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밤나무 꽃과 잎의 화학성분 및 항균활성 검색 -제2보. 항균활성 검색-
김해영,조규성,Kim, Hae-Yeong,Cho, Gyu-Seong 한국응용생명화학회 2003 한국농화학회지 Vol.46 No.3
밤나무의 밤꽃과 밤잎의 항균활성 효과를 조사하기 위하여, 시료를 80% methanol로 추출하여 용매분획을 하였다. 용매분획별 수율은 밤꽃에서 ethylacetate 1.94%, methanol 4.75% 및 water 7.81%였고, 밤잎은 ethylacetate 2.24%, methanol 5.03% 및 water 8.47%였다. 밤꽃과 밤잎의 methanol 분획 추출물은 Gram양성 및 음성의 모든 균주에서 강한 항균활성을 보였으며, ethylacetate 및 water 분획 추출물은 약한 항균활성을 보였다. 최소저해농도는 $60\;{\mu}g/disc$ 이상에서 항균력이 인정되었다. Bacillus. subtilis에 대한 생육저해 효과는 control에 비하여 밤꽂과 밤잎 추출물은 모두 낮은 생육저해 효과를 보였으며, 또한 각 추출물은 모두 배양 15시간까지는 현저히 낮은 생육저해를 보이다가 그 후는 약간 높아졌다. 밤꽃 추출물에서는 methanol 추출물이 가장 높은 생육저해효과를 보인 반면에, water 추출물은 다른 추출물에 비하여 낮은 생육저해를 보였으며, 밤잎 추출물은 각 추출물에서 거의 비슷한 생육저해를 보였다. 밤꽃과 밤잎의 methanol 분획 추출물을 B. subtilis에 각각 500 ppm씩 처리한 후, 주사전자현미경(SEM)으로 관찰한 결과, 추출물을 처리하지 아니한 경우는 전형적인 Bacilli의 형태를 보였지만, methanol 분획추출물을 처리한 경우는 세포의 형태가 일그러지고 손상을 입은 형태를 보였다. Chestnut (Casranea crenata S. et Z.) leaves and flowers were extracted with 80% methanol and then fractionated with ethylacetate, methanol and water. Their antimicrobial activities in each fraction were investigated. Methanol fraction of the chestnut leaves and flower showed strong antimicrbial activities against both of Gram positive and Gram negative bacteria. The ethylacetate and water fraction, however, showed only weak antimicrobial activities when the antimicrobial activities were occurred. Minimal inhibitory concentration (MIC) of the methanol extracts of the chestnut leaves and flowers against 5 strains of Gram positive and Gram negative bacteria were at $60\;{\mu}g/disc$. The extracts of the chestnut leaves and flowers inhibited the growth of Bacillus subtilis at 0.5% (w/w) concentration. In order to investigate the effect of extraction methods on the B. subtilis, scanning electron microscope was used. The B. subtilis was damaged when the methanol extracts of the chestnut leves and flowers were at 500 ppm.
5'-Untranslated Region 에 존재하는 Iron Responsive Element 에 의한 Ferritin 합성조절
김해영,정인식,이중림 ( Hae Yeong Kim,In Sik Chung,Jung Lim Lee ) 한국응용생명화학회 1998 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.41 No.3
The expression of ferritin involved in iron metabolism is regulated at the translational level by the interaction of iron regulatory protein with iron-responsive element(IRE) in the 5`-untranslated region of ferritin transcript. To identify the role of structural element utilized for translational regulation of ferritin, we studied the effects of mutations in the ferritin IRE by measuring IRP binding activity and translational activity. Our data suggest that the cytosine at bulged position of IRE within ferritin is important for the formation of RNA secondary structure involved in translational regulation.
쌀전분(澱粉) 분해물(分解物) 분석(分析)에 의한 세균성(細菌性) ${\alpha}-Amylase$의 작용(作用) 특성(特性)
김해영,박관화,Kim, Hae-Yeong,Park, Kwan-Hwa 한국응용생명화학회 1986 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.29 No.3
쌀의 생전분(生澱粉) 상태와 호화전분(糊化澱粉) 상태에 대한 전분분해효소의 작용특성과 이용방법(利用方法)을 조사하기 위하여 생전분과 호화전분에 세균성 ${\alpha}-amylase$ 및 glucoamylase를 처리하고, 생성되는 당의 종류를 정량하였다. 생전분에 ${\alpha}-amylase$를 작용시켰을 때에는 glucose(45%), maltese(33%), maltotriose(19%), maltotetrose 이상의 당류(3%) 등의 순서로 생성되었고, 호화전분에 작용(作用)했을 때에는 maltotriose(31%), maltose(31%), maltotetrose 이상의 고당류 (22%), glucose (15%)의 순서로 생성(生成)되었다. 한편 glucoamylase를 처리하였을 때에는 생전분과 호화전분에서 다같이 주로 glucose가 생성되었다. 전자현미경으로 분해된 상태를 확인한 결과, 생전분은 ${\alpha}-amylase$에 의하여 pinhole이 생성되고 전분입자의 표면침식이 잘되있고, 호화전분은 입자의 중앙부위에 공동(空洞)이 생성(生成)되었다. 이상의 결과(結果)로 보아 세균성 ${\alpha}-amylase$는 생전분 입자의 표면에 작용하여 말단기부터 glucose 및 maltose 단위로 분해하며 호화된 전분입자에는 임의의 장소에서 전분을 가수분해함을 알 수 있었다. The product specificity of Bacillus ${\alpha}-amylase$ on raw rice starch has teen studied by using HPLC and scanning electron microscopy (SEM). Analysis of starch degradation products digested by ${\alpha}-amylase$ showed considerable differences between raw and gelatinized rice. The hydrolysis of raw rice starch resulted in formation of more glucose and maltose than those of gelatinized starch. SEM revealed characteristic enzyme degradation patterns. Hollow curvatures were observed in gelatinized starch, indicating the substrate is hydrolyzed in the interior of the starch chain by Bacillus ${\alpha}-amylase$. In contrast, raw starch were hydrolyzed from the end of the substrate, resulting in pinholes over the surface of the starch granules.
PCR을 이용한 식품 내 Salmonella 균주의 신속 검출방법
정상훈 ( Jeong Sang Hun ),김묘영 ( Kim Myo Yeong ),김현중 ( Kim Hyeon Jung ),김태운 ( Kim Tae Un ),유상렬 ( Yu Sang Lyeol ),김해영 ( Kim Hae Yeong ) 한국응용생명화학회 2003 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.46 No.3
This study was carried out to investigate the simple and rapid detection of Salmonella species in different kinds of food using PCR method. The specific primer sets (STN1 and STN2) was designed and utilized to amplify a 617 bp DNA fragment from Salmonella species. The sensitivity of PCR was 1 pg of purified template DNA or 10² cells from pure culture. The detection limit of Salmonella typhimurium on agarose gel electrophoresis was 10³~10⁴cells/g in the artificially contaminated food samples. These results suggested that this simple method could be applied to industrial fields for detection of Salmonella species in food.
김재환,김영록,김해영,Kim, Jae-Hwan,Kim, Young-Rok,Kim, Hae-Yeong 한국식물생명공학회 2011 식물생명공학회지 Vol.38 No.2
1994년 처음으로 GM 토마토인 Flavr Savr가 시장에 나온 이후, 2010년 현재 140여 품목의 GM식물이 전 세계적으로 상업화되었다. GM식물들에 대한 안전성 승인여부의 확인 및 표시제관리를 위하여 이들 GM식물내로 도입된 삽입유전자의 정보를 이용한 검정방법이 도입되었으며, 또한 도입유전자의 발현된 단백질을 분석하기 위하여 정성 및 정량을 위한 면역학적 방법이 도입되었다. 본 총설에서는 국내 외적으로 개발된 콩, 옥수수, 카놀라, 면화 등의 GM식물에 적용된 multiplex PCR, real-time PCR 방법과 최신 개발 중인 microarray, 나노기술 등을 활용한 방법들을 조사하였다. Since the first commercial GM plant, the FlavrSavr tomato, authorized in 1994, more than 140 GM plants were authorized for marketing globally. For the authorization and labelling of GM plants, the detection methods for genes introduced and proteins expressed in GM plants were developed qualitatively and quantitatively. This review presented the detection methods, conventional PCR, multiplex PCR and real-time PCR, for soybean, maize, canola and cotton as the dominant GM plants. Also, microarray assay and nanotechnology as new approaches for detection methods for GM plants were investigated.
토양에서 분리한 국내 미기록종 Pseudomonas 속 6종의 생화학적 특성과 계통 분류
김현중,정유정,김해영,허문석,Kim, Hyun-Joong,Jung, You-Jung,Kim, Hae-Yeong,Hur, Moonsuk 한국미생물학회 2019 미생물학회지 Vol.55 No.1
생명공학산업의 주요한 자원인 미생물의 가치는 날로 증대하고 있으며, 이로 인해 생물자원을 확보하기 위한 국가간의 경쟁은 심화되고 있다. 이에 다양한 환경에서 미생물자원을 발굴하고 특성을 확인하는 것은 미래의 잠재적 생물자원을 확보하는데 큰 의미가 있다. 본 연구에서는 Pseudomonas속에 속하는 6종의 미생물들을 일반 토양에서 분리하여 분자계통학적 분석을 통해 국내 미기록종임을 확인하였다. 본 연구로 확보된 미생물들은 자생 생물자원의 다양성을 늘리고, 산업계에 생물자원의 선택의 폭을 늘리는데 도움이 될 것으로 기대된다. In 2017, as a study to discover indigenous prokaryotic species in Korea, a total of 6 bacterial strains assigned to the genus Pseudomonas were isolated from soil. From the high 16S rRNA gene sequence similarity (${\geq}99.5%$) and phylogenetic analysis with closely related species, the isolated strains were identified as independent Pseudomonas species which were unrecorded in Korea. The six Pseudomonas species were Pseudomonas mandelii, P. canadensis, P. thivervalensis, P. jessenii, P. lurida, and P. brenneri. Gram reaction, culture conditions, colony and cell morphology, basic physiological and biochemical characteristics are described in the species description section.
5'-Untranslated Region에 존재하는 Iron Responsive Element에 의한 Ferritin 합성조절
정인식,이중림,김해영,Chung, In-Sik,Lee, Jung-Lim,Kim, Hae-Yeong 한국응용생명화학회 1998 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.33 No.2
철의 대사과정에 관여하는 ferritin 단백질의 발현은 ferritin transcript의 5'-untranslated region에 위치한 iron-responsive element (IRE)와 철 농도 조절 단백질의 결합에 의해 조절된다. 이러한 ferritin의 생성에 관여하는 구조적인 요소를 밝히기 위해, RNA 이차구조인 IRE의 bulge 부분을 다른 염기로 변환시켜 철 농도 조절단백질에 의한 RNA 결합력과 ferritin 단백질의 생성의 저해정도를 비교 측정하였다. 측정된 결과로부터 IRE의 bulge 부분의 시토신 염기배열만이 RNA 이차구조의 형성에 중요한 작용을 하여 ferritin 합성을 조절할 수 있는 것을 보였다. The expression of ferritin involved in iron metabolism is regulated at the translational level by the interaction of iron regulatory protein with iron-responsive element(IRE) in the 5'-untranslated region of ferritin transcript. To identify the role of structural element utilized for translational regulation of ferritin, we studied the effects of mutations in the ferritin IRE by measuring IRP binding activity and translational activity. Our data suggest that the cytosine at bulged position of IRE within ferritin is important for the formation of RNA secondary structure involved in translational regulation.