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        밀 단백 효소 가수분해물의 항균활성

        이상덕(Sang-Duk Yi),주정현(Jeong-Hyeon Joo),이규희(Gyu-Hee Lee),이기택(K. T. Lee),오만진(Man-Jin Oh) 한국식품영양과학회 2003 한국식품영양과학회지 Vol.32 No.5

        밀 단백질에 효소가수분해할 때 생산되는 peptide의 항균활성과 천연항균제로서의 이용가능성을 검토하기 위하여 실험을 행하였다. 밀 단백질에 7종의 단백질가수분해효소를 작용시켜 생성된 가수분해물의 항균활성을 측정하고 한외여과, membrane filtration, HPLC를 이용하여 항균성 peptide를 분리 정제한 후 분자량과 아미노산 결합순서를 측정한 결과는 다음과 같다. 밀 단백질에 7종의 단백질 분해효소를 적용시켜 제조한 가수분해물중 Asp. saito protease를 적용시켜 얻어진 peptide만이 항균활성을 나타내었다. Asp. saito protease는 37℃, pH 6.0에서 작용시킨 경우에 항균활성이 가장 높았으며, 50℃ 이상에서는 활성을 나타내지 않았다. 밀단백 효소가수분해물은 membrane filtration에 의하여 분자량 1,000~3,000에서 항균활성이 나타났다. Membrane filtration으로 얻어진 항균활성분획을 HPLC로 분리한 결과 retention time 31.1~31.8 min에서 항균활성을 나타내었다. 밀단백 효소가수분해물은 121℃에서 15분간 가열하여도 효소활성이 유지되는 매우 안정한 화합물이었다. 항균활성분획을 MALDImass로 질량을 분석한 결과 1,633이었다. 항균성 peptide의 아미노산 결합순서는 cysteine, glycine, prolin, valine, valine, alanine, alanine, arginine의 순서였다. This study was carried out to investigate whether peptide produced from wheat protein by enzyme hydrolysis can be used as a natural antimicrobial agent. Antimicrobial peptide was obtained from wheat protein hydrolyzed by 7 of protease. The produced antimicrobial peptide was purified through ultrafiltration, membrane filtration and HPLC, and molecular weight and amino acid sequence of the purified antimicrobial peptide were determined. Among hydrolysate produced from wheat protein by 7 of protease, antimicrobial activity was observed for the peptide obtained from Asp. saito protease. The Asp. saito protease did produce antimicrobial hydrolysate showing the highest antimicrobial activity at reaction condition of 37℃ and pH 6.0, but not at reaction condition above 50℃. Wheat protein hydrolysate was fractionated by membrane filtration and showed antimicrobial activity between molecular weight 1,000~3,000. The antimicrobial activity fraction obtained by membrane filtration was separated through HPLC and showed antimicrobial activity in the peak of retention time 31.1~31.8 min. We could convince this hydrolysate as heat-stable peptide since antimicrobial activity was maintained after treated with heat for 15 min at 121℃. Molecular weight of antimicrobial peptide identified by MALDI-mass was 1,633. Amino acid sequence of antimicrobial peptide was cysteine, glycine, prolin, prolin, prolin, valine, valine, alanine, alanine and arginine.

      • SCOPUSKCI등재

        된장추출물의 항균활성

        이상덕(Sang-Duk Yi),양재승(Jae-Seung Yang),정재홍(Jae-Hong Jeong),성창근(Chang-Kun Sung),오만진(Man-Jin Oh) 한국식품영양과학회 1999 한국식품영양과학회지 Vol.28 No.6

        된장의 생리활성을 조사하기 위하여 Asp. oryzae와 R. tamari를 이용하여 제조한 된장과 시판되고 있는 된장을 수집하여 항균활성을 측정한 결과는 다음과 같다. R. tamari, Asp. oryzae로 단연 배양된 코지로 담금한 된장과 혼합 배양된 코지로 담금한 된장 모두에서 항균활성을 나타내었으며, 시판 된장의 경우에도 모든 시험구에서 항균활성을 보였고, 아미노태 질소의 함량이 높고, hunter L값이 낮을수록 증가하는 경향을 보였다. 담금 직후의 된장추출물은 B. cereus, E. coli, L monocytogense, S. aureus, S. faecalis에 대하여 항균활성을 보였고 E. coli O157:H7, B. subtilis, S. typhimurium 대하여는 항균활성을 나타내지 않았다. 동결 건조한 된장의 80% methanol 추출물을 chloroform, ethyl acetate, butanol로 순차 분획하여 항균활성을 측정한 결과 ethyl acetate, butanol층에서 높은 항균활성을 나타내었으며, GC-MS 결과로 볼 때 peptide류와 benzoic acid-4_hydroxy, benzoic acid 등이 된장이 항균활성을 나타내게 하는 성분 중의 하나라고 추정된다. To identify antimicrobial activities of soybean paste, studies have been carried out with laboratory manufactured soybean paste, traditional and improved type soybean paste purchased on the market. The soybean paste fermented with Aspergillus oryzae and Rhizopus tamari and commercial soybean paste were shown antimicrobial activities for Bacillus cereus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis, Escherichia coli O157:H7, Bacillus subtilis and Salmonella typhimurium Non-fermented soybean paste did not show antimicrobial activities against Bacillus cereus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus and Streptococcus faecalis. The extract of soybean paste extracted by 80% methanol showed the highest antimicrobial activities of in ethyl acetate fraction and followed butanol fraction, respectively. Antimicrobial activities of traditional and improved type soybean paste were shown against all tested microorganisms and clear zone length of traditional soybean paste was slightly larger than that of improved type. Components of antimicrobial fractions of soybean paste were guessed peptides, 4-hydroxy benzoic acid, benzoic acid by GC-MS.

      • KCI등재

        Pepsin에 의한 Zein 가수분해물의 항균활성

        강윤정(Yoon-Jung Kang),이상덕(Sang-Duk Yi),이규희(Gyu-Hee Lee),오만진(Man-Jin Oh) 한국식품영양과학회 2006 한국식품영양과학회지 Vol.35 No.2

        효소에 의한 옥수수 단백가수분해물의 천연항균제로서의 이용가능성을 조사하기 위하여 zein 단백질에 단백 가수분해 효소를 작용시켜 얻어진 가수분해물의 항균활성을 측정하고 membrane filter로 한외 여과하여 항균활성이 가장 높은 분획을 HPLC로 분취한 후 항균활성을 측정하고 MIC, 각종 세균에 대한 생육저해농도를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Zein 단백질에 6종의 단백분해효소를 작용시켜 제조한 가수분해물 중 pepsin으로 작용시킨 것이 항균활성이 가장 높았다. Membrane filter에 의하여 여과한 가수분해물의 항균활성은 M.W. 10,000~30,000에서 가장 높았으며 121℃에서 10분간 처리하여도 항균활성에 변화가 없는 열안정성이 매우 높았고 MIC는 2.5 ㎎/mL이었다. HPLC로 분리한 항균성 peptide의 N-말단 아미노산 조성은 leucine, glutamic acid, proline, phenylalanine, aspartic acid, argenine 순이었다. 분자량 10,000~30,000의 가수분해 동결 건조물을 3 ㎎/mL 농도로 nutrient broth 배지에 첨가하고 37℃에서 배양하였을 때 크게 생육이 저해되었다. A study was carried out to produce antimicrobial peptides from zein treated with proteases of six kinds. Among the proteases of six kinds, zein hydrolysate treated with pepsin showed the highest antimicrobial activity. The zein hydrolysate with pepsin was fractionated with membrane filter (30,000 10,000 and 3,000 molecular weight cut-off) and antimicrobial activity was measured for each fractions. Antimicrobial activity appeared greatly in the fraction below 3,000 (molecular weight cut-off). The fraction was re-fractionated by HPLC and substances of two peaks collected as a sample to measure antimicrobial activity. All of both peaks showed the antimicrobial activity but 1st peak exhibited a consistently higher antimicrobial activity than 2nd peak. Minimum inhibitory concentrations (MIC) were between 2.5 and 3.0 ㎎/mL. The peptide was heat-stable since antimicrobial activity was maintained after treated with heat for 20 min at 121℃. N-terminal amino acid sequence of peptide fractionated by HPLC was leucine, glutamic acid, proline, phenylalanine, aspartic acid and argenine. These results indicated that peptide isolated from zein hydrosate with pepsin can use as a natural preservative ingredient in food industry.

      • KCI등재후보
      • KCI등재

        콩 단백 효소 가수분해물의 항균활성

        주정현(Jung-Hyun Joo),이상덕(Sang-Duk Yi),이규희(Gyu-Hee Lee),이기택(Ki-Teak Lee),오만진(Man-Jin Oh) 한국식품영양과학회 2004 한국식품영양과학회지 Vol.33 No.2

        콩 단백질을 효소로 가수분해하였을 때 생성되는 항균활성 peptide를 조사하고 천연 항균제로서의 이용 가능성을 조사하기 위하여 본 실험을 실시하였다. 분리 콩 단백질에 5종의 단백질 가수분해 효소를 작용시켜 생성된 가수분해물의 항균력을 측정하고, membrane filter를 이용해서 한외여과 하여, 분자량별로 분리된 각 fraction의 항균활성을 측정하였으며, 항균활성이 가장 높은 분획을 high performance liquid chromatography로 분취한 항균성 peptide의 항균활성을 측정하였다. 분리 콩 단백질에 5종의 단백질 분해 효소를 작용시켜 제조한 가수분해물 중 Aspergillus saitoi protease로 작용시킨 것이 항균활성이 가장 높았다. Aspergillus saitoi protease로 작용시킨 콩 단백질의 가수분해물을 여과 한계량 10,000, 3,000, 1,000 membrane filter로 cut-off하여 한외 여과한 각 fraction의 항균활성을 측정한 결과 분자량 1,000~3,000인 fraction의 항균활성이 가장 높게 나타났다.Aspergillus saitoi protease로 작용시킨 콩 단백질의 분자량 1,000~3,000 범위 가수분해물의 MIC는 0.5~0.8 ㎎/mL였으며 그람 양성균과 음성균 모두의 증식을 억제하는 경향을 보였다. Aspergillus saitoi protease로 작용시킨 콩 단백질의 가수분해물을 121℃, 10분간 열처리하였을 때도 그 항균활성을 유지하는 것으로 보았을 때 이는 열에 대단히 안정함을 알 수 있었다. 한외여과하여 얻어진 콩 단백질의 분자량 1,000~3,000 범위 가수분해물을 동결건조하여 HPLC의 결과 얻어진 peak 별로 분획 수집을 반복하여 항균 활성을 측정한 결과 retention time 16.02[Ⅳ]의 peak에서 최고 항균활성을 확인하였다. Soy protein was hydrolyzed by 5 different proteases and determinated antimicrobial activity of each hydrolysate. The soy protein hydrolysate treated by protease from Aspergillus saitoi showed the highest antimicrobial activity among the protease studied and was used for further analysis. Soy protein hydrolysate was fractionated by ultrafiltration for M.W. 10,000, 3,000 and 1,000. The M.W. 1,000~3,000 showed the highest antimicrobial activity. The minimum inhibition concentrations of obtained fraction were 0.5~0.8 ㎎/mL for gram positive and negative microbials, and its activity was even observed after heating at 121℃ for 10 min, suggesting that hydrolyzed protein having antimicrobial activity is quite heat-stable. Reverse-phase HPLC was further applied to separate the fraction and 8 peaks were found. Each 8 peaks were separated and pooled and measured antimicrobial activity. Among them, retention time of peak at 16.02 min showed the prominent antimicrobial activity.

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      • KCI등재후보

        오목눈이 Aegithalos caudatus의 번식생태와 서로 다른 두 서식지에서의 번식성공률 차이

        백충렬(Chung-Ryul Baek),이진희(Jin-Hee Yi),염광석(Kwang-Suk Yeom),노선호(Sun-Ho No),이상덕(Sang-Duk Lee),조삼래(Sam-Rae Cho) 한국조류학회II 2011 한국조류학회지 Vol.18 No.4

        본 연구는 2009년 3월부터 2009년 11월까지 공주대학교 교내·지역과 계룡산국립공원에서 번식하는 오목눈이 Aegithalos caudatus를 대상으로 조사하였다. 오목눈이의 둥지는 이끼류와 거미줄을 이용하여 길쭉한 타원형의 호리병 모양으로 만들며, 둥지의 크기는 장경이 223.49±16.52mm, 단경이 96.45±11.98mm, 깊이가 109.46±9.54mm였다. 오목눈이의 한배산란수는 8.63±1.21개이며, 부화율은 95.73%, 이소율은 75.79% 그리고 번식성공률은 72.56%로 나타났다(Mann-whitney Utest P<0.05). 알의 크기는 장경이 14.50±0.93mm, 단경이 11.20±0.37mm, 무게가 1.23±0.18g 이였으며, 알의 형태지수는 78.45±1.25%로 타원형에 가까웠다. 포란기간은 16.89±1.29일이며, 육추기간은 16.24±1.25일 이였다. 오목눈이 유조의 성장은 완만한 S자형 곡선을 이루었다. 부리와 부척에 관한 성장에서 비교적 고른 성장을 보였고, 깃털의 영향을 받는 전장, 꼬리, 날개는 초기 이후 급속한 성장을 보였다. 공주대학교 교내·지역과 계룡산국립공원에서의 번식성공률은 각각 80.80%와 60.00%(Mann-whitney U test P<0.05)로 나타났으며, 오목눈이의 번식성공률은 서식지의 조건(먹이자원 등)보다 천적의 밀도가 영향을 미치는 것으로 생각된다. We surveyed about breeding ecology of Long-tailed Tit in Kongju National University and Gye-ryong Mountain from March 2009 to October 2010. Long-tailed Tit Aegithalos caudatus spent about 59-66 days on nesting, laying, incubating and fledging. Its nest was made of the moss type and the spider web and its shape was like a longish elliptical calabash. It had 223.49±16.52mm in outside diameter of nest, 96.45±11.98mm in inner diameter and 109.46±9.54mm of thickness. The number of the clutch size was 8.25±1.14 and hatching success was 95.73%, fledging success was 75.79%, breeding success was 72.56% (Mann-whitney U test P<0.05). The eggs were 14.50 ±0.93mm of length, 11.20±0.37mm of width, 0.90±0.44g of mass and 78.45±1.25% of shape index. The mean incubation period was 16±1.23days and parental care period was 15.75±1.14 days. The growth of the chicks was gentle S curve drew. The growth of the bill and tarsus was relatively shown gentle growth, and the total length, the length of tails and wings which are influenced by feathers were grown rapidly. I guess that its breeding success rate was more affected by the habitat density of the natural enemy than the condition of the habitat density (food resources etc.)

      • KCI등재후보

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