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형질전환체 담배에서 사람 파필로마 바이러스 HPV-18 E6 유전자의 발현
전재필,현미아,김달웅,진승원,박순희,김현수,유왕돈,손우익,Jeon, Jae-Pil,Hyun, Mee-Ah,Kim, Dal-Ung,Jin, Seung-Won,Park, Soon-Hee,Kim, Hyun-Soo,Yoo, Wang-Don,Sohn, U-Ik 생화학분자생물학회 1994 한국생화학회지 Vol.27 No.5
담배에서 human papil1omavirus-18형 E6(HPV-18 E6) oncogene을 발현시키기 위하여 E6 유전자를 Cauliflower mosaic virus(CaMV)의 35S dual promoter와 tobacco etch virus(TEV) 5'-untranslated region의 조절을 받도록 벡터를 제조한 후, Agrobacterium-mediated leaf disc 방법으로 담배에 도입하였다. Kanamycin 저항성을 갖는 형질전환체를 선별하고, 완전한 식물체로 재생한 형질전환체의 잎조직에 대하여 PCR 방법과 Northem blot, Westem blot 분석을 한 결과, HPV-18 E6 유전자가 형질전환체 담배에서 성공적으로 발현됨을 알 수 있었다. To develop a HPV-18 oral vaccine, HPV-18 E6 gene was cloned into an expression vector, under the control of CaMV 35S dual promoter and 5'UT region of TEV. The constructed vector (pUS-E6) was used to transform tobacco plants by the Agrobacterium-mediated leaf disc method. The transformants were then regenerated to whole transgenic plants. The HPV-18 E6 gene was found to be expressed in the transgenic tobacco plants as determined by PCR, RT-PCR, Northern analysis and Western analysis. These results show a possibility that HPV oral vaccine may be developed by expressing the HPV proteins in tomato or other vegetables.
노갑수,홍선표,신영철,이성희,김현수,최차용,여지혜,김수옥,유왕돈,Noh, Kap-Soo,Hong, Sun-Pyo,Shin, Young-Cheol,Lee, Sung-Hee,Kim, Hyun-Su,Choi, Cha-Yong,Yao, Zhi-Hui,Kim, Soo-Ok,Yoo, Wang-Don 대한미생물학회 1996 Journal of Bacteriology and Virology Vol.26 No.2
한탄바이러스의 내피 단백질 (N)은 이 바이러스에 대한 중요한 항원으로 작용하지만 신증후출혈열 예방과 관련된 작용은 명확히 알려져 있지 않다. 본 연구는 이러한 내피 단백질이 한탄바이러스에 대한 중화 항체를 유도할 수 있는가 하는 관점에서 수행되었다. 한탄바이러스의 내피 단백질을 대장균에서 용해된 형태로 발현하고 이를 단클론 항체를 이용한 면역친화 컬럼으로 분리 정제하였다. 정제된 내피 단백질을 기니픽에 면역하여 항혈청을 얻고 이것의 한탄바이러스에 대한 중화능력을 중화항체 플락 감소법 (plaque reduction neutralization test)을 이용하여 조사한 결과 최고 1:160의 중화능이 있음을 관찰하였다. 이는 한탄바이러스의 내피 단백질이 중화 항체를 유도할 수 있는 epitopes을 가지고 있음을 의리하며 이러한 생각은 본 연구에서 수행한 면역침강법과 N 단백질에 대한 단클론항체를 이용한 면역친화법을 통한 한탄바이러스의 정제 실험 결과에서도 뒷받침되고 있다.
라미부딘 내성 만성 B형간염 환자에서 아데포비어 투여에 따른 내성 바이러스 출현 및 초기 바이러스반응에 미치는 인자
조진희 ( Jin Hee Cho ),정재연 ( Jae Youn Cheong ),강준구 ( Joon Koo Kang ),박진선 ( Jin Sun Park ),이명희 ( Myoung Hee Lee ),임남규 ( Nam Kyu Lim ),홍선표 ( Sun Pyo Hong ),김수옥 ( Soo Ok Kim ),유왕돈 ( Wang Don Yoo ),조성원 ( Sun 대한간학회 2008 Clinical and Molecular Hepatology(대한간학회지) Vol.14 No.1
대장균에서 발현시킨 사람 파필로마 바이러스 18 형 E6 단백질의 분리정제와 사람 혈청내의 18 형 E6 항체 검색에의 이용
정태화,손우익,박순희,강주현,유왕돈,진승원 경북대학교 유전공학연구소 1995 遺傳工學硏究所報 Vol.10 No.1
Human papillomavirus type 16 and 18 encode two major transforming proteins E6 and E7. Recombinant E6 protein for human papillomavirus type 18(HPV 18) E6 gene was expressed in E. coli in large quantity as authentic size, non fused form of protein. However, the protein was produced in inclusion bodies. Therefore this bacterially produced E6 protein was solublized in SDS solution and purified to the homogeneity by gel filtration column chromatographies using Sephacryl S-200 column. The yield of purified 18 E6 recombinant protein was approximately 30 ㎎/ℓ liter culture. This purified recombinant 18E6 protein was used to determine the presence of antibodies that might have been produced against HPV 18 infections in the human sera. We tested and compared sera obtained from both cervical cancer patients and people having no apparent cervical cancers. These were accomplished using Western blot. Antibodies reactive to recombinant HPV 18E6 protein were frequently detected in cases with cervical carcinoma(14 out of 20, 70%), compared to people with no apparent carcinoma(4 out of 9, 44%).
형질전환체 담배에서 사람 파필로마 바이러스 HPV-18 E6 유전자의 발현
김현수,김달웅,손우익,현미아,박순희,유왕돈,전재필 경북대학교 유전공학연구소 1995 遺傳工學硏究所報 Vol.10 No.1
To develop a HPV-18 oral vaccine, HPV-18 E6 gene was cloned into an expression vector, under the control of CaMV 35S dual promoter and 5'UT region of TEV. The constructed vector (pUS-E6) was used to transform tobacco plants by the Agrobacterium-mediated leaf disc method. The transformants were then regenerated to whole transgenic plants. The HPV-18 E6 gene was found to be expressed in the transgenic tobacco plants as determined by PCR, RT-PCR, Northern analysis and Western analysis. These results show a possibility that HPV oral vaccine may be developed by expressing the HPV proteins in tomato or other vegetables.