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표면부착에 의한 사람 폐포대식세포의 유전자 발현에 관한 연구
정만표,유철규,한성구,심영수,이종헌,한용철,김영환,Chung, Man Pyo,Yoo, Chul Gyu,Han, Sung Koo,Shim, Young-Soo,Rhee, Chong H.,Han, Yang Chol,Kim, Young Whan 대한결핵및호흡기학회 1996 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.43 No.6
연구배경: 식세포인 호중구나 단핵세포는 생체 외실험에 사용하기 위한 세포분리법인 플라스틱 표면부착만으로도 세포활성화가 일어나 이후의 실험결과에 영향을 주고 이 과정에 염증반응과 관련된 물질의 유전자 전사 및 부착분자가 연관되어 있는 것으로 알려져 있다. 폐의 주된 면역세포인 폐포대식세포도 대부분 플라스틱 표면부착에 의해 세포를 분리하므로 사람의 폐포대식세포가 표면부착 자체에 의해 활성화되고 여기에 염증관련 유전자 및 부착분자가 관여하는지를 알아보기 위해 연구를 시행하였다. 방법: 적어도 한 쪽 폐가 정상인 사람에서 기관지폐포세척술을 통해 얻은 폐포대식세포를 대상으로 표면부착이 미치는 영향을 얄아보기 위해 부유상태와 부착상태에서 각각 시간에 따른 lL-8, SOD 및 CD11/CD18 mRNA 발현을 Northern blot analysis로 분석하였고 PMA와 fMLP로 추가 자극했을 경우 차이를 보이는지 알아 보았다. 결과: 1) 플라스틱 표면에 부착시킨 폐포대식세포는 염증 또는 면역에 관계되는 IL-8 mRNA 및 SOD mRNA의 발현이 부착시간 정과에 따라 증가하여 부착 8시간후에 최대로 나타났으나 CD18 mRNA 발현은 부착에 의해 증가되지 않았다. 2) 이런 mRNA의 증가는 PMA에 의해서는 부착여부와 관계없이 유도되었지만 fMLP에 의해서는 부착된 세포에서만 유도되었다. 결론: 이상의 결과로 플라스틱 표면부착에 의해 폐포대식세포에서 염증매개성 물질의 유전자발현이 증가되며 이는 표면부착에 의한 세포 활성화와 관계가 있을 것으로 생각된다. Background: Neutrophils or monocytes separated in vitro by the adherence to plastic surface are known to be activated by surface adherence itself and subsequent experimental data might be altered by surface adherence. Adhesion molecules and gene transcription of the inflammatory mediators are known to be associated in this process. To evaluate whether adhesion molecule and transcriptional activation of the inflammatory substances are also involved in the activation of human alveolar macrophage by the adherence procedure, we designed this experiment. Method : Bronchoalveolar lavage was performed in the person whose lung of either side was confirmed to be nonnal by chest cr and alveolar macrophage was harvested. To measure the expression of Interleukin-8(IL-8) mRNA, manganese superoxide dismutase(SOD) mRNA and CD11/CD18 mRNA in human alveolar macrophage of both adherence state and suspension state, Northern blot analysis was done at 0, 2, 4, 8 and 24hrs after the adherence to plastic surface and during suspension state. Then, phorbol myristate acetate(pMA) and N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine(fMLP) were added respectively in the same experimental condition. Result : 1) Human alveolar macrophages in the adherent state induced IL-8 mRNA and SOD mRNA expression which was maximal at 8 hours after the adherence to plastic surface. But we could not observe the upregulation of CD18 mRNA by surface adherence. 2) PMA induced these mRNA expression both in the adherent cell and the nonadherem cells, but the induction of mRNA expression by fMLP occurred only in the adherent cells. Conclusion: These results suggest that adherence of huamn alveolar macropahge is an important cell-activating event that may play a critical role in the modulation of lung inflammatory respones.
만성폐색성폐질환 환자의 임상적 분류에 따른 운동생리의 차이
정만표(Man Pyo Jeong),현인규(In Gyu Hyun),송재훈(Jae Hun Song),정기석(Ki Suk Chung),한성구(Sung Koo Han),심영수(Young Soo Shim),김건열,한용철(Yong Chol Han) 대한내과학회 1991 대한내과학회지 Vol.40 No.4
N/A While patients with chronic obstructive pulmonary disease can be divided into two clinical groups as Pink Puffers (PP) and Blue Bloaters (BB), and whether or not knowledge on the physiologic changes during exercise in PP or BB and their differences might be useful to document the pathophysiology of PP and BB has been in debate. To evaluate the differences in exercise performance and physiologic changes during exercise between the two groups, pulmonary function test at rest, arterial blood gas analysis before and after exercise and incremental exercise test with bicycle ergometer on 16 PP and 9 BB patients with the same degree of airway obstruction in the resting state were conducted. The results were as follows. 1) There was no differences in sex, age, smoking history, forced vital capacity (FVC), forced expiratory volume in one second (FEV₁) and FEV₁/FVC between the two groups. 2) The anaerobic threshold (AT) was significantly lower in the PP group (p<0.05), while FEV₁, was not different. 3) There were no differences in the resting ventilatory response to O₂consupmption (VE/Vo₂) and to CO₂production (VE/Vco₂) between the two groups, but VE/ Vo₂and VE/Vco₂at maximal exercise were significant- ly nigher in the PP group (p<0.01). The increase in minute ventilation according to work load increment (△VE/△work 1oad), △VE/△Vo₂VE/Vco₂, were all significantly higher in the PP group (p<0.05, p<0.01, p<0.001, respectively). 4) There was a good correlation between △VE/△Vo₂, and △VE/△Vco₂(r = 0.782, p<0.001) in all patients. From the above findings. it was suggested that the PP were not only more sensitive in ventilatory response to the changes in the work load, O₂, or CO₂than BB, but that they also had lower exercise performance, and the ventilatory sensitivities to O₂, and CO₂were closely correlated with each other in all patients. However further study would be necessary for the identification of the pathophysiologic mechanisms of chronic obstructive pulmonary disease.
정만표 ( Man Pyo Chung ) 대한결핵 및 호흡기학회 2011 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.71 No.3
Recently published articles on interstitial lung disease (ILD) have focused on the accurate diagnosis of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), serum biomarkers, acute exacerbation of IPF, the prognostic factors of ILD and the trial of new treatment. In particular, reports on the serum biomarkers such as CC-chemokine ligand 18, surfactant protein, circulating fibrocytes, and acute exacerbation of IPF are sufficient to be mentioned here. Pirfenidone therapy is the most important trial for the treatment of IPF. Other newer treatment trials such as interferon-gamma, sildenafil and imatinib have been reported to be unsuccessful. On the other hand, the sirolimus trial for lymphangioleiomyomatosis is promising. Combined pulmonary fibrosis and emphysema and IgG4-related disease are established to be the new disease entities of ILD.
정상 한국인에서의 Isoniazid와 Rifampicin 약동학 연구
정만표 ( Man Pyo Chung ),김호철 ( Ho Cheol Kim ),서지영 ( Gee Young Suh ),박정웅 ( Jeong Woong Park ),김호중 ( Ho Joong Kim ),권오정 ( O Jung Kwon ),이종헌 ( Chong H. Rhee ),한용철 ( Yong Choi Han ),박효정 ( Hyo Jung Park ),김명민 대한결핵 및 호흡기학회 1997 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.44 No.3
강우헌,안병훈,정만표,김호중,권오정,이종헌,김진국,한정호,이경수,Kang, Woo-Heon,Ahn, Byung-Hoon,Chung, Man-Pyo,Kim, Ho-Joong,Kwon, O-Jung,Rhee, Chong-H.,Kim, Jhin-Gook,Han, Jung-Ho,Lee, Kyung-Soo 대한결핵및호흡기학회 1998 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.45 No.1
We report a rare case of primary tracheal malignent melanoma documented by careful clinical examination. Differentiation between primary and metastatic malignant melanoma is very difficult We conclude that this tracheal tumor is a primary malignant melanoma based on characteristic pathologic features and the exclusion of the possibility of spontaneous regression of the primary site by patient's history and physical examination.
Retroviral Vector를 이용한 TNF-$\alpha$ 유전자의 이입이 암세포의 종양괴사인자(TNF) 감수성에 미치는 효과
오연목,박계영,정만표,유철규,김영환,한성구,심영수,한용철,Oh, Yeon-Mok,Park, Kyeo-Yeong,Jung, Man-Pyo,Yoo, Chul-Gyu,Kim, Young-Whan,Han, Sung-Goo,Sim, Young-Soo,Han, Yong-Chol 대한결핵및호흡기학회 1994 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.41 No.2
연구배경 : 종양괴사인자(tumor necrosis factor ; TNF)는 여러 암세포에 대해서 세포독성을 보임이 알려져 있다. 그리고, 최근 분자생물학적 발전에 힘입어 TNF 유전자를 암세포에 이입하고 발현시키는 연구가 그 동안 진행되었다. 이들 연구의 목적은, TNF를 전신적으로 쓸 경우 전신 부작용이 심하여 인체에 쓸 수 없는 현 단계에서 암세포 자체에서 TNF를 만들어 내어서 암세포 주위에서만 작용하게 함으로써 연체에 미치는 전신독성을 최소한으로 줄이고 암세포를 사멸시키는 것이었다. 암세포에 TNF 유전자를 이입함으로써 예상되는 항암효과가 성공을 거두기 위해서는 첫째, TNF 유전자가 이입된 암세포에서 분비된 TNF가 주위 암세포를 성공적으로 사멸시켜야 하고 둘째는 분비된 TNF가, TNF 유전자가 이입된 암세포 자신을 사멸시켜야 한다. 본 연구는 이 중 두번째 기전, 즉 TNF 유전자가 이입된 암세포가 자신이 분비한 TNF에 의해서 사멸되거나 또는 세포 독성이 나타날 수 있는가를 검증하는데 목적을 두었다. 방법 : TNF에 감수성을 보이는 인체의 중피종 세포주인 NCI-H2058과 생쥐 섬유육종 세포주인 WEHI164에 TNF-$\alpha$ 유전자를 retroviral vector를 이용하여 이입하고 TNF를 발현을 시도하였다. DNA 수준과 단백질 수준에서 TNF-$\alpha$ 유전자가 제대로 이입되어 발현되는지 PCR과 ELISA 및 bioassay(MTT assay)로 확인하였다. 그리고, TNF 유전자가 이입된 세포주가 자신이 분비하는 TNF에 사멸되는지 아니면 생존하는지 MTT(dimethylthiazolyl diphenyltetrazolium) assay로 알아보았다. 그리고, 만일 TNF 유전자가 이입된 암세포가 자신이 분비한 TNF에 사멸되지 않고 생존할 경우, TNF 유전자가 이입된 NCI-H2058-TNF와 WEHI164-TNF 암세포주가 외부에서 준 TNF에도 내성을 보이는지도 추가로 MTT assay 방법으로 확인해 보았다. 결과 : 1) TNF-$\alpha$ 유전자 이입 및 발현 확인 PCR을 시행한 결과, TNF 유전자가 이입된 NCI-H2058-TNF와 WEHI164-TNF 세포주는 790 base pair 크기의 진한 DNA band를 보인 반면 각각의 모세포주에서는 보이지 않아서 retroviral vector를 이용한 유전자 이입이 DNA 수준에서 이루어졌음을 확인할 수 있었다. 그리고, NCI-H2058-TNF와 WEHI164-TNF의 상층 배양액의 TNF양을 ELISA와 bioassay(MTT assay)로 측정한 결과, 생물학적 활성을 지닌 TNF를 각각 $23.6{\pm}0.84ng$/24h/$10^6cells$, $12.2{\pm}0.36ng$/24h/$10^6cells$ 생산함을 알 수 있었다. 2) TNF 유전자 이입 전후, 암세포의 TNF에 대한 감수성 비교 TNF 유전자 이입 전후의 TNF에 대한 세포주의 감수성(세포사망율)을 TNF의 농도 변화에 따라 비교한 결과, NCI-H2058의 경우 TNF 농도 100ng/ml에서 모세포는 $25{\pm}3%$의 세포독성을 보인 반면 TNF 유전자 이입 후에는 $3{\pm}2%$의 세포독성을 보여 통계적으로 유의한 차이가 있었다(p<0.01). 그리고, WEHI-164의 경우도 TNF 농도 100ng/ml에서 모세포는 $73{\pm}5%$의 세포독성을 보인 반면 TNF 유전자 이입 후에는 $3{\pm}2%$의 세포독성을 보여 통계적으로 유의한 차이가 있었다(p<0.01). 결론 : TNF에 감수성을 보이는 암세포주인 NCI-H2058과 WEHI164에 TNF 유전자 이입을 시행하고 TNF가 발현되게 하였을 때, TNF 유전자를 이입받은 두 암세포주 모두에서 자신이 생산해 내는 TNF에 내성을 보여 생존하였다. 뿐만 아니라 생존한 이들 세포는 외부에서 준 TNF에 대해서도 내성을 보였다. 따라서, 암세포에 대한 TNF 유전자 이입을 통한 유전자 요법이 성공 Background : Since tumor necrosis factor was discovered in 1975, TNF has been well known about its cytotoxic effect on tumor cells in vivo and in vitro. According to the recent improvement of molecular biological techinques, it is possible that exogenous TNF gene is transferred to tumor cells and is expressed in theirs. By virtue of TNF gene transfer, we have expected that TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would kill tumor cells in vivo without systemic side effect. The expected mechanisms in which antitumor effects of TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells are working would be as followings. In the first mechanism, TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would kill tumor cells around(like homicide). In the second mechanism, TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would kill themselves(like suicide). In the third mechanism, TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would recruit immune effector cells and kill tumor cells indirectly. In the last mechanism, TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would augment cytokine such as interferon-$\gamma$ to kill tumor cells. Among these four mechanisms of antitumor effect, only the second mechanism has not been established yet. Therefore, to elucidate the second mechanism, We performed this study. Method : We transferred TNF-$\alpha$ gene to NCI-H2058, a human mesothelioma cell line and WEHI164, a murine fibrosarcoma cell line by using retroviral vector(pLT12SNTNF). And, We determined by using MTT assay whether TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cell lines would kill themselves like suicide or not. Then, if TNF-gene-transferred tumor cell lines would not suicide themselves, I would know more about the TNF sensitivity of TNF-gene-transferred tumor cell lines to exogenous TNF also by MTT assay. Result : NCI-H2058 and WEHI164 which were sensitive to TNF, became far less sensitive to endogenous and exogenous TNF after being transferred TNF-$\alpha$ gene to. Conclusion : TNF-gene-transfer to NCI-H2058 and WEHI164 gave them resistance to TNF.
특발성 폐섬유화증에서 Interferon gamma-1b 치료의 단기 임상경험
황정혜 ( Jung Hye Hwang ),정만표 ( Man Pyo Chung ),강은해 ( Eun Hae Kang ),김경찬 ( Kyung Chan Kim ),이병훈 ( Byoung Hoon Lee ),고원중 ( Won Jung Koh ),서지영 ( Gee Young Suh ),김호중 ( Ho Joong Kim ),이경수 ( Kyung Soo Lee ),한 대한결핵 및 호흡기학회 2004 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.56 No.6