진드기의 기생이 많은 목장에서의 Theileria sergenti 감염유우의 분만후 혈액상 및 필유량의 변동에 관한 연구

김인철,손제영 ( In Cheul Kim,Jae Young Son ) 한국축산학회 1984 한국축산학회지 Vol.26 No.2

This study was conducted to investigate on the change of blood values and milk yield after parturition in a Holstein herd infected with Theileria sergenti (T. sergenti) in Chung-nam area where tick population is dense. Nineteen cows were selected randomly from May 4, 1982 to June 7, 1982. The cows were examined for number of parasitized erythrocytes, number of erythrocytes, hemoglobin concentration, hematocrit values, number of leukocytes, percent of differential leukocytes and total plasma protein at the one week before, and 2 days, one month and two months after parturition. 1. The number of T. sergenti in the peripheral blood of the cows infected with T. sergenti at one month after parturition increased, and the number of erythrocytes, hemoglobin concentration and hematocrit values of that were decreased. 2. The cows found higher number of T. sergenti in the peripheral blood before parturition appeared lower erythrocyte counts, hemoglobin concentration and hematocrit values after parturition, and lower mills yield by 60 days after parturition compared to the cows found lower number of T. sergenti before parturition. 3. The cows found higher number of T. sergenti at two months after parturition also resulted in lower hematocrit values(p≤0.05), and tend to be lower erythrocyte counts, hemoglobin concentration, and lower milk yield from 30 days after parturition compared to the cows with lower number of T. sergenti at that time. 4. The number of T. sergenti in the peripheral blood of 3rd to 6th lactation cows was higher than that of 1st and 2nd lactation cows, and the erythrocyte counts, hemoglobin concentration and hematocrit values of 3rd to 6th lactation cows were lower than those of lst and 2nd lactation cows. The 2nd lactation cows showed the highest daily milk yield among the lactation period. 5. The number of total leukocytes increased slightly without effect parturition, but the eosinophile decreased at the second day after parturition. 6. The total plasma protein increased at the first and second month after partuation.

진드기의 기생이 적은 목장에서의 Theileria sergenti 감염유우의 분만후 혈액상 및 비유량의 변동에 관한 연구

김인철,손제영 ( In Cheul Kim,Jae Young Son ) 한국축산학회 1983 한국축산학회지 Vol.25 No.5

This study was conducted to investigate on the change of blood values and milk yield after parturition in a Holtein herd infected with Theileria sergenti in Gyeong-buk area where tick population is sparse. Two Holstein cows distinguished anemic symptom were compared to normal cows on the blood values and milk yield after parturition. Erythrocyte counts, hemoglobin determinations, hematocrit values and daily milk yield of the two anemic symptom cows showed lower than those of the normal cows after parturition. Several heads among the cows showed severe Theileriosis, but some of them showed only slight symptoms after parturition.

단위가축영양 : 수퇘지의 정액 성상과 혈중 항산화물 농도에 대한 통마늘분말 급여의 영향

김인철 ( In Cheul Kim ),조규호 ( Kyu Ho Cho ),이성대 ( Sung Dae Lee ),이상철 ( Sang Cheul Lee ),홍준기 ( Joon Ki Hong ),박준철 ( Jun Cheoi Park ),류재원 ( Jae Weon Ryu ),사수진 ( Soo Jin Sa ) 한국동물자원과학회 ( 구 한국축산학회 ) 2010 한국축산학회지 Vol.52 No.5

본 연구는 통마늘분말의 급여가 수퇘지의 정액 성상과 혈중 항산 화물 농도에 미치는 영향을 구명하기 위해 12개월령의 듀록종 수퇘지 9두를 공시하여 시험사료만을 급여한 대조구(4두)와 시험사료에 0.3% 통마늘분말을 첨가하여 급여한 실험구(5두)를 이용해 13주간 수행되었다. 통마늘분말의 급여가 수퇘지의 정액생산량과 정자농도에 미치는 영향을 8주간에 걸쳐 평가한 결과, 정액생산량에서는 통마늘분말 급여 여부에 따른 차이를 보이지 않았으나, 수퇘지 정액의 평균 총정자수는 0~4주의 평균 총정자수는 통마늘분말 급여여부에 상관없이 차이가 없었다. 그러나, 5~8주에 채취된 정액의 평균 총정자수는 통마늘분말을 급여한 실험구가 대조구에 비해 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05). 통마늘분말 급여가 수퇘지의 성욕에 미치는 영향을 알아보기 연속 사정횟수와 전체 사출정액에 대한 총정자수를 조사한 결과, 통마늘분말을 급여한 실험구가 대조구에 비해 사정횟수와 총정자수가 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05). 수퇘지에 대한 통마늘분말의 급여가 정장 및 혈장 내 polyphenol 농도에 미치는 영향에서는 정장 내에서의 polyphenol 농도는 통마늘분말 급여여부에 상관없이 차이를 보이지 않았다. 그러나, 혈장 내에서의 polyphenol 농도는 9주, 12주 및 13주차에 통마늘분말을 급여한 실험구가 대조구에 비해 유의적으로 높은 수치를 나타내었다(P<0.05). 본 실험의 결과를 종합하면, 정액채취용 수퇘지에 대한 통마늘분말의 급여는 성욕의 향상에 영향을 미쳐 정액채취빈도와 정액내 총 정자수를 증가시키고, 혈액 내 항산화물 농도를 높이는 것으로 나타나, 통마늘분말이 정액채취용 수퇘지의 성적을 향상시키는데 사료적 가치가 있는 것으로 사료된다. The objective of this study was to determine the effects of dietary supplementation of whole garlic powder (WGP) on semen characteristics and blood antioxidant level in boars. For this study, nine Duroc boars of 12 months age were used. Semen and blood samples were collected for 13 weeks, once in each week. The boars were fed the basal diet (BD; control) or BD supplemented with 3% WGP. There were no significant differences in the semen volume and sperm concentration between control and WGP group on all collection weeks. However, total sperm number per ejaculate was higher in the WGP group than that in the control group on collection weeks 6, 7 and 8 (P<0.05). Also, on collection weeks 5, 6, 7 and 8, mean of total ejaculated sperm numbers per boar were significantly higher in the WGP group compared to control group (P<0.05). On the other hand, ejaculation frequency per boar (boar`s libido) and total ejaculated sperm number per boar were significantly increased in the WGP group compared to the control group, respectively (P<O.05). Although there was no difference in polyphenol level in seminal plasma between two treatment groups, polyphenol level in blood serum was significantly higher in the WGP group on collection weeks 9, 12 and 13 (P<0.05). These results indicate that dietary supplementation of 3% WGP improves boar libido and semen productivity such as ejaculation frequency per boar, total sperm number per ejaculate, mean of total ejaculated sperm number per head. and elevate the blood level of antioxidant (polvphenon in boar serum.

In vitro 발효에서 Prebiotics와 Probiotics가 돼지 장내미생물과 발효산물에 미치는 영향

김동운,채수진,김영화,정현정,이성대,박준철,조규호,사수진,김인철,김인호,Kim, Dong-Woon,Chae, Su-Jin,Kim, Young-Hwa,Jung, Hyun-Jung,Lee, Sung-Dae,Park, Jun-Cheol,Cho, Kyu-Ho,Sa, Soo-Jin,Kim, In-Cheul,Kim, In-Ho 한국미생물학회 2013 미생물학회지 Vol.49 No.1

본 연구는 prebiotics와 probiotics가 in vitro 배양조건에서 돼지 장내 미생물 및 발효산물에 미치는 영향에 대하여 검토 하였다. prebiotics로써 이소말토-올리고당(IMO), 부분분해 치커리이눌린(CI), 라피노스(RA), 사이클로덱스트린(CD)을 사용하였으며 probiotics로는 Lactobacillus reuteri를 사용하였다. In vitro 발효시험은 육성돈 사료를 소화효소로 가수분해 시킨 사료와 5%의 돈분 그리고 prebiotics와 probiotics를 첨가 또는 무첨가하여 24시간 동안 배양시켰다. 배양 후 발효액 내의 미생물, 가스, pH, 암모니아, 황화수소, 단쇄지방산을 분석하였다. 엔테로박테리아는 prebiotics와 probiotics 첨가구가 대조구와 비교하여 유의적으로 감소하였으며, 락토바실러스 수는 유의적으로 증가하였다. 발효액의 pH는 대조구에 비하여 첨가구에서 낮았으며 prebiotics보다 prebiotics+probiotics 첨가구에서 더욱 낮았다. 암모니아, 황화수소 및 스카톨의 농도는 prebiotics+probiotics 구보다 prebiotics 첨가시 유의적으로 감소하였다. 단쇄지방산은 prebiotics 보다 prebiotics+probiotics 구에서 유의적으로 많이 생성되었다. 본 시험의 결과 prebiotics 첨가는 암모니아, 황화수소 및 스카톨의 농도를 감소시키는데 효과가 있었으며, prebiotics+probiotics는 유산균과 단쇄지방산의 농도를 증가시키는 효과가 있었다. In vitro에서 얻어진 실험 결과가 실제로 돼지에 급여 시 같은 결과가 얻어질런지에 대한 추가적인 연구가 필요하다. In the present study, the effects of prebiotics and prebiotics+probiotics on intestinal microflora and fermentation products were evaluated in a pig in vitro fermentation model. The substrates used in this study were iso-malto oligosaccharide (IMO), partially digested chicory-inulin (CI), raffinose (RA), and cyclodextrin (CD) as prebiotics and Lactobacillus reiteri as probiotics. For a pig in vitro fermentation, the experimental diet for growing pigs was predigested using digestive enzymes secreted by small intestine and this hydrolyzed diet was mixed with a buffer solution containing 5% fresh swine feces. The mixture was then incubated with either prebiotics or prebiotics+probiotics for 24 h. Samples were taken at 24 h, and viable counts of microflora, gas, pH, volatile organic compounds (VOCs) and short-chain fatty acid (SCFA) were analyzed. The viable count of Enterobacteriaceae was significantly decreased (p<0.001) in all treatments containing prebiotics and prebiotics+probiotics when compared to the control. However, the number of lactic acid bacteria increased in the prebiotics and prebiotics+probiotics treatment. The pH values in the fermentation fluid decreased in all treatments when compared to the control, and their effects were greater in the prebiotics+probiotics group than prebiotics group. Fermentation with prebiotics resulted in a reduction in malodorous compounds such as ammonia, hydrogen sulfide and skatole when compared to the prebiotics+probiotics group. Short-chain fatty acid production was also higher for treatment with prebiotics+probiotics than treatment with prebiotics. In conclusion, the results of this study demonstrated that fermentation with prebiotics was effective in reducing the formation of malodorous compounds and prebiotics+probiotics was effective in increasing lactic acid bacteria and SCFA and reducing the pH. Moreover, further studies will be needed to determine whether the results observed in the in vitro model would occur in pigs that ingest these prebiotics or probiotics.

단위가축영양 : 모돈에 대한 생강 및 황금 분말 급여가 초유와 혈청의 항산화력과 IgG 농도에 미치는 영향

김상범 ( Sang Bum Kim ),김인철 ( In Cheul Kim ),송영민 ( Young Min Song ),이성대 ( Sung Dae Lee ),정현정 ( Hyun Jung Jung ),박준철 ( Jun Cheol Park ),조성백 ( Sung Back Cho ) 한국동물자원과학회 ( 구 한국축산학회 ) 2010 한국축산학회지 Vol.52 No.5

본 연구에서는 생강과 황금 건조 분말의 급여가 모돈의 유질과 자돈의 면역력에 미치는 영향을 구명하고자 수행하였다. 공시동물은 2산차 F1 임신모돈 24두를 이용하였다. 시험사료는 대조구(CON) 사료에 생강건조분말(GDP)과 황금건조분말(SDP)를 0.3 % 대체하여 분만 전 30일부터 이유 21일까지 시험사료를 급여하였다. 모돈 혈청에서 항산화력과 IgG는 처리구간에 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 초유에서 항산화력은 처리구가 대조구보다 높은 수치를 나타내었지만, 처리구간의 유의적 차이를 나타내지 않았다. 초유의 IgG 함량은 GDP구가 다른 처리구에 비해 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05). 초유의 유성분 함량에서, 단백질 함량은 GDP구가 다른 처리구에 비해 유의적으로 높게 함유하였다 (P<0.05) 지방과 유당 함량은 처리구간에 유의적 차이를 나타내지 않았다. 초유의 아미노산 조성은 SDP구가 다른 처리구에 비해 각각의 아미노산 함량이 유의적으로 높게 나타났다. 0일령과 21일령에서 자돈 혈청의 항산화력은 처리구간에 유의적 차이를 나타내지 않았지만, 다른 구에 비해 GDP구가 높은 함량을 유지하였다. IgG 함량은 0일령에서는 측정되지 않았고, 21일령에서는 GDP구가 다른 구에 비해 유의적으로 높은 함량을 나타내었다(P<0.05). 이상의 결과로, 생강 건조분말은 초유의 IgG 함량과 자돈 혈청 IgG 함량을 개선시키는 효과가 확인되어 모돈 사료의 유질개선용으로 활용이 가능할 것으로 판단된다. The objective of this study was to investigate the effects of dietary ginger and Scutellaria on antioxidant capacity and IgG concentration in plasma and colostrum of sows. Twenty-four sows (Landrace x Yorkshire) in parity 2 were assigned to 3 treatment groups (8 sows per treatment) from 30 day before farrowing up to weaning on day 21 after farrowing. The treatment diets included I) CON (Basal diet), 2) GOP (0.3% ginger dry powder was used as the replacement of wheat in basal diet) and 3) SOP (0.3% Scutellaria dry powder was used as the replacement of wheat in basal diet). No differences were found in antioxidant capacity and IgG concentration in plasma of sows among all the three treatments. Antioxidant capacity in colostrum was not affected by replacement of ginger and Scutellaria dry powder. IgG and protein concentration in colostrum was significantly higher (P<0.05) in GOP than that in CON and SOP. However, fat and lactose concentration were not affected by treatments. The total amino acid concentration in colostrum was significantly higher (P<0.05) in GOP than that in CON and SOP. Plasma antioxidant capacity was not affected by treatments in piglet on 0 day and 21 day, but tended to increase by supplementation of ginger. On o day, plasma IgG in piglet was not detected by replacement of ginger and Scutellaria dry powder. However, plasma IgG concentration in piglets on 21 day was significantly higher (P<0.05) in GOP than that in CON and SOP. These results indicate that colostrum IgG concentration in sows and plasma IgG concentration in piglets were improved by feeding ginger dry powder 30 days before farrowing in comparison to basal diet.

착즙부산물을 이용한 발효사료가 육성돈의 영양소 소화율 및 질소균형에 미치는 영향

이제현,정현정,김동운,이성대,김상호,김인철,김인호,오상집,조성백,Lee, Je-Hyun,Jung, Hyun-Jung,Kim, Dong-Woon,Lee, Sung-Dae,Kim, Sang-Ho,Kim, In-Cheul,Kim, In-Ho,Ohh, Sang-Jip,Cho, Sung-Back 한국축산환경학회 2010 축산시설환경학회지 Vol.16 No.1

본 시험은 착즙부산물 발효사료가 육성돈의 영양소 소화율, 분뇨 배설량 그리고 질소 균형에 미치는 영향을 알아보고자 실시하였다. 삼원교잡종 24두(개시체중 46.79 kg)를 공시하여 10일간의 적응기를 거쳐 7 일간 대사 케이지 ($0.5{\times}1.3m$)에서 소화시험을 수행하였다. 처리구는 1) 기초사료 (CON), 2) 발효사료(기초사료를 발효한 사료, F), 3) 케일박 발효사료 (KF), 4) 신선초박 발효사료 (AF), 5) 당근박 발효사료 (CF) 빛 6) 포도박 발효사료(GF)로 하여 총 6개 처리이었으며 처리당 4반복으로 하였다. 시험기간 동안 건물 소화율은 대조구, F, CF 처려구가 다른 처리구들보다 유의적으로 높았다 (p<0.05). 조단백질소화율은 F 처리구가 AF 및 GF 처리구보다 유의적으로 높았고 (p<0.05), 조섬유 소화율은 GF 처리구가 다른 처리구들보다 유의적으로 낮았다 (p<0.05). 조지방 소화율에서는 AF 및 CF 처리구가 KF를 제외한 처리구들보다 유의적으로 높았다 (p<0.05). 조회분 소화율은 CF 처리구가 다른 처리구들보다 유의적으로 높았다 (p<0.05). 반면 칼숨과 인 소화율에서는 CF 및 GF 처리구가 다른 처리구들보다 유의적으로 높았다 (p<0.05). 에너지 소화율에서는 대조구, F 및 CF 처리구가 KF, AF 및 GF 처리구보다 유의적으로 높았다(p<0.05). 총 필수아미노산 소화율에서는 F 처리구가 AF, CF 및 GF 처리구보다 유의적으로 높았고(P<0.05), 비필수아미노산의 평균 소화율에서는 F 처리구가 AF, CF 및 GF 처리구보다 유의적으로 높았다 (p<0.05). 총 아미노산의 평균 소화율에서는 F 처리구가 AF 및 CF 처리구보다 높았으며 (p<0.05), GF 처리구가 가장 낮았다 (p<0.05). 분으로 배설된 질소 비율은 GF 처리구가 다른 처리구들보다 높았고(p<0.05), F 처리구가 낮았다 (p<0.05). 뇨로 배설된 질소 비율에서는 대조구와 GF 처리구가 다른 처리구들보다 유의적으로 낮았다(p<0.05). 질소 축적비율에서는 대조구가 가장 높았으며 (p<0.05), KF 처리구가 가장 낮았다 (p<0.05). 결론적으로 일반배합사료보다 착즙부산물 발효사료의 소화율이 감소하였는데 이것은 사료에 혼합된 착즙부산물 수준 30%가 높은 수준인 것으로 판단되어 추후 섬유소 수준을 낮추어 시험을 수행할 필요가 있다고 생각된다. 특히, 포도박 발효사료 처리구에서 분 배설량이 많은 이유는 포도박 발효사료의 섬유소 함량이 대조구 및 발효사료 보다 높고 다른 착즙부산물에 비하여 소화되지 않는 포도씨가 다량 배설되었기 때문인 것 같다. This study was conducted to evaluate the effects of fermented diets including liquid by-products on nutrient digestibility and nitrogen balance in growing pigs. Treatments were 1) CON (basal diet), 2) F (fermented diet with basal diet), 3) KF (fermented diet with basal diet including 30% kale pomace), 4) AF (fermented diet with basal diet including 30% angelica keiskei pomace), 5) CF (fermented diet with basal diet including 30% carrot pomace) and 6) OF (fermented diet with basal diet including 30% grape pomace). A total of 24 pigs (41.74kg average initial body weight, Landrace $\times$ Yorkshire $\times$ Duroc), were assigned to 6 treatments, 4 replicates and 1 pig per metabolic cage in a randomized complete block (RCB) design. Pigs were housed in $0.5\times1.3m$ metabolic cage in a 17d digestibility trial. During the entire experimental period, Digestibility of dry matter (p<0.05) of treatment CON, F and CF were higher than other treatments. In crude protein digestibility, treatment F was higher than treatment AF and GF (p<0.05). Treatment GF showed the lowest digestibility of crude fiber among all treatments (p<0.05). In ether extract digestibility, treatment AF and CF showed higher than other treatments (p<0.05) except KF treatment. CF treatment showed the best digestibility of ash among all treatments (p<0.05). Whereas, For Ca and P digestibility, CF and OF treatments were improved than other treatments (p<0.05). Energy digestibility (p<0.05) of CON, F and CF treatments were higher than KF, AF and GF treatments. In total essential amino acid digestibility, F treatment was improved than AF, CF and GF treatments (p<0.05). In total non-essential amino acid digestibility, F treatment was higher than CON, AF and GF treatments (p<0.05). In total amino acid digestibility, F treatment was higher than AF and CF treatments (p<0.05) and GF treatment showed the lowest digestibility (p<0.05). In fecal nitrogen excretion ratio, GF treatment was greatest among all treatments (p<0.05) and F treatment was decreased than other treatments (p<0.05). In urinary nitrogen excretion ratio, CON and GF treatments showed the lowest among all treatments (p<0.05). In nitrogen retention ratio, CON treatment showed the high and KF treatment showed the lost among all treatments (p<0.05). Therefore, this experiment suggested that fermented diet could improve nutrient and amino acid digestibilities of growing pigs.

Screening of Effective Medium Composition for the Cultivation of Lactobacillus plantarum and Lactobacillus reuteri Using Statistical Methods

Dong Woon Kim(김동운),Sang Buem Cho(조상범),Young Hwa Kim(김영화),Sung Daw Lee(이성대),Hyun Jung Jung(정현정),Sang Ho Kim(김상호),Kyu Ho Cho(조규호),Soo Jin Sa(사수진),In Cheul Kim(김인철),Mi-Young Won(원미영),Su-Ok, Kim(김수옥),Soo- 한국생명과학회 2012 생명과학회지 Vol.22 No.5

본 연구는 가축용 생균제로서 이용성이 우수한 Lactobacillus plantarum과 Lactobacillus reuteri의 대량생산을 위한 경제적 최적 배지조성을 도출하기 위하여 수행되었다. 두 균주의 배양을 위한 배지성분 요인들은 유산균 배지로 알려진 MRS broth를 기준으로 하여, sucrose, glucose, molasses, yeast extract, corn steep liquor, soy peptone, dipotassium phosphate, manganese chloride, magnesium chloride, tween 80, sodium chloride, sodium acetate, ammonium citrate, sodium sulphate 및 ferrous sulphate 등 총 15가지를 선택하였다. 각 배지성분들이 각 균주들의 세포성장에 미치는 요인분석은 20개의 실험으로 구성된 Plackett-Burman design 방법을 이용하여 분석하였다. 그 결과 L. plantarum의 성장에 있어서는 sucrose, glucose, molasses, yeast extract, corn steep liquor, soy peptone, sodium acetate, ammonium citrate 등이 긍정적인 효과(positive effect)를 나타내었다. L. reuteri의 경우, yeast extract, soy peptone, K2PHO4, tween 80에서 수준간의 격차가 큰 긍정적인 효과가 나타났다. 두 가지 균주들에서 얻어진 표준화된 통합적 효과의 주 효과를 분석한 결과, sucrose, yeast extract, soy peptone에서 긍정적인 효과가 나타났다. 최종적으로 L. plantarum과 L. reuteri 두 균주에 공통적으로 적용할 수 있는 유효 배지 성분들로 sucrose (20.0 g/l), glucose (5.0 g/l), soy peptone (11.0 g/l), yeast extract (5.0 g/l), K2HPO4 (0.2 g/l), CH3COONa (2 g/l) 및 MgCl2 (0.02 g/l)를 선택하였다. This study was conducted to develop an economical optimum medium composition for the mass production of Lactobacillus plantarum and Lactobacillus reuteri, livestock probiotics. Medium ingredient factors were selected on the basis of MRS broth composition, and the 15 ingredient variables were as follows: sucrose, glucose, molasses, yeast extract, corn steep liquor, soy peptone, dipotassium phosphate, manganese chloride, magnesium chloride, tween 80, sodium chloride, sodium acetate, ammonium citrate, sodium sulphate, and ferrous sulphate. The Plackett Burman design, consisting of 20 runs, was employed for the analysis of ingredient effects on cell growth of L. plantarum and L. reuteri. As a result, sucrose, glucose, molasses, yeast extract, corn steep liquor, soy peptone, sodium acetate, and ammonium citrate positively influenced the growth of L. plantarum. Additionally, yeast extract, soy peptone, K2PHO4, and tween 80 positively influenced the growth of L. reuteri. Positive effects were found from sucrose, yeast extract, and soy peptone in the integrated analysis of the effects of both L. plantarum and L. reuteri. Finally, effective medium components for both strains were found as follows: sucrose (20.0 g/l), glucose (5.0 g/l), soy peptone (11.0 g/l), yeast extract (5.0 g/l), K2HPO4 (0.2 g/l), CH3COONa (2 g/l), and MgCl2 (0.02 g/l).

Serratia marcescens 검출을 위한 PCR 기법 개발 및 돼지정액 유래균주에 대한 항생제 감수성 양상

정지아(Ji-A Jung),김애란(Aeran Kim),서병주(Byoung Joo Seo),정석찬(Suk Chan Jung),김인철(In Cheul Kim),정기화(Ki Hwa Chung),정병열(Byeong Yeal Jung) 한국생명과학회 2013 생명과학회지 Vol.23 No.9

돼지 원정액의 채취나 희석정액의 제조과정 중 세균오염이 많이 발생하는데, 이는 정자활력의 감소뿐 아니라 모돈의 수태율 저하 등을 유발한다. 특히 Serratia marcescens는 환경에 널리 존재하며 비위생적으로 제조된 정액에 많이 분리되고 있다. 본 연구에서는 S. marcescens의 신속한 동정을 위하여 PCR 기법을 개발하였으며, 국내 돼지정 액 유래 S. marcescens을 이용하여 최소생육억제농도(MIC) 등을 조사하고 유효 항생제를 선발하고자 하였다. 개발 PCR 기법은 S. marcescens에서만 306 bp의 특이 유전자 증폭산물을 형성하였으며, 기타 돼지정액에서 분리 보고된 균주나 Serratia 속균에서는 유전자 증폭 산물이 형성되지 않아 특이성이 인정되었다. PCR 기법의 민감도는 S. marcescens에서 추출된 DNA 50 pg/μl까지 검출이 가능하였다. 디스크확산법에 의한 국내 돼지정액 유래 S. marcescens의 항생제 감수성을 조사한 결과, gentamicin, ceftiofur, neomycin 등에서 80% 이상의 높은 감수성을 보였 다. 한편 ceftiofur, enrofloxacin, gentamicin, neomycin의 MIC90는 각각 8, 8, 8, 16 μg/ml로 나타났다. 따라서 개발된 PCR 기법은 S. marcescens를 동정하는 유용한 방법이며, gentamicin 등 선발된 항생제는 S. marcescens에 의한 정액 내 세균오염을 관리하기 위한 희석제용 항생제로 추천된다. During the collection of boar semen, bacterial contamination usually occurs. The contamination has deleterious effects both on semen quality and on sow fertility. The majority of contaminants are gram-negative bacteria, especially Serratia marcescens. In this study, we developed a PCR assay for the identification of S. marcescens targeting the luxS gene (GenBank no. EF164926). S. marcescens yielded a specific 306 bp PCR product. However, no amplification was observed in the other strains tested. The detection limit of PCR was 50 pg/μl of template DNA of S. marcescens. The antimicrobial susceptibility patterns of S. marcescens isolated from boar semen were tested using the disk diffusion method. Gentamicin, ceftiofur, florfenicol, and neomycin showed high sensitivity in this test. The minimum inhibitory concentration (MIC) was also determined by the broth microdilution method. The MIC90 values of ceftiofur, enrofloxacin, gentamicin, and neomycin were 8, 8, 8, and 16 μg/ml, respectively. These results indicate that PCR amplification of the luxS gene is a reliable and effective method for the identification of S. marcescens and that ceftiofur, enrofloxacin, gentamicin, and neomycin are effective semen extenders for controlling S. marcescens.

Prostaglandin $F2{\alpha}$ 투여가 수퇘지의 성행동과 정액 채취 훈련에 미치는 영향

홍준기,유재원,조규호,김명직,박준철,김인철,정일병,Hong, Joon-Ki,Ryu, Jae-Weon,Cho, Kyu-Ho,Kim, Myung-Jick,Park, Jun-Chul,Kim, In-Cheul,Jung, Il-Byung 한국수정란이식학회 2009 한국동물생명공학회지 Vol.24 No.1

Prostaglandin $F_2{\alpha}$ ($PGF_2{\alpha}$) can facilitate release of epinephrine from the adrenal gland. The objective was to extend these findings and determine the effects of $PGF_2{\alpha}$ on sexual activity and semen collection training in sexually inexperienced boars. Boars (n=32; $281{\pm}18$ days of age) were moved individually once weekly to a semen collection room equipped with an artificial sow. Before entering the semen collection room, boar received i.m. treatments of $PGF_2{\alpha}$ at doses of 5 (n=8), 10 (n=8), or 20 (n=8), and control boar (n=8) were not treated. Reaction time (elapsed time after entering collection pen until the start of mounting) for boars receiving 5mg ($3.3{\pm}0.9\;min$), 10mg ($3.3{\pm}0.8\;min$) $PGF_2{\alpha}$ was shorter (p<0.05) than for controls ($6.7{\pm}0.9min$). Duration of ejaculation (min) per session was longer (p<0.05) for $PGF_2{\alpha}$ (10 mg, 20 mg)-treated boars ($7.3{\pm}0.7\;min$, $6.9{\pm}0.7\;min$), compared to control ($3.4{\pm}0.8\;min$). The number of training session per boars was less (p=0.056) for $PGF_2{\alpha}$ 10mg-treated boars ($1.0{\pm}0.4$), compared to control ($2.0{\pm}0.4$). Semen characteristic such as volume, concentration, the number of total ejaculated sperm, were similar for $PGF_2{\alpha}$-treated and controls. There was no apparent difference on sperm movement characteristics (Mot: motility, VCL : curve linear velocity, VSL : straight line velocity, VAP : average path velocity, LIN : linearity) after semen preservation by collected with or without $PGF_2{\alpha}$ treatment. In summary, administration of $PGF_2{\alpha}$ in boars increased the sexual activity and facilitated the training boars to mount an artificial sow for semen collection, but did not affect semen characteristic.

Establishment of PCR Conditions for the Identification of Stenotrophomonas maltophilia Isolated from Boar Semen and Antimicrobial Susceptibility Patterns of the Isolates

Byeong Yeal Jung(정병열),Bum Soo Park(박범수),Ha-Young Kim(김하영),Jae Won Byun(변재원),Aeran Kim(김애란),Albert Byungyun Jeon(전병윤),In Cheul Kim(김인철),Ki Hwa Chung(정기화) 한국생명과학회 2012 생명과학회지 Vol.22 No.8

돼지 정액의 세균오염은 정자활력 감소나 수태율 저하 등을 유발하는데, 특히 Stenotrophomonas maltophilia는 자연환경에 널리 존재하여 비위생적으로 채취된 정액에 많이 오염될 뿐 아니라 사람에게도 병원성을 일으킨다. 본 연구에서는 S. maltophilia의 검사 시간 단축과 정확도를 높이고자 PCR 기법을 개발하였으며, 돼지 원정액에서 이들 세균의 오염율을 조사하고 유효 항생제를 선발하고자 하였다. 돼지 원정액에서 분리 빈도가 높은 18 균종을 대상으로 PCR을 적용한 결과, S. maltophilia에서만 445 bp의 특이 유전자 증폭산물이 확인되었다. 또한 순수 배양된 S. maltophilia는 1.5×10³ CFU/ml까지, 원정액에 혼합된 S. maltophilia에 대해서는 1.5×10⁴ CFU/ml까지 검출이 가능하였다. 2009년에 116건과 2011년 324건 등 총 440건의 원정액 중 26건(5.9%)에서 S. maltophilia가 분리되었으며, 여름과 가을철에 오염율이 상대적으로 높게 나타났다. 균분리법과 PCR간의 일치율은 98.9%, kappa value는 0.906이었으며, PCR의 민감도와 특이도는 각각 100%, 98.7%로 나타났다. 분리균주의 항생제 감수성 시험 결과, enrofloxacin (100%)과 florfenicol (92.3%)에 높은 감수성을 보였으나 amoxicillin/clavulanic acid, apramycin, ceftiofur, penicillin, spectinomycin에는 내성율이 높게 나타났다. 결론적으로 개발된 PCR기법은 민감도, 특이도, 일치율이 높아 균분리법을 보조하고 신속?정확하게 정액 내 오염세균을 확인할 수 있어 효율적인 정액관리가 가능할 것으로 기대된다. Bacteria are frequently contaminated during the collection and processing procedures of boar semen. Of the contaminants, Stenotrophomonas (S.) maltophilia is a Gram-negative bacterium that is widely distributed in a variety of habitats. Although PCR assays have been developed for the detection of S. maltophilia, they cross-react with some species of Xanthomonas. In this study, we designed a primer set for the detection of S. maltophilia in order to target the chiA (GenBank accession no. NC_010943) gene. The specific PCR products were amplified from S. maltophilia only, not from other tested strains that are frequently found in semen. The detection limit of the PCR was 1.5×10³ CFU/ml with pure-cultured S. maltophilia and 1.5×10⁴ CFU/ml with S. maltophilia spiked in semen. Twenty-six (5.9%) S. maltophilia were isolated from 440 semen samples. The PCR results exhibited 98.9% agreement with a comparison of S. maltophilia isolation. Also, the sensitivity and specificity of the PCR were 100% and 98.7%, respectively. In the antimicrobial susceptibility test, S. maltophilia isolates were highly susceptible to enrofloxacin and florfenicol, while the majority of them were resistant to amoxicillin/clavulanic acid, apramycin, ceftiofur, penicillin, and spectinomycin. These results indicated that the PCR using the chiA gene was proven to be reliable and effective for the detection of S. maltophilia with high levels of sensitivity and specificity.