재래종 황색자두효소 갈변반응 생성물의 돌연변이 억제작용

함승시,Ham, Seung-Shi 한국응용생명화학회 1987 한국농화학회지 Vol.30 No.1

재래종 황색계자두 효소와 4종류의 polyphenol 화합물과 반응시켜 얻어진 효소적 갈변반응 생성물에 대하여 변이원성 및 변이원 억제작용에 관한 실험결과 B. subtilis H17과 M45 두 균주를 이용한 rec-assay에서 4종류의 갈변반응 생성물 모두 변이원성은 없었다. rec-assay에서 금속이온의 영향을 실험한 결과 pyrogallol의 갈변반응 생성물의 경우 $Fe^{3+},\;Mn^{2+},\;Zn^{2+},\;Ni^{2+}\;Al^{2+}$에서 약한 영향을 받았으며 hydroxyhydroquinone의 갈변반응 생성물에서는 $Cu^{2+},\;Pb^{2+}$, 그리고 catechol의 갈변반응 생성물에서는 $Mn^{2+}$ 공존하에서 약한 영향을 받았다. DNA절단실험 결과 갈변반응 생성물 자체에 의해서는 4종류의 시료 모두 DNA절단능력은 없었다. 금속이온의 영향에서는 $Fe^{2+}$의 경우 그 자체에 의해 절단되었으며 $Cu^{2+}$은 DNA 절단을 촉진하는 것으로 나타났다. S-9 mix를 첨가한 돌연변이 유발실험에서는 4종류의 갈변반응 생성물 모두 농도증가에도 변이원성은 없었으며 변이원 물질인 $benzo\;{\alpha}\;pyrene$에 대한 돌연변이원 억제반응에서는 4종류의 갈변반응 생성물 모두 농도증가에 따라 대조구에 비해 강한 억제작용을 나타냈다. 따라서 재래종 황색계 자두로부터 추출한 polyphenol oxidase와 4종류의 polyphenol 화합물과 반응시켜 얻어진 효소적 갈변반응 생성물의 들연변이원성 실험결과 갈변반응 생성물자체에 의한 돌연변이원성은 없었으며 금속이온의 영향도 받지 않는 것으로 나타났으나 강력한 발암물질인 $benzo\;{\alpha}\;pyrene$을 사용한 돌연변이 억제실험에서는 4종류의 갈변반응 생성물 모두 강한 돌연변이 억제작용이 있음을 알 수 있었다. The mutagenicity and desmutagenicity on enzymatic browning reaction products which obtained from prunes salicina (yellow) enzyme and polyphenol compounds were carried out. In the rec-assay on Bacillus subtilis strains H17 and M45, the enzymatic browning reaction products of pyrogallol, hydroxyhydroquinone, 3,4-dihydroxytoluene and catechol of $10^{-2}M$ did not showed mutagenicity. In the effects of various metal ions on the rec-assay, the enzymatic browning reaction products of pyrogallol showed mutagenic activity by $Fe^{3+},\;Mn^{2+},\;Zn^{2+},\;Ni^{2+}$ and $Al^{3+}$. In the enzymatic browning reaction products of hydroxyhydroquinone, $Cu^{2+},\;Mn^{2+}$ and $Pb^{2+}$ were effected in mutagenic action and the enzymatic browning reaction products of catechol was effected in mutagenic action by $Mn^{2+}$. In the DNA-breaking action of enzymatic browning reaction products of pyrogallol, hydroxyhydroquinone, 3,4-dihyroxytoluene and catechol did not show, DNA-breaking action. In the effects of various metal ions on the DNA-breaking action of enzymatic browning reaction products, $Cu^{2+}$ showed DNA-breaking action. In the mutagenicity test on Sal. typhimurium strains TA98 and TA 100 with S-9 mix, 4 kinds of browned substances did sot shove muragenicity, all the browned substances showed strong desmutagenic activity in the presence of benzo $({\alpha})-pyrene$ with S-9 mix.

재래종 적색자두(Prunus salicina) 효소갈변반응 생성물의 돌연변이 억제작용

함승시,홍은희,대촌호구,Ham, Seung-Shi,Hong, Eun-Hee,Omura, Hirohisa 한국식품과학회 1987 한국식품과학회지 Vol.19 No.3

재래종 적색 자두 (Prunus salicina)에서 효소를 추출하여 4종류의 polyphenol화합물과 반응시켜 얻어진 갈변반응 생성물에 대하여 Bacillus subtilis H17과 M45를 이용한 rec-assay와 Salmonella typhimurium TA98과 TA100 두 균주를 이용한 Ames test, 그리고 calfcthymus DNA를 이용하는 DNA절단시험을 이용하여 돌연변이원성과 돌연변이 억제작용을 조사하였다. 포자 rec-assay 에서는 pyrogallol, hydroxyhydroquinone, 3,4-dihydroxytoluene, chlorogenic acid 의 갈변반응 생성물은 모두 DNA손상능력이 없었으며 8가지 금속이온 중 ${Zn}^{2+}$과 ${Ni}^{2+}$의 첨가로 고초균 DNA손상에 약한 영향을 나타내었다. DNA절단시험 결과 4종류 갈변반응 생성물 모두 DNA절단작용이 없었으며 금속이온의 영향에 있어서는 pyrogallol 갈변반응 생성물이 ${Cu}^{2+}$의 영향을 받아 ${Cu}^{2+}$의 농도가 증가함에 따라 강한 절단작용을 나타내었으며 3,4-dihydroxytoluene 과 hydroxyhydroquinone갈변반응 생성물은 금속이온의 영향을 전혀 받지 않았다. 또한 chlorogenic acid갈변반응 생성물은 DNA 절단을 억제하는 효과를 나타내었다. Ames test에서는 4가지 갈변반응 생성물 모두 변이원성은 없었으며 benzo$[{\alpha}]$pyrene을 사용한 변이원성 억제작용 실험결과 benzo$[{\alpha}]$pyrene의 활성을 강하게 억제하는 것으로 나타났다. The rec-assay on Bacillus subtilis strains H17$({Rec}^+)$ and M45$({Rec}^-)$, the Ames test with modification of preincubation on Salmonella typhimurium TA98 and TA100 and DNA-breaking test on double strand calfthymus DNA were carried out using enzymatically browned substances obtained from the reaction of Prunus salicina (Red) enzyme and polyphenols. The spore rec-assay of enzymatic browning reaction products of pyrogallol, hydroxyhydroquinone. 3,4-dihydrohyoluene and chlorogenic acid showed non-mutagenic activity The spore rec-assay showed a little influence of ${Zn}^{2+}$ and ${Ni}^{2+}$ on the action of four kinds of enzymatic browning reaction products. The enzymatic browning reaction products of polyphenols did not show DNAbreaking activity. ${Cu}^{2+}$ of various metal ions influenced on DNA-breaking of enzymatic browning reaction products of pyrogallol. However, enzymatic browning reaction products of chlorogenic acid inhibited on DNA-breaking activity. Four kinds of enzymatic browning reaction products showed non-mutagenic activity on Salmonella typhimurium TA98 and TA100 with S-9 mix. In the mutagenicity on Salmonella typhimurium TA98 and TA100 with S-9 mix in the presence of benzo$({\alpha})$pyrene which is the carcinogenic substances, four kinds of enzymatic browning reaction products showed desmutagenic activity.

곰취 추출물의 항돌연변이성 및 유전독성억제효과

함승시(Seung-Shi Ham),이상영(Sang-Young Lee),오덕환(Deog-Hwan Oh),정성원(Sung-Won Jung),김상헌(Sang-Heon Kim),정차권(Cha-Kwon Chung),강일준(II-Jun Kang) 한국식품영양과학회 1998 한국식품영양과학회지 Vol.27 No.4

곰취(Ligularia fischeri)를 건조 후 세절하여 에탄올, 메탄올, 물을 가하여 추출한 추출물과 상온에서 에탄올로 추출한 추출물을 포함하여 네가지의 추출물을 얻었다. 이들 네가지 시료들에 대하여 Salmonella typhimurium TA100고 TA98을 이용한 Ames test와 mouse를 이용한 micronucleus test를 실시한 결과 Ames test에서는 곰취 에탄올, 메탄올, 물 그리고 상온 에탄올 추출물 모두 시료자체의 돌연변이원성은 없는 것으로 나타났으며, 4-nitroquinoline-1-oxide(4NQO)와 N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) 그리고 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido-[4,3-b]indol (Trp-P-1) 등 세가지 양성변이원물질에 대한 항돌연변이원성을 검토한 결과 S. typhimurium TA100에 대해서는 MNNG에 대하여 200㎍/plate의 농도에서 에탄올, 메탄올, 물 및 상온 에탄올 추출물이 각각 84.7%, 77.1%, 72.5% 및 71%의 억제효과를 나타내었다. 4-NQO에 대해서는 각각 67.9%, 66.8%, 64.6% 및 56%, 그리고 Trp-P-1에 대해서는 70.1%, 60.9%, 61.9% 및 52.8%의 억제효과를 나타냄으로서 에탄올 추출물이 가장 높은 항돌연변이 활성을 가지고 있음을 알 수 있었다. Base pair substitution mutagen에 대하여 돌연변이원성을 나타내는 S. typhimurium TA100 균주에서 frame shift mutagen에 대하여 돌연변이원성을 나타내는 S. typhimurium TA98 균주에서보다 높은 억제효과를 나타내었다. 그리고 곰취 추출물의 MNNG에 대한 소핵생성 억제효과는 MNNG 150㎎/㎏을 복강내 투여하여 positive control로서 이용하여 소핵생성빈도를 억제율로 나타내었다. 농도별 첨가시 에탄올 추출물의 경우 12~57.0%의 억제율을 보였고, 메탄올 추출물의 경우 15~58.0%의 소핵생성 억제율을 나타내었다. 두가지 시료 모두 비슷한 소핵생성 억제효과를 보임으로서 MNNG에 대한 소핵생성 억제효과 in vitro실험인 Ames test에서의 결과가 유사한 것으로 나타나 상호 높은 연관성이 있음을 알 수 있었다. The antimutagenic and antigenotoxic effects of ethanol, methanol, water and non-heating ethanol extract of Ligularia fischeri were investigated using Ames test and micronucleus test. Four solvent extracts by themselves did not induce mutagenesis. The four extracts of 200㎍/plate showed approximately 84.7%, 77.1%, 72.5% and 71% inhibitory effect on the mutagenesis induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) and 67.9%, 66.8%, 64.6% and 56% inhibition on the mutagenesis by 4-nitroquinoline-1-oxide(4NQO) against TA100 strain, whereas 70.1%, 60.9%, 61.9% and 52.8% inhibitions were observed on the mutagenesis induced by 3-amino-l,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b]indol(Trp-P-1) in the presence of 200㎍/plate. TA100 strain was more sensitive than TA98 strain by four kinds of extracts on anti mutagenesis. The effects of Ligularia fischeri extracts on the frequencies of micronucleated polychromatic erythrocytes(MNPCEs) induced by MNNG were investigated in the bone marrow. Ten, 20, 40 and 80㎎ g/㎏ of each extract were administered to animals immediately after injection of MNNG and the exposure time was 36 hours. Inhibitory effects of Ligularia fischeri ethanol extracts were 12%,35.3%,58.8%, and 57%, in the presence of 20, 40, 60 and 80㎎/㎏, respectively whereas methanol extracts showed 15.5%, 32.7%, 50.8%, and 57.9% inhibitory effects, respectively. Both extracts showed enhanced antimutagenic and antigenotoxic effects. These results showed a good correlation between antimutagenic effects in in vitro and in in vivo assay.

메밀 Flavonoids의 항돌연변이원성 및 지질대사 조절기능에 관한 연구 - 메밀 잎 에탄올 추출물의 항돌연변이원성 연구 -

함승시(Seung-Shi Ham),최근표(Koun-Pyo Choi),최용순(Young-Soon Choi),이상영(Sang-Young Lee) 한국식품영양과학회 1994 한국식품영양과학회지 Vol.23 No.4

Spore ree-assay에서 메밀잎 에탄올 추출물은 낮은 농도에서 항돌연변이원성을 나타내었으나 높은 농도에서는 보돌연변이 효과를 나타내었다. 한편 Ames test에서 메밀잎 에탄올 추출물은 자체 변이원성은 없었으며 S. typhimurium TA98과 TA100 균주를 사용하였을 때 B(a)p, 2AF, Trp-P-l 및 MNNG에서 돌연변이 유발을 억제시키는 효과가 있었다. 이들 추출물을 다시 핵산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 그리고 물층으로 분획하여 항돌연변이 효과를 조사한 결과 이 중 헥산 분획이 B(a)P에 대한 S. typhimurium TA100에서 항돌연변이 효과가 가장 컸으며 MNNG에 대해서는 클로로포름분획에서 가장 효과가 컸다. 돌연변이 기작을 규명하기 위해 변이원물질, S9 mix, 균 및 메밀 잎 추출물의 첨가 순서와 반응시간에 따른 변이원 억제활성을 검토 하였다. 그 결과 복귀변이가 일어난 균체에 대해서는 MNNG, B(a)p 모두 반응시간을 달리하여도 MNNG 847±41~849±42 / plate, B(a)P 338±21~388±24 / plate로 거의 일정한 수준이었다. 그러나 변이원물질과 추출물을 시간별로 먼저 반응시킨 후 균을 첨가하여 검토한 결과 MNNG 152±12~273±18 / plates, B(a)p 135±13~195±10 / plates로 강력한 억제효과를 나타내었다. In spore rec-assay using B. subtillus H17 (rec^+) and M45 (rec^-), the ethanol extract of buckwheat leaves showed antimutagenicity in condition of low concentrations, but its did comutagenicity in condition of high concentrations. In Ames test, the ethanol extract of buckwheat leaves reduced the mutagenicity of N-methyl-N'nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG), benzo (a)pyrene (B(a)P), 2-amino-fluorene (2AF), and 3-amino-l, 4-dimethyl-5-H-pyrido (4, 3-b) indol (Trp-P-l) in Salmonella typhimurium TA98 and TA100. The ethanol extract was fractionated by hexane, ethylacetate, butanol and water. Among them, hexane fraction showed the highest inhibition rate on the mutagenicity of B(a)P, and so did chloroform fraction on the mutagenicity of MNNG in S. typhimurium TA98 and TA100. To elucidate the antimutagenic mechanism of the ethanol extract, it was mixed and co-incubated with various mutagens, S9 mix, and the bacteria with different experimental orders and different reaction times. The ethanol extract did not affect reversion rate of pre-mutated S. typhimurium. However, when the ethanol extract was added to the mutagens before. their interaction with S. typhimurium, it reduced the mutation rate to 152±12~273±18 colonies / plates in case of MNNG, and 135±13~95±l0 colonies / plates in case of B (aW, showing strong desmutagenic activity.

산채류를 이용한 음료 개발에 관한 연구

함승시(Seung-Shi Ham),이상영(Sang-Young Lee),오덕환(Deog-Hwan Oh),김상헌(Sang-Heon Kim),홍정기(Jeong-Ki Hong) 한국식품영양과학회 1997 한국식품영양과학회지 Vol.26 No.1

산채 일반음료는 산채를 착즙하여 쥬스를 제조한 후 각종 부원료를 사용하여 최적의 배합비로 산채음료를 제조하였으며, 산채 발효음료는 Lactobacillus helveticus를 이용한 산채음료 원액과 시럽믹스를 1 : 3으로 혼합한 다음, 균질기를 이용하여 균질화한 후 요구르트 향료를 첨가하여 발효음료를 제조하였다. 이 시제품들에 대한 일반분석 실험과 저장안정성 실험을 행하였다. 산채 일반음료의 일반분석 결과 37℃에서 6개월간 저장시 수리취와 고려엉겅퀴음료의 pH는 각각 3.80과 3.7, 산도는 각각 0.50 및 0.49, OD값은 각각 1.021 및 1.119로 나타났다. 그리고 저장안정성 시험은 상온 및 37℃로 구분하여 6개월간 저장하면서 pH와 색도의 경시적 변화를 측정한 결과 상온에서의 pH의 변화는 수리취가 3.96~3.95, 고려엉겅퀴는 3.99~3.89로 각각 0.01과 0.1정도의 미미한 변화를 보였으며, 37℃에서는 각각 3.95~3.83과 3.98~3.87로 0.12정도의 변화폭을 보였다. 산채 발효음료의 일반분석에서는 수리취와 엉겅퀴의 pH는 각각 3.65와 3.70, 산도는 0.57 및 0.60, S.N.F.는 3.2 및 3.1 그리고 유산균수는 각각 2.5×10^8과 4.0×10^8으로 나타났다. 저장안정성 실험은 4℃에서 15일간 저장하면서 pH와 산도의 경시적인 변화를 측정하였다. 수리취와 엉겅퀴의 pH는 3.56~3.39 및 3.67~3.48로 각각 0.17과 0.19의 차이를 보였다. Beverages using mountain edible herbs(MEH) were formulated by determining optimum ratio of juices of MEH to several other ingredients. Fermented beverages were made by mixing juices(1 volume) fermented with Lactobacillus helverticus with syrup(3 volumes), followed by homogenization and flavoring. The general analysis and quality change of the beverages during storage were performed. The analysis of the beverages showed that the pH of Synurus deltoides and Cirsium sctidens were 3.8 and 3.7, titratable acidities were 0.50 and 0.49, optical densities were 1.201 and 1.119, respectively. The pH and color were not significantly changed when Synurus deltoides and Cirsium sctidens were stored at room temperature and 37℃ for 6 months. The pH of Synurus deltoides beverage ranged 3.95~3.96 and pH of Cirsium sctidens was 3.83~3.95 at room temperature and 3.87~3.98 at 37℃, respectively. The analysis of fermented beverages showed that pHs of Synurus deltoides and Cirsium sctidens were 3.65 and 3.70, titratable acidities were 0.57 and 0.60. Solids-non-fat were 3.2 and 3.1, and total counts of lactic acid bacteria were 2.5×10^8 and 4.0×10^8, respectively. The changes of pH and titratable acidities stored at 4℃ for 15 days were 3.39~3.56 and 0.61~0.81 for Synurus deltoides and 3.48~3.67 and 0.60~0.78 for Cirsium sctidens, respectively.

해양심층수염 및 다시마분말 첨가 고추장추출물의 항돌연변이성 및 암세포 성장억제효과

함승시(Seung-Shi Ham),최현진(Hyun-Jin Choi),김수현(Soo-Hyun Kim),오현택(Hyun-Taek O),정미자(Mi-Ja Chung) 한국식품영양과학회 2008 한국식품영양과학회지 Vol.37 No.4

본 연구는 Ames test와 SRB assay를 통해 SK와 SDK 메탄올 추출물을 이용하여 항돌연변이원성과 세포독성 효과에 대해 살펴보았다. S. Typhimurium TA98과 TA100 균주를 사용하여 돌연변이원성을 실시한 결과 SK와 SDK 메탄올 추출물 자체의 돌연변이원성은 없었으며, MNNG와 4NQO를 유도하여 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. S. Typhimurium TA98에서 4NQO를 유도하여 SDK(200 ㎍/plate) 메탄올 추출물 처리 시에 71.4%의 억제효과를 나타내었으며, 반면에 S. Typhimurium TA100에 4NQO와 MNNG의 돌연변이를 유도하였을 때 각각 56.1%와 83.6%의 억제율을 보였다. 암세포 성장 억제효과를 검토한 결과 샘플처리 시 농도 의존적 증가를 보였으며, SDK 메탄올 추출물 1 ㎎/mL 첨가 시 HeLa, Hep3B, MCF-7, AGS 및 A549에서 각각 61.5%, 61.3%, 51.4%, 57.9% 및 77.7%의 억제효과를 나타내었다. SK 메탄올 추출물 첨가 결과 51~58% 정도의 억제효과를 보였다. 대조적으로 SDK 메탄올 추출물을 1 ㎎/mL 첨가 시 293에서 2~38%의 세포독성을 나타내었다. This study was performed to observe the antimutagenic and cytotoxic activities of methanol extract of kochujang added with sea tangle and deep sea water salts (SDK) and kochujang added with sea tangle (SK) using the Ames test and SRB assay, respectively. The direct antimutagenic effect of SDK and SK methanol extracts were examined by Ames test using Salmonella Typhimurium TA98 and TA100. In the Ames test, methanol extract of SDK and SK alone did not exhibit mutagenicity and most of the samples showed high antimutagenic effects against mutation induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) and 4-nitroquinoline-1-oxide (4NQO). Methanol extract of SDK (200 ㎍/plate) showed approximately 71.4% inhibitory effect on the mutagenesis induced by 4NQO against TA98 strain; whereas 56.1% and 83.6% inhibitions were observed on the mutagenensis induced by 4NQO and MNNG against TA100 strain. The cytotoxic effects of SDK and SK increased with increasing sample concentration against human cervical adenocarcinoma (HeLa), human hepatocellular carcinoma (Hep3B), human breast adenocarcinoma (MCF-7), human stomach adenocarcinoma (AGS), and human lung carcinoma (A549). The SDK at the concentration of 1 ㎎/ml showed cytotoxicities of 61.5%, 61.3%, 51.4%, 57.9% and 77.7% against HeLa, Hep3B, MCF-7, AGS and A549, respectively. In contrast 1 mg/ml treatment of SDK and SK methanol extract had only 2~38% cytotoxicity on human transformed primary embryonal kidney cell (293).

효소적 갈변반응 생성물의 돌연변이 억제효과 및 유전자 수복에 관한 연구

함승시(Seung-Shi Ham),김성완(Sung-Wan Kim),김영명(Young-Myung Kim) 한국식품과학회 1990 한국식품과학회지 Vol.22 No.6

在來種 赤色자두(Prunus salicina) Polyphenol oxidase의 一般的 性質

함승시(Seung-Shi Ham),홍은희(Eun-Hee Hong),大村浩久(Hirohisa Omura) 한국식품영양과학회 1987 한국식품영양과학회지 Vol.16 No.2

在來種 赤色자두(Prunus salicina)로부터 酵素를 抽出 精製하여 그 性質을 調査한 結果는 다음과 같다.<br/> 1. 赤色자두의 PPO는 crude extract보다 (NH₄)₂SO₄로 飽化했을 때 15倍, 그리고 Sephadex G-100 column chromatography를 행하였을 때 64倍로 精製되었다.<br/> 2. 酵素反應의 最適條件은 最適溫度 및 pH가 35℃, 6.5였으며 主要基質은 o-diphenol인 catechol로 나타났다.<br/> 3. 赤色자도 PPO의 熱安定性은 50℃에서 5分間 處理하였을 때 初期 PPO의 活性中 85%, 30分間 處理時에는 75%의 殘存活性을 나타내었다.<br/> 4. 本 酵素의 K값은 2.58mM이었다.<br/> 5. 沮割劑의 效果 중 L-cysteine, glutathione, ascorbic acid와 potassium cyanide는 1mM 濃度에서 완전히 酵素活性을 沮割하였으나 EDTA는 沮割效果가 대단히 약하게 나타났다. Polyphenol oxidase in Prunus salicina(Red) was extracted, some properties and its partially purification were investigated as follows;<br/> Polyphenol oxidase was purified about 15 folds after ammonium sulfate saturation and about 64 folds after Sephadex G-100 column chromatography.<br/> Polyphenol oxidase showed optimum pH for activity at 6.5 and optimum temperature at at 35℃ and high affinity to catechol in o-diphenol compounds.<br/> Thermal stability were about 85% and 75% of initial polyphenol oxidase activity remained after heating at 50℃ for 5 minutes and 30 minutes respectively.<br/> The Michaelis constant of the enzyme was 2.58mM.<br/> L-cysteine, glutathione, ascorbic acid and potassium cyanide appeared to be most effective inhibitors. EDT A showed a slight inhibition.

Partial Purification and Some Properties of Polyphenol Oxidase from Aster scaber

함승시(Seung-Shi Ham),홍은희(Eun-Hee Hong),이상영(Sang-Young Lee),박귀근(Gwi-Gun Park),오무라 히라히사(Hirohisa Omura) 한국식품영양과학회 1991 한국식품영양과학회지 Vol.20 No.3

참취로부터 추출한 polyphenol oxidase의 부분정제를 (NH₄)₂SO₄처리 및 Sephadex G-150 column chromatogaphy에 의해 분리하였다. Polypenol oxidase의 최적pH와 최적온도는 각각 7.0과 30℃였으며, 효소활성은 60℃ 에서 30분간 처리시와 70℃에서 5분간 처리시 완전실활하였다. 기질특이성에서는 chlorogenic acid의 기질이 높은 특이성을 나타낸 반면 DL-dopa는 활성을 억제하였다. Polyphenol oxidase의 Km값은 17.6mM이었다. A polyphenol oxidase from the crude extract of Aster scaber was partially purified by (NH₄)₂ SO₄ precipitation and subsequent Sephadex G-150 chromatography. The final preparation showed five peaks of enzyme activity. Optimum pH and temperature for the activity of polyphenol oxidase were 7.0 and 30℃, respectively. Enzyme activity was stable at 40℃ for 5min in pH 7.0 reaction mixture but ceased completely at 60℃ for 30min and 70℃ for 5min at pH 7.0. The polyphenol oxidase has good activity on chlorogenic acid but was inactive on DL-dopa. The apparent Km for catechol was about 17.6mM.

더위지기 추출물의 항돌연변이원성 및 세포독성효과

함승시(Seung-Shi Ham),정차권(Cha-Kwon Chung),이재훈(Jae-Hoon Lee),최근표(Kun-Pyo Choi),정성원(Seung-Won Jung),김은정(Eun-Jeong Kim) 한국식품영양과학회 1998 한국식품영양과학회지 Vol.27 No.1

더위지기의 발암물질 억제효과 실험결과 생즙, 에탄올추출물 및 물 추출물의 경우 Salmonella typhimurium TA100 균주에서 직접 변이원 물질인 MNNG(0.5㎍/plate)에 대하여 시료를 50㎍/plate 첨가시 생즙의 경우는 83%의 높은 억제 효과를 나타내었으며 에탄올 추출물의 경우는 35% 그리고 물 추출물의 경우는 20%의 억제효과를 나타내었다. 한편 간접변이원인 Trp-P-1(5㎍/plate)의 발암물질에 대해서도 생즙 50㎍/plate 첨가시 70%의 높은 억제효과를 나타내었으며 에탄올 추출물에 대해서는 30%, 물 추출물에 대해서는 15%의 낮은 억제효과를 나타내었다. 한편 4종류의 인간 암세포를 이용하여 더위지기의 생즙과 에탄올 추출물 그리고 물 추출물에 대한 세포독성 실험결과 인간 폐암세포인 A549의 경우 50㎍/ml의 농도를 첨가하였을 때 에탄올 추출물 89%, 생즙 80% 그리고 물 추출물이 35%의 사멸효과를 나타내었다. 또한 유방암세포인 MCF7에 대해서는 50㎍/ml 첨가시 에탄올 추출물 91%, 생즙 76%, 물 추출물 30%의 억제효과를 나타내었으며, 섬유육종암세포 HT1080에 대해서는 에탄올 추출물 90%, 생즙 78% 그리고 물 추출물이 30%의 억제효과를 나타내었고 위암세포인 KATOⅢ에 대해서는 에탄올 추출물 68%, 생즙 52% 그리고 물 추출물이 18%의 세포독성효과를 나타내었다. 4종류의 인간 암세포주에 대한 더위지기의 항암효과는 에탄올 추출물에서 강한 효과를 보여주었다. The antimutagenic activity of three kinds of extract such as fresh juice, ethanol extract and water extract of Artemisia iwayomogi against 3-amino-l,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b]indol(Trp-P-1) and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) was demonstrated with the Salmonella typhirnurium assay. The numbers of revertants per plate decreased significantly when these extracts(0.5㎍/plate) added to the assay system using S. typhimurium TA100. These extracts also showed prominant cytotoxic activity against four different kinds of human cancer cell such as human lung cancer cell(A549), breast cancer cell(MCF7), fibrosacoma cell(HT1080) and gastric cancer cell(KATOⅢ), respectively.