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혈관내피세포에서 방사선 조영제에 의해서 유발된 아포프토시스에 대한 adrenomedullin의 세포보호 효과
강경표 ( Kyung Pyo Kang ),이애신 ( Ae Sin Lee ),정유진 ( Yu Jin Jung ),김덕훈 ( Duk Hoon Kim ),고강석 ( Kang Suk Ko ),최경화 ( Kyoung Hwa Choi ),정영욱 ( Young Wook Jeong ),김이식,이식 ( Sik Lee ),박성광 ( Sung Kwang Park ),성미정 ( 대한신장학회 2008 Kidney Research and Clinical Practice Vol.27 No.1
목적: 혈관내피 세포는 혈장과 혈장내 여러 가지 물질이 직접 접촉하게 되어 다양한 자극을 주는 물질을 통하여 병태생리에 관련된다. 최근, 아포프토시스가 세포손상의 새로운 병태생리 기전 중의 하나라는 것이 알려져서 혈관내피세포에 서 아포프토시스는 혈관세포손상의 기전이 될 수 있다. 또한, 아포프토시스를 줄일 수 있는 물질은 세포 손상을 줄이거나 억제함으로서 혈관손상을 예방 또는 치료제로서의 효과를 가질 수 있다. 따라서, 이 연구에서는 조영제인 iopromide를 사람의 제대정맥 내피세포에 투여하여 아포프토시스를 유발시키는지를 알아보고, adrenomedullin을 투여하여 아포프토시스 억제효과와 신호전달과정을 관찰하고자 하였다. 방법: 사람의 제대정맥내피세포을 이용하여 iopromide로 아포프토시스를 유발시켰으며, adrenomedullin을 투여하여 아포프토시스 억제 효과를 FACScan과 TUNEL 염색으로 관찰하였으며 신호전달과정은 phospho-Akt/Akt의 western blotting을 시행하였다. 결과: 제대정맥 내피세포에서 iopromide은 농도에 의존적으로 아포프토시스를 유발하였으며 adrenomedullin은 10-9 mol/L 이상의 농도에서부터 iopromide에 의해서 유도된 아포프토시스에 억제효과가 있었다. Iopromide에 의해서 유발된 아포프토시스에서 adrenomedullin의 억제효과는 농도에 의존적이었다. 결론 : 피세포에서 adrenomedullin은 iopromde에 의해서 유발된 apoptosis를 감소시켰며 이는 phosphatidylinositol 3`-kinase/Akt의존적인 신호전달 경로를 통하여 이루어졌다. Purpose: Because vascular endothelial cells play a pivotal role in the vascular diseases, damage of vascular endothelial cells lead to progression of vascular disease. Apoptotic damage of cells is an important mechanism in vascular disease. Therefore, several growth factors that have antiapoptotic effect may have a protective role in maintaining a cell function in apoptotic cell injury. In this study, we examined the effects of adrenomedullin on apoptosis in iopromide-induced endothelial cell injury. Methods: Human umbilical vein endothelial cells were incubated with nonionic radiocontrast agent, iopromide and/or adrenomedullin. Apoptosis was assessed quantitatively using FACScan after annexin V-FITC and propidium iodide staining, and by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) stain. Signaling pathway was evaluated by Western blot analysis of phospho-Akt and Akt. Results: Iopromide-induced apoptosis in human umbilical vein endothelial cells was increased in a dose-dependent manner. Adrenomedullin prevented iopromide-induced apoptosis in human umbilical vein endothelial cells in a dose dependent manner. Wortmannin, phosphatidylinositol 3-kinase inhibitor, decrease the adrenomedullin-induced antiapoptotic effect. Conclusion: These results suggest that adrenomedullin protects vascular endothelial cells from iopromide-induced apoptosis by regulating the activity of Akt.