연구의 일환으로 다양한 병원균 감염 및 장질환 유발시 어떻게 장줄기세포가 작용하는지를 이해하기 위해 초파리 장세포의 일차배양 방법을 확립하였다. 초파리 성충으로부터 장을 해부하고 다양한 효소를 처리하여 장세포를 분리한 후 배양하였다. 배양세포의 생존여부는 현미경 검경 및 MTS assay에 의해 확인한 결과 배양 후 9일째 최대 증식되었고 14일까지 생존함을 확인할 수 있었다. 또한 장줄기세포 및 장내분비세포의 존재도 immunostaining에 의해 확인하였다. 따라서 본 연구에서 구축된 초파리 일차배양 장세포는 다양한 유전자에 의한 장줄기 세포 조절연구뿐만 아니라 장에서 발생하는 다양한 질병을 연구하는 도구로 매우 유용할 것으로 추측된다. Drosophila melanogaster has been used as a useful model to study development and disease. In this study, we established the primary culture method of Drosophila in the intestine to understand how intestinal stem cells (ISCs) mediate tissue repair during infection and disease. To obtain intestinal cells, we separated intestines from adult flies and isolated single cells by enzymatic treatment. The survival of cultured cells was measured using MTS-analysis. The maximum growth rate of the cells was observed on the 9th day after seeding. In addition, the presence of ISCs and enteroendocrine cells was confirmed by delta and prospero staining. Accordingly, we supposed that Drosophila melanogaster gut cells established in this study are probably useful in studies about intestinal stem cell regulation and various diseases occurring in the intestine.

중국신장성 위그르인의 얼굴 계측: 눈과 코를 중심으로

황영일(Hwang Young-il),고기석(Koh Ki Seok),한승호(Han Seung Ho),이규석(Lee Kyu Seok),최병영(Choi Byoung Young),김희진(KIm Hee Jin),이경훈(Lee Kyung Hoon),정민석(Chung Min Suk) 대한체질인류학회 1994 대한체질인류학회지 Vol.7 No.2

중국 서쪽 신장성 위그르자치구에 거주하는 위그르인을 대상으로 하여 그들의 체질인류학적 특질을 알아 보고자 하는 연구의 일환으로 눈과 코를 중심으로 한 계측자료를 구하였다. 대상인원은 서부지역에 거주하는 18세 이상의 남자 120명, 여자 94명과 동부지역에 거주하는 18세 이상의 남자 182명, 여자66명이 있으며 계측항목은 눈을 중심으로 한 9가지, 코를 중심으로 한 4가지로 모두 13가지 였다. 실제 계측은 표준화된 방법으로 촬영한 전면, 왼쪽측면 및 왼쪽45˚ 경사면 사진을 대상으로 image analyzer를 이용하여 시행하였다. 계측치는 남녀를 공히 동쪽 및 서쪽으로 나누어 비교하였다. 또한 이들의 자료를 기존의 한국인 자료와 비교하여 보았다. 남자의 경우 동쪽은 서쪽에 비하여 코너비가 넓었으며 검은자직경이 컸다. 또한 눈꺼풀틈새의 경사도가 약간 올라가고 눈꼬리 사이거리가 긴 경향을 보였다. 한편 여자의 경우에는 동쪽여자가 서쪽에 비해 눈구석사이거리가 매우 유의하게 길었으며 반대로 눈꺼풀 틈새 길이는 잛았다. 눈꼬리가 치켜 올라간 것이 또 하나의 특징이 였으며 검은자직경 역시 남자에서와 마찬가지로 동쪽여자에서 컸다. 한국인의 기존자료와 비교하여 보았을 때 대다수 항목의 측정값은 남녀 모두에서 서쪽보다는 동쪽에 거주하는 위그리인의 수치가 한국인에 가까웠다.

PCNA 및 BrdU 표지에 의한 흰쥐 갑상샘 조직 재생에 관한 비교 연구

황영일(Young-il Hwang),유영복(Young Bok Yoo),백상호(Sang Ho Baik) 대한해부학회 2000 Anatomy & Cell Biology Vol.33 No.2

갑상샘에서 세포분열 정도는 갑상샘종의 예후나 감별진단을 위하여 중요하게 연구되고 있는 항목이다. 조직절편에서 세포분열을 확인하는 방법은 많이 있으나 그 중에 PCNA 염색과 BrdU 염색은 현재 가장 많이 사용되는 방법들이다. 본 연구에서는 외과적으로 절제된 흰쥐 갑상샘의 재생 과정을 PCNA 염색과 BrdU 염색으로 각각 살펴보았으며 또한 이 두방법의 결과가 서로 부합하는지를 확인하였다. 흰쥐의 갑상샘 양쪽 엽을 모두 50~60% 정도 외과적으로 절제한 후 수술 후 1, 2, 3, 4, 5, 7일 후에 조직을 얻고 면역조직화학염색을 시행하여 PCNA와 BrdU 양성세포를 각각 계수하였다. 수적인 차이를 제외하면 PCNA와 BrdU 염색에 의한 결과는 기본적으로 같았으나 전반적으로 PCNA 양성세포의 수는 BrdU 양성세포에 비하여 약 4~6배 정도 많은 비율로 나타났다. 정상 조직에서 양성세포의 수는 많지 않았으나 수술 다음날부터 양성세포율이 증가하여 수술 후 2일째 최고가 되었으며 수술 후 4일까지는 많은 양성세포가 관찰되다가 5일과 7일을 거쳐서 급격히 감소하는 양상을 보였다. 재생과정 전 기간에 걸쳐서 양성세포는 절제면 가까운 곳에 높은 빈도로 나타났다. 세포증식 연구에 있어서는 PCNA 염색과 BrdU 염색이 기본적으로는 동일한 결과 및 양상을 나타내었으나 BrdU 염색법이 PCNA 염색법에 비하여 보다 판독이 용이하고 세포증식을 좀더 특이하게 반영하는 것으로 생각되는 바이다. Cell proliferation index in the thyroid is regarded as an important marker for predicting the prognosis and for differential diagnosis of thyroid tumors. Among the methods for the detection of cell proliferation in histological sections, immunohistochemistry for PCNA and BrdU are the most preferable ones. In this study, we evaluated the regeneration process of the thyroid in the rat after surgical resection with special respect to the cell proliferation revealed by both PCNA and BrdU immunohistochemistry, and compared these two results. Rat thyroid was resected bilaterally, about 50~60% of the total lobe in volume, and the tissues were obtained 1, 2, 3, 4, 5, and 7 days after operation, immunohistochemistry was done, and positive and negative cells were counted. The regeneration pattern reflected by cell proliferation was basically same in both PCNA and BrdU immunohistochemistry, except that the positive ratio for PCNA was 4~6 fold higher than that for BrdU in general. In the control thyroid, positive cells were rare. However, the ratio of positive cells increased immediately after the operation, on day 1, and reached at its peak on day 2. The high ratio sustained until day 4, after which the ratio declined abruptly. Through the experimental days, positive cells were more crowded in the area adjacent to the resection plane than elsewhere, suggesting that the areas are more active regenerating focus. Although the pattern of proliferation was same both in PCNA and BrdU immunostaining in terms of time and localization, BrdU staining was easier to read and seeded to reflect cell proliferations more specifically than PCNA staining.

조리방법별 갈색거저리 유충의 물리적 및 관능적 특성

백민희,윤영일,김미애,황재삼,구태원,윤은영,Baek, Minhee,Yoon, Young-Il,Kim, Mi Ae,Hwang, Jae-Sam,Goo, Tae-Won,Yun, Eun-Young 한국식품조리과학회 2015 한국식품조리과학회지 Vol.31 No.5

Recently, the Tenebrio molitor larva was recognized as a novel food ingredient by the Ministry of Food and Drug Safety in Korea. Accordingly, we investigated its physical and sensory characteristics to establish the cooking conditions that may increase the demand of T. molitor larvae as a food. In this study, T. molitor larvae were cooked by various methods such as hot air dry, oven-broil, roast, pan fry, deep fry, boil, steam, and by microwave. In the physical evaluation of texture, the hardness and fracturability values were highest when larvae were cooked in the microwave. The adhesiveness, springiness, and chewiness values were highest when larvae were boiled. Boiled and steamed larvae had the highest lightness (L value), while oven-broiled larvae had the highest redness (a value) and yellowness (b value) values. Sensory evaluations assessed the appearance, aroma, flavor, and texture of cooked T. molitor larvae. Steamed and boiled larvae sizes were significantly large and the form was well preserved similar to fresh larvae. The moisture heat cooked (steamed and boiled) T. molitor larvae had the aroma and flavor of steamed corn, canned pupa, and boiled mushroom. In case of oven-broiled T. molitor larvae, the aroma and flavor of mealworm oil, seafood, sweet and roasted sesame were higher than in those cooked by other methods. In texture among sensory evaluation, the hardness and crispiness were the highest in the hot air dried and oven-broiled larvae, whereas juiciness was significantly higher in the boiled and steamed. Accordingly, we suggest that oven-broiled T. molitor larva will be prefered by consumer, due to its the rich aroma and flavor.

초저잡음 P-HEMT 제작 및 특성

정영래(Young-Lae Jung),주문철(Moon-Cheul Ju),송용두(Yong-Doo Song),황영일(Young-Il Hwang),곽명현(Myeong-Hyeon Kwak),마동성(Dong-Sung Ma) 대한전자공학회 1996 대한전자공학회 학술대회 Vol.1996 No.11

한.양방 병원 외래환자의 한.양약 동시복용 경험 실태조사

오문수,강재승,황영일,정희재,김윤경,Oh, Moon-Su,Kang, Jae-Seung,Hwang, Young-Il,Jung, Hee-Jae,Kim, Yun-Kyung 대한한의학방제학회 2010 大韓韓醫學方劑學會誌 Vol.18 No.2

The purpose of this survey was to find out the actual condition and the problems of combined medications of patients who have general diseases, respiratory diseases. The objects of this survey were 1,769 outpatients who visited 8 Oriental hospitals and Seoul national university hospital respiratory clinics. SPSS program was used to analyze the survey data. The mean age of patients was lower in oriental hospital than in western hospital. The monthly family incomes were higher in oriental hospital patients than in western hospital patients. The condition of patients was better in oriental hospital than western hospital and self-assessed health status was more positive in oriental hospital patients than in western hospital patients. The percentage of having experienced of treated in oriental and western hospital at the same time was 21% in western hospital patients and 45% in oriental hospital patients. In patients with respiratory diseases, the percentage of having taken combined medications was 40.2% in oriental hospital and 13.7% in western hospital. In patients with non-respiratory diseases, the percentage of having taken combined medications was 27.4% in oriental hospital and 8.3% in western hospital. And in the patients with two different diseases, the percentage of having taken combined medications was 27.9% in oriental hospital and 6.3% in western hospital. The percentage of having experienced synergistic effects was 33.0% in western hospital and 56.3% in oriental hospital. The percentage of side effects was 12.6% in western hospital and 12.2% in oriental hospital. This survey was meaningful in that it reported the actual condition of combined medications of patients who have general diseases, respiratory diseases. For the deep study on synergistic and side effects of combined medications, it is necessary to collect many cases of synergistic and side effects by doctors in western and oriental hospitals.

흰점박이꽃무지(Protaetia brevitarsis)의 식품원료화를 위한 전처리 조건 확립

권은영(Eun-Young Kwon),유정미(Jeongmi Yoo),윤영일(Young-Il Yoon),황재삼(Jae-Sam Hwang),구태원(Tae-Won Goo),김미애(Mi-Ae Kim),최영철(Young-Cheol Choi),윤은영(Eun-Young Yun) 한국식품영양과학회 2013 한국식품영양과학회지 Vol.42 No.3

본 연구에서는 흰점박이꽃무지를 식품원료화 하기 위한 전처리 조건을 설정하기 위해 세포독성, 이취감소 및 살균조건을 확립하였다. 유충에 살균 후 공급되는 세 가지 사료(참나무톱밥, 볏짚, 목초) 중에서 참나무톱밥을 공급하여 사육한 유충의 분말이 세포독성이 없었고, 유충의 발육단계를 크게 3령 유충, 용화직전 번데기, 번데기로 구분 지은 후 각각의 분말이 가지는 세포독성 유무를 확인한 결과에서 세포독성은 나타나지 않았다. 세포독성 검사 결과를 토대로 식품원료화하기 위한 유충의 표준사료는 세포독성이 전혀 나타나지 않고 전국 사육농가 중 가장 많이 이용하고 있는 발효 참나무 톱밥을 표준사료로 선정하였다. 흰점박이꽃무지의 분말전처리 조건으로 증기로 5분 동안 살균처리를 통해 사료 내의 미생물을 제거한 참나무톱밥을 급여하고 3일간 절식상태로 배변유도 후, 중장에 존재하는 내용물의 잔여도가 현저히 감소됨을 확인하였다. 또한 관능평가를 통해 3일간의 배변된 유충의 장 내용물의 잔여물이 감소함으로써 유충이 가지는 고유한 이취와 색깔이 눈에 띄게 개선되는 효과를 확인할 수 있었다. 배변 유도된 유충을 115℃, 0.9 kgf/cm³의 고온고압멸균을 5분간 실시한 후 동결건조 한 분말에서 세균 및 진균을 포함하는 미생물이 완전히 제거됨으로서 식품원료로서의 안전성을 확보할 수 있었다. The pharmacological efficacy of Protaetia (P.) brevitarsis larvae has been described in the Dongui Bogam. It is believed that the larvae are particularly useful for hepatic disorders. However, natural aversion has made it difficult to consume these larvae as food. Thus, we sought to make an eatable form of the larvae by establishing optimal conditions for larvae preparation. Larvae were selectively bred, sterilized, and a powder of larvae generated by freeze-drying. Afterward, the CellTiter 96<SUP>®</SUP> AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay (MTS) with the RAW 264.7 cell line was used to validate the safety of the powder as a food ingredient. We determined that oak sawdust sterilized by water vapor for 5 minutes could be used for larvae feed, and a feeding for 3~5 days followed by a fasting for 3 days were optimal conditions for larvae preparation. In addition, sterilization of larvae at 115oC and 0.9 kgf/cm³ (to avoid contamination of pathogenic bacteria and fungi) was successfully applied in the production of edible powder from P. brevitarsis. The optimized processes established in our experiments can be used in the industrial production of P. brevitarsis as a food ingredient.