실험 : 임신 중 비타민 C와 비타민 E 섭취 시 임부의 자궁정맥혈장, 양수 및 융모양막내 항산화제 농도 변화

양정선 ( Jung Sun Yang ),김윤하 ( Yoon Ha Kim ),김철홍 ( Cheol Hong Kim ),조문경 ( Moon Kyoung Cho ),김종운 ( Jong Woon Kim ),조혜연 ( Hye Yon Cho ),양성렬 ( Sung Yeul Yang ),안봉환 ( Bong Whan Ahn ),남종희 ( Jong Hee Nam ),송태복 대한주산의학회 2009 大韓周産醫學會雜誌 Vol.20 No.1

목적: 임신 중 비타민 C와 비타민 E를 섭취하여 분만 시 자궁정맥혈장, 양수 및 융모양막내 항산화제 농도 변화를 알아보고자 하였다. 방법: 단태아를 임신한 임부 중 제왕절개술이 예정된 산모에게 무작위로 임신 33~34주에서 만삭 제왕절개분만 전까지 하루에 비타민 C 1,000 mg과 비타민 E 400 IU를 투여했던 실험군 15명과 투여하지 않았던 대조군 15명을 대상으로 하였다. 제왕절개분만 시 자궁정맥혈, 양수 및 융모양막을 채취하였다. Thiobarbituric acid 반응을 이용하여 지질과산화물 농도를 측정하였고 Cao 등의 방법으로 항산화능(oxygen-radical absorbance capacity, ORAC)을 측정하였으며 high performance liquid chromatography를 이용하여 아스코르빈산, 요산, 베타-카로틴, 레티놀, 알파-토코페롤 및 감마-토코페롤 농도를 측정하였다. 융모양막의 조직절편을 헤마톡실린-에오신 및 Masson-trichrome 염색하여 조직학적 검사를 하였으며 제4형 교원섬유에 대한 면역조직화학 염색 검사를 하였다. 결과: 자궁정맥혈장내 지질과산화물 농도는 실험군에서 유의하게 낮았으며, 항산화능은 대조군은 실험군에서 유의하게 높았다. 자궁정맥혈장, 양수 및 융모양막의 알파-토코페롤 농도는 실험군에서 유의하게 높았다. 융모양막의 헤마톡실린-에오신 염색상에서 양막의 두께는 실험군에서 증가된 경향을 보였으나 통계학적 유의한 차이를 보이지는 않았다. Masson-trichrome 염색상 섬유질이 증가된 소견이 실험군에서 보였고, 면역조직화학 염색에서 제4형 교원섬유가 더 진하게 염색되었으나 대조군과 비교하여 차이는 없었다. 결론: 임신 중 비타민 C와 비타민 E 섭취는 산화적 스트레스로 생기는 산과적 질환에 예방적 목적으로 사용될 수 있으며 융모양막의 조직학적 충실성을 도모할 수 있을 것으로 사료된다. Purpose: To investigate the change in the antioxidant vitamin levels in maternal uterine venous plasma (MUVP), amniotic fluid (AF), and chorioamnion after vitamin C and E supplementation during pregnancy. Methods: Thirty pregnant women who were scheduled for elective cesarean section between 37 and 39 gestational weeks were randomized in this study. Fifteen women were given a daily oral dose of vitamin C 1,000 mg and vitamin E 400 IU from 33~34 gestational weeks to delivery. The other fifteen women were not given, as a control group. Maternal uterine venous blood, AF, and chorioamnion were obtained after cesarean section. Lipid peroxides and oxygen-radical absorbance capacity value were measured by thiobarbituric acid reaction and Cao`s method respectively. Ascorbic acid, uric acid, β-carotene, retinol, α-tocopherol, and γ-tocopherol were measured by high performance liquid chromatography. The tissue sections of chorioamnion were stained with hematoxylin-eosin and Masson-trichrome stain, and immunohistochemical stain for collagen type IV was also performed. Results: The lipid peroxide levels in MUVP of the study group were significantly lower than those of the control group but in contrast, ORAC (Oxygen-radical absorbance capacity) values were lower in the control group. The α-tocopherol levels in MUVP, AF, and chorioamnion study group were significantly higher than those of the control group. Amniotic membrane and subepithelial stromal tissue in the study group were thicker than those in the control group. And subchorionic type IV collagen of placenta tissue in the study group was more stained than that of the control group. Conclusion: Maternal vitamin C and E supplementation may be beneficial in the prevention of diseases caused by oxidative stress such as preeclampsia and PROM and in increasing fibrin and type IV collagen in chorioamnion.

정상과 자간전증 임부의 태반내 지질과산화치와 항산화능

김윤하(Yoon Ha Kim),송태복(Tae Bok Song),안봉환(Bong Whan Ahn),양성렬(Sung Yeul Yang),이소윤(So Yoon Lee),김석모(Seok Mo Kim),정광필(Kwang Pil Jeong),변지수(Ji Soo Byun),조문경(Moon Kyoung Jo) 대한산부인과학회 2002 Obstetrics & Gynecology Science Vol.45 No.8

목적 : 정상과 자간전증 임부의 태반내 지질과산화, 항산화능 및 항산하 비타민의 양태를 과악하여 이들이 자간전증의 병태생리에 어떤 역활을 하는지 알고자 하였다. 연구 방법 : 임신 33주 이상의 정상 임부 B3명과 자간전증 환자 18명으로부터 분만후 태반조직을 채취하여 태반조직균질액을 얻었다. Enzyme-linked immunoassay (ELISA)를 이용하여 tumor necrosis factor-α (TNF-α)를 측정하였고, thiobarbituric acid (TBA)반응을 이용하여 지질과산화 정도를 측정하였으며, 2,2`azobis-2-amidinopopane (ABAP)를 사용한 total peroxyl radical-trapping antioxidant parameter (TRAP) 검사를 통하여 총 항산화능을 측정하였고, high performance liquid chromatography (MPLC)를 이용하여 아스코르빈산 (ascorbic acid), 요산 (uric acid). 레티놀 (retinol), 알과-토코페롤 ( α-tocopherol) 및 감마-토코페를 (γ-tocopherol) 농도를 측정하였다. 결과 : 1. 정상 임신군과 자간전증군의 태반조직균질액내 TNF-α 농도는 각각 10.3±1.06pg/㎖과 21.4±3.39 pg/㎖으로 자간전증군에서 정상 임신군보다 의의있게 증가하였다 (p<0.05). 2. 정상 임신군과 자간전증군의 태반조직균질액내 지질과산화물은 4.98±0.37 nmol/㎎ protein과 6.65±0.57 nmol/㎎ protein으로 자간전증군에서 정상 임신관보다 의의있게 증가하였다 (p<0.05). 3. 정상 임신군과 자간전증군의 태반조직균질액내 TRAP 값은 0.31±0.03 mM과 0.24±0.02 mM으로 자간 전증군에서 정상 임신군보다 의의있게 감소하였다 (p<0.05). 4. 정상 임신군과 자간전증군의 태반조작균질액내 아스코르빈산 농도는 333.3±32.8 nmol/㎖과 217.0±21.0 nmol/㎖으로 자간전증군에서 정상 임신군보다 의의있게 감소하였다 (p<0.05). 결론 : 자간전증 환자의 태반내에서 지질과산화치는 정상임신군보다 증가하고 항산화능은 감소하였으며 특히 아스코르빈산이 감소하였다. 이는 자간전증이 산화촉진물과 항산화제의 불균형을 보이는 산화적 스트레스를 동반하는 소견이며, 자간전증 태반에서 TNF-α가 증가가 산화적 스트레스를 일으키는 한 원인인 것으로 시사되었다. 또한 자간전증의 병태생리에 태반내 지질과산화물의 증가와 항산화능의 감소가 주요 인자로 관여 할 것으로 사료되었다. Objective : Our purpose was to investigate lipid peroxide levels, total peroxyl radical-trapping antioxidative parameter (TRAP) values, and antioxidant vitamin levels in placental tissues of women with preeclampsia and to evaluate their roles in the pathophysiology of preeclampsia. Study Design : Samples of placental tissue homogenates were obtained from 23 normal and 18 preeclamptic women between 33 and 40 weeks gestation. TNF-α was assayed by an enzyme-linked immunoassay. Lipid peroxide levels measured by thiobarbituric acid reaction. The TRAP values were measured by modified Wayners method. Ascorbic acid, uric acid, retinol, α-tocopherol, and γ-tocopherol were measured by high performance liquid chromatography (HPLC) CoulArray detector. Results : TNF-α levels in placental tissue homogenates of women with preeclampsia were significantly higher than that of women with preeclampsia (21.4±3.39 vs. 10.3±1.06 pg/㎖, p<0.05). Lipid peroxide levels in placental tissue homogenates of women with preeclampsia were significantly higher than that of women with preeclampsia (6.65±0.57 vs. 4.98±0.37 nmol/㎎ protein, p<0.05). TRAP values in placental tissue homogenates of women with preeclampsia were significantly lower than that of women with normal pregnancy (0.24±0.02 vs. 0.31±0.03 mM, p<0.05). Ascorbic acid levels in placental tissue homogenates of women with preeclampsia were significantly lower than that of women with normal pregnancy (217.0±21.0 vs. 333.3±32.8 nmol/㎖, p<0.05). Conclusion : The above results suggest that increased oxidative stress in placenta is involved in the pathophysiology of preeclampsia and ascorbic acid may act as an important preventive factor in the development of preeclampsia.

Extract of Rubus coreanus Fruits Increases Expression and Activity of Endothelial Nitric Oxide Synthase in the Human Umbilical Vein Endothelial Cells

Hyun Joong Yoon(윤현중),Soo Young Park(박수영),Sung-Tack Oh(오성택),Kee Young Lee(이기영),Sung Yeul Yang(양성렬) 한국생명과학회 2011 생명과학회지 Vol.21 No.1

본 연구는 복분자의 수용성 추출물(RCE) 이 배양된 제대정맥내피세포에서 내피세포 NO 합성 효소(eNOS)의 발현과 활성에 미치는 효과를 연구하고, 이러한 RCE의 효과가 어떤 신호전달 과정을 거치는지를 밝히기 위한 것이다. 연구에 따르면 RCE가 제대정맥내피세포에서 NO의 생성을 증가시키는데 이는 iNOS 보다는 eNOS의 활성화에 의한 것임을 이들의 특이 억제제를 사용한 실험으로 확인할 수 있었다. 나아가 eNOS에 의한 NO 생성증가는 이 효소의 활성 증가뿐만 아니라 mRNA 수준에서의 발현증가에도 기인함을 확인할 수 있었다. PKC-특이 억제제인 RO-317549는 RCE에 의한 NO 생성의 증가에 별다른 영향을 주지 않았으나, 에스트로젠 수용체-특이 억제제인 Tamoxifen, ERK-특이 억제제인 PD98059와 PI3K/Akt-특이 억제제인 LY-294002는 제대정맥내피세포에서 RCE에 의해 증가된 NO 생성을 억제하였으며, 이는 두 저해제가 eNOS의 활성형인 pSer1177의 양을 감소시키며, 특히 PD98059는 비활성형인 pThr495의 양도 증가시키기 때문임을 알 수 있었다. 이상의 결과로써, 복분자수추출물은 사람의 제대정맥내피세포에서 NO 생성을 증가시키며, 이는 eNOS의 발현을 증가시킬 뿐만 아니라, ERK와 PI3K/Akt의 신호전달과정을 거쳐서 eNOS의 활성도 증가시키기 때문임을 확인할 수 있었다. This study aimed to investigate the effects of water extract of Rubus coreanus (RCE) on the expression and activity of endothelial nitric oxide synthase (eNOS), as well as its signal transduction pathways in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). The specific inhibitors of NOS show RCE treatment increases NO production in HUVECs due to the up-regulation of eNOS rather than iNOS. The real-time expression level of eNOS mRNA was also increased upon RCE treatment in HUVECs. While a PKC-specific inhibitor, RO-317549, did not alter RCE-induced NO production in HUVECs, tamoxifen (estrogen receptor-specific inhibitor), PD98059 (ERK-specific inhibitor) and LY-294002 (PI3K/Akt-specific inhibitor) did have suppressive effects. Increased NO production by RCE seems to result from a higher level of active eNOS (pSer1177). Specifically, inhibition of ERK not only decreased the level of active eNOS, but also increased the inactive form of the enzyme (pThr495) in HUVECs. This study suggests that RCE treatment increases NO production in HUVECs due to the increased expression and activity of eNOS. It is also shown that RCE-induced eNOS activation occurs partly through the binding of RCE to the estrogen receptor, along with ERK and PI3K/Akt-dependent signal transduction pathways. In addition, the regulatory binding proteins of eNOS including Hsp90 and caveolin-1 were related to these effects of RCE on eNOS activity in HUVECs.

만삭전 조기양막파열 임부에서 정맥혈장내 지질과산화도와 단백산화도의 증가

조문경 ( Moon Kyoung Cho ),김윤하 ( Yoon Ha Kim ),김철홍 ( Cheol Hong Kim ),김기민 ( Ki Min Kim ),안봉환 ( Bong Whan Ahn ),양성렬 ( Sung Yeul Yang ),김종운 ( Jong Woon Kim ),송태복 ( Tae Bok Song ) 대한산부인과학회 2007 Obstetrics & Gynecology Science Vol.50 No.4

목적: 비임부, 정상 및 만삭전 조기양막파열 임부의 정맥혈장내 지질과산화 치와 단백산화촉진능의 차이를 비교하고자한다. 연구방법: 비임부 20명, 임신 25주 이상 37주 미만의 정상 임부 20명과 조기양막파열 임부 20명으로부터 팔오금 중간정맥혈을 채취하였다. Thiobarbituric acid 반응을 이용하여 지질과산화물 농도를 측정하였다. 그리고 2,4-Dinitrophenylhydrazine(DNPH) 방법을 이용하여 단백질의 carbonyl기 함량의 기준치와 moxalactam 부치 후 및 amoxaciilin 부치 후의 단백질의 carbonyl기 함량을 측정하였다. 결과: 1. 만삭전 조기양막파열 임부군의 정맥혈장내 지질과산화 치는 5.66±0.43 nmol/mg protein으로 비임부군 3.78±0.24 nmol/mg protein, 정상 임부군 3.56±0.30 nmol/mg protein보다 의의있게 높았다 (p<0.01). 2. 만삭전 조기양막파열 임부군의 정맥혈장내 carbonyl기 함량도 8.23±0.54 nmol/mg protein으로 비임부군 6.39±0.23 nmol/mg protein, 정상 임부군 6.54±0.24 nmol/mg protein보다 의의있게 높았다 (p<0.01). 3. Moxalactam과 함께 부치시켰을 때 생성되는 만삭전 조기양막파열 임부군의 정맥혈장내 carbonyl기 함량은 11.73±0.59 nmol/mg protein으로 비임부군 10.06±0.26 nmol/mg protein, 정상 임부군 10.10±0.22 nmol/mg protein보다 의의 있게 높았다 (p<0.05). 4. Amoxacillin과 함께 부치시켰을 때 생성되는 정맥혈장내 carbonyl기 함량은 서로 간에 유의한 차가 없었다 (5.63±0.41, 5.81±0.43, 5.81±0.39 nmol/mg protein). 5. 정맥혈장내 지질과산화물 농도가 증가할수록 moxalactam에 부치 후 단백질의 carbonyl기 함량이 증가하는 비례적인 관계를 보였다 (p<0.05). 결론: 만삭전 조기양막파열시 정맥혈장에서 지질과산화와 단백질의 산화적 변화가 증가되어 있으며, 또한 cephalosporin에 의한 단백질의 산화적 변화도 쉽게 촉진되었다. 이는 만삭전 조기양막파열 환자는 혈액 내의 산화적 자극이 증가되어 있을 가능성을 시사한다. Objective: This study was performed to investigate the lipid peroxide levels and the protein carbonyl groups content in the venous plasma of pregnant women with preterm premature rupture of membranes (PPROM), non-pregnant, and normal pregnant women. Methods: Samples of venous blood were obtained from women with non pregnancy (n=20), normal pregnancy between 25 and 37 weeks gestation (n=20), and PPROM before 37 completed weeks gestation (n=20). Lipid peroxide levels in the venous plasma of women of each group were measured by thiobarbituric acid reaction. The basal, amoxacillin and moxalactam-induced protein carbonyl contents in the venous plasma of women of each group were determined by the 2,4-dinitrophenylhydrazine (DNPH) method. Results: 1. Lipid peroxide levels in the venous plasma of PPROM was significantly higher than that of non-pregnant and normal pregnant women (5.66±0.43 vs. 3.78±0.24 vs. 3.56±0.30 nmol/mg protein, p<0.01). 2. Protein carbonyl levels in the venous plasma of PPROM was also significantly higher than that of non-pregnant and normal pregnant women (8.23±0.54 vs. 6.39±0.23 vs. 6.54±0.24 nmol/mg protein, p<0.01). 3. Protein carbonyls formation by moxalactam in the venous plasma of PPROM was significantly higher than that of non-pregnant and normal pregnant women (11.73±0.59 vs. 10.06±0.26 vs. 10.10±0.22 nmol/mg protein, p<0.05). 4. There was no significant difference in protein carbonyls formation by amoxacillin of the venous plasma of pregnant women with PPROM, non-pregnant, and normal pregnant women (5.63±0.41 vs. 5.81±0.43 vs. 5.81±0.39 nmol/mg protein, p>0.05). 5. There were ignificant positive correlations between lipid peroxide and moxalactam-induced protein carbonyls levels of the venous plasma (p<0.05). There were no significant positive correlations between lipid peroxide and amoxacillin-induced protein carbonyls levels of the venous plasma. Conclusion: In the venous plasma of pregnant women with PPROM, the lipid peroxidation and the protein carbonyl formation were increased. And moxalactam-induced protein carbonyl levels were increased in PPROM. These results suggest that oxydative stress was increased in pregnant women with PPROM.

조기분만 시 양막파열 유무에 따른 제대정맥혈장내 interleukin-6와 tumor necrosis factor-α 및 항산화능의 변화

정광필 ( Kwang Pil Jeong ),김윤하 ( Yoon Ha Kim ),김철홍 ( Cheol Hong Kim ),조문경 ( Moon Kyoung Cho ),김기민 ( Ki Min Kim ),김종운 ( Jong Woon Kim ),안봉환 ( Bong Whan Ahn ),양성렬 ( Sung Yeul Yang ),주은현 ( Eun Hyun Joo ),송태 대한산부인과학회 2007 Obstetrics & Gynecology Science Vol.50 No.2

목적: 양막파열이 없는 조기 분만과 만삭전 조기 양막파열 분만 시 제대정맥혈장내 interleukin-6 (IL-6)와 tumor necrosis factor-α(TNF-α) 및 항산화능과 항산화제를 측정하고 이들을 정상 만삭분만과 비교분석하여 병태생리에 어떤 역할을 하는 가 규명하고자 하였다. 연구방법: 양막파열이 없는 조기 분만 임부 30명 (조기분만군), 만삭전 조기 양막파열 임부 30명 (양막파열군) 및 정상만삭분만 임부 30명 (정상 대조군)에서 태아 분만 시 제대정맥혈을 채취하여 혈장을 얻었다. Enzyme-linked immuno-sorbent assay kit를 이용하여 IL-6와 TNF-α농도, thiobarbituric acid 반응을 이용하여 지질과산화물 농도, Cao 등의 방법으로 항산화능 (ORAC) 및 high performance liquid chromatography를 이용하여 항산화제를 측정하여 비교하였다. 결과: 1. 정상 대조군, 조기 분만군 및 양막파열군의 IL-6 농도는 각각 2.79±0.22 pg/ml, 2.84±0.19 pg/ml, 3.28±0.31 pg/ml으로, 양막파열군에서 조기 분만군과 정상대조군보다 각각 유의하게 높았다 (p<0.05, p<0.05). 2. 정상 대조군, 조기 분만군 및 양막 파열군의 TNF-α농도는 각각 1.40±0.25 pg/ml, 1.64±0.23 pg/ml, 2.30±0.27 pg/ml으로, 양막파열군에서 조기 분만군과 정상 대조군보다 각각 유의하게 높았다 (p<0.01, p<0.01). 3. 정상대조군, 조기 분만군 및 양막파열군의 지질과산화물 농도는 각각 2.24±0.24 nmol/mg protein, 2.54±0.32 nmol/mg protein, 2.78±0.27 nmol/mg protein으로 양막파열군에서 정상 대조군보다 유의하게 높았다 (p<0.01). 4. 정상대조군, 조기 분만군 및 양막파열군의 항산화능(ORAC)은 각각 1011328.5±85.96 U/ml, 967425.4±98.99 U/ml, 965165.8±91.20 U/ml로 조기 분만군과 양막파열군에서 정상대조군보다 각각 유의하게 낮았다 (p<0.05, p<0.05). 5. 정상대조군, 조기 분만군 및 양막파열군의 ascorbic acid의 농도는 각각 221.7±2.82 nmol/ml, 158.3±3.08 nmol/ml, 125.6±2.33 nmol/ml로 양막파열군에서 정상대조군보다 유의하게 낮았다 (p<0.01). 결론: 제태연령이 진행될수록 태반내 지질과산화물 생성은 감소하고 항산화능과 항산화제는 증가하였으며, 만삭전 조기 양막파열 시 자궁내 염증성 반응으로 제대혈액내 cytokine들과 지질과산화물이 증가하며 이에 따른 항산화능 감소가 만삭전 조기 양막파수의 병태생리에 중요한 인자로 관여할 것으로 사료된다. Objective: To compare interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor-α(TNF-α), oxygen-radical absorbance capacity (ORAC), and antioxidant vitamin levels in the umbilical venous plasma of preterm labor with intact membranes (PTL) and preterm premature rupture of membrane (PPROM) with that of full term normal pregnancy (NP) and to evaluate their roles of pathophysiology in preterm labor and PPROM. Methods: Umbilical venous blood samples were collected from women with PTL (n=30), PPROM (n=30) and NP (n=30). IL-6 and TNF-α were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Lipid peroxide levels were measured by thiobarbituric acid reaction. The ORAC was mesured by Cao`s method. Antioxidant vitamin levels were measured by high performance liquid chromatography. Results: IL-6 and TNF-αlevels in the umbilical venous plasma of PPROM were significantly higher than that of PTL and NP (3.28±0.31 vs. 2.84±0.19 vs. 2.79±0.22 pg/ml, p<0.05), (2.30±0.27 vs. 1.64±0.23 vs. 1.40±0.25 pg/ml, p<0.01). Lipid peroxide levels in the umbilical venous plasma of PPROM were significantly higher than that of NP and PTL (2.78±0.27 vs. 2.54±0.32 vs. 2.24±0.24 nmol/mg protein, p<0.01). ORAC levels in the umbilical venous plasma of PTL and PPROM were significantly lower than that of NP (967425.4±98.99 vs. 965165.8±91.20 vs. 1011328.5±85.96 U/ml, p<0.05). Ascorbic acid levels in the umbilical venous plasma of PPROM were significantly lower than that of NP and PTL (125.6±2.33 vs. 158.3±3.08 vs. 221.7±2.82 nmol/ml, p<0.01). Conclusion: Increase in inflammatory cytokines (IL-6, TNF-α) and imbalance of increased lipid peroxidation and decreased antioxidant activity in umbilical venous blood may be involved in the pathophysiology of PPROM.

임신 중 비타민 C와 비타민 E 투여 후 임신부 정맥혈장과 제대정맥혈장내 지질과산화물, 항산화능 및 항산화 비타민 농도

김윤하 ( Yoon Ha Kim ),김종운 ( Jong Woon Kim ),김철홍 ( Chul Hong Kim ),조문경 ( Moon Kyoung Cho ),김석모 ( Seok Mo Kim ),강우대 ( Woo Dae Kang ),조혜연 ( Hye Yon Cho ),양성렬 ( Sung Yeul Yang ),안봉환 ( Bong Whan Ahn ),송태복 ( 대한산부인과학회 2009 Obstetrics & Gynecology Science Vol.52 No.11

목적: 임신 중 비타민 C와 비타민 E 투여 후 만삭임신부 정맥혈장과 제대정맥혈장내 지질과산화물, 항산화능 및 항산화비타민 농도의 변화를 알아보고자 하였다. 연구 방법: 초임부 또는 이전 자간전증이나 만삭전 조기양막파열 기왕력이 있었던 임부에게 무작위로 임신 15주에서 20주 사이부터 만삭 (임신 37주 이후) 분만 전까지 하루에 비타민 C 1,000 mg 과 비타민 E 400 IU를 투여했던 실험군 20명과 투여하지 않았던 대조군 20명을 대상으로 하였다. 비타민 투여 전과 분만직전 임부의 상완정맥혈액과 분만 후 제대정맥혈액을 채취하였다. Thiobarbituric acid (TBA) 반응을 이용하여 지질과산화물 농도를 측정하였고 Cao 등의 방법으로 항산화능을 측정하였으며, high performance liquid chromatography (HPLC)를 이용하여 아스코르빈산, 요산, 레티놀, 알파-토코페롤, 감마-토코페롤 및 베타 카로텐 농도를 측정하였다. 결과: 실험군에서 비타민 투여 후 임부 혈장내 지질과산화물 농도는 감소하였고, 항산화능 농도와 알파-토코페롤 농도는 증가하였다. 실험군의 제대정맥 혈장내 농도는 대조군에 비해 지질과산화물 농도는 낮았고, 항산화능 농도와 알파-토코페롤 농도는 높았다. 결론: 임신 중 비타민 C와 비타민 E 섭취로 임신부 정맥혈장과 제대정맥혈장내 지질과산화물은 감소하고 항산화능은 증가하였으며, 비타민 C 농도는 변화가 없었지만 비타민 E 농도는 증가하였다. 이는 임신부 혈액내 산화제-항산화제 불균형을 초래하는 산화적 스트레스로 생기는 산과적 질환의 예방적 목적으로 비타민 섭취가 이용될 수 있으며 태아의 항산화능에도 영향을 줄 수 있으리라 사료된다. Objective: This controlled trial investigated the effect of supplementation with vitamins C and E on the lipid peroxide, antioxidant ability, and antioxidant vitamin levels in full term maternal and umbilical venous plasma. Methods: Forty pregnant women were randomized in this study. They were nulliparous or multiparous women with history of preeclampsia or preterm premature rupture of membranes (PPROM). Twenty women were given vitamin C (1,000 mg/day) and vitamin E (400 IU/day) from 15~20 gestational weeks to delivery. The others were not given, as a control group. Maternal venous blood was obtained before vitamin supplementation and just before delivery. Umbilical venous blood was obtained after delivery. Lipid peroxide level and oxygen-radical absorbance capacity (ORAC) were measured by thiobarbituric acid reaction and Cao`s method, respectively. Ascorbic acid, uric acid, β-carotene, retinol, α-tocopherol, and γ-tocopherol were measured by high performance liquid chromatography. Results: Supplementation with vitamins C and E was associated with decrease in lipid peroxide levels and increase in ORAC values and α-tocopherol levels in maternal venous plasma. And it was also associated with decrease in lipid peroxide levels and increase in ORAC values and α-tocopherol levels in umbilical venous plasma. Conclusion: Supplementation with vitamins C and E may be beneficial in the prevention of oxidant-antioxidant imbalance origin diseases such as preeclampsia, PPROM. And it also may affect antioxidant ability of the fetus.

만삭 전 조기양막파열 임부에서 항생제 투여 후 정맥혈장 내 지질과산화도와 단백산화도의 변화

하진아 ( Jin A Ha ),김윤하 ( Yoon Ha Kim ),김석모 ( Seok Mo Kim ),김철홍 ( Chul Hong Kim ),조문경 ( Moon Kyoung Cho ),김종운 ( Jong Woon Kim ),강우대 ( Woo Dae Kang ),조혜연 ( Hye Yon Cho ),양성렬 ( Sung Yeul Yang ),안봉환 ( Bong 대한산부인과학회 2009 Obstetrics & Gynecology Science Vol.52 No.7

목적: 만삭 전 조기양막파열 임부에게 항생제를 투여한 후 정맥혈장 내 지질과산화도와 단백산화도를 비교분석하여 이들이 어떤 영향을 미치는 가에 대하여 규명하고자 한다. 연구 방법: 임신 25주 이상 32주 미만의 만삭 전 조기양막파열 임부 36명 중 1군 18명은 amoxacillin계와 erythromycin계 항생제를 7일간 병합 투여하고, 2군 18명은 3세대 cephalosporin계 (cefodizime, cefditoren)와 erythromycin계 항생제를 7일간 병합 투여하였다. 각 군에서 투여 전, 3일째, 7일째 팔오금 중간정맥혈을 채취하고 원심분리 후 혈장을 얻었다. Thiobarbituric acid반응을 이용하여 지질과산화물 농도를 측정하였고, 2,4-dinitrophenylhydrazine 방법을 이용하여 단백질의 carbonyl기 함량을 측정하였다. 대조군으로 임신 25주 이상 32주 미만 정상임부 18명의 정맥혈장을 얻어 시험관 내 방법으로 지질과산화물 농도와 단백질의 carbonyl기 함량을 측정하였다. Interleukin (IL)-6은 enzyme-linked immunosorbent assay kit를 이용하여 측정하였다. 결과: 1. 만삭 전 조기양막파열 임부군 (18명)의 정맥혈장 내 지질과산화물 농도와 단백질의 carbonyl기 함량은 4.77±0.36, 7.11±0.41 nmol/mg protein으로, 정상임부군 (18명) 3.55±0.22, 5.69±0.30 nmol/mg protein보다 모두 유의하게 높았다 (P<0.01). 2. 만삭 전 조기양막파열 임부군 (18명)의 정맥혈장에서 시험관 내 방법으로 amoxacillin계, 3세대 cephalosporin계 및 erythromycin계 항생제를 처치한 전과 후에 측정한 지질과산화물 농도와 단백질의 carbonyl기 함량의 차이는 의의가 없었다. 3. 1군의 투여 전, 투여 3일째, 7일째 정맥혈장 내 지질과 산화물 농도는 4.51±0.41, 4.33±0.28, 4.55±0.35 nmol/mg protein이며, 2군의 투여 전, 투여 3일째, 7일째 정맥혈장 내 지질과 산화물 농도는 4.89±0.22, 4.62±0.21, 4.50±0.26 nmol/mg protein으로 유의한 차이는 없었다. 4. 1군의 투여 전, 투여 3일째, 7일째 정맥혈장 내 단백질의 carbonyl기 함량은 7.21±0.38, 7.53±0.41, 7.70±0.54 nmol/mg protein으로 유의한 차이는 없었다. 그러나 2군의 투여 전, 투여 3일째, 7일째 정맥혈장 내 단백질의 carbonyl기 함량은 7.04±0.51, 6.04±0.44, 5.53±0.37 nmol/mg protein으로 투여 전보다 투여 7일째가 유의하게 감소하였다 (P<0.05). 5. 1군의 투여 전과 7일째 정맥혈장 내 IL-6 농도는 6.82±0.38, 8.21±0.54 pg/mL으로 유의한 차이는 없었다. 2군의 투여 전과 7일째 정맥혈장 내 IL-6농도는 7.50±0.35, 3.13±0.37 pg/mL으로 유의하게 감소하였다 (P<0.05). 결론: 만삭 전 조기양막파열 시 정맥혈장에서 지질과산화와 단백질의 산화적 변화가 증가되어 있었으며, 3세대 cephalosporin계와 erythromycin계 병합치료에 의해 단백질의 산화도와 IL-6 생성이 감소되는 경향을 보였다. 이는 3세대 cephalosporin계와 erythromycin계 병합요법이 염증성 반응으로 발생되는 활성 산소를 억제시키는 효과를 나타낸 것으로 사료된다. Objective: To investigate and compare the amount of the lipid peroxidation and the protein carbonyls formation in maternal venous plasma of preterm premature rupture of membranes (PPROM) during antibiotics administration. Methods: PPROM were selected between 25 and 32 weeks of gestation. Eighteen patients (group 1) were treated with amoxicillin and erythromycin for 7 day period, 18 patients (group 2) were treated with 3rd generation cephalosporin (cefodizime, cefditoren) and erythromycin for the same period. Maternal blood were obtained from the two groups before and after the antibiotics administration, day 3 and day 7. Lipid peroxidation levels and protein carbonyl contents were measured by thiobarbituric acid reaction and 2,4-dinitrophenyl hydrazine method. Other 18 women with normal pregnancy between 25 and 32 weeks of gestation of venous blood were checked same things in vitro. Interleukin (IL)-6 was measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Results: 1. The lipid peroxidation levels and protein carbonyls formation in the maternal venous plasma of PPROM was significantly higher than that of normal pregnancy (lipid peroxidation levels; 4.77±0.36 vs 7.11±0.41 nmol/mg protein, P<0.01, protein carbonyls formation; 3.55±0.22 vs 5.69±0.30 nmol/mg protein, P<0.01). 2. There were no significant differences in the lipid peroxidation levels and protein carbonyls formation of the maternal venous plasma with PPROM mixed and incubated by amoxicillin, cefodizime, cefditoren, and erythromycin (in vitro). 3. There were no significant differences in the lipid peroxidation levels and protein carbonyls formation of the venous plasma of group 1 between before and after antibiotics administration, day 3 and day 7. 4. There were no significant differences in the lipid peroxide levels of the venous plasma of group 2 between before and after antibiotics administration, day 3 and day 7. 5. The protein carbonyls formation in the venous plasma of group 2 was significantly decreased at day 3 and day 7 after antibiotics administration than that of before (6.04±0.44 and 5.53±0.37 vs. 7.04±0.51 nmol/mg protein, P<0.05). 6. The levels of IL-6 in the venous plasma of group 2 was significantly decreased at day 7 after antibiotics administration than that of before (7.50±0.35 vs. 3.13±0.37 pg/mL, P<0.05). Conclusion: In the maternal venous plasma of PPROM, the lipid peroxidation levels and protein carbonyls formation were increased. The formation of protein carbonyls and IL-6 in the maternal blood of PPROM was decreased by combined treatment of 3rd generation cephalosporin and erythromycin. The results suggest that reactive oxygen species formation by inflammatory reaction is suppressed by the 3rd generation cephalosporins and erythromycin combined treatment.

임상 ; 조기분만 시 융모양막염 유무에 따른 제대정맥혈장내 Interleukin-6, C-reactive Protein 및 지질과산화물의 변화

강명선 ( Myoung Seon Kang ),김윤하 ( Yoon Ha Kim ),김철홍 ( Cheol Hong Kim ),김기민 ( Ki Min Kim ),조문경 ( Moon Kyoung Cho ),김종운 ( Jong Woon Kim ),김조헌 ( Jo Heon Kim ),남종희 ( Jong Hee Nam ),양성렬 ( Sung Yeul Yang ),안봉환 대한주산의학회 2007 Perinatology Vol.18 No.4

목적: 조기분만 시 제대정맥혈장내 Interleukin-6(IL-6)와 C-reactive protein (CRP) 및 지질과산화물을 측정하여 조직학적 융모양막염 유무에 따른 이들의 변화와 주산기 예후에 어떤 역할을 하는가 규명하고자 하였다. 방법: 양막파열이 없는 조기분만 임부 39명(조기분만군), 만삭전 조기양막파열 임부 27명(양막파열군)에서 분만시 태반조직과 제대정맥혈을 채취하여 IL-6, CRP, 지질과산화물 농도를 측정하고 비교하였고, 태반조직의 병리학적 소견을 얻었다. 결과: 조기분만군 39예 중 8예, 양막파열군 27예 중 16예에서 조직학적 융모양막염이 있었으며, 양막파열군에서 조기분만군보다 증가하였다. 조기분만군과 양막파열군 간에 IL-6, CRP, 지질과산화물의 차이가 없었다. 조직학적 융모양막염이 있는 군에서 없는 군보다 IL-6, CRP, 지질과산화물 농도가 증가하였다. 조직학적 융모양막염이 있는 조기분만군에서 없는 조기분만군보다 IL-6, CRP, 지질과산화물 농도가 증가하였다. 조직학적 융모양막염이 있는 양막파열군에서 없는 양막파열군에 비해 CRP는 증가하였으나, IL-6와 지질과산화물 농도는 차이가 없었다. 선천성 패혈증이 의심스러웠던 태아 3명의 IL-6와 지질과산화물 농도가 증가된 소견을 보였다. 조직학적 제대염을 동반한 경우의 IL-6 농도는 동반하지 않은 경우보다 증가하였으며, 제대염이 있었던 6예 중 신생아 패혈증 의증 2명, 호흡곤란증후군 1명, 뇌실내출혈 1명으로 주산기 이환율이 높았다. 결론: 조직학적 융모양막염이 동반된 조기분만에서 제대정맥내 IL-6, CRP 및 지질과산화물이 증가하였으며, 이에 따라 주산기 이환율이 영향을 받을 것으로 사료된다. Objective: To investigate interleukin-6 (IL-6), C-reactive protein (CRP), and lipid peroxide levels in the umbilical venous plasma of preterm birth with or without histologic chorioamnionitis and to evaluate their roles in the pathophysiology in preterm labor and perinatal outcome. Methods: This cohort study included 66 cases of preterm delivery with preterm labor and intact membranes (PTL) (n=39) and preterm premature rupture of membranes (PPROM) (n=27). The umbilical venous blood samples were collected at the time of delivery. IL-6, CRP, and lipid peroxide levels were measured by ELISA Kit, latex agglutination assay, and thiobarbituric acid reaction. Histologic chorioamnionitis was diagnosed by the presence of neutrophil infiltration into the subamnionic space. Results: The prevalence of histologic chorioamnionitis was significantly higher in PPROM (59.3%, 16/27) than in PTL (20.5%, 8/39). IL-6, CRP, and lipid peroxide levels in the umbilical venous plasma of histologic chorioamnionitis were significantly higher than those without histologic chorioamnionitis. IL-6, CRP, and lipid peroxide levels in the umbilical venous plasma of PTL with histologic chorioamnionitis were significantly higher than those of PTL without histologic chorioamnionitis. CRP levels in the umbilical venous plasma of PPROM with histologic chorioamnionitis were significantly higher than those of PPROM without histologic chorioamnionitis. Three suspected neonatal sepsis patients have increased IL-6 and lipid peroxide levels in the umbilical venous plasma compared with patients without neonatal sepsis. IL-6 levels in the umbilical venous plasma of histologic funisitis were significantly higher than those without funisitis. Conclusion: Preterm birth with chorioamnionitis is associated with an increased level of IL-6, CRP, and lipid peroxide in umbilical venous blood. Preterm birth with chorioamnionitis may have an effect on perinatal outcome.

자간전증에서 자궁정맥, 제대정맥 및 제대동맥 혈장내 단백산화 촉진능

김재훈 ( Jae Hoon Kim ),김윤하 ( Yoon Ha Kim ),김철홍 ( Cheol Hong Kim ),조문경 ( Moon Kyoung Cho ),김기민 ( Ki Min Kim ),박수영 ( Soo Young Park ),송태복 ( Tae Bok Song ),안봉환 ( Bong Whan Ahn ),양성렬 ( Sung Yeul Yang ) 대한산부인과학회 2005 Obstetrics & Gynecology Science Vol.48 No.7

사람 뇌척수액중 Transthyretin의 항산화작용

양성렬,최기오,박종근,류문희,홍석노,김수한,안봉환,이제혁,이민화 대한신경외과학회 1994 Journal of Korean neurosurgical society Vol.23 No.4

Protective effects of human cerebrospinal fluid antioxidants against enzyme inactivation caused by metal-catalyzed oxidation systems were investigated. When purified glutamine synthetase(GS) was incubated with human cerebrospinal fluid(CSF), the enzyme was progressively inactivated. Catalase and EDTA could inhibit the enzyme inactivation by 50-80%. Small-molecular(Mr< -10,000) fraction of CSF inactivated the exogenous GS, but large-molecular(Mr> -10,000) fraction did not. The GS inactivation by the small-molecular fraction was also markedly inhibited by catalase and EDTA. These results suggested that metal-catalyzed oxidation is involved in the GS inactivation by the small-molecular fraction of CSF. Dithiothreitol(DTT) was shown to inhibit almost completely the oxidative inactivation of GS by CSF. However, DTT inhibited only partially the oxidative inactivation of GS caused by small-molecular fraction of CSF. When large-molecular fraction of CSF was separated by anion-exchange HPLC chromatogrpahy, there was a peak of antioxidant activity inhibiting the small-molecular fraction-induced GS inactivation in the presence of DTT. The antioxidant activity was neutralized by monoclonal antibodies to transthyretin. Purified transthyretin was found to efficiently inhibit ascorbate/Cu^(2+)-induced GS inactivation in the presence of DTT. Uric acid and glucose did not show any protective effect on the GS inactivation in the same condition. The above results suggest that metal-catalyzed oxidation occurs normally in human CSF, and that transthyretin may play an important role as a CSF antioxidant in protecting proteins from metal-catalyzed oxidation.