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      • KCI등재

        Mycoplasma pneumoniae의 분리 및 항생제 감수성 검사(III)

        장명웅,김광혁,박인달,송갑영,김성원,이은영,김문찬,조명훈,김규언,최충언,박선영,조현장,Chang Myung-Woong,Kim Kwang-Hyuk,Park In-Dal,Song Gap-Young,Kim Sung-Won,Lee Eun-young,Kim Moon-Chan,Cho Myung-Hoon,Kim Kyu-Earn,Choi Choong-Eon,Park Se 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.3

        2002년 2월부터 2005년 2월까지 성인 및 소아 호홉기질환자 994명의 상기도 도말물에서 M. pneumoniae 균주를 분리하고, 분리 균주의 ciprofloxacin, ofloxacin, minecline, tetracycline, sparfloxacin, josamycin, erythromycin에 대한 감수성 검사를 실시하였으며, 분리된 균주의 235 rRNA domain II와 V에서 erythromycin저항성 변이가 일어났는가를 PCR과 유전자 염기서열분석으로 erythromycin에 감수성인 M. pneumonine균주의 염기서열과 비교분석하여 확인하였다. 호흡기질환자에서 M. pneumoniae의 분리율은 123/994$(12.4\%)$이었으며, 분리된 M. pneumoniae 균주의 minocycline, sparfloxacin, tetracycline, ciprofloxacin, ofloxacin, josamycin, erythromycin MIC 범위는 각각 $0.015\~0.25,\;0.06\~0.5,\;0.06\~0.5,\;0.25\~0.5,\;0.25\~0.5,\;0.015\~8.0,\;0.015\~8.0{\mu}m$이었다. 분리 동정된 M. pneumoniae 균주 중에서 erythromycin에 저항성인 균주가 60주$(48.8\%)$였으며, 모두가 ribosomal protein L4 영역과 23S rRNA domain V에 내성변이가 일어났으며, 이 중 2균주는 23S rRNA domain II에도 변이가 일어난 균주도 있었다. 국내에서 분리되는 M. pneumoniae균주의 $48\%$가 erytomycin에 저항성인 균주이므로 앞으로 이 균에 의한 폐렴의 치료에 주의가 요구된다. The 994 throat swabs obtained from 688 adults and 306 children patients with respiratory diseases were examined for Mycoplasma pneumoniae infection by culture method. Antimicrobial susceptibilities of the resulting 123 M. pneumoniae isolates were evaluated by testing minimum inhibitory concentrations (MICs) of erythromycin, minocycline, tetracycline, josamycin, sparfloxacin, ofloxacin, and ciprofloxacin by a broth micro-dilution method. The erythromycin resistant strains of M. pneumoniae was determined above $1.0{\mu}g/ml$ of MIC for erythromycin. The erythromycin resistant strains of M. pneumoniae was confirmed resistant gene mutation of the portions of genes 23S rRNA (domain II and V), and ribosomal protein 14 and L22 by PCR amplified and their nucleotide sequenses were compared to those of the susceptible strain M129. The isolation rate of M. pneumoniae was $12.9\%$ (89/688) for the adults and $11.1\%$ (34/306) for the children. The $MICs_{90}$ of the M. pneumoniae isolates were $0.12{\mu}g/ml$ for minocycline, $0.25{\mu}g/ml$ for sparfloxacin, $0.5{\mu}g/ml$ for ciprofloxacin, ofloxacin, and tetracycline, respectively, and $2.0{\mu}g/ml$ for josamycin and erythromycin, respectively. The isolation rate of erythromycin resistant M. pneumoniae from patients was $49.4\%\;(44/89)$ for the adults, $47.1\%\;(16/34)$ for children, and $48.8\%\;(60/123)$ for the total. No mutation could be detected in the ribosomal protein L22 region, but all strains were mutated in the ribosomal protein L4 as two point mutation M144V. Two point mutations in domain V of 23S rRNA were selected in the presense of erythromycin resistant M. pneumoniae isolates, such as one strain was G2057C mutant, two strains were A2059C mutants, three strains were C2611G mutants, four strains were A2058C mutants, five strains were A2058T mutants, twenty strains were A2059G mutants, and twenty-five strains were A2058G mutants, respectively. These results show that erythromycin was not the most active compound against M. pneumoniae infection in Korea and clinical studies of macrolides in human patients are demanded.

      • KCI등재

        호흡기질환 환자로부터 분리된 Mycoplasma pneumoniae의 tetracycline과 erythromycin에 대한 저항성 변이

        장명웅,박인달,김광혁,송갑영,김성원,Chang Myung-Woong,Park In-Dal,Kim Kwang-Hyuk,Song Gap-Young,Kim Sung-Won 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.6

        2002년 2월부터 2005년 4월까지 호흡기질환 환자로부터 분리된 M. pneumeniae 123 균주의 tetracycline과 erythromycin에 대한 MIC 범위는 각각 $0.5\~1.0$, and $0.5\~512{\mu}/ml$ 이었다. 분리된 M. pneumoniae 123 균주에서 plasmid DNA는 확인되지 않았다. 분리된 M. pneumoniae 123 균주 중에서 57($46.3\%$) 균주가 tetracycline에 저항성인 tetM유전자를 가지고 있었으며, 235 rRNA domain V에 erythromycin에 저항성 변이를 일으킨 균주가 60($48.8\%$)이었다. erythromycin에 저항성 변이를 일으키지 않은 63균주 중에서 tetM 유전자를 가지고 있는 균주는 36($57.1\%$)이었으며, erythromycin에 저항성 변이를 일으킨 60균주 중에서 21($35.0\%$ 균주가 tetM 유전자를 가지고 있었다. 본 연구로써 국내에서 tetracycline과 erythromycin에 대한 저항성 M. pneumoniae 균주의 분리율이 외국에 비하여 높으며, M. pneumoniae 감염의 치료에 erythromycin이 일차 선택제가 될 수 없으므로 이에 대한 범국가적 조사가 필요하다고 생각된다. One hundred and twenty three strains of Mycoplasma pneumoniae were isolated from patients with respiratory diseases from February 2002 to April 2005 in Busan, Korea. The MICs of tetracycline and erythromycin up to $90\%$ of the 123 M. pneumoniae isolates tested were $0.5\~1.0$, and $0.5\~512{\mu}/ml$, respectively. Plasmid DNA was not isolated from all of the M. pneumoniae isolates. Out of 323 strains of M. pneumoniae, 57 ($46.3\%$) stains contain tetM gene on their chromosomal DNA, and 60 ($48.8\%$) strains were mutated in domain V of 23S rRNA for erythromycin resistance. Out of 63 strains of M. pneumoniae which were not mutated in domain V of 235 rRNA for erythromycin resistance, 36 ($57.1\%$) strains contained tetM gene, and out of 60 strains of M. pneumoniae which were mutated in domain V of 23S rRNA for erythromycin resistance, 21 ($35.0\%$) strains contained tetM gene. These results suggest that the isolation rate of erythromycin and tetracycline resistant M. pneumoniae is higher than those of other countries, and erythromycin and tetracycline are not first choice drug for M. pneumoniae infection in Korea, and it need confirm by a nationwide surveilance of antimicrobial resistance.

      • KCI등재

        위암 및 결장암 조직과 그 주변의 정상조직에서 Mycoplasmas DNA의 정색

        장명웅,신현철,박인달,김광혁,Chang, Myung-Woong,Shin, Hyun-Chul,Park, In-Dal,Kim, Kwang-Hyuk 한국생명과학회 2007 생명과학회지 Vol.17 No.2

        위암 환자 30명과 결장암 환자 30명의 암 조직과 그 주위의 정상 조직을 구분하고, 암 조직과 정상조직의 쌍을 찾지 못한 경우의 위암 조직 8개와 결장암 조직 10개의 각 조직에서 Mycoplasma DNA의 존재 유무를 PCR법으로 확인하고 PCR산물에서 DNA의 염기서열을 분석하여 Mycoplasma DNA 서열과 비교함으로써 Mycoplasmas를 검색한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 위암 조직과 그 주위 조직 30개 중에서 Mycoplasma DNA가 검출된 것은 각각 13개(43.3%)와 18개(60%)이었으며, 결장암 조직과 그 주위 조직 30개 중에서 Mycoplasma DNA가 검출된 것은 각각 12개(40%)와 15개(50%)이었다. Mycoplasma DNA가 검출된 위암 조직에서 mycoplasma 균종의 분리빈도는 M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. conjunctivae의 순이었다. Mycoplasma DNA가 검출된 위암 조직 주변의 정상조직에서 mycoplasma 균종은 M. facium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. bovigenitalium와 M. pulmonis의 순이었다. Mycoplasma DNA가 검출된 결장암 조직에서 mycoplasma 균종의 분리 빈도는 M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae), M. synoviae M. bovigenitalium, M. gallinarum, M. moatsii의 순이었다. Mycoplasma DNA가 검출된 결장암 조직 주변의 정상조직에서 mycoplasma 균종은 M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. bovis, M. opalescens, M. bovigenitalium, M. gallinarum와 M. moatsii의 순이었다. 이상의 결과에서 위암 및 결장암 조직 보다 암 주위의 정상 조직에서 Mycoplasma DNA의 검출율이 높았으며, 검출된 Mycoplasma 균종도 암 조직과 정상 조직에서 차이가 없었으므로 이들 암과 Mycoplasma와는 상관관계가 없는 것으로 생각된다. Detection of Mycoplasma DNA from the 30 cases of cancer tissues and the normal tissues surrounding the cancer tissues obtained from the patients with gastric cancer and the other 30 cases of cancer tissues and the normal tissues surrounding the cancer tissues obtained from the patients with colon cancer were evaluated by polymerase chain reaction(PCR). The PCR products were sequenced using an ABI 377 automatic DNA sequencer, and these sequences were confirmed by comparing sequences with the database of the National Center for Biotechnology Information BLAST network server. Mycoplasmas DNA were defected in 18 (60%) cases of normal tissues which were around gastric cancer and were 13 (43.3%) cases of gastric cancer tissues. Mycoplasmas DNA were detected in 15(50%) cases of normal tissues which were around colon cancer and 12 (40%) cases of colon cancer tissues. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, and M. conjunctivae were detected from the gastric cancer tissues. The M. faucium, M. subdolum,, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. bovigenitalium and M. pulmonis were detected from the normal tissues around gastric cancer. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. synoviae M. bovigenitalium, M. gallinarum, and M. moatsii were detected from the colon cancer. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. bovis, M. opalescens, M. bovigenitalium, M. gallinarum, and M. moatsii were detected from the normal tissues around the colon cancer. These results suggest that Mycoplasmas infection may not correlate with gastric cancer and colon cancer, because of the detection rate of Mycoplasmas DNA were not significantly differences between normal and cancer tissues from the patients.

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        Erythromycin과 tetracycline에 저항성인 Myoplasma pneumoniae의 quinolone계 항생물질에 대한 감수성

        장명웅,박인달,김광혁,Chang, Myung-Woong,Park, In-Dal,Kim, Kwang-Hyuk 한국생명과학회 2006 생명과학회지 Vol.16 No.5

        호흡기 질환 환자로부터 분리된 M. pneumoniae 123 균주를 tetracycline에 저항성인 tetM 유전자만을 가진 36균주, erythromycin에만 저항성 변이를 일으킨 39균주, tetracycline과erythromycin에 저항성인 21균주, erythromycin과 tetracycline에 감수성인 27균주로 나누어 quinolone 제제와 macrolides계 항생제에 대한 감수성 검사를 시험관 희석법으로 실시하여 다음과 같은 결론을 얻었다. Tetracycline에만 저항성인 M. pneumoniae 36균주의 moxifloxacin, levofloxacin, sparfloxacin, ofloxacin, ciprofloxacin, amikacin, clarithromycin에 대한 $MIC_{90}$은 각각 0.125, 0.39, 0.125, 1.0, 1.0, 15.6과 $1.56\;{\mu}g/ml$ 이었다. Erythromycin에만 저항성인 39균주의 $MIC_{90}$은 각각 0.06, 0.39, 0.125, 1.0, 1.0, 15.6과 $25.0\;{\mu}g/ml$ 이었다. Tetracycline과 erythromycin에 모두 저항성인 21 균주의 $MIC_{90}$은 각각 0.125, 0.39, 0.125, 1.0, 1.0, 3.9,과 $1.56\;{\mu}g/ml$ 이었다. Tetracycline과 erythromycin에 모두 감수성인 27 균주의 $MIC_{90}$은 각각 0.125, 0.39, 0.125, 1.0, 1.0, 7.8과 $0.09\;{\mu}g/ml$ 이었다. 이상의 결과로 moxifloxacin, levofloxacin, sparfloxacin 과 같은 quinolone 계 항생물질은 tetracycline이나 erythromycin에 단독 혹은 모두에 저항성인 M. pneumoniae 균주에도 감수성이었으므로 이들 균에 의한 감염증의 치료에 이용할 수 있는 약제이었으나, ofloxacin, ciprofloxacin, clarithromycin 등의 약제 선택에는 항생물질에 대한 감수성검사를 실시하여 적절한 항생제를 선택하는 등의 각별한 주의가 요망된다. The in vitro activities of quinolones were determined with 36 strains of tetracycline- resistant, 39 strains of erythromycin-resistant, 21 strains of both resistant to tetracycline and erythromycin, and 27 strains of both susceptible to tetracycline and erythromycin of the M. pneumoniae isolates which have been isolated and classified in previous studies. The $MIC_{90}$ of moxifloxacin, levofloxacin, sparfloxacin, ofloxacin, ciprofloxacin, amikacin, and clarithromycin against 36 strains of tetracycline-resistant M. pneumoniae isolates were 0.125, 0.39, 0.125, 1.0, 1.0, 15.6, and $1.56\;{\mu}g/ml$, respectively. The $MIC_{90}$ against 39 strains of eryhtromycin-resistant M. pneumoniae isolates were 0.06, 0.39, 0.125, 1.0, 1.0, 15.6, and $25.0\;{\mu}g/ml$, respectively. The $MIC_{90}$ against 21 strains of both resistant to tetracycline and eryhtromycin of M. pneumoniae isolates were 0.125, 0.39, 0.125, 1.0, 1.0, 3.9, and $1.56\;{\mu}g/ml$, respectively. The $MIC_{90}$ against 27 strains of both susceptible to tetracycline and eryhtromycin of M. pneumoniae isolates were 0.125, 0.39, 0.125, 1.0, 1.0, 7.8, and $0.09\;{\mu}g/ml$, respectively. These result suggest that moxifloxacin, levofloxacin, and sparfloxacin of the quinolones might be promising antimicrobial agents for the treatment of tetracycline- and erythromycin-resistant M. pneumoniae infection. However, selection of ofloxacin, ciprofloxacin, and clarithromycin for the treatment of M. pneumoniae infection should be cautious decision with antimycoplasmal susceptibility test.

      • SCOPUSKCI등재
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