RAPD기법을 이용한 Lycoris속의 유연관계 분석

박종군(Park Jong Kun),박윤점(Park Yun Jum),차재영(Cha Jae Young),조기정(Cho Gi Chung),김완주(Kim Won Joo),이혜숙(Lee Hye Suk) 한국원예학회 1998 원예과학기술지 Vol.16 No.3

알킬화제에 의한 DNA 단사절단 , 절제회복 및 자매염색분체 교환에 미치는 Poly ( ADP - ribose ) polymerase 저해제의 상승효과

김철근,박종군,박상대 ( Chul Geun Kim,Jong Kun Park,Sang Dai Park ) 생화학분자생물학회 1983 BMB Reports Vol.16 No.2

Benzamide and 3-aminobenzamide, potent inhibitors of poly (ADP-ribose) polymerase, increased MMS or MNNG-induced DNA strand breaks and significantly retarded the rejoining of strand breaks in CHO cells. These inhibitors also synergistically enhanced the frequencies of unscheduled DNA synthesis (UDS) and sister chromatid exchanges (SCE) induced by MNNG. Amounts of UDS and strand breaks induced by the combined treatment with MMS and MNNG were found to be additive but these amount were enhanced in the presence of inhibitors. These results suggest that poly (ADP-ribose) functions a regulatory role in the repair of DNA damage by virtue of stabilizing chromatin structure whenever strand breaks occur in DNA.

Enhancing Effects of Inhibitors of Poly(ADP-ribose) Polymerase on Alkylating Agents-Induced DNA Strand Breaks, Excision Repair and sister Chromatid Exchanges

김철근,박종군,박상대,Kim, Chul-Geun,Park, Jong-Kun,Park, Sang-Dai 생화학분자생물학회 1983 한국생화학회지 Vol.16 No.2

CHO 세포에 있어서 강력한 poly(ADP-ribose) polymerase 저해제인 benzamide와 3-aminobenzmide는 MMS와 MNNG에 의한 DNA 단사절단을 증가시켰으며 단사절단의 재결합을 유의성 있게 억제하였다. 이들 저해제는 또한 MNNG에 의한 비주기성 DNA 합성(UDS)과 자매염색분체 교환(SCE)에 상승 효과를 나타내었다. MMS와 MNNG의 복합처리에 의한 UDS와 단사절단은 상가효과를 보이나 저해제 처리에 의해 이의 효과는 상승되었다. 이들 결과로 보아 poly(ADP-ribose)는 DNA에 단사절단이 일어날때마다 염색사구초를 안정화 시킴으로서 DNA 손상에 대한 회복에 조절작용을 나타낸다고 사료된다. Benzamide and 3-aminobenzamide, potent inhibitors of poly (ADP-ribose) polymerase, increased MMS or MNNG-induced DNA strand breaks and significantly retarded the rejoining of strand breaks in CHO cells. These inhibitors also synergistically enhanced the frequencies of unscheduled DNA synthesis (UDS) and sister chromatid exchanges (SCE) induced by MNNG. Amounts of UDS and strand breaks induced by the combined treatment with MMS and MNNG were found to be additive but these amount were enhanced in the presence of inhibitors. These results suggest that poly (ADP-ribose) functions a regulatory role in the repair of DNA damage by virtue of stabilizing chromatin structure whenever strand breaks occur in DNA.

NIH3T3 세포에서 UVB에 의한 세포고사에 미치는 옻 추출물과 fisetin의 효과

김돈영,황은희,박종군,Kim Don Young,Hwang Eun Hee,Park Jong Kun 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.1

For a long time Rhus vemiciflua Stokes (RVS) has been traditionally used as a herbal plant in Asia. In this study, we have investigated the effect of acetone extract of Rhus verniciflua Stokes (RVSE) and fisetin, a component of RVSE, on DNA damage response in NIH3T3 cells. Exposure of cells to DVB light $(200 J/m^2)$ and postincubation in growth medium for 48 hr resulted in a decrease of cell viability to about $10-20\%$ of nontreated control. Addition of various concentrations of RVSE in the postincubation medium, however, significantly increased the cell viability as compared with the values expected. The genotoxicity-decreasing effect was also demonstrated in cells exposed to UVB light and incubated in medium containing fisetin. The genotoxicity-decreasing effect of RVSE and fisetin was further demonstrated by various analyses including cell morphology studies, trypan blue exclusion assay and DAPI staining. By Annexin V binding analysis, RVSE and fisetin were shown to decrease the early apoptosis induced by UVB exposure. These results suggest the RVSE contain components that either increase the DNA repair or decrease the apoptosis in UVB-exposed cells.

찔레 추출물의 B16 세포 멜라닌 형성 억제

하세은,김형도,박종군,정연옥,김현종,박노복,Ha, Se-Eun,Kim, Hyoung-Do,Park, Jong-Kun,Chung, Yeon-Ok,Kim, Hyun-Jong,Park, Nou-Bog 한국자원식물학회 2009 한국자원식물학회지 Vol.22 No.4

In the present study, the effect of ethanol extracts of leaf and root of Rosa multiflora on the proliferation of B16 cells, tyrosinase activity and melanin synthesis were investigated. 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(MTT) assay demonstrated that the cell viability upon treatment with Rosa multiflora extract(0-200 ${\mu}g$/ml) was similar to that of untreated control. Treatment with leaf or root extracts(200 ${\mu}g$/ml) decreased the in vitro tyrosinase activity to about 65% of that in untreated control. Similarly, the intracellular tyrosinase activity of B16 cells decreased in a concentration-dependent manner. Furthermore, the melanin synthesis of B16 cells decreased by the two extracts in a concentration dependent manner. However, the extracts did not change the level of tyrosinase mRNA, as determined by RT-PCR. These results demonstrated that the Rosa multiflora extracts inhibit the tyrosinase dependent melanin biosynthesis, and therefore, are candidates for skin-whitening agents. 본 연구는 찔레 에탄올 추출물의 세포 활성 및 티로시나아제활성 저해를 분석하였다. 찔레 추출물의 세포활성을 분석한 결과 찔레 잎과 뿌리 추출물의 경우에는 추출물을 처리하지 않은 대조군과 유사한 결과를 관찰하였다. 모든 농도에서 세포 활성이 나타나지 않아 티로시나아제 활성 저해 효과를 분석한 결과 찔레 잎과 뿌리추출물은 상대적으로 고농도(200 ${\mu}g$/ml)에서 약 30${\sim}$32% 정도를 저해하는 효과를 나타냈다. 또한 B16 세포에서 티로시나아제활성 저해 효과를 분석한 결과 상대적으로 고농도(200 ${\mu}g$/ml)에서 양성대조군인 알부틴보다 20${\sim}$25% 정도 낮은 저해 효과를 나타냈다. 멜라닌 함량 저해 효과를 분석한 결과 찔레 잎과 뿌리 추출물의 경우 티로시나아제의 저해 효과와 유사하게 농도 의존적인 저해효과를 나타내는 것을 관찰하였다. RT-PCR 방법으로 분석한 결과, 추출물 처리군들은 정상대조군과 비교하여 티로시나아제 mRNA 수준이 유의적으로 차이가 나지 않았으며, 또한 농도 의존적인 변화도 없었다.

자외선 B에 의해 유도되는 DNA 상해에 대한 참갈파래 메탄올 추출물의 보호 효과

정슬아,정유헌,박종군,Jeong, Seula,Chung, Yuheon,Park, Jong Kun 한국식품영양학회 2020 韓國食品營養學會誌 Vol.33 No.3

In this study, we investigated the protective effects of Ulva lactuca methanol extracts against ultraviolet B (UVB)-induced DNA damage in HaCaT cells. First, the contents of general and antioxidative nutrient contents of Ulva lactuca were measured. The moisture, carbohydrate, crude protein, crude fat and ash were 14.01%, 44.80%, 23.19%, 3.10% and 14.90%, respectively. Magnesium that acts as DNA repair enzyme cofactor was the most abundant mineral followed by Ca, P and Fe. The total phenolic and anthocyanoside contents of Ulva lactuca were 2.69 mg/g and 0.13 mg/g, respectively. Cells treated with Ulva lactuca methanol extracts for 24 hours post UVB exposure increased cell viability in a concentration-dependent manner compared to the non-treated control. Also, Ulva lactuca methanol extracts decreased the levels of UVB-induced DNA damage such as cyclobutane pyrimidine dimer and DNA damage response (DDR) proteins such as p-p53 and p21. These results suggest that Ulva lactuca methanol extracts comprising physiological active substances such as Mg, polyphenols and anthocyanosides promote DNA repair by regulating genes related with DDR.

HepG2 세포에서 아마란스 종자 에탄올 추출물이 포도당 흡수 조절에 미치는 효과

박소진(So Jin Park),박종군(Jong Kun Park),황은희(Eunhee Hwang) 한국영양학회 2021 Journal of Nutrition and Health Vol.54 No.6

혈당 조절에 유익한 천연 식품을 발굴하고 그 효과를 밝혀보고자 본 연구에서는 아마란스 종자에 주목하여 몇 가지 혈당조절 연관 지표의 증감 정도를 알아보았다. 아마란스 종자의 색과 발아 여부에 따라 효능에 차이가 있는지 알아보기 위하여 발아 흑색 아마란스는 germinated black amaranth (GBA), 비발아 흑색 아마란스는 black amaranth (BA), 발아 황색 아마란스는 germinated yellow amaranth (GYA), 비발아 황색 아마란스는 yellow amaranth (YA)로 구분하였고 각각의 시료는 80% 에탄올 추출물을 만들어 사용하였다. 본 연구에서 α-amylase 및 α-glucosidase 저해 활성을 측정한 결과 GBA, BA, GYA, YA 순으로 높은 저해 활성을 나타냈으며 특히 α-amylase 저해 활성 실험에서 GBA는 양성 대조물질인 acarbose와 거의 비슷한 수준을 나타내어 높은 저해 활성을 가지는 것으로 판단된다. HepG2 세포에서 포도당 흡수를 측정한 결과 모든 추출물에서 농도 의존적으로 증가하였고 GBA > BA > GYA > YA 순으로 높게 나타났다. 특히 50 μg/mL 농도에서 GBA는 인슐린과 유사한 값을 나타내었다. GBA를 농도별로 처리한 HepG2 세포에서 ACC, GLUT-2, GLUT-4, IRS-1, IRS-2 mRNA 발현 정도는 모두 농도 의존적으로 증가하였다. 이상의 결과로 아마란스 종자는 혈당 조절 및 개선에 효능이 있다고 평가되며 특히 발아한 흑색 종자가 혈당 조절 효능이 높게 나타남을 보여 혈당 조절에 유익한 효능을 가지는 식품 소재가 될 수 있음을 확인하였다. Purpose: This study was carried out to investigate the effect of amaranth seed extracts on glycemic regulation in HepG2 cells. The 80% ethanol extracts of amaranth seeds were used to evaluate α-amylase and α-glucosidase activities, cell viability, glucose uptake and messenger RNA (mRNA) expression levels of acetyl-CoA carboxylase (ACC), glucose transporter (GLUT)-2, GLUT-4, insulin receptor substrate (IRS)-1 and IRS-2. Methods: The samples were prepared and divided into 4 groups, including germinated black amaranth (GBA), black amaranth (BA), germinated yellow amaranth (GYA) and yellow amaranth (YA). Glucose hydrolytic enzyme, α-amylase and α-glucosidase activities were examined using a proper protocol. In addition, cell viability was measured by MTT assay. Glucose uptake in cells was measured using an assay kit. The mRNA expression levels of ACC, GLUT-2, GLUT-4, IRS-1 and IRS-2 were measured by reverse transcription polymerase chain reaction. Results: The inhibitory activities of α-amylase and α-glucosidase were highly observed in GBA, followed by BA, GYA and YA. Similar results were observed for glucose. The GBA effect was similar compared to the positive control group. The mRNA expression levels of ACC, GLUT-2, GLUT-4, IRS-1, and IRS-2 were significantly increased. The potential hypoglycemic effects of amaranth seed extracts were observed due to the increase in glucose metabolic enzyme activity, and glucose uptake was mediated through the upregulation of ACC, GLUT-2, GLUT-4, IRS-1, and IRS-2 expression levels. Conclusion: Our findings suggest that the amaranth seed is a potential candidate to prevent a diabetes. The present study demonstrated the possibility of using amaranth seeds, especially GBA and BA for glycemic control.

분열형 효모에서 mas³ 유전자의 세포내 기능 연구

황미라,차재영,신상민,박종군,Hwang Mi Ra,Cha Jae Young,Shin Sang Min,Park Jong Kun 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.1

세포주기 조절에서 유전자 발현의 조절은 매우 중요한 부분이다. 본 연구에서는 인간의 유전자인 SMARCADl과 상동성을 가지는 분열형 효모의 새로운 유전자 $mas3^+$를 분리하였다. 이 두 유전자는 $87\%$의 상동성을 보인다. $mas3^+$유전자는 DEAD/H box를 포함한 7개의 motif를 가지고 있어서 helicase superfamily 중에서도 SNF2 family에 속한다. kanMX6를 선별 표지로 이용하여 $mas3^+$유전자 결손 세포를 구성하였고 $mas3^+$ 유전자 결손 세포는 UV와 MMS처리 실험에서 정상의 세포와 생존율이 비슷하여 DNA상해회복과는 관련이 없음을 알 수 있었다. $mas3^+$ 유전자의 세포주기별 발현 양을 분석한 결과 $G_2$단계부터 점차적으로 발현양이 늘어났다. $mas3^+$결손 돌연변이를 $26^{\circ}C$와 $35^{\circ}C$에서 배양한 결과, 비정상적인 세포질 분열 과정으로 인해 다중 격막 세포의 빈도가 증가하였다. 이상의 결과들은 $mas3^+$유전자는 세포질 분열과 세포형태 형성에 연관되어 있음을 시사한다. The regulation of gene expression plays an important rolet in cell cycle controls. In this study, a novel $mas3^+$ (mitosis associated protein) gene, a homolog of human SMARCADl, was isolated and characterized from a fission yeast Schizosaccharomyces pombe. The overall homology between the helicase proteins of the two species is $87\%$. This DEAD/H box-containing molecule has seven highly conserved sequence regions that allow us to place it in the SNF2 family of the helicase superfamily. Knock-out cell of $mas3^+$ gene was constructed using kanMX6 as a selection marker. Survival of mas3 null mutant exposed to UV or MMS was similar to those of wild type cells. $mas3^+$ expression was lowest at $G_2$ and gradually increased. Cytokinesis of mas3 null mutant was abnormal at $26^{\circ}C\;and\;35^{\circ}C$ and a large number of multi-septate cells were produced. These results indicate that the $mas3^+$ is involved in cytokinesis and cell shape control.

자외선A로 손상된 DNA의 회복과 DNCB에 의한 알러지성 접촉피부염에 대한 표고버섯과 침향 추출 혼합물의 효과

김민섭,황현익,이유리,김호원,박종군,Kim, Min Seob,Hwang, Hyun Ik,Lee, Yu Ri,Kim, Ho Won,Park, Jong Kun 한국식품영양학회 2015 韓國食品營養學會誌 Vol.28 No.5

The effects of extracts from Lentinula edodes (L. edodes) and Aquilariae agallocha (A. agallocha) on the DNA damage response in ultraviolet A (UVA)-exposed HaCaT cells and on the allergic contact dermatitis caused by 2,4-dinitro-chlorobezene (DNCB) were investigated. When UVA-exposed cells were incubated for 24 hours in medium containing L. edodes or A. agallocha extract, the level of 8-OHdG and CPD decreased in a concentration-dependent manner. The combined treatment with both extracts potentiated the decrease in UVA-induced 8-OHdG and CPD levels as compared with those following treatment with a single extract. In addition, the two extracts showed preventive effects against the UVA-induced reduction in collagen levels. Furthermore, the blood levels of IgE, IL-6, and histamine decreased more significantly upon combined treatment with L. edodes and A. agallocha extracts as compared with those following treatment with single extracts in DNCB-induced allergic contact dermatitis in the ICR mouse. The results of the present study suggest that the components with in the extracts of L. edodes and A. agallocha can help to prevent of UVA-induced genomic instability via a decrease in DNA damage, and to decrease the DNCB-induced allergic dermatitis via modulation of relevant proteins including IgE and IL-6. Further study is needed to clarify the purified components related to the preventative effects of the two extracts against UVA- or DNCB-induced genomic damage.

EFFECT OF GLYCYRRHETINIC ACID ON CYCLOSPORIN A-INDUCED CELL ACTIVITY OF CULTURED HUMAN GINGIVAL FIBROBLATS AND MOUSE 3T3 CELLS IN VITRO

유수경,김강주,신형식,박종군,Yoo, Soo-Kyong,Kim, Kang-Ju,Shin, Hyung-Shik,Park, Jong-Kun The Korean Academy of Periodontoloy 1994 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.24 No.3

배양한 치은섬유아세포와 3T3 세포에서, glycyrrhetinic acid가 cyclosporin A를 처리 세포의 활성에 미치는 영향을 알아보기 위해서 MTT 방법을 이용하여 측정하였다. Cyclosporin A는 $1{\sim}10ng/ml$의 농도에서 인체 치은 섬유아세포와 마우스 3T3 세포 활성을 증가시켰으며, glycyrrhetinic acid는 농도와 비례하게 마우스 3T3 세포의 성장을 억제시켰다. 특히 $25{\mu}g/ml$ 이상의 농도에서는 현저하게 억제시킴을 관찰할 수 있었다. 반면, 인체 치은 섬유아세포에서는 $50{\mu}g/ml$ 이상의 농도에서 조차도 성장을 억제 시키지 않았다. 또한, 마우스 3T3와 인체 치은 섬유아세포에서 일정한 cyclosporin A 농도에 $1-100{\mu}g/ml$의 다양한 농도로 glycyrrhetinic acid를 첨가하였을 때, cyclosporin A 단독으로 처리한 세포에 비하여 유의성 있게 세포의 활성을 억제시켰으며, 특히, $100{\mu}g/ml$의 glycyrrhetinic acid를 첨가하였을 경우 세포활성을 현저하게 억제시켰다. 3T3 세포에 cyclosporin A와 $50{\mu}g/ml$의 glycyrrhetinic acid를 함께 처리한 경우 glycyrrhetinic acid단독처리한 군에 비하여 세포활성에 첨가 효과를 보였으며, 인체 치은 섬유아세포 에서는 같이 처리한 경우 glycyrrhetinic acid단독 처리에 비하여 뚜렷한 억제 효과를 나타내었다. 이러한 상승효과는 1ng/ml 의 cyclosporin A와 $50{\mu}g/ml$ glycyrrhetinic acid를 같이 처리한 군에서 가장 뚜렷하게 관찰되었다. 이러한 결과로, 인체 치은 섬유아세포에 cyclosporin A와 glycyrrhetinic acid를 동에 처리하였을 경우 세포의 활성에 상승 효과가 있음을 알 수 있다.