활성화한 RAW 264.7 세포주에서 8-epi-xanthatin의 Nitric Oxide 생성저해

이화진(Hwa Jin Lee),정연수(Yeon Su Jeong),류시용(Shi Yong Ryu),류재하(Jae Ha Ryu) 대한약학회 1998 약학회지 Vol.42 No.5

The nitric oxide (NO) produced in large amounts by inducible nitric oxide synthase is known to be responsible for the vasodilation and hypotension observed in septic shock. We have found that 8-epi-xanthatin from Xanthium strumarium L. inhibited the production of NO in LPS-activated RAW 264.7 cells (IC50 value was 1.5 mcM). This activity was resulted from the suppressing of inducible nitric oxide synthase enzyme expression.

천연 Naphthoquinone계 Juglone의 KAPAS 저해 및 제초활성 특성

최정섭(Jung-Sup Choi),임희경(Hee-Kyung Lim),서보람(Bo-Ram Seo),김진석(Jin-Seog Kim),최춘환(Chung-Whan Choi),김영섭(Young-Sup Kim),류시용(Shi-Yong Ryu) 韓國雜草學會 2011 Weed&Turfgrass Science Vol.31 No.3

식물 유래 naphthoquinone 계 juglone의 신규 제초제 작용점 KAPAS에 대한 in vitro 및 in vivo에서의 활성 평가를 통해 천연물 유래 제초제로서의 가능을 검토하였다. Juglone은 농도의존적인 반응으로 KAPAS를 효과적으로 저해하였으며, 50% 저해농도는 9.5 μM이었다. 바랭이(Digitaria sanquinalis)에 대한 경엽처리에서 juglone 125, 250, 500 및 1,000㎍ mL-1 농도에서의 활성정도는 각각 70, 95, 100 및 100%이었다. 또한, 8종의 화본과 및 광엽잡초에 대한 juglone 2,000 및 1,000 ㎍ mL-1 농도에서의 살초력은 완전하였으며(100%), 500㎍ mL-1에서도 90~100%이었다. Juglone을 처리했을 때 나타나는 주요 증상은 고사(desiccation) 또는 화염상(burndown) 이었다. Juglone 처리에 의한 전해물질 누출은 광조건에 관계없이 농도의존적으로 일어났으나, 엽록소 함량 감소 정도는 광조건에서도 경미한 수준이었으며, 암 조건에서는 전혀 일어나지 않았다. Juglone에 의해 억제되었던 애기장대 종자의 발아율은 biotin 공급에 의해 뚜렷하게 회복되었다. 이상의 실험결과에 의하면 천연 naphthoquinone계 juglone은 신규 제초제 작용점 KAPAS 를 효과적으로 저해하는 친환경적인 천연물 유래 제초제로서의 가능성을 확인하였다. The potential of juglone a plant naphthoquinone as a natural herbicide on new target, 7-keto-8-amino pelargonic acid synthetase (KAPAS) in the early step of biotin biosynthesis pathway, was performed in vitro and in vivo. Juglone effectively inhibited KAPAS activities in vitro and the IC50 was 9.5 μM. Foliar application of juglone showed very good herbicidal activity to the eight-tested weed species. Among them, Solanum nigrum was completely controlled at a concentration of 250 μg mL-1 with main symptoms of desiccation or burndown. Digitaria sanguinalis and Aeschynomene indica were also sensitive to juglone treatment. All eight weed species were controlled by 90∼100% at a concentration of 500 μg mL-1. However, soil application of juglone to Digitaria sanguinalis did not show any herbicidal symptoms. Cellular leakage from cucumber leaf squares treated with juglone increased depending on the concentrations increased from 6.25 to 100 μM after 24 hours incubation with or without light. However, chlorophyll loss in cucumber leaf squares was negligible. Biotin supplements significantly rescued the inhibition of germination rate of Arabidopsis thaliana seeds previously inhibited by the juglone. Our results suggest that the juglone is a possible environmental friendly herbicide candidate with a new target KAPAS inhibiting activity.

천연물 유래 5,8-dihydroxy-1,4-naphthoquinone의 살초특성과 작용기구

최정섭(Jung-Sup Choi),김지연(Ji-Yeon Kim),서보람(Bo-Ram Seo),고영관(Young-Kwan Ko),차미란(Mi-Ran Cha),김영섭(Young-Sup Kim),류시용(Shi-Yong Ryu),황인택(In-Taek Hwang) 韓國雜草學會 2011 Weed&Turfgrass Science Vol.31 No.3

본 실험은 식물에서 유래한 천연 naphthoquinone 계 5,8-dihydroxy-1,4-naphthoquinone(DHNQ)의 온실조건에서의 제초활성 정도를 평가하고 효소활성 저해를 포함한 생리·생화학적인 규명을 통해 살초특성을 알아보고자 수행하였다. 온실조건에서 바랭이(digitaria sanquinalis)에 대한 경엽처리에서 DHNQ 125, 250, 500 및 1,000㎍ mL-1 농도에서의 활성정도는 각각 60, 70, 95 및 100% 이었다. 돌피를 포함한 화본과 잡초 3종과 까마중을 포함한 5종의 광엽 잡초에 대한 살초활성 평가에서 2,000 및 1000㎍ mL-1농도에서는 완전방제되었고, 500㎍ mL-1수준에서는 70~100%이었다. 주요 증상은 화염상(burndown)이었고, 약제 처리 24시간 이내에 활성이 나타나 속효성이지만 완전하게 방제되지 않은 개체에서는 처리 5일 이후에 재생되었다. DHNQ를 처리했을 때 KAPAS를 농도의존으로 저해하였으며, 50% 저해농도는 4.4 μM이었다. 엽절편으로부터의 전해물질 누출은 광·암 조건에 관계없이 농도 의존적으로 증가되었으나 누출된 총량은 상대적으로 적었다. DHNQ은 광·암 조건에 관계없이 엽록소 함량 감소는 거의 일어나지 않았다. 한편, DHNQ에 의해 억제되었던 애기장대 종자 발아율은 biotin을 공급해 줌으로서 크게 증가되었다. 이상의 실험의 결과에 의하면 천연 naphthoquinone 계 DHNQ 는 식물체 내로의 흡수 또는 침투성을 증가시킬 수 있는 제형개발을 통해 살초력을 증가시킬 수 있는 방안이 강구된다면 신규 제초제 작용점으로 발굴한 KAPAS를 효과적으로 저해하는 친환경적인 천연물 유래 제초제로서의 가능성을 확인하였다. This study was conducted to assess the possibility of 5,8-dihydroxy-1,4- naphthoquinone (DHNQ) as a environmental friendly herbicide candidate. Foliar application of DHNQ showed excellent herbicidal effect to the 3 grasses and 5 broad-leaved weeds. Among them, Digitaria sanguinalis and Solanum nigrum were completely controlled by 250 μg mL-1 of DHNQ with main symptoms of desiccation or burndown within 24 hours. Aeschynomene indica was also sensitive to DHNQ treatment. All of the eight weed species were controlled by 90∼100% at a concentration of 1,000 μg mL-1. However, soil application of DHNQ to Digitaria sanguinalis did not show any herbicidal symptoms. DHNQ strongly inhibited KAPAS activities in vitro and the IC50 was 4.4 μM. Cellular leakage from cucumber leaf squares treated with DHNQ increased depending on the concentrations increased from 6.25 to 100 μM after 24 hours incubation with or without light. However, chlorophyll loss in cucumber leaf squares was negligible. Biotin supplements significantly rescued the inhibition of germination rate of Arabidopsis thaliana seeds previously inhibited by the DHNQ. According to above results, DHNQ is a good natural herbicide candidate having a new target KAPAS, which is involved in biotin biosynthesis pathway, with environmental friendly.

In vitro antitumor activity of flavonoids from Sophora flavescens

Ryu, Shi Yong 대전대학교 韓醫學연구소 1997 한의학연구소 논문집 Vol.5 No.2

The cytotoxicity-guided fractionation of the roots of Sophora flavescens (Leguminosae) extracts led to the isolation of fifteen active principles 1∼15, responsible for the cytotoxicity against five kinds of cultured human tumor cell lines, i.e., A549(non small cell lung), SK-OV-3(ovary), SK-MEL-2(skin), XF498(central nerve system) and HCT-15(colon), evaluated by SRB method in vitro. Compounds 2∼14 were classified as unusual flavonoid occurred exclusively in this species and the proliferation of each examined tumor cells were significantly inhibited during the continuous exposure to compounds 1∼15 for 48 hours, respectively.

白花蛇舌草 헥산分劃과 多糖體가 抗癌 및 抗轉移 活性에 미치는 影響 : Ursolic acid와 Asperuloside 병용투여시 항암 및 항전이 효과에 관한 연구

宋圭鏞,柳時容,金聖勳 대한동의병리학회 1999 동의생리병리학회지 Vol.13 No.1

산업기술의 발달로 인한 삶의 질의 향상과 더불어 현대의학의 발달에도 불구하고 아직도 불치의 병으로 여겨지고 있는 암에 의한 사망률은 계속 증가되고 있는 추세로 암을 치유하기 위한 연구가 활발히 전개되고 있다. 백화사설초는 항암 본초로 분류되어 암치료를 위해 한방처방에 가미되어 응용되고 있다. 그러나 백화사설초의 성분에 대한 연구는 미흡한 실정이다. 이런 점을 감안하여 본 연구실에서는 백화사설초의 용매 분획 중 헥산 분획이 수종의 암세포에 대해서 세포독성이 있음을 발견하고 물질분리를 실시하여 물질을 단리한 후 물리·화학적인 방법을 통하여 구조를 확인 한 결과 ursolic acid(UA)가 효과를 나타내는 물질이라는 것을 밝혔다. 따라서 UA의 구체적인 항암 및 항전이 효과를 검증하기 위하여 수종의 암세포에 대한 세포독성, 부착저지효과, 폐암전이 억제효과, 혈관형성 억제효과, 암전이에 관련된 유전자인 MMP-2의 발현 정도를 살펴보았고 면역세포에 미치는 영향은 물론 배당체인 asperuloside(AS)를 분리하여 UA와 병용투여하므로써 항암 및 항전이 활성의 변화를 관찰하여 항암제로서의 가능성을 타진하고자 하였다. 실험결과 UA는 수종의 암세포에 농도의존적으로 암의 성장을 억제하였으며, AS의 병용투여시 상승적인 세포독성 효과를 발휘하지 않았다. 그러나 세포부착 저지효과, 혈관형성 억제효과 및 폐암전이 효과와 같은 암전이에 관련된 실험에서 AS는 UA의 효과를 상승적으로 증가시켰을 뿐만아니라 면역세포에 대해서도 증가효과를 나타냈다. 이상의 결과로부터 UA는 항암 및 항전이 효과가 있음을 발견하였으며, AS와 같은 배당체의 병용투여는 이러한 항암 및 항전이 효과를 증가시키는 것으로 보아 암에 유효하게 사용될 수 있으리라 사료된다. Ursolic acid(UA), isolated from the Oldenlandia diffusa(Rubiaceae), is a triterpenoid compound that exist widely in food, medicinal herbs, and other plants and has been recognized to have a wide spectrum of pharmacological activity such as antiinflammatory effect, anti-HIV activity, antihyperlipidemic activity, and antitumor activity. Ursolic acid was treated either alone or in combination with asperuloside(AS), irridoidal glycoside, for the evaluation of antitumor and antimetastatic effects by several experimental parameters, for example, cytotoxicity against various cancer cell line, clonogenic assay, antiadhesion assay, CAM assay, pulmonary colonization assay, MMP-2 expression, and immunological analysis by FACS. The results were obtained as follows; Ursolic acid showed a potent cytotoxic activity in a dose dependent manner against SF295, SK-OV-3, HCT15, and UN-2 cancer cell lines, while combined treatmenmt of UA & AS didn't. However, UA & AS were more effectiv than UA only in inhibitory effect on cell adhesion of A549 cells to complex extracellular matrix in vitro and pulomonary colonization assay by B16BL/6 in vivo. In the clonogenic assay UA & AS more effectively inhibited colony formation by A549 synergistically to 97% than UA to 78%. By analysis by FACS UA & AS activated CD4(T helper cell) and CDB(cytotoxic T cell) as well as macrophage while UA activated macrophage only. UA and AS suppressed MMP-2 gene expression more effectively than UA only in a dose dependent manner. These results suggest that combined therapy of ursolic acid and asperuloside showed antitumor and antimetastatic effects than ursolic aicd only so that Oldenlandiae diffusae Herba can be effectively applied for the prevention and treatment of cancer. It also is very necessary that biological activities and their mechanism should be kept studying between different constituents isolated from same plant.

Induction of Apoptosis by Yomogin in Human Promyelocytic Leukemic HL-60 Cells

JEONG, Seoung-Hee,KOO, Sung-Ja,HA, Joo-Hun,RYU, Shi-Yong,PARK, Hee-Juhn,LEE, Kyung-Tae WHO COLLABORATING CENTRE FOR TRADITIONAL MEDICINE 2004 東西醫學硏究所 論文集 Vol.2004 No.-

Yomogin is an active compound isolated from Artemisia princep, a traditional Oriental medicinal herb, which has been shown to inhibit tumor cell proliferation. In this study, we investigated the effects of yomogin on the cytotoxicity, induction of apoptosis, and putative pathways of its actions in human promyelocytic leukemia cells. Yomogin-treated HL-60 cells displayed several features of apoptosis, including DNA fragmentation, formation of DNA ladders in agarose gel electrophoresis, and externalization of annexin-V targeted phosphatidylserine residues. We observed that yomogin caused activation of caspase-8, caspase-9, and caspase-3. A general caspase inhibitor (z-VAD-fmk), caspase-8 inhibitor (z-IETD-fmk) and caspase-3 inhibitor (z-DEVD-fmk), almost completely suppressed the yomogin-induced DNA fragmentation. We further demonstrated that yomogin induced Bid cleavage, mitochondrial translocation of Bax from the cytosol, and cytochrome c release from mitochondria in a caspase-8-dependent manner. Taken together, our data indicate that yomogin is a potent inducer of apoptosis and facilitates its activity via caspase-8 activation, Bid cleavage, Bax translocation to mitochondria, and subsequent release of cytochrome c into the cytoplasm, providing a potential mechanism for the anticancer activity of yomogin.