1996년부터 2005년까지 혈청검사로 진단된 신증후출혈열의 역학적 특성 분석

노윤태(Yoon-Tae Noh),조정은(Jung-Eun Cho),한명국(Myung Guk Han),이나연(Na-Yeon Lee),김수연(Su-Yeon Kim),주재신(Chaeshin Chu),이호동(Ho-Dong Lee),남재환(Jae-Hwan Nam),박근용(Keun-Yong Park),신영학(Young-Hack Shin),조해월(Hae Wol Cho) 대한미생물학회 2006 Journal of Bacteriology and Virology Vol.36 No.4

Development of a simple and sensitive method to detect enteric viruses from oysters

정은영,제회복,전홍기,윤재득,지영미,천두성,조해월,장경립,Chung, Eun-Young,Je, Hee-Bok,Jun, Hong-Ki,Yoon, Jae-Deuk,Jee, Young-Mee,Cheon, Doo-Sung,Cho, Hae-Wol,Jang, Kyung-Lib Korean Society of Life Science 2002 생명과학회지 Vol.12 No.1

Development of a rapid method possessing the requisite sensitivity and specificity for virus monitoring is necessary for protection of the shellfish-consuming public. Oysters tissue usually contains virus particles in relatively small concentrations along with various other substances that can interfere with detection steps. Therefore, the critical point concerning the detection of viruses in shellfish tissues resides in the processing of samples. The current study demonstrated the possibility of purifying small amounts of virus particles at the interface of a 10/50% sucrose gradient after a single round of sucrose gradient ultracentrifugation. We could detect HAV and poliovirus simultaneously from oyster tissues by using two different sets of primer. Furthermore, the method showed a high level of virus recovery rate (>95%) as determined by plaque assays of the final samples. Taken the advantages of the simple and sensitive methods, it was possible to detect 2 pfu of HAV in 5 g of oyster digestive tissues within 24h. 굴 소비자의 보호를 위해서는 매우 민감하고 특이적으로 바이러스를 모니터링할 수 있는 신속진단법의 개발이 필수적이다. 굴 조직은 흔히 비교적 소량의 바이러스와 검출단계를 방해할 수 있는 다른 물질들을 함께 함유한다. 따라서 굴으로부터 바이러스의 검출에서 가장 중요한 과정은 시료의 가공단계이다. 본 연구에 의하면 한번의 sucrose 구배 초원심분리에 의하여 10%와 50% 사이에서 소량의 바이러스를 분리할 수 있음을 제시하였다. 우리는 두 종류의 primer 세트를 이용하여 HAV와 poliovirus를 동시에 굴 조직으로부터 검출할 수 있었다. 또한, 이 방법은 높은(>95%) 바이러스 회수율을 나타내었다. 이 방법은 24시간이내에 5 g의 굴조직으로부터 2 pfu의 HAV를 검출할 수 있을 정도로 신속하고 민감한 검사법이다.

신증후출혈열 백신 접종 후 항체양전율 및 항체가 양상에 관한 실험역학적 연구

김상훈 ( Sang Hoon Kim ),류승호 ( Seung-ho Ryu ),최보율 ( Bo Youl Choi ),박항배 ( Hung-bae Park ),조해월 ( Hae-wol Cho ),김승육 ( Seung-yuck Kim ),전태준 ( Tae-joon Chun ) 국군의무사령부 1997 대한군진의학학술지 Vol.28 No.1

서울바이러스 80-39주에 대한 단세포군항체 생산 및 특성 분석

송진원(Jin-Won Song),송기준(Ki-Joon Song),최영주(Young Ju Choi),기선호(Sun Ho Kee),조해월(Hae-Wol Cho),이용주(Yong-Ju Lee),이호왕(Ho Wang Lee) 大韓微生物學會 1998 大韓微生物學會誌 Vol.33 No.1

In vivo Study on the Japanese Encephalitis

김인범(In-Beom Kim),채수림(Soo-Lim Chae),최우영(Woo-Young Choi),박찬(Chan Park),주영란(Young-Ran Joo),조해월(Hae-Wol Cho),박근용(Keun-Yong Park) 대한해부학회 2003 Anatomy & Cell Biology Vol.36 No.5

일본뇌염은 일본뇌염바이러스의 감염에 의해 야기되는 치명적인 중추신경 질환으로서, 동아시아 지역에서 발생하는 뇌 염 중 가장 흔한 형태이다. 본 연구는 일본뇌염의 in vivo 모델을 확립하고 이의 특성을 밝히고자 생후 4주된 생쥐에 일본뇌염바이러스를 복강 내 로 주사한 후 면역조직화학법으로 생쥐 뇌의 바이러스 분포를 조사하였고, 또한 조직병리양상을 관찰하였다. 일본뇌염바 이러스는 뇌의 특정 부분에 존재하는 신경세포에 위치하였고, 조직병리소견은 뇌실질 내에 염증세포침윤 및 단핵구의 혈 관주위 커프현상과 같은 전형적인 급성 바이러스성 뇌염의 양상을 보였다. 이러한 결과는 이 in vivo 모델이 일본뇌염바이러스의 뇌로의 유입기전, 특정세포친화성 및 일본뇌염의 병태생리를 연구하는데 유용하게 사용될 수 있음을 시사한다. Japanese encephalitis is a potentially lethal disease of the central nervous system caused by infection with Japanese encephalitis virus (JEV). JEV is the most common cause of encephalitis over a large part of eastern Asia. To establish and characterize in vivo model to study the Japanese encephalitis, the immunohistochemical localization of JEV and the histopathological finding were investigated in the brains of young adult mice infected with JEV by intraperitoneal inoculation. JEV was localized to neurons in discrete regions of the brain. Histopathological finding showed typical pattern of acute viral encephalitis, such as inflammatory cell infiltration in brain parenchyme and perivascular cuffs of mononuclear cells. These results suggest that this in vivo system can be used to study the mechanism of virus entry into the brain, cell specific tropism, and pathophysiology in Japanese encephalitis.

Apoptotic Neuronal Death in the Mouse Brain Induced by Experimental Japanese Encephalitis Virus Infection

강태훈(Tae-Hoon Kang),채수림(Soo-Lim Chae),최우영(Woo-Young Choi) , 박찬(Chan Park),남재환(Jae-Hwan Nam),주영란(Young-Ran Joo),박근영(Keun-Yong Park),조해월(Hae-Wol Cho),김인범(In-Beom Kim) 대한해부학회 2005 Anatomy & Cell Biology Vol.38 No.3

일본뇌염바이러스 (JEV)는 사람에 있어서는 급성뇌염을 유발하고, 다양한 배양세포에 있어서는 해로운 영향을 줄 것이라고 알려져 있다. 본 연구는 일본뇌염바이러스 (JEV)에 감염된 생쥐의 뇌에서 세포자멸사가 발생하는지를 알아보고자 하였다. JEV에 감염된 생쥐 뇌의 특정부위에서의 DNA파쇄는 DNA oligonucleosomal laddering을 관찰함으로써 확인하였고, 진행중인 세포자멸사는 in situ terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labeling (TUNEL) 기법으로 관찰하였다. TUNEL 염색과 JEV 항원에 대한 염색법을 이용하여 이중면역염색법을 시행한 결과, 감염된 많은 신경세포들이 TUNEL 면역염색성을 나타내었다. 이와 같은 결과는 생쥐 뇌에서 JEV 감염에 의해 유도된 세포사멸은 세포자멸사성 기작과 연관이 있으며, 따라서 이러한 세포자멸사는 일본뇌염에 따른 병 발생에 중요한 역할을 하는 것으로 보인다. Japanese encephalitis virus (JEV) may cause acute encephalitis in humans and induce severe cytopathic effects in various types of cultured cells. To investigate whether JEV infection induces apoptosis, we examined DNA fragmentation and apoptosis in the specific region of the JEV infected mouse brain by DNA oligonucleosomal laddering and in situ terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labeling (TUNEL) technique and immunohistochemical study. JEV infections in the mouse brain were detected in the telencephalon, the diencephalons, and the brain stem, but not in the cerebellum and the hippocampus. Fragmentation of cellular DNA into oligonucleosome-length ladders was only observed in tissue samples prepared from the cerebral cortex. In addition, the large number of TUNEL-positive cells was observed in the cerebral cortex. Double-labeling experiment with TUNEL staining and immunostaining for the JEV showed that TUNEL-positive neurons containing JEV immunoreactivity. These results suggest that JEV infection may evoke apoptotic neuronal death in the mouse brain, which plays an important role in the pathogenesis of Japanese encephalitis.

대장균에서 한탄바이러스 Glycoprotein G1 유전자의 발현 및 정제

최규리(Kyu-Ri Choi),남재환(Jae-Hwan Nam),최우영(Woo-Young Choi),주영란(Young-Ran Ju),박근용(Keun-Yong Park),조해월(Hae-Wol Cho) 대한미생물학회 2002 Journal of Bacteriology and Virology Vol.32 No.4

국내 인플루엔자 바이러스 분리주의 Hemagglutinin과 Neuraminidase 유전자 특성 및 Oseltamivir 내성에 관한 연구

김윤영(Yoon-Young Kim),이주연(Joo-Yeon Lee),황지훈(Ji-Hoon Hwang),김경애(Kyung-Ae Kim),장성욱(Sung-Wook Jang),박미선(Mi-Sun Park),김우주(Woo-Joo Kim),조해월(Hae-Wol Cho),이형환(Hyung-Hwan Lee),강춘(Chun Kang) 대한미생물학회 2005 Journal of Bacteriology and Virology Vol.35 No.2

국내에서 유행하는 HIV의 전파 경로에 따른 Subtype 분포

이주실,남정구,김성순,강춘,최병선,김옥진,박미선,성봉모,서순덕,전수경,변승옥,신영오,조해월 대한감염학회 2001 감염 Vol.33 No.5

Background : Previous data have been reported that subtype B is prevalent in South Korea, but neither the extent nor the proportion of subtypes could be evaluated. This study was designed to analyze the distribution of HIV-1 subtypes, temporal instructions and transmission dynamics between epidemiological groups. Methods : 1,280 Koreans had been diagnosed as HIV seropositive during the period 1985 to 2000. Among them, 134 individuals were selected for this molecular epidemiological study. 134 DNAs were isolated from uncultured or cultured peripheral blood mononuclear cells. V3-V5 (0.7 kb) fragment of HIV-1 env gene was amplified by nested polymerase chain reaction and was sequenced. Results : HIV-1 isolates from thirty-seven homosexuals were all subtype B (100%). On the other hand, 66 isolates from 94 heterosexuals were subtype B (70%) and 28 were non B subtypes (30% : 13 A, 4 C, 2 D, 8 E , 1 G). Only subtype B strains were isolated from 73 males who were infected with HIV inside Korea while 16 B and 20 non B subtype strains were isolated from 36 males who were HIV infected outside of Korea. However, B and non B strains were isolated half and half from females who were infected inside Korea except one. Conclusion : The HIV-1 subtype B strains are prevalent in Korea from the early HIV infection until present in both homo and heterosexuals. Non B strains have been transmitted from men who were infected outside Korea to their spouses and casual partners. So, we need further study to monitor subtype B and non B HIV transmission in epidemiological groups of Korea, (Korean J Infect Dis 33:311∼318, 2001)

일본뇌염백신 접종후 면역 항체 지속률에 대한 연구

손영모,조해월,김창휘,오성희,이환종,강진한,김광남,김동수,박종영,정철영,차성호,홍영진,신상만 대한감염학회 1995 감염 Vol.27 No.6

목 적 : 현재 매년 추가접종하고 있는 일본뇌염백신 접종 스케줄의 타당성을 알아보기 위하여 1994년도 9월 시점에서 1994년도에 접종여부를 분류하여 접종여부에 따른 적혈구응집항체 및 중화항체의 보유률과 평균항체가에 차이가 있는가를 조사하였다. 방 법 : 1994년 8월부터 12월까지 서울시내 소재 9개, 부천 소재 1개 대학부속병원과 국립병원 소아과에 입원하고 있는 환자중 뇌염이나 신경계 증상이 없는 18세 이하의 소아를 대상으로 일본뇌염백신 접종여부를 확인하고 Hemagglutination inhibition test 와 Plaque reduction neutralization test를 시행하여 적혈구응집항체와 중화항체를 측정하였다. 결 과 : 모두 333명을 검사한 결과 1994년도 접종자는 119명(35.7%) 였으며 1993년도 접종자 131명(39.3%) 이였다. 1) 93년에 최종 접종을 한 131명을 대상으로 3회의 기본접종 2회만 접종한 30명과 추가접종까지한 101명에서 HI항체 양전율을 조사한 결과 두군간에 의미있는 차이가 있었으며 (46.7% vs 72.3%, pvalue<0.01), 이중 84명에 대한 중화항체 GMT 를 검사한 결과 기본 2회 접종만 한 경우는 15.5, 추가 접종을 한 경우는 18.8로 두 군간에 통계적으로 의미있는 항체가 차이는 없었다(p>0.7). 2) 94년에 최종 접종을 한 119명을 대상으로 기본접종만 한 24명과 추가접종을 한 95명에서 HI 항체 양성률에 의미있는 차이가 있었으며(41.7% vs 68.4%,P value<0.01), dlwnd 75명에서 중화항체 GMT를 검사한 결과 기본접종만 한 경우 15.2 추가접종 까지 한 경우 17.7로 두 군간에 차이는 없었다(p>0.3). 3) 기본 3회 접종중 2회만 접종한 접종자중 93년도 접종자 30명과 94년도 접종자 24명의 HI 항체 양성률은 46.7%와 41.7%을 보였으며 (p>0.9), 54명중 24명에대하여 중화항체가 GMT를 비교한 결과 93년 접종자는 15.5, 94년도 접종자는 15.7% 이었다(p>0.6). 4) 추가접종을 한 196명에서 93년도 추가 접종자 101명과 94년도 추가접종자 95명의 HI 항체양성률은 72.3%와 68.4%로 두 군간에 통계적으로 의미있는 차이가 없었으며(p>0.5), 추가접종자 196명중 HI항체가 양성인 접종아중 133명을 대상으로 중화항체 GMT 결과는 93년도 접종자는 18.8이였으며 94년 추가접종자는 17.7%로 두 군간에 차이가 없었다(P>0.8). 5) 2회 접종만 한 56명과 추가접종을 한 203명을 대상으로 HI항제 양성률을 비교한 결과 48.6%와 66.8%로 의미있는 차이가 있었다(p<0.01) 결 론 : 일본뇌염바이러스 감염을 예방하기 위한 기본면역을 유지하기 위해서는 2회 접종 후 반드시 12개월 후 1회의 추가접종이 필요한 것으로 나타났다. 그러나 매년 재접종의 필요성에 대한 결과는 1 년전에 최종 재접종을 하고 94년에는 접종을 하지않은 군과 93년과 94년에 걸쳐 연속 재접종을 한 군 사이에 HI 항체양성률에 차이가 없는 것으로 나타나 일본뇌염백신 기본 3회접종(1-2주간격으로 2회 접종 후 12개월에 1회 추가접종)후에 매년 재접종 스케줄을 2년 간격으로 하여도 항체양성 보유율로 볼때 차이가 없을 것으로 판단되며 부작용이 발생할 가능성도 줄일수 있을 것으로 사료된다. Background: Japanese encephalitis (JE), a mosquito-borne flaviviral disease of humans and animals, is a major public health problem in Asian country, were an estimated 50,000 cases occur annually. Since several decade ago, inacyivated JE vaccine has been used in Korea with the national expanded immunization program which consists of primary doses; two consecutive vaccination with one month interval and one booster vaccination at 12 months after second injection, and annual revaccination thereafter. However this annual revaccination schedule has not yet been justified immunologically, practically and economically.We retrospectively reviewed the immunization history and concurrently examined humoral immune response to JE virus to determine whether the current annual revaccination after primary vaccination is neccesary in Korean children. methods: We tested sera from children who had the history of JE vaccination in 1933 or 1944, for antibodies against JE virus by hemagglutination inhibition test and plaqe reduction neutralization test. Seroposiyivity rates of hemagglutination(HI) antibody and geometric mean titers(GMT) of netrualizing antibody(NA) were compared according to the type of immunization schedule(primary or booster). Results: The total enrolled subjects were 333; 1994 vaccinees were 119(35.7%) AND 1993 VACCINEES,131(39.3%) 1) Among 131 subjects who received the last vaccination in 1993, the seroppsitive rates of HI antibody against JE virus of primary vaccination group(PVG) and booster vaccination group(BVG) were 46.7% and 72.3%, respectively (p value<0.01) and GMTs of NA of tow 15.5 and 18.8, respectively (p>0.7) 2) Among 119 subjects who received the last vaccination in 1994, the seropositive rates of HI antibody of PVG were 41.7% and 68.4% respectively(p value<0.01) and GMTs of two groups were 15.2 and 17.7 respectively(p>o.3) 3) The seropositive rates of HI antibody of 54 subjects who had only primary vaccination in 1993 or 1994 were 46.7% and 41.7%, respectively (p value>0.9) andGMTs, 15.5 and 15.7, respectively (p value>0.6). 4) The seropositive rate of HI antibody of 194 suvjects who had booster vaccination in 1993 or 1994 were 72.3% and 68.4%, respectively (p>o.5) and GMTs, 18.8 and 17.7, respectively (p>0.8). 5) The seropositive rate of HI antibody of 56 subjects who only primary vaccination and 203 suvjects who had booster vaccination were 48.6% and 66.8%, respectively (p<0.01) Conclusion: This data showed that we need three doses of consecutive vaccinations, as two dose primary vaccination with one month interval and booster dose after primary vaccination at 12 month later, for acqusition of primary immunity against JEV and we may be able to change the annual revaccination schedule to two years intervals, after acqusition of primary immunity trough three consecutive vaccination.