DHPLC를 이용한 β₂-교감신경수용체 유전자에서의 돌연변이 분석

박상범,오충훈,김종완,장원철,Park, Sang-Bum,Oh, Chung-Hun,Kim, Jong-Wan,Jang, Won-Cheoul 한국분석과학회 2002 분석과학 Vol.15 No.3

본 연구에서는 ion-pair reversed-phase high performance liquid chromatography (IP-RP-HPLC)방식을 이용한 denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC)방법을 사용하여 기관지 천식을 조절하는 ${\beta}_2$-교감신경수용체 유전자의 돌연변이를 검출하였다. 50명의 천식 환자의 혈액에서 genomic DNA를 추출하여 중합효소연쇄반응 (polymerase chain reaction, PCR)을 이용해 증폭하고, 그 산물을 DHPLC로 분석한 결과, 50개의 시료 가운데 15개 (30%)의 돌연변이를 검출하였다. 최종적으로 유전자 염기서열결정법을 통해 DHPLC의 돌연변이 검출률이 정확함을 확인하였다. We analysed mutation of ${\beta}_2$-adrenergic receptor gene that controls bronchial asthma by denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC) according to ion-pair reversed-phase high performance liquid chromatography (IP-RP-HPLC). We extracted genomic DNA from 50 asthma patients, amplified DNA using PCR, and analysed PCR product by DHPLC. As a result, we obtained that mutation frequency was 15 (30%) among 50 cases. Consequently DHPLC mutation detection was confirmed that the result of direct sequencing was coincide exactly.

한국인 베체트 환자의 분자유전학적 연구

박상범,남윤형,박수민,이상현,안영창,조민호,김종규,최재구,김성규,장원철,Park, Sang-Bum,Nam, Youn-Hyoung,Park, Su-Min,Lee, Sang-Hyun,Ahn, Young-Chang,Cho, Min-Ho,Kim, Jong-Gyu,Choi, Jae-Gu,Kim, Seong-Kyu,Jang, Won-Cheoul 대한화학회 2007 대한화학회지 Vol.51 No.6

베체트 병은 여러 장기에서 발생하는 만성 염증성 질환이다. 베체트병에서 염증은 T-helper type 1 (Th1) 림프구에서 분비된 싸이토카인에 의해 유도된다. 베체트병의 발병원인이나 기전에 대해 확실히 밝 혀지지는 않았으나 유전적인 소인이 있는 사람에서 감염 등 환경적인 요인이 면역 반응에 이상을 일으켜 질병의 여러 증상이 발현된다. 주조직복합체(major histocompatibility complex, MHC)와 non-MHC gene 등 다양한 유전자들이 베체트병의 병인으로 관여한다. 이 연구에서는 HLA-B51, IL-18, SLC11A1, TNF-α의 유 전적 다형성이 한국인 베체트병의 감수성에 관여하는지를 확인하였다. 실험 결과, HLA-B51이 베체트병과 가장 연관성이 큰 유전인자로 나타났지만, HLA 분자가 베체트병의 직접접인 병인인지는 확실하지 않다. IL- 18은 베체트병 환자와 대조군 간에 연관성은 없었으나 안구병변을 가지고 있는 환자에서 -137 G/G 유전자 형이 높게 나타났다. SLC11A1 유전자에서 (GT)n의 다형성의 allele 3과 genotype allele 3/ allele 3이 한국 인 베체트병의 방어 효과를 갖는 것으로 추정된다. TNF-α gene의 유전자 다형성은 베체트병 감수성에 있 어서의 연관성을 찾지 못하였다. Behcet's disease (BD) is a chronic inflammatory disorder, involving several organs. Inflammation in the disease is thought to be mediated by cytokines derived from T-helper type 1 (Th1) lymphocytes. Although the exact pathogenesis for BD is not completely understood, it has been suggested that the disease is triggered in genetically susceptible individuals by environmental factors, such as microbial agents. It is noted that multiple genes, including MHC (major histocompatibility complex) and non-MHC genes, are implicated in the pathogenesis of BD. This study tries to determine whether HLA-B51, IL-18, SLC11A1 and TNF-α polymorphisms are associated with susceptibility to Behcet's disease in Koreans. As a results, HLA-B51 was a genetic factor with the strongest association with BD. But it is still uncertain whether this HLA molecule is directly involved in the pathogenesis of BD. Although the IL-18 gene polymorphisms were not associated with a susceptibility to BD in the Korean population, the patients carrying the GG genotype at position 137 had a higher risk of developing the ocular lesions. This study suggests that the allele 3 and the genotype allele 3 / allele 3 of 5'-promoter (GT)n polymorphism in the SLC11A1 gene may have a protective effect for the development of BD in the Korean population. There were no evidences for genetic association conferred by the TNF-α gene with respect to susceptibility to BD.

대장암에서 PCR-SSCP와 DHPLC를 이용한 p53 돌연변이의 검출

박상범,한상만,남윤형,장원철,Sang-Bum Park,Sang-Man Han,Youn-Hyoung Nam,Won-Cheoul Jang 대한화학회 2003 대한화학회지 Vol.47 No.5

p53 유전자의 변이는 다양한 인체암 중 가장 일반적인 유전자적 변화로 알려져 있으며, 양성에서 악성 대장암으로 전이되는 과정에서 연관이 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 PCR-SSCP와 DHPLC를 이용하여 대장암 환자의 조직에서 p53 유전자의 엑손 5-8에서 돌연변이를 분석하였다. SSCP에서는 50개의 샘플중 엑손 5에서 C13109>T 형태의 돌연변이가 7례가(14%) 발견되었고, DHPLC에서는 C13109>T 7례와 C13202>A, C13204>G 형태의 돌연변이 2례, 모두 9례의(18%) 변이가 검출되었다. DHPLC 분석법을 이용하여 SSCP에서 발견하지 못했던 2례(4%)의 변이를 더 발견하였다. 최종적으로 염기서열분석법을 통해 위의 결과를 확인하였고, p53 돌연변이 검출법으로 SSCP보다 DHPLC가 더 감도가 좋고 효과적인 검출법임을 확인하였다. Structural alteration of p53 and overexpression of p53 protein are the most common genetic abnormalities in various kinds of human cancer. Mutations in the p53 tumor-suppressor gene are usually associated with an advanced development of colorectal cancer characterized by the transition from the adenoma to carcinoma stage. Mutations in exons 5-8 of the p53 gene were analyzed by the polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism(PCR-SSCP) and denaturing high performance liquid chromatography(DHPLC). SSCP analysis detected 7 mutations(C13109>T) in 50 colorectal cancer samples(14%) at exon 5, and DHPLC analysis detected 7 mutations (C13109>T) and 2 mutation(C13202>A, C13204>G) in 50 colorectal cancer samples(18%) at exon 5. All of 9 mutations were proved by sequencing analysis. We conclude that DHPLC is a highly sensitive and specific method for p53 gene mutations.

뇨중 파라쿼트(paraquat)측정용 진단 시험지의 개발

박상범,장원철,김종완,Park Sang-Bum Park,Won-Cheoul Jang,Jong-Wan Kim 대한화학회 2003 대한화학회지 Vol.47 No.4

Paraquat는 가장 효과적이고 널리 사용되는 제초제이지만 인간에게 매우 유독한 물질이다. 중독환자에 있어 뇨중 농도는 가장 중요한 인자중의 하나로 알려져 있으나 일반 검사실에서 이를 위한 정량검사는 거의 시행되지 않고 있다. 본 연구에서는 sodium dithionite를 이용하여 뇨중의 paraquat의 농도를 측정하는 새로운 방법의 진단 시험지를 개발하였다. 이 이차유도성 방식을 사용하여 paraquat의 농도를 측정한 결과 $0.5{\%}$ borate 완충용액(pH 8.0), 유도체 0.25 M $Na_2S_2O_4,\0.1~0.8{\%}$ PolyVinyl Pyrrolidone(PVP) 안정제, $1{\%}$ decanol의 구성비로 만들어진 진단시험지의 반응 색상이 안정하며 표준 비색표에 의한 육안적인 감별은 물론 화학 자동분석기에서의 응용성이 좋았다. Paraquat is an effective and widely used herbicide, but it is also very toxic to humans. It is well-known that urine paraquat concentration is one of the most important prognostic indicator for paraquat-poisoning. Quantitative analysis of paraquat, however, are not generally used in clinical laboratories. In this work, a new test strip to detect paraquat concentration using sodium dithionite in urine was developed. Using these second-derivative method, the test strip prepared in $0.5{\%}$ borate buffer (pH 8.0), 0.25 M $Na_2S_2O_4,\0.1~0.8{\%}$ PVP, and $1{\%}$ decanol showed not only better color reaction but also an excellent application possibility to be used in automatic analyzer.

SSCP와 DHPLC에 의한 β₂-교감신경수용체 유전자의 돌연변이 분석

박상범,한상만,남윤형,장원철,Park, Sang-Bum,Han, Sang-Man,Nam, Youn-Hyoung,Jang, Won-Cheoul 한국분석과학회 2004 분석과학 Vol.17 No.1

현재 일반적으로 많이 사용되는 single strand conformation polymorphism (SSCP)나 denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE)같은 돌연변이 검출법은 많은 시간과 비용, 그리고 노동력이 소모된다는 단점과 실험자의 실험에 대한 숙련도에 의해 실험 결과가 달라지는 한계점을 가지고 있다. 이런 단점들을 보완하기 위하여 ion-pair reversed phase chromatography (IP-RPC)방식을 이용한 denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC)방법을 사용하여 기관지 천식 (bronchial asthma)을 조절하는 베타2-교감신경수용체 유전자의 돌연변이를 검출하였다. 80명의 천식 환자의 혈액에서 genomic DNA를 추출하여 중합효소연쇄반응 (polymerase chain reaction)을 이용해 증폭하고, 그 산물을 SSCP와 DHPLC로 분석하였다. 그 결과, 베타2-교감신경수용체 유전자에서 SSCP는 80명의 sample 가운데 19개 (23.75%)의 돌연변이를 검출하였고, DHPLC는 25개 (31.25%)의 변이를 검출하였다. 돌연변이 검출법으로 DHPLC 분석법이 SSCP보다 더 빠르고 효과적인 방법임을 확인하였다. Up to now, methods for the detection of genetic alterations as single strand conformation polymorphism (SSCP) or denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) have been used. It is too labor-intensive and expensive to serve for routine analysis. Moreover, lower in its sensitivity and specificity being also strongly dependent on the experience of the investigater. To improve these problems, we analysed mutation of ${\beta}_2$-adrenergic receptor gene that controls bronchial asthma by denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC) according to ion-pair reversed phase chromatography (IP-RPC). We extracted genomic DNA from 80 asthma patients and then amplified DNA using PCR and analysed PCR product by SSCP and DHPLC. As a result, we analysed mutation frequency is 19 (23.75%) on SSCP and 25 (31.25%) on DHPLC in ${\beta}_2$-adrenergic receptor gene. We conclude that DHPLC is a fast and simple screening method rather than SSCP analysis.

목재를 이용한 무할렬 숯잔 제조 및 발수특성

박상범(Sang Bum Park),이민(Min Lee) 한국가구학회 2014 한국가구학회지 Vol.25 No.3

With increased interests in environmental issues, people are looking for new materials that serve special and bio-activated functions. One of interesting materials is charcoal which has excellent adsorption ability for harmful volatile organic compounds, fireproof performance, far-infrared ray emission, and electromagnetic shielding. Since non-crack carbonized board was developed from wood-based composite materials, carbonization method might be applied to woodcraft products such as wood cup and bamboo. In this study, manufacture of wood charcoal bowl was conducted with carbonization method developed in 2009 in order to activate wood products market. Ash tree(Fraxinus rhynchophylla) cup was carbonized at 600℃ with two pretreatments which were phenol resin and wood tar solution treatment. After carbonization of ash tree cup, non-crack charcoal cup were successfully manufactured. Phenol resin treatment affected on charcoal cup manufacturing both positively and negatively. For a positive way, it prevented shrinkage. For a negative way, it decreased water repellency. On the contrary, wood tar treatment accelerated shrinkage a bit and increased water repellency. Based on the results, wood tar can be used as pre-treatment solution for reducing post-treatment costs. We confirmed woodcraft products can be carbonized without deformation, so carbonization may provide a high value-added products from wood.

뇌졸중 환자의 재활을 위한 인지적 중재전략으로서의 운동심상과 활동관찰

박상범 ( Sang Bum Park ),김미현 ( Mi Hyun Kim ) 한국특수체육학회 2005 한국특수체육학회지 Vol.13 No.2

제57회 일본목재학회대회

박상범 ( Sang Bum Park ),이상민 ( Sang Min Lee ) 한국목재공학회 2008 목재공학 Vol.36 No.1

인적자원의 네트워킹 능력이 기업 성과에 미치는 영향

박상범(Park, Sang Bum) 한국인사조직학회 2010 한국인사ㆍ조직학회 발표논문집 Vol.2010 No.1

본 연구는 기업의 경영성과에 대한 인적자원 제도와 경쟁력, 네트워킹 능력의 영향을 경험적으로 분석하였다. 인적자원 제도는 평가, 보상, 인사관리, 공정관리의네 범주로 분류하여 해당 제도의 운용 여부를, 경쟁력(주관적 성과)은 대고객역량,노사관계, 인적자원, 공정역량의 네 차원으로 구분하여, 각각 고객관계관리(CRM),협력적 노사관계(CLMR), 인적자원의 관리와 개발(HRM/D), 글로벌 네트워크 비즈니스(GNB) 등의 경영 의제에 대한 수용 능력과 제도의 수행 능력으로 파악하였다.본 분석에서는 기업의 조직구조 내에서 인적자원의 네트워킹 능력과 성과와의관련성에 주목하여 네트워크의 두 근본 속성인 연결성과 일관성의 영향력을, 인적자원 제도의 운용 여부와 경쟁력, 기업 특성 등과 함께 검증하였다.분석 결과는 세 가지로 요약된다. 첫째, 네트워킹 능력은 기업의 경쟁력과 성과모두에 다른 변수들 보다 가장 높은 영향력을 미친다. 둘째, 인적자원 제도는 기업의 성과 보다는 경쟁력을 향상시키는 데 기여한다. 셋째, 네트워킹 능력의 향상을통해 기업은 경쟁력과 성과를 높이고, 동시에 성과의 주관적 측면과 객관적 측면을연결 지을 인과상의 고리를 형성할 수 있다. This study explores the determinants of corporate performance by analyzing a on human capital corporate panel(HCCP) collected by the Korea Research Institute for Vocational Education and Training(KRIVET). Profits are the raison d'être of corporations. However, corporate performance is also influenced by the changes of the society and the renewed needs of stakeholder. I sought to examine such changes in the corporate environments by using a framework of path analysis. Specifically, this study sought to elucidate the effects of the networkability on the internal dimension of the corporations empirically. The networkability is a corporate internal ability related to the networks which performance depend on two fundamental attributes of the network: its connectedness and consistency. For analysing five pairs of hypotheses, a number of multi-regressions were developed. The results of the data analysis suggests the followings: (1) the networkability might be the most powerful determinant for both corporate competitiveness and financial performance; (2) the corporate human resource management institutions contribute to subjective and non-financial competitiveness rather than objective and financial performance; (3) by improving networkability, corporations are able to make up a virtuous circle that connects their competitiveness to performance.

제8회 환태평양 바이오복합재료 심포지엄

박상범 ( Sang Bum Park ) 한국목재공학회 2007 목재공학 Vol.35 No.1